金匮肾气丸对大鼠肾脏纤维化的影响

目的：研究金匮肾气丸对 UUO 致肾间质纤维化大鼠模型的影响,探讨金匮肾气丸抗肾间质纤维化作用机制。方法：采用UUO 大鼠模型,将雄性 SD 大鼠75只按照3：1：1的比例随机分为治疗组（45只）、UUO 模型组（15只）、假手术组（15只）。治疗组用金匮肾气丸配成溶液,按照高剂量、中剂量、低剂量分为治疗1组、2组、3组灌胃。灌胃后第7天、第14天、第28天取血液标本,测血肌酐、尿素氮,同时分别处死5只大鼠,取结扎侧肾组织,免疫组织化学技术检测各组大鼠肾脏中单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）、α-平滑肌肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin,α-SMA）和细胞增殖核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达。结果：UUO 造模后肾间质 MCP-1、α-SMA、PCNA 表达明显增加,使用金匮肾气丸治疗后大鼠肾间质 MCP-1、α-SMA、PCNA 表达较 UUO 模型组显著减少（P ＜0．05）。结论：金匮肾气丸可通过降低 MCP-1、α-SMA 和 MCP-1表达,减轻肾间质纤维化。     

金匮肾气汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾纤维化缺氧的影响及作用机制

目的探讨金匮肾气汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化缺氧的影响及作用机制。方法雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组、模型组、金匮肾气汤组、依那普利组,每组6只,采用左侧输尿管结扎术造模,UUO术后第1天开始灌胃,金匮肾气汤1.8 g/kg,依那普利10 mg/kg,每日1次。第21天处死大鼠,取梗阻肾组织,HE和Masson染色观察肾组织病理改变,免疫荧光检测Tomato Lectin、Hypoxyprobe-1和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在肾组织的表达, Western Blot检测转化生长因子-β1 (TGF-β1)、骨形态发生蛋白(BMP-7)和HIF-1α在肾组织的表达。结果与模型组比较,金匮肾气汤治疗后,HE和Masson染色结果提示梗阻肾肾盂扩张减轻、肾实质变厚,间质胶原阳性面积减少,Western Blot检测梗阻肾组织中TGF-β1蛋白表达下调、BMP-7蛋白表达上调(P0.05);免疫荧光检测显示梗阻肾组织中血管密度增加、缺氧改善,HIF-1α表达下调(P0.05)。结论金匮肾气汤可以减轻UUO大鼠梗阻肾组织纤维化,其作用机制可能与其改善肾间质缺氧有关。     

银杏叶对肾间质纤维化防治作用的实验研究

目的观察银杏叶对肾间质纤维化的防治作用及其效果。方法45只雄性SD大鼠随机分为3组,假手术组、模型组和治疗组,每组15只动物。治疗组在单侧输尿管结扎(unilated ureteral obstruction,UUO)基础上给予银杏叶(300 mg/kg.d-1)灌胃治疗,1次/d;模型组在UUO基础上给予生理盐水灌胃;对照组除不结扎输尿管外,其余同模型组。分别于实验第3、7、14 d分批处死大鼠,每次处死5只。对大鼠结扎侧肾组织进行形态学和免疫组织化学观察。采用HE、Masson两种染色观察梗阻侧肾组织病理学的改变,采用免疫组织化学的方法检测肾组织中转移生长因子-β1(transforming growth factor,βTGF-β1)、核因子kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、α-平滑肌肌动蛋白(-αsmooth muscle actin,-αSMA)的表达,采用氯胺T法测定肾组织中羟脯胺酸的含量。结果大鼠UUO术后3d,肾间质水肿,单核细胞浸润。14 d后肾小管萎缩,间质增宽,肾组织中TGF-β1、NF-κB、α-SMA的表达及肾组织中胶原蛋白含量明显增加,且随着梗阻时间延长,其阳性表达率也增加。银杏叶治疗组肾组织中TGF-β1的表达及胶原蛋白的含量较模型组明显降低,单核细胞浸润减轻,肾脏病理学明显改善。结论银杏叶能够抑制UUO大鼠肾间质炎性细胞浸润,减少肾间质胶原蛋白的含量,有防治UUO大鼠肾间质纤维化的作用。     

肾康丸通过p38/NF-κB通路抑制AOPP诱导的足细胞炎症因子MCP-1的表达

目的 探讨肾康丸含药血清对晚期氧化蛋白产物(AOPP)诱导的体外培养足细胞(MPC5)单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响及其机制.方法 制备肾康丸含药血清和AOPP;体外培养MPC5,用不同浓度的肾康丸含药血清刺激不同时间,MTT法检测细胞增殖;用肾康丸含药血清干预AOPP处理的MPC5,Western blot法检测p38MAPK、IκBα蛋白表达,免疫荧光法观察NF-κB p65核转移,ELISA法检测细胞培养上清中MCP-1表达.结果 (1)肾康丸含药血清呈时间和浓度依赖性促进MPC5增殖,最佳作用浓度和时间分别是5％、24 h;(2)AOPP呈浓度和时间依赖性诱导MPC5分泌MCP-1;p38抑制剂SB203580或NF-κB抑制剂小白菊内酯预孵育能使细胞上清中MCP-1分泌减少;肾康丸含药血清能抑制AOPP诱导MPC5分泌MCP-1;(3)AOPP以浓度依赖的方式增加P-p38蛋白的表达、降低IκBα蛋白的表达;与AOPP组相比,AOPP+肾康丸组MPC5 Iκ Bα蛋白表达增加;AOPP+SB203580组IκBα蛋白表达亦增加,但不及AOPP+肾康丸组;(4)肾康丸含药血清减少AOPP诱导的NF-κB p65核转移.结论 肾康丸含药血清能通过p38MAPK/NF-κB途径下调MCP-1表达而发挥抗炎作用,为应用其防治糖尿病肾病提供了新的理论依据.     

青蒿琥酯对UUO模型大鼠肾脏的抗炎作用及其机制研究

目的 观察青蒿琥酯能否有效拮抗肾脏病理性炎症过程的发生以及对肾脏疾病的治疗作用.方法 将雄性Wistar大鼠60只随机分为5组,包括假手术组(SOR组)、大剂量青蒿琥酯组(HAD组)、小剂量青蒿琥酯(SDA组)、氯沙坦钾组(ARB组)、UUO模型对照组(UUO组).从模型建立后24 h开始灌胃:其中SDA、HAD组分别给予青蒿琥酯25 mg·kg-1·d-1、50 mg·kg-1·d-1灌胃,ARB组给予氯沙坦钾20 mg·kg-1·d-1灌胃,大鼠术后3、7 d收集24 h尿、血、肾组织标本.行一般生化检查及病理染色,电镜观察细胞器改变情况.免疫组化法检测肾组织中磷酸化NF-Kappa B,实时荧光定量PCR检测Smad 7和IκB-α的mRNA表达.结果 (1)UUO组术后3、7 d血肌酐水平高于其他各组(P<0.05),各治疗组不同时间点血肌酐水平差异无统计学意义(P>0.05);(2)磷酸化NF-Kappa B P56阳性细胞在成模后3 d开始增加,UUO组表达显著高于对照组(P<0.05),各治疗组显著少于UUO组(P<0.05);(3)RT-PCR检测Smad 7 mRNA在UUO组表达相同时间点较SOR组略有上升,各治疗组Smad 7亦较SOR组有所上升,SOR组IκB-α mRNA显著高于各实验组(P<0.05),各药物治疗组IκB-α mRNA减低程度弱于UUO组 (P<0.05).结论 青蒿琥酯可以减轻肾间质炎性损伤,其机制可能和上调Samd 7表达及减少IκB-α mRNA降解有关.     

维生素E抑制氯化汞诱导大鼠肾间质纤维化的抗氧化作用机制（英文）

目的：观察维生素E对氯化汞诱导的大鼠肾间质纤维化的作用并探讨其抗氧化机制方法：32只大鼠随机分为正常组、模型组与维生素E组。除正常组外,其余大鼠以8mg/kg氯化汞（mercuricchloride,HgCl2）灌胃,每天1次,共9周。维生素E组同时以维生素E100mg/kg灌胃,正常组与模型组灌服等量生理盐水。9周后处死大鼠,盐酸水解法检测肾组织羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）含量,苏木精伊红染色、Masson染色与过碘酸六胺银染色观察肾组织病理形态与胶原沉积;试剂盒方法检测肾组织过氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性与谷胱甘肽（glutathione,GSH）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;蛋白印迹法检测核因子κB（nuclearfactor-κB,NF-κB）信号途径的κB抑制蛋白（inhibitorκB,IκB）、磷酸化IκB（phospho-IκB,p-IκB）以及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的表达;蛋白印迹法与免疫荧光法观察α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）的表达。结果：与正常组比较,肾组织Hyp含量、Masson染色与过碘酸六胺银染色以及肾组织α-SMA的变化证实肾间质纤维化模型造模成功;GSH-Px活性与GSH、MDA含量变化提示肾间质纤维化模型存在脂质过氧化损伤。与模型组比较,维生素E组大鼠肾组织Hyp含量降低（P〈0.01）,肾间质纤维化减轻,GSH与MDA含量降低（P〈0.01）;维生素E组p-IκB、TNF-α、α-SMA蛋白表达明显降低,各组中IκB蛋白表达无明显变化。结论：维生素E抗氯化汞诱导大鼠肾间质纤维化的作用机制在于抗脂质过氧化损伤,与抑制NF-κB信号通路及细胞外基质产生细胞活化有关。     

利拉鲁肽通过circ-sirt1/NF-κB信号通路抑制血管平滑肌细胞炎症的机制研究

目的 探究利拉鲁肽(liraglutide,LIR)对肿瘤坏死因子α(tumour necrosis factor-α,TNF-α）诱导的血管平滑肌细胞炎症反应的作用及其可能的分子机制。 方法 实验分为空白对照组(NC组)、TNF-α组(10 μg/L)和TNF-α+LIR组(10 μg/L TNF-α+100 nmol/L LIR)。酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养基中的白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)。实时荧光定量核酸扩增检测系统(real-time quantitative polymerase chain reaction detecting system,qPCR)检测circ-sirt1及细胞间黏附分子1(inter-cellular adhesion molecule 1,ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、抑制性卡巴蛋白α(inhibitor kppa B-α,IκB-α）mRNA的表达。Western Blot检测细胞ICAM-1、MCP-1和IκB-α蛋白表达。免疫荧光检测核因子κB（nuclear factor kappa-B,NF-κB）p65蛋白分布。 结果 与NC组相比,TNF-α组细胞培养基中的IL-1β和IL-6含量显著升高,ICAM-1、MCP-1 mRNA及蛋白表达显著升高,IκB-α mRNA及蛋白表达显著减低,circ-sirt1表达显著降低,NF-κB p65蛋白主要定位在细胞核。与TNF-α组相比,TNF-α+LIR组IL-1β和IL-6含量显著减少,ICAM-1、MCP-1蛋白表达显著降低,IκB-α蛋白表达显著增加,circ-sirt1表达显著升高,NF-κB p65蛋白细胞核定位减少。 结论 利拉鲁肽能够抑制血管平滑肌细胞的炎性反应,可能是通过抑制炎症介质释放及circ-sirt1/NF-κB信号通路的激活发挥作用。     

血必净对梗阻肾间质炎性损害的干预实验

目的动态观察单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）模型肾间质炎性损害病理改变及核因子-κB（NF～κB）、转化生长因子一β1（TGF-β1）在肾间质的表达,探讨血必净对肾间质炎性损害的干预机制。方法Sprague—Dawley（简称SD）清洁级健康大鼠雌雄各半共60只,随机分为三组：假手术组（SOR组）、模型组（MOD组）、血必净治疗组（XBJ组）。每组20只;建立UUO模型,分别于手术后第7d、第14d各组随机选取10只大鼠,取梗阻侧肾组织,行HE、MASSON染色及免疫组化染色。观察肾脏间质病理变化以及NF—κBp65和TGF一β1在肾间质的表达。结果血必净能减轻UUO大鼠肾间质炎性损害（第7d、第14d肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积P〈0．05）;血必净能下调肾组织间质NF—κBp65及TGF-β1的的表达（P〈0．05）有统计学意义。结论血必净减轻肾间质炎性损害,其机制可能通过抑制肾组织间质NF-κBp65及TGF-β1的的表达,并对早期肾间质纤维化有抑制作用。     

六味地黄汤对5/6肾切除大鼠NF-κB、MCP-1、Col-Ⅲ表达的影响

目的 观察六味地黄汤对5/6肾切除大鼠残肾转录因子-核因子κB (NF-κB)、单核细胞趋化因子(MCP-1)及Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)表达的影响,探讨六味地黄汤抑制肾间质纤维化进展的作用机制.方法 按照随机数字表法将60只SD雄性大鼠分为5组:空白组、假手术组、模型组、依那普利组、六味地黄汤组,每组12只,后三组行5/6肾切除术诱导大鼠肾衰模型,假手术组同期手术,但不损及肾脏.、造模术后3d进行灌胃干预.灌胃8周后处死各组大鼠,观察各组大鼠残肾组织形态学变化并用免疫组化法检测大鼠残肾NF-κB 、MCP-1 、Col-Ⅲ的表达.结果 (1)观察5/6肾切除大鼠残肾组织细胞形态学,与模型组相比六味地黄汤、依那普利组可减轻大鼠肾间质损害及纤维化程度;(2)免疫组化半定量分析显示六味地黄汤组肾皮质的NF-κB、MCP-1及Col-Ⅲ表达均明显低于模型组(P＜0.05),与依那普利组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 六味地黄汤可能通过下调NF-κB 、MCP-1及Col-Ⅲ的表达,减少细胞外基质的积聚,减轻炎症反应和纤维化程度,抑制5/6肾切除大鼠肾间质纤维化进展,可作为慢性肾衰竭的辅助用药、