使用瞳孔孔径动态变化测量分析装置定量检测正常人瞳孔对光反射

目的：定量观察正常人瞳孔对光反射。方法：以瞳孔孔径动态变化测量分析装置连续摄录并且分析127名正常人瞳孔直径，分析不同年龄的瞳孔对光反射的变化；结果：不同年龄组的瞳孔对光反射的瞳孔收缩速率和收缩时间不同，年龄越大，瞳孔收缩速率越慢。年龄越小，瞳孔收缩时问越短。结论：瞳孔孔径动态变化测量分析装置能较好地定量检测人瞳孔对光反射。     

眼睛动态检测系统在神经疾病定位诊断中的初步应用

目的:探讨光反射传导径路出现异常引起眼睛变化的特点,研究眼睛的动态检测对光反射传导径路出现异常的神经性病变定位诊断的价值。方法:观察分析病例,在暗视条件下,应用本课题组设计的眼睛动态检测系统检测病例的瞳孔及其对光反射。瞳孔对光反射检查是在左右两侧分别给予光刺激时,定量检测双侧眼的瞳孔变化情况。检测的特征值包括瞳孔初始直径(D0)、瞳孔收缩速度(V)等。根据其眼睛的动态变化情况,作出传导径路出现神经病变的定位分析。结果:病例的瞳孔大小和瞳孔对光反射都出现了异常现象,但各自有不同的特点。病例C的左侧瞳孔明显小于右侧,左眼的直接对光反射消失、间接对光反射也消失;右眼直接对光反射存在、间接对光反射也存在。病例D的右侧瞳孔明显小于左侧,右眼直接对光反射消失,间接对光反射虽然幅度小,但存在;左眼直接对光反射存在,间接对光反射消失。结论:眼睛动态检测可起到对光反射传导径路异常的神经疾病定位分析和鉴别诊断的重要作用。     

视神经三维结构可视化及定量测量

目的:定量分析眼底视神经的损伤用于青光眼的早期诊断。通过青光眼患者和正常对照组眼底视神经乳头可视化三维结构对比,研究青光眼患者眼球内部筛板、视神经束等框内视神经结构的定量形态学变化,分析青光眼下框内视神经损伤的定量评价。方法:采集正常对照组6例,青光眼组6例。利用光学相干断层成像获得青光眼组和对照组的视神经乳头的断层容积图像,采用三维可视化和多平面绘制对视神经乳头进行三维重建,并对可见筛板区域面积、可视筛孔数量、平均面积和总面积及可视视神经束的长度、宽度进行定量测量,并进行数据对比分析,用SPSS 19.0软件进行统计分析。结果:青光眼患者组和正常对照组在可视筛板面积、可视筛孔的面积及个数有明显差异,可视视神经束的长度及宽度无明显差异。结论:通过对青光眼患者的视神经乳头可视化结构的定量测定,获得青光眼视神经乳头部分结构的形态变化,青光眼患者筛板及筛板前组织明显变形,筛孔的可见面积和数量明显增加,视神经形态无明显差异。分析青光眼致病过程,有助于青光眼致病机理的研究,帮助获得青光眼早期诊断的依据和方法,具有一定的临床价值。     

大鼠受损视神经去分化相关基因表达谱的变化及移植预变性腓总神经的作用

为检测受损视神经基因表达谱的变化以及移植预变性周围神经的调节作用,SD大鼠随机分为正常组、损伤组和神经移植组,术后7 d取眶内段视神经,用Aglient Oligo芯片检测其基因表达谱的变化,并用实时荧光定量PCR、免疫组织化学、Western Blot验证芯片检测结果。损伤组与正常组相比,1340条基因上调,940条基因下调;去分化相关基因如神经发育早期基因表达上调,转录、凋亡、增殖、生长、分化和细胞内信号转导类差异表达基因较多,基因差异表达的变化以有利于神经再生为主,但也存在显著抑制神经再生的差异表达变化。神经移植组与损伤组相比,106条基因上调,14条基因下调,部分差异表达基因与细胞去分化有关。总之,视神经损伤早期约1/10的基因差异表达,其中包含与神经胶质细胞去分化密切相关的基因;移植预变性周围神经可调控受损视神经中部分基因的表达,促使胶质细胞去分化趋势增强,有利于视神经再生。     

毛囊神经干细胞促进受损大鼠视神经大胶质细胞去分化

目的 培养毛囊神经干细胞,研究其对受损视神经大胶质细胞去分化的影响。 方法 取约90g雄性SD大鼠触须垫毛囊隆突区贴块,无血清培养或经15%胎牛血清诱导培养毛囊隆突区细胞,用免疫荧光细胞化学和PCR鉴定;以含增强型绿色荧光蛋白的腺相关病毒（rAAV2EGFP）稳定转染该细胞。成年雄性SD大鼠54只,分为正常对照组、损伤组、移植组,移植组为视神经损伤后移植上述毛囊神经干细胞。转染细胞移植组术后7d、14d、30d,取视神经荧光显微镜下观察;损伤组和未转染细胞移植组术后7d取术侧视神经行Affymetrix基因芯片及实时荧光定量PCR检测,术后7d、14d取术侧视神经行HE、免疫组织化学检测。 结果 成功培养出神经前体细胞标记分子阳性的毛囊神经干细胞,诱导后该细胞可表达成熟神经细胞标记分子。毛囊神经干细胞移植到受损视神经30 d后,仍能存活和迁移。与损伤组相比,移植组差异表达基因有240条,其中一些与去分化相关,如干细胞、凋亡、增殖、信号转导、转录、分化发育、细胞黏附等相关基因,实时荧光定量PCR与基因芯片结果基本相符。移植组视神经远侧段细胞数较损伤组明显增多,巢蛋白、髓鞘碱性蛋白(MBP)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达增加,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达减少,且视神经近侧段神经丝(NF)表达增加。 结论 毛囊神经干细胞通过调节受损视神经中的一些基因表达,促进了其大胶质细胞去分化并向有利于神经再生方向变化。     

头颈部CT血管造影的三维重建视神经与鼻窦的关系

目的 视神经管毗邻的结构复杂,建立三维视神经模型,以达到多角度直观观察视神经的目的。方法 拷贝头颈CT血管造影（CTA）并对视神经、蝶窦及后组筛窦进行数字化三维重建,分析三维立体图像上视神经的毗邻结构及分型。结果 获得了视神经、蝶窦及后组筛窦的三维模型。根据视神经的三维立体毗邻结构将其分为3种类型,即：蝶窦型、筛窦型和蝶筛型。分析了视神经毗邻位置的分型所对应的蝶窦与筛窦气化程度的关系。结论 三维立体模型中可以全方位直观观察视神经的毗邻结构。     

NanoString数字基因定量技术在生物医学领域的应用进展

NanoString数字化基因分析系统是最新的多重基因定量检测技术.此技术可直接检测条形码探针标记的单个mRNA转录子,并通过数字计数进行定量;它仅需100 ng的RNA即可对逾八百个特异的mRNA转录子进行准确的定量;它无需酶促和扩增过程,其检测的敏感性和准确性与实时荧光定量PCR（RQ-PCR）技术相当.近年来,NanoString技术的特点及优势使其被越来越广泛地应用到生物医学前沿领域,包括高通量基因表达结果验证、基因表达谱研究、基因调控网络研究、临床疾病分子分型及诊断预后等领域.     

黄芪甲苷对成年大鼠视神经切断后视网膜节细胞存活的影响

目的:探讨黄芪甲苷(AST)在成年大鼠视神经切断后对视网膜节细胞(RGCs)存活的影响。方法:动物分为正常组、单纯切断视神经组、AST处理组和生理盐水对照组。用荧光金(FG)逆行示踪标记法及定量解剖学技术观察正常和经AST处理的SD大鼠于视神经切断后5、7、14 d的RGCs的密度。结果:正常组RGCs平均密度为(2 230±156)/mm~2。单纯视神经切断组RGCs平均密度与生理盐水对照组相比较,无显著性差异;AST处理组与单纯切断视神经组和生理盐水对照组相比较,在各个时间点上均存在显著性差异。结论:黄芪甲苷可提高成年大鼠视神经切断后视网膜节细胞短期存活。     

碱性成纤维细胞生长因子诱导大鼠受损视神经胶质细胞去分化

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进大鼠受损视神经修复及诱导胶质细胞去分化的机制。方法成年SD大鼠55只随机分为正常对照组、损伤组、bFGF组。术后7d取眶内段视神经行Agilent基因芯片、实时荧光定量PCR检测;术后7d、14d取眶内段视神经行HE、免疫组织化学等检测。结果术后7d,bFGF组与损伤组相比有645条基因上调,458条下调,其中包括与神经干细胞或前体细胞及神经发育、增殖凋亡、染色质构型、转录调节、信号转导、神经生长相关基因等。与损伤组相比,bFGF组受损视神经远侧段细胞核增大,细胞数量增加,巢蛋白、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性物质增加,近侧段神经丝(NF)阳性物质增加。结论外加bFGF能促进受损视神经细胞增殖,增强神经胶质细胞去分化变化,同时改善神经再生的抑制性微环境,促进视神经再生。     

柯萨奇病毒A组16型抗原的ELISA定量检测方法建立

目的:建立柯萨奇病毒A组16型(CA16)抗原的双抗体夹心ELISA定量检测方法,用于CA16灭活疫苗的研发和生产过程的抗原定量检测。方法:以CA16中和单抗T26H12为包被抗体、NA14B9为标酶抗体,构建定量检测CA16抗原的双抗体夹心ELISA方法,并对方法的特异性、灵敏度、精密度、准确性、线性和稳定性进行分析。结果:建立了双抗体夹心定量检测CA16抗原的ELISA方法。方法的线性相关系数R2=0.998,线性范围为8～128 ng/ml,定量限度为8 ng/ml;变异系数CV<15%;回收率介于87.0%～113.8%之间;37℃6天的回收率>80%;与CA16以外的其他样本没有交叉反应。结论:构建的CA16抗原ELISA定量检测方法的各项性能符合定量检测需要,可用于CA16疫苗的研发和生产过程的抗原活性的定量检测。     

视觉诱发电位检测对视神经炎的诊断价值

视觉诱发电位(visual evoked potential,VEP)为检测视神经上行通路皮质下结构(包括视神经、视交叉、视束、外侧膝状体和视放射)的神经电生理检查方法之一,主要反映视网膜视锥细胞的电活动情况,从而检测视觉通路神经的功能.Halliday等[1]最先将棋盘格翻转视觉诱发电位(PS-VEP)用于临床并获得肯定结果,其后VEP被广泛应用,已成为神经眼科学重要的辅助诊断手段之一.     

激光扫描检眼镜

本文描述一种起低光强级眼底照相机和检眼镜作用的、能对眼眭进行广泛的定量测量的仪器。这种检眼镜检查法的光强级(在视网膜上20μw/cm~2)比目前所使用的光强级至少低2个数量级。一束聚焦的激光束所形成的飞点,在扫描镜作用下按规律地移动。因此分辨单元可达20μm或更小,而仅仅把病人瞳孔上直径为0.9mm的面积用于入射光束。其余的瞳孔面积作为出射光孔——使用通常成象法的系统则需要完全相反的瞳孔分配。正是这种相反的瞳孔分配才使     

虹膜组织力学特性及瞳孔阻滞力定量研究的方法学探索

目的:寻找一种能对虹膜本构关系以及原发性闭角型青光眼瞳孔阻滞力进行定量研究的方法,为闭角型青光眼的早期诊断及治疗方法的选择和治疗效果的评价提供一种定量标准.方法:根据瞳孔阻滞产生机制,设计瞳孔阻滞力仿真方法;依据力学原理和自定义的虹膜面应变、面积模量等建立虹膜的本构关系.结果:设计了一种不破坏虹膜正常功能和形态学结构,对虹膜组织力学特性及瞳孔阻滞力进行定量研究的方法.     

RAPD基因指纹图谱在解脲脲原体分型研究中的应用初探

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,以美国Operon公司生产的OPL1～20十聚体脱氧寡核苷酸为引物,对解脲脲原体8和10血清型标准株基因指纹图谱进行了构建。通过比较发现,两型解脲脲原体DNA间存在同源性和多态性。初步研究结果表明,RAPD可用于解脲脲原体分型。     

登革热病毒RNA实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

目的建立TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR方法,测定登革热病毒（DV）及DV病毒的RNA拷贝数。方法利用TaqMan探针,建立实时荧光定量RT-PCR方法,通过对登革热病毒RNA定量外标准品的定量分析,优化反应体系,检测TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR方法的灵敏度、特异性和重复性。结果该方法检测灵敏度可达1×103copies/mL,特异性及重复性良好,对同一样品进行5次重复检测,其循环阈值的平均标准偏差为0.792。结论TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定登革热病毒及DVRNA载量。     

髓细胞白血病的分子遗传学监测

肿瘤发生是多种基因异常的共同结果,因而检测基因改变可用于肿瘤监测。约1/3急性髓细胞白血病(AML)可发生N-ras原癌基因点突变。随着简便、灵敏的半固相微测序法的建立,它将用于监测AML早期复发和定量检测残留白血病细胞;此外,髓细胞白血病患者降钙素基因高甲基化可作为判定疾病进展的分子标记,且特别有助于慢性髓细胞白血病(CML)分期。     

模式翻转视觉诱发电位快速提取的可行性再研究

目的把模式翻转视觉诱发电位快速提取法应用于视神经病变的病人,探讨其临床应用价值。方法应用Galileo视觉诱发电位检测系统对30例正常健康人和17例视神经疾病病人分别进行全视野的PRVEP检测熏每一结果重复检测3次。所得结果应用少次提取法进行处理而得VEP波形。然后将正常对照组3次重复结果两两间分别进行配对t检验,探讨其可重性,并计算出正常值范围,最后参照正常值,分析视神经疾病组的检测结果。结果3次重复结果两两间配对t检验,得P1=0.425>0.05,P2=0.179>0.05,P3=0.110>0.05;参照本研究得出的正常值范围,对病人组的检测结果进行分析,得出这种少次提取法对视神经疾病检测的敏感度90.0%(18/20),特异度92.5%(13/14),准确度91.1%(31/34)。结论用这种少次提取法提取PRVEP,可重性好,稳定可靠。很有临床应用价值。     

组织多普勒结合多巴酚丁胺负荷试验对冠心病的研究

多巴酚丁胺负荷超声心动图主要用于冠心病的研究 ,可检测梗死心肌、心肌缺血后的存活心肌及冠状动脉血流储备等 ,具有较高的敏感性和特异性 ,但其图像分析采用半定量目测法 ,结果的分析判断需要一定的经验 ,并带有一定的主观性 .组织多普勒是近年发展起来的一项定量分析室壁运动的超声新技术 ,用于多巴酚丁胺负荷试验(DSE)可弥补其半定量目测法的不足     

组织多普勒结合多巴酚丁胺负荷试验对冠心病的研究

多巴酚丁胺负荷超声心动图主要用于冠心病的研究,可检测梗死心肌、心肌缺血后的存活心肌及冠状动脉血流储备等,具有较高的敏感性和特异性,但其图像分析采用半定量目测法,结果的分析判断需要一定的经验,并带有一定的主观性.组织多普勒是近年发展起来的一项定量分析室壁运动的超声新技术,用于多巴酚丁胺负荷试验(DSE)可弥补其半定量目测法的不足.     

MTT法定量检测白血病细胞株与基质细胞粘附率的方法

<正>粘附率是用于标定相互作用的分子数量及其亲和力大小的定量指标。目前常用于定量检测粘附率的方法主要有同位素标记法、形态学计数法,它们各有优缺点,本文介绍一种简单易行的检测粘附率的方法──MTT法,它具有客观性、非放射性和可以定量等优点。