TLC和HPLC分离松果菊属植物中烃酰胺类化合物

从松果菊屑(Echinacea)植物提取的药品制剂,广泛用于提高免疫系统的非特异性功能。根据以前的研究,烃酰胺类化合物是紫松果菊(Fchinacea purpurea Moench.)和松果菊(Echinacea angustifolia DC.)中亲脂性馏分的主要成分,也是松果菊属制剂中免疫刺激活性的主要成分。作者曾报道松果菊属药物中酰胺成分的分离和结构分析。本文介绍紫松果菊、松果菊和白松果菊(Echinacea pallida)中烃酰胺类化合物的色谱分析。为分析鉴定这些药物,建立了TLC和     

应用免疫反应糖蛋白/多糖的ELISA控制药用植物赝靛和松果菊的质量

药用植物赝靛属(Baptisia)和松果菊属(Echinacea,Esberitox(?))的有效成分都是糖蛋白和多糖。为了这些免疫物质的定量,我们基于用一固相结合的抗原抑制抗体反应而发展了一种酶免疫分析法。抗血清是用染色赝靛(B.tinctoria)和/或紫松果菊(E.purpurca)的冻干提取物或层析纯成分对兔子免疫得到的,用的固相抗原是糖蛋白/多糖-BSA轭合物,因为我们的糖蛋白/多糖在通常包被条件下很少被吸收。这方法可检测抗原范围为2～15μg/ml,这样就     

松果菊属3种植物的理化分析

对松果菊属紫花松果菊、狭叶松果菊,淡紫松果菊3个种进行了理化分析研究。方法 采用HPLC、TLC法对3种松果菊的松果菊苷进行了定性和定量分析;采用紫外扫描仪,对3种松果菊进行了紫外吸收光谱的测定。结果 3种松果菊根和茎叶中均含松果菊苷成分,但紫花松果菊的含量最低。结论 通过理化分析表明,3种松果菊之间的成分组成存在着差异,特别是紫花松果菊根与另两种根之间存在显著差异。该结果为进一步合理开发利用松果菊资源提供了参考资料。     

老化对白间素-2基因表达的影响

近年来,在巨噬细胞与淋巴细胞相互作用的研究中,有两个重大突破。一是分子水平上控制免疫反应,发现了免疫细胞间相互作用的介导物质——白间素(Interleukin);二是遗传水平上控制免疫反应。白间素在巨噬细胞与淋巴细胞相互作用中以及在淋巴细胞激活,增生分化过程中起着十分重要的作用。它们在不同白细胞群体间起联络信号的作用。现已发现的白间素有三种:即I1-1,I1-2和I1-3。 Morgan证明T-细胞的生长需要T-细胞生长因子(TCGF)的活化和维持。Gillis     

3种松果菊属植物的鉴别、活性成分及生物技术研究进展

综述了近年来关于3种药用松果菊:狭叶松果菊E ch inacea angustif olia、紫花松果菊E.purpurea和淡紫松果菊E.p a llid a的生物活性成分和生物技术方面的研究进展以及这3种药用松果菊的鉴别方法,并对松果菊属植物的药理活性进行了总结。药用松果菊的主要活性成分是多糖、糖蛋白、咖啡酸衍生物和烷基酰胺类。松果菊制剂具有增强免疫、抗炎、抗感染等功效。在生物技术领域,有关松果菊属植物的首例转基因已在狭叶松果菊中取得成功。采用离体培养法已建立了松果菊的植株再生体系,实现了植株的离体快繁。     

TIC和HPLC分析松果菊中的烷酰胺类

紫松果菊(Echinacea purpurea (L.)Moench),窄叶松果菊(E angustifolia DC.)和苍白松果菊(E. Pallida(Nutt. )Nutt. )的提取物可广泛用于提高非特异性免疫系统功能,提取物的亲脂部分,尤其是烷酰胺部分,在体内外实验中都具有免疫活性。本文对窄叶松果菊和紫松果菊根中的25种化合物作了TLC和HPLC分析,并鉴别出15种新的具有异丁基和2-甲基丁基的酰胺类化合物。本法可作为三种松果菊的分析特征和标准鉴定方法。提取:将植物试材粉末1g,置索氏提取器中以氯仿50ml提取至少1h,蒸干萃取液,     

菊科松果菊属三种药用植物花粉的形态研究

目的：研究３种松果菊属药用植物花粉的形态。方法：对３种花粉进行了光镜（ＬＭ）和扫描电镜（ＳＥＭ）的观察。结果：松果菊属３种花粉形态特征基本一致,但在花粉颜色、大小、萌发沟特征及外壁纹饰上种间存在一定的差异。结论：松果菊属３种植物花粉在形态上存在种间差异。此研究结果为首次报道。     

松果菊苷通过激活ERK/BMP-2信号通路促进大鼠的成骨细胞增殖观察

目的：考察松果菊苷对大鼠成骨细胞增殖的影响及作用机制。方法将不同浓度的松果菊苷（0.01,0.1,1.0,10.0,100 nmol/L）及MAPK/ERK信号通路抑制剂PD98059（20μmol/L）与成骨细胞共培养12,24,36,48,60 h后,采用MTT法检测细胞增殖情况。酶联免疫吸附法（ELISA）和qRT-PCR法检测细胞上清中和成骨细胞中骨钙素（BGP）和骨形态发生蛋白（BMP-2）的表达水平。Western blotting检测成骨细胞中Smad4、ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达水平。结果松果菊苷能够促进大鼠成骨细胞的增殖,而且能诱导ERK 的磷酸化从而激活 MAPK/ERK 信号通路,并提高成骨细胞中 BMP-2和 Smad4的表达而激活BMP/Smad信号通路。加入PD98059后,松果菊苷诱导的BMP-2和Smad4表达及成骨细胞增殖均受到抑制。结论松果菊苷可通过激活ERK/BMP-2信号通路促进大鼠的成骨细胞增殖。     

松果菊属药用植物的应用基础研究

菊科松果菊属(Echinacea)药用植物原产于北美,在西方应用广泛,是闻名世界的"免疫"草药,具有突出的抗感染与免疫促进作用,曾多年名列西方草药市场销售额的第一位.尽管该属植物松果菊Echinacea purpurea (L.) Moench.作为花卉很早就被引入我国,北京植物志[1]亦有记载,但在我国并没有药用历史,亦没有相关研究基础,尚未进入我国的药品标准.我们研究组近5年的系统研究工作为该属植物纳入中药范畴及进一步开发利用奠定了坚实的基础.现将该项目取得的研究结果简单总结如下.     

紫外分光光度法测定松果菊提取物中多酚

松果菊Echinacea purpurea(L.)Moench为菊科松果菊属药用植物,原产北美,是印第安人的传统药材。由于其具有显著的抗感染与免疫促进作用,近年来在西方应用广泛,成为闻名世界的“免疫”草药。国内外有关松果菊的化学成分的研究报道较多,证实其含有多糖、多酚、咖啡酸衍生物、挥发油、烷基酰胺、类黄酮等成分[1~3]。目前我国学者对松果菊的药用研究和质量控制越来越重视,已有报道对松果菊中的菊苣酸、松果菊苷和挥发油进行测定[4~7]。本实验采用紫外分光光度法测定了松果菊提取物中的多酚,进一步完善了松果菊的质量标准研究。1材料与仪器松果…     

松果菊苷在肝脏缺血再灌注损伤中的保护作用及机制研究

目的 探讨松果菊苷预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制.方法 SD大鼠40只随机分为假手术组、模型组、松果菊苷低、高浓度治疗组,模型组、松果菊苷低、高浓度治疗组采用阻断部分肝血供的方法建立肝脏缺血再灌注损伤模型.HE染色观察肝组织病理学变化;试剂盒测定丙二醛(MDA)活性及超氧化物歧化酶(SOD)水平;酶联免疫吸附实验分析丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量;免疫印迹法分析HO-1、Nrf-2蛋白的表达含量.结果 HE结果显示,松果菊苷低、高浓度组肝损伤程度较模型组明显改善;与模型组比较,松果菊苷低、高浓度组大鼠肝脏组织中MDA含量下降,SOD活性升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);松果菊苷低、高浓度组大鼠ALT及AST活性下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);免疫印迹法结果显示,松果菊苷治疗组HO-1、Nrf-2蛋白的表达升高,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 松果菊苷可以通过激活Nrf-2信号通路减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤.     

松果菊苷对阿尔茨海默病转基因小鼠脑内氧化应激及β-淀粉样蛋白含量的影响

目的 研究松果菊苷抑制阿尔茨海默病转基因小鼠脑内氧化应激并减少β-淀粉样蛋白含量的作用.方法 实验小鼠分为APP/PS1转基因小鼠(AD模型鼠)和松果菊苷治疗组.对照组给予生理盐水,治疗组小鼠给予松果菊苷(20 mg/kg/天)2个月.应用水迷宫实验方法检测两组小鼠的学习记忆能力;利用免疫荧光技术检测Aβ在AD模型鼠及...     

紫锥菊中菊苣酸提取纯化工艺研究

紫锥菊属(即松果菊属)植物是原产美洲的一类菊科野生花卉。该属植物共有8个种及数个变种，已开发为药品的主要为紫锥菊Echinacea purpurea (L．)Moench、狭叶紫锥菊E．angustifolia DC．和淡白紫锥菊E．pallida(Nutt．)Nutt。其中紫锥菊是目前受到国际普遍重视的一种免疫促进剂和免疫     

松果菊苷通过IL-33/STAT轴对脓毒症大鼠急性肾损伤的保护作用及机制研究

目的 探究松果菊苷对脓毒症大鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用,并探讨可能机制。方法 55只SPF级SD大鼠中随机选择10只设为对照组;剩余45只大鼠建立脓毒症模型,成功40只,并将其随机分为模型组、松果菊苷低剂量组、松果菊苷中剂量组、松果菊苷高剂量组,每组各10只。松果菊苷低、中、高剂量组尾静脉注射松果菊苷(分别为25、50、100 mg/kg),对照组、模型组注射等量DMSO,术后6、12、18 h分别给药一次。流式细胞术检测外周血Th1、Th2构成比;检测血清炎症因子;检测血清肾功能指标;HE染色观察肾组织病理学变化;免疫印迹法检测肾组织白介素-13(IL-13)、Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、p-JAK2、信号转导及转录激活子3(STAT3)、p-STAT3蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示,对照组肾组织结构完整,形态正常;模型组肾组织结构严重破坏,肾小球基质增多、系膜区增厚,可见大量炎性细胞浸润;松果菊苷低、中、高剂量组系膜区增厚减轻,炎性细胞浸润减少,中、高剂量组改善更加明显。与模型组比较,松果菊苷低、中、高剂量组外周血Th2构成比、血清IL-6、IL-8、尿素氮...     

松果菊苷固体脂质纳米粒的表征及体外细胞摄取评价

[目的]对本实验室前期处方优化的松果菊苷固体脂质纳米粒(ECH-SLN)的物理性质和体外细胞摄取情况进行评价,为今后眼部制剂的改进奠定基础。[方法]根据本实验室前期优化的处方,采用乳化-固化法制备ECHSLN,运用差示扫描量热法(DSC)及X射线衍射法(XRD)表征其物理性质,并选取人角膜上皮HCEpiC细胞与人晶状体上皮SRA 01/04细胞,对罗丹明123固体脂质纳米粒(Rhodamine 123-SLN,Rh 123-SLN)进行体外细胞毒性评价及细胞摄取研究。[结果] DSC结果显示仅松果菊苷和物理混合物(空白SLN∶松果菊苷=5∶1)在150℃出现松果菊苷的熔化吸热特征峰,空白SLN、ECH-SLN和物理混合物在110℃和230℃均出现SLN的两个熔化吸热特征峰;XRD结果显示松果菊苷和物理混合物在20°时出现明显的松果菊苷特征峰,空白SLN,ECH-SLN和物理混合物在20°～25°范围均显示SLN的范围特征峰;结果均表明松果菊苷作为药物以分子分散状态被包裹在固体脂质纳米粒(SLN)中;细胞活力影响实验结果显示Rh 123-SLN浓度为5.13μg/mL和10.25μg/mL时对两种细胞均无明显毒性,与对照组相比无显著性差异;细胞摄取实验结果表明Rh 123溶液不能被细胞所摄取,而Rh 123-SLN的细胞摄取量与药物浓度和孵育时间呈正相关。[结论] ECH-SLN能够将松果菊苷递送到眼细胞,这可能为氧化性白内障的治疗提供一种有效的药物递送系统。     

采籽前后荒漠肉苁蓉不同部位中有效成分含量测定

目的:考察采籽前后荒漠肉苁蓉不同部位中松果菊苷、毛蕊花糖苷含量。方法:采用RP-HPLC法,Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱:0～37min,26.5%A;37～40min,26.5%～29.5%A;40～65min,29.5%A;检测波长:334nm;流速:1mL/min;柱温:35℃。结果:松果菊苷在0.0284～0.6320μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为101.56%,RSD为1.82%(n=6),毛蕊花糖苷在0.0320～0.7100μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.22%,RSD为0.97%(n=6)。采籽前随机抽取的7根药材,其头部及根部中松果菊苷、毛蕊花糖苷总量均大于0.30%,符合《中华人民共和国药典》规定,其中2根药材头部两成分总量大于根部;采籽后药材中只有1号根部两成分总量符合《中华人民共和国药典》规定,其余均不符合。结论:采籽后药材中有效成分松果菊苷、毛蕊花糖苷总量明显低于采籽前,药材的头部与根部存在较大差别,但其个体差异较大,未显示一致性。     

狭叶松果菊 3-脱氢奎尼酸合成酶基因 cDNA 的克隆及其组织表达特征

目的 克隆狭叶松果菊 〖WTBX〗Echinacea angustifolia 3-脱氢奎尼酸合成酶基因并考察其在各个组织中的表达情况。方法 采用快速扩增 cDNA 末端技术,以狭叶松果菊组培苗 cDNA 为模板,克隆出狭叶松果菊 3-脱氢奎尼酸合成酶基因全长序列并通过半定量 RT-PCR 分析其在不同器官中的表达模式。结果 克隆到的基因 (命名为EanaroB) 全长为 1 424 bp,编码一个 442 个氨基酸残基组成的多肽。其氨基酸序列与植物来源的 3-脱氢奎尼酸合成酶同源性都在 80% 左右。将得到的序列提交 Genbank,序列号为EU293857。半定量 RT-PCR 结果表明,狭叶松果菊EanaroB 基因在狭叶松果菊的根、茎、叶、花中均有表达,但花和叶中的表达量较高,在根和茎中较少。结论 采用 RACE 和 PCR 的方法从狭叶松果菊中克隆出了咖啡酸类化合物生物合成途径上的一个基因 EanaroB,为进一步研究咖啡酸类衍生物生物合成代谢途径提供一定依据,为今后利用基因工程技术提高咖啡酸类衍生物,包括苯乙醇苷类物质松果菊苷的代谢工程打下一定基础。     

Echinacoside中译名的商榷及其研究进展

Echinacoside的中译名较早称海胆甙(《英汉医学词汇》,1979年)或海胆苷(《英汉化学化工词汇》第3版,1984年)。以后为多种文献辞书沿用,如1987年出版的《英汉科技辞天》和《英汉科技词库》,直至现在仍有人译为海胆苷。本人认为该中译名值得商榷。该化合物系Stoll等人于1950年首次从菊科紫松果菊属植物狭叶松果菊(或狭叶紫锥菊)Echi-     

松果菊苷对帕金森病模型大鼠中脑超微结构的影响

目的:观察松果菊苷对帕金森病(PD)模型大鼠中脑超微结构的影响.方法:将健康SD大鼠随机分为对照组、模型组和松果菊苷组,每组10只.对照组用生理盐水灌胃,模型组和松果菊苷组大鼠造模后,分别用生理盐水和2 mg/mL的松果菊苷水溶液灌胃,每天1次,连续14 d.灌胃结束后,采集各组大鼠中脑,制作超薄切片,在7000倍和50000倍电镜下观察并比较各组大鼠中脑神经细胞超微结构的差异.结果:对照组中脑神经细胞结构清晰,核膜光滑、完整,核内染色质分布均匀;线粒体数量较多,形态规则,双层膜结构、线粒体嵴结构清晰.与对照组比较,模型组的神经细胞胞体缩小,核染色质边聚;线粒体数量减少,双层膜结构不清,线粒体嵴排列紊乱.松果菊苷组与模型组比较,神经细胞胞体大小有所恢复,核染色质边集现象有所缓解;线粒体数量增加,双层膜结构清晰,线粒体嵴排列相对规律,形态基本正常.结论:松果菊苷能改善PD模型大鼠中脑神经细胞凋亡的超微结构,这一结果可能与缓解神经细胞线粒体功能障碍有关.     

野靛碱对心脏血管作用的研究

野靛碱(Cytisine)系豆科槐属植物苦豆子(Sophora alopecuroides L.)中提得的一种生物碱。熔点154～155℃,分子式为C_(11)H_(14)N_2O,结构式为: