GUF评定血清TB参考测量程序测量不确定度初探

目的探讨基于《测量不确定度表示指南》(简称GUM)的不确定度框架法(GUF)评定Doumas血清总胆红素(TB)参考测量程序测量结果不确定度的可行性。方法应用国际检验医学溯源联合委员会(JCTLM)推荐的Doumas血清TB参考测量程序,对国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)参考实验室外部质量评价计划(RELA)样本进行测定,分析测量结果各不确定度分量来源,同时对各分量分别进行评定,计算相对合成不确定度、标准不确定度和扩展不确定度。结果 2014年RELA-A和RELA-B样本TB浓度分别为67.33、31.99μmol/L,相对合成标准不确定度分别为1.57%、1.61%,标准不确定度分别为1.06、0.52μmol/L,扩展不确定度(取95%可信区间,k=1.96)分别为2.07、1.01μmol/L。结论利用GUF评定血清TB参考测量程序测量结果不确定度的方法可满足临床实验室对血清TB参考测量系统的要求。     

血清钾、钠、钙、镁离子色谱法候选参考测量程序的建立及性能评估

目的建立一种基于离子色谱技术的血清电解质(钾、钠、钙、镁)候选参考测量程序并评价其性能。方法采用一种简单的湿法消化方法对血清样本进行前处理,然后采用离子色谱仪检测。以患者新鲜血清及国际临床化学和检验医学联合会参考实验室外部质量评价计划(RELA)样本作为检测样本,对候选参考测量程序的正确度和不精密度进行评估,同时与决定性方法[电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)]比较。结果2 m L硝酸可将1.0 m L血清样本中的蛋白完全去除。32 mmol/L甲基磺酸淋洗液能将钾、钠、钙、镁实现基线分离。建立的候选参考测量程序的正确度和不精密度均在1.0%以内,与ICP-MS具有良好的可比性。结论成功建立了基于离子色谱技术的检测血清钾、钠、钙、镁的候选参考测量程序,相对于ICP-MS,具有操作简便、运行成本低、正确度高、稳定性好等优点,在临床检验的量值溯源中更具实用价值。     

蒙特卡洛法对校准曲线法测定总胆红素浓度的不确定度评定

目的 优化蒙特卡洛法(MCM)对国际检验医学溯源联合委员会(JCTLM)推荐的总胆红素参考测量程序不确定度的评定过程,参考实验室条件实现对血清总胆红素不确定度评定的量值溯源。方法 应用JCTLM推荐的参考测量方法(Doumas法)测定国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)2014年参考实验室外部质量评价计划国际比对样本A和样本B,基于MCM原理,借助可视化软件MATLAB对总胆红素浓度测量不确定度进行评定。结果 建立了实验室测量不确定度表达指南(GUM)的不确定度的评定模型,校准曲线相关参数为：斜率(b)=0.007 531 6,斜率的标准差为0.000 025 51;浓度均值为87.284 4 mg/L,浓度均值的标准差为0.196 5;吸光度均值(y)=0.657 917,吸光度均值的标准差为0.000 365 4;截距(a)=0.000 5251 6,截距的标准差为0.002 699。参考实验室条件下总胆红素测定结果：样本A浓度x=39.368 8 mg/L,合成标准不确定度(u)=0.603 2,95%可信区间为38.188 0～40.553 5;样本B浓度x=18.703 ...     

临床生物化学实验室测量不确定度的评估

目的通过临床生物化学实验室肌酐(Cr)测量不确定度的评估,探讨医学实验室认可工作中测量不确定度的评估方法和程序。方法以中国合格评定国家认可委员会(CNAS)提供的《测量不确定度要求的实施指南》为基础,参考其他测量不确定度指南文件,对本实验室血清Cr的测量不确定度进行评估。结果血清Cr浓度为59.65μmol/L时,所有不确定度分量影响的合成不确定度为2.69μmol/L,取95%可信区间,包含因子k=2,则血清扩展不确定度U=5.38μmol/L;排除生物学变异和分析前因素后,其他不确定度分量影响的合成不确定度为0.75μmol/L。结论我们所建立的测量不确定度评估方法简单方便,能分析不同因素对测量结果的影响程度,可用于医学实验室认可工作。     

6个酶学参考方法不确定度的研究

目的建立酶学参考方法不确定度研究模型,系统地对丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-淀粉酶(AMY)、谷氨酰基转移酶(GGT)和肌酸激酶(CK)6个酶学参考方法的不确定度影响因素进行研究,以明确各参考方法影响的关键因素,更好地指导参考方法的建立和运行。方法参照JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》、JJF1135-2005《化学分析测量不确定度评定》、CNAS-GL06《化学分析中不确定度的评估指南》和CNAS-CL33《检测和校准实验室能力认可准则在临床酶学参考测量领域的应用说明》,采用理论评估和实验设计相结合的方法对6个酶学参考方法不确定度进行评定。结果建立的酶学不确定度评定模型为C=ΔAΔt·1ε·1L·V1+V2+VSVS·fT·fpH·fλ·f试剂·f测试结果。结论建立了酶学参考方法不确定度的评定模型,并成功运用于6个酶学参考方法不确定度的评定。     

参考测量程序测定血清三酰甘油水平的测量不确定度评定

目的以血清三酰甘油(TG)为例,探讨临床生化检验的不确定度评定方法。方法建立测量血清TG水平的参考测量程序,使用"bottom-up"的方法对各不确定度分量的来源进行分析,并对各不确定度分量分别进行评定。通过合成标准不确定度,进一步计算获得血清TG水平的测量扩展不确定度。结果实验室测量得到朗道常规生化质控水平2TG的平均水平为1.10 mmol/L,合成标准测量不确定度结果为0.04mmol/L,在95%CI其水平的测量不确定度为(1.10±0.09)mmol/L,k=2;实验室测量得到朗道常规生化质控水平3TG的平均水平为2.96mmol/L,合成标准测量不确定度结果为0.04mmol/L,在95%CI其水平的测量不确定度结果为(2.96±0.20)mmol/L,k=2。结论建立了血清TG的测量不确定度评定方法,为临床生化检验不确定度的评定提供了有效的参考依据;对于促进临床实验室管理标准化,提高临床生化检验质量有指导意义。     

蒙特卡罗法对血清淀粉酶活性不确定度的评定

目的:探讨参考实验室测量血清淀粉酶(amylase,AMY)的不确定度评定方法。方法:利用参考测量程序测定血清AMY催化活性浓度,分别采用测量不确定度表达指南为框架的不确定度评定方法(GUM Uncertainty Framework,GUF)和蒙特卡罗法(Monte Carlo method,MCM)评定不确定度,通过分析不确定度来源,并对各分量进行定量,计算合成标准不确定度,进而计算扩展不确定度。用自适应蒙特卡罗法(adaptive MCM)对GUF评定结果进行确认。结果:GUF评定样品A测量结果为(85.8450±1.1026)U/L(k=1. 9 6), 9 5%CI8 4.7424～86.9476U/L;样品B测量结果为(225.5625±2.9312)U/L(k=1.96),95%CI222.6313～228.4937U/L。MCM评定样品A测量结果为(85.8350±1.0864)U/L,95%CI84.7596～86.9215U/L;样品B测量结果为(225.5847±2.8571)U/L,95%CI222.7570～228.4499U/L。样本A数值容差取0.05时,用自适应MCM对GUF确认,通过验证;数值容差取0.01时,用自适应MCM对GUF确认时,未通过。样本B数值容差取0.5时,用自适应MCM对GUF确认,通过验证;数值容差取0.1时,用自适应MCM对GUF确认,未通过。结论:依据JJF1059.2～2011《用蒙特卡罗法评定测量不确定度》推荐的adaptive MCM可作为GUF的确认方法。     

气相色谱-质谱法测定食用植物油中3-氯-1,2-丙二醇酯的不确定度评定

目的采用气相色谱-质谱法对食用植物油中3-氯-1,2-丙二醇酯的不确定度进行评定。方法根据JJF 1135-2005《化学分析测量不确定度评定》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》中的有关规定,建立测定食用植物油中3-氯-1,2-丙二醇酯含量不确定度数学模型,并按数学模型计算出各不确定度分量、合成不确定度和扩展不确定度。结果当3-氯-1,2-丙二醇酯含量为0.76mg/kg时,扩展不确定度为0.09mg/kg,结果表达为(0.76±0.09)mg/kg。结论评定结果表明,影响测定结果的主要因素为标准曲线拟合、测量重复性和标准溶液配制。     

锂、钠、钾、镁、钙、氯复合电解质冰冻人血清国家标准品的研制和性能评价

目的研制锂、钠、钾、镁、钙、氯复合电解质冰冻人血清国家标准品,并评价其性能,促进锂、钠、钾、镁、钙、氯电解质测定的标准化。方法收集含不同浓度锂、钠、钾、镁、钙、氯离子的无溶血、脂血和黄疸血清,经多重过滤、除菌后分装,制备成3个水平的候选品,-70℃保存。以钾离子作为均匀性评价的特性量,采用单因素方差分析评价候选品的均匀性。以钾、钠、氯离子作为稳定性评价的特性量,采用线性回归分析评价候选品的稳定性。采用参考方法或经验证的方法定值,并计算不确定度。评估候选品、新鲜血清样本在参考方法或经验证的方法与4个常规检测系统间的互通性。结果 3个水平侯选品中,钾离子的均匀性检验F值分别为1.630 1、1.498 6和1.020 8,均F0.05;钾、钠、氯离子在2～8℃、20～25℃和-20℃条件下,均至少可稳定30 d。3个水平侯选品中,锂离子定值结果分别为(0.649±0.022)、(1.195±0.032)、(1.334±0.008)mmol/L(k=2),钠离子定值结果分别为(120.057±2.206)、(142.030±1.521)、(158.228±1.293)mmol/L(k=2),钾离子定值结果分别为(5.042±0.143)、(5.739±0.106)、(6.158±0.094)mmol/L(k=2),镁离子定值结果分别为(0.732±0.021)、(0.857±0.026)、(1.144±0.026)mmol/L(k=2),钙离子定值结果分别为(2.014±0.078)、(2.348±0.056)、(3.070±0.024)mmol/L(k=2),氯离子定值结果分别为(90.814±2.005)、(108.875±0.908)、(128.156±1.453)mmol/L(k=2)。钠、钾、镁、钙和氯离子3个水平侯选品浓度均在新鲜血清样本的95%可信区间内,互通性良好。结论制备的锂、钠、钾、镁、钙、氯复合电解质冰冻人血清国家标准品候选品均匀性、稳定性好,钠、钾、镁、钙和氯离子侯选品互通性良好,定值准确可靠,可作为国家标准品使用。     

速率法血清ALT活性浓度的不确定度评定

目的通过对ALT活性浓度测量不确定度的评定,初步探讨血站实验室对测量不确定度的评定方法。方法依据中国合格评定国家认可委员会(CNAS)《测量不确定度要求的实施指南》及JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》等其他不确定度指南文件,采用A、B类评定方法对血站献血者标本ALT活性浓度的测量不确定度进行评定。结果血清ALT活性浓度为40.1 U/L时,ALT活性浓度扩展不确定度为U=2.2 U/L(包含因子k取2,置信区间95%)。结论本实验所使用的方法可以对ALT活性浓度测量不确定度进行评定。     

应用参考方法对血清γ-谷氨酰基转移酶的测量不确定度评定

目的 探讨临床实验室对测量不确定度的评定方法和程序.方法 应用国际临床化学联合会(IFCC)公布的参考方法对参考实验室外部质量评价计划(RELA)样本进行γ-谷氨酰基转移酶(GGT)催化活性浓度测定,明确反映整个过程测量不确定度分量的来源,按A,B两类不确定度的计算方式对各分量分别进行评定,计算合成标准不确定度,最后取95%置信区间,计算出扩展不确定度.结果 GGT催化活性浓度均值为3.492 μkat/L,合成标准不确定度为0.032 μkat/L,取95%置信区间,包含因子k=2,则扩展不确定度(U)为0.064 μkat/L.结论 临床实验室的测量不确定度与传统的测量误差相比,更能反映测量的水平,对临床检验工作有一定的指导意义.     

GUM法与蒙特卡洛法在IFCC 37 ℃肌酸激酶催化活性水平参考测量程序不确定度评定中的应用

目的用测量不确定度表示指南(GUM)与蒙特卡洛法(MCM)评定本室条件下国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)37℃肌酸激酶(CK)参考测量程序的不确定度,比较两种评定结果并尝试寻找适用的酶学参考测量不确定度评定模式。方法按照IFCC参考方法测定样品RELA2012KSA中CK活性水平,寻找测定过程中各不确定度来源,确定本室酶学参考测量模型。用GUM法与MCM法评定3次测量结果的不确定度,并以自适应MCM法对GUM法结果进行验证。结果本室实验条件下,CK活性测定不确定度来源主要有修正后的反应速率、总体积比、样品复溶体积、比色皿光径、摩尔吸光系数、反应温度与pH值及监测波长的偏离等。CK单次测定GUM法不确定度评定结果为(260.0±12.2)U/L,相对扩展不确定度为4.7%,3次测定结果的95%概率对称包含区间分别为(247.829 5,272.094 7)U/L、(246.938 8,270.923 6)U/L、(246.495 1,269.857 5)U/L,均值的不确定度评定结果为(259.0±7.0)U/L,相对扩展不确定度为2.7%。3次CK测定MCM法不确定度评定结果为输出量估计值,分别为260.0、259.0、258.2 U/L,95%概率对称包含区间分别为(248.753 2,271.535 7)U/L、(247.746 9,270.418 0)U/L、(247.303 9,269.330 8)U/L。用MCM法验证GUM法包含区间,3组绝对偏差dlow与dhigh值均大于数值容差0.05,GUM法结果未通过MCM法验证。结论 MCM法结果更为准确,可用于结果报告。GUM法结果经MCM法验证其质量后,可用于发现各不确定度来源对参考测量质量的影响,提高实验室质量改进效率。联合应用GUM法与MCM法进行不确定度评定可作为酶学参考测量不确定度评定方案的一种选择。     

血清葡萄糖测定的测量不确定度评定

目的 通过对血清葡萄糖浓度的测量不确定度评定,探讨实验室对测量不确定度的评定方法和程序.方法 用Olympus生化检测系统己糖激酶法检测血清葡萄糖浓度,建立反映整个过程测量不确定度分量来源的数学模型.根据数学模型,分析各不确定度的来源,按A、B两类不确定度的计算方式对各分量分别进行评定,计算合成标准不确定度,最后,取95%置信区间,计算出扩展不确定度.结果 血清葡萄糖浓度为4.61 mmol/L,合成标准不确定度uc=0.1667,取95%置信区间,包含因子k=2,则扩展不确定度U=0.1667×2=0.33 mmol/L.结论 医学实验室的测量不确定度与传统用准确度表示的误差相比,更能反映测量的水平,且对检测结果的临床应用有实际指导意义.     

产品校准品不确定度水平对互换性评价结果的影响

目的观察产品校准品不确定度水平对互换性评价结果的影响。方法以总胆红素为例,评价A厂家产品校准品的互换性。建立测量血清总胆红素的参考测量程序和厂家测量系统;同时测量3.9~717.4μmol/L 26份单人份血清和A厂家产品校准品;按目前我国市场上总胆红素产品校准品的不确定度水平(0.57%~10.0%),采用国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)互换性评价更新方案评价校准品不确定度水平对其互换性的影响。结果建立的总胆红素参考测量程序测量GBW09184和GBW09185的结果分别为(108.1±1.8)μmol/L和(44.8±0.8)μmol/L;测量浓度为84.3μmol/L的质控品10次,测量变异为0.55%。26份单人份血清,参考测量程序和厂家测量系统的测量结果分别为5.0~679.7μmol/L和3.9~717.4μmol/L,A厂家产品校准品的测量结果分别为80.9和77.6μmol/L。按总胆红素产品校准品的相对不确定度分别为1.0%、5.0%计算,A厂家产品校准品在2个相同测量程序间的互换性评价结果存在差异。结论产品校准品的不确定度水平影响互换性评价结果。     

速率法检测献血者丙氨酸转氨酶的测量不确定度评定

目的通过丙氨酸转氨酶（ALT）测量不确定度的评定,探讨血站实验室建立测量不确定度的评定方法和程序。方法依据（（JJFl059-1999测量不确定度评定与表示》和《CNAS-GL05测量不确定度要求的实施指南》对ALT速率法的测量不确定度进行评定,明确测量不确定度分量来源,采用不确定度A类和B类评定方法评定各不确定度分量,计算合成不确定度与扩展不确定度。结果献血者血浆ALT浓度为52．5U／L时,其扩展不确定度为U=3．31U／L（包含因子k=2,置信区间P=95％）。结论本实验室所建立的测量不确定度评定方法可分析不同因素对测量结果的影响程度,有助于实验室提高检测质量。     

同位素稀释质谱法测定血清肌酐浓度的不确定度评定

目的探讨同位素稀释质谱法(ID-MS)测量血清肌酐浓度的不确定度评定方法。方法应用ID-MS建立测定血清肌酐浓度的参考测量程序,严格按照《测量不确定度表示指南》(简称GUM)评定不确定度,即严格根据测量模型对各不确定度分量进行详细分析和定量,加减项用绝对值、乘除项用相对值合成各标准不确定度分量;同时,用传统评定方法和蒙特卡洛方法(MCM)分别对血清肌酐浓度测量结果进行不确定度评定。结果对特定血清进行赋值,其肌酐浓度为347.4μmol/L。按照ID-MS测量模型,并严格应用GUM原理进行不确定度评定,其合成标准不确定度的相对值为0.89%,而传统方法评定结果为0.93%,较GUM法高4.8%;采用MCM评定各不确定度分量,其合成标准不确定度的相对值为0.64%,较严格GUM法低27.9%,其测量结果的95%可信区间为343.1~351.8μmol/L。结论与GUM法评定结果比较,传统评定方法结果偏高,而MCM偏低,3种评定方法存在差异。建议采用GUM法,根据测量模型对各不确定度分量进行定量和合成。有条件的话,可用MCM评定不确定度。     

血清总胆红素改良参考测量程序的复现及性能评价

目的 复现血清总胆红素改良参考测量程序并评价其性能。方法 根据德国汉诺威临床化学研究所推荐的参考方法及相关文件，复现血清总胆红素的改良参考测量程序，对其正确度、精密度、线性范围、不确定度等进行评估。采用Doumas参考方法和改良参考测量程序检测40份临床血清样本，评价两种方法的一致性。结果 改良参考测量程序检测国家一级标准物质GBW09184、GBW09185的浓度为107.03、44.10μmol/L,相对扩展不确定度为2.1%、2.5%,偏倚为-0.99%、-1.13%,2020RELA样本的测量值在其等效范围内，总不精密度<1.5%,测量线性范围为11.55～443.96μmol/L。40份血清标本测量结果与Doumas参考方法可比，Passing-Bablok回归分析方程为Y=0.029 9+1.001X,斜率的95%CI为0.995 8～1.004 6,截距的95%CI为-0.197 2～0.187 5,相关系数r=0.999。结论 成功复现血清总胆红素改良参考测量程序，改良程序使用摩尔吸光系数代替标准溶液进行校准，操作方便，分析性能提高，可实现临床常规实验室总胆红素检...     

糖化血红蛋白液相色谱-质谱参考测量程序测量结果的不确定度评定

目的探讨液相色谱-质谱(LC-MS)参考测量程序(又称:参考方法)测量人全血中糖化血红蛋白(HbA_(1c))结果的不确定度评定方法。方法建立国际检验医学溯源联合委员会(JCTLM)推荐的HbA_(1c)参考测量程序——LC-MS法,按照国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)HbA_(1c)标准化工作组实验方案对样品进行测量,分析测量不确定度分量来源,评定各分量,合成标准不确定度,计算扩展不确定度,确定校准和测量能力(CMC)。结果人全血HbA_(1c)浓度为32.8 mmol/mol、71.8 mmol/mol、52.4 mmol/mol、100.9 mmol/mol、59.6 mmol/mol时,其相对扩展不确定度分别为2.9%、1.5%、1.9%、1.3%和1.7%(95%置信区间,包含因子k=2)。参考测量能力范围为32.8 mmol/mol至100.9 mmol/mol时,其CMC为1.3%。结论该参考实验室评定了LC-MS参考测量程序HbA_(1c)检测结果的测量不确定度,满足了对HbA_(1c)参考测量能力的要求。     

血站丙氨酸氨基转移酶分析中测量不确定度的评估

目的通过对血站ALT检测测量不确定度的评估,探讨血站实验室测量不确定度的评估方法。方法参照1995年国际标准化组织推出的《测量不确定度表述指南》与《测量不确定度评定与表示》,对本实验室献血者血清ALT测量不确定度进行评估。结果献血者血清ALT浓度为20.9 U/L时,合成标准不确定度为0.7 U/L,取95%置信水平,包含因子k=2,扩展不确定度为1.4 U/L。构成不确定的分量中,校准品浓度分量所占比例最大,为96.18%。结论该测量不确定度评估方法简便易行,可用于血站实验室。     

血清总胆红素参考方法的建立及其不确定度评估

目的建立血清总胆红素（T-BIL）参考方法,评价其性能,并评估其测量结果不确定度。方法根据国际医学检验溯源联合委员会（JCTLM）公布的相关文献建立参考实验室内部的血清总胆红素参考方法,对方法的线性、精密度和准确度进行评估,测量结果不确定度参照GUM文件进行评估。结果总胆红素标准曲线线性方程为：Y=0．00750X=0．00308,R2=0．9999,线性范围0～200mg／L;测量血清样本的相对标准偏差（CV）小于1．0％;测量IFCC-RELA样本,结果在等效范围内,相对标准不确定度[urep（c）]小于2．0％。结论成功建立了血清总胆红素参考方法,可用于血清总胆红素项目的量值溯源和标准化,为血清总胆红素常规检测系统向参考方法／g考物质溯源提供有效途径。