钙敏感受体基因突变及多态性的研究进展

细胞外钙敏感受体(CaSR)属于G蛋白耦联受体C家族成员,参与调节各种生理过程,在信号识别和转导以及钙稳态调节中起关键作用,CaSR基因已受到研究者的广泛关注,CaSR的突变及基因多态性将引发各种疾病,因而了解CaSR基因突变,多态性及其相关疾病前景很有必要.     

钙敏感受体在动脉粥样硬化中的作用研究进展

钙敏感受体(CaSR)是G蛋白偶联受体C家族的成员之一,广泛表达于体内不同组织细胞,参与机体多种病理生理过程。CaSR能够通过调控血管内皮细胞损伤、炎性反应、血管平滑肌细胞增殖和迁移及血管钙化过程,参与动脉粥样硬化的发生发展。     

Notch信号通路与乳腺癌发生关系的研究进展

1983年Artavanis Tsakonas研究组首次克隆了Notch基因,并发现其编码一类大的跨膜受体,即Notch受体.随后相继在线虫、爪蟾、鼠和人等多个物种体内发现其家族不同成员~([1]).Notch信号不仅影响细胞的增殖、分化、凋亡、黏附和上皮细胞-间叶细胞转变(epithelial-mesenchy maltransition,EMT)等活动,在胚胎发育、造血、血细胞发育、血管生成、某些神经系统疾病及肿瘤形成等生理病理过程中起着重要的作用~([1]).     

PTH、细胞内钙和CaSR在心肌损伤中的“三角关系”

正甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)是甲状旁腺细胞分泌的调控机体钙磷代谢的重要激素。近年来,PTH对于心肌的毒性作用开始受到人们关注。钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)是G蛋白偶联家族成员之一,可以感受细胞外钙浓度的细微变化,并通过多种途径调节细胞内钙浓度,进而控制PTH的分泌。CaSR在心肌细胞、     

ATP门控离子通道P2X_7受体在中枢系统的表达与功能

正P2X受体是由ATP激发的离子通道,从中可渗透Na~+、K~+和Ca~(2+),这些蛋白参与一系列生理过程,包括调节突触传输、平滑肌收缩、化学递质分泌和免疫反应调控。P2X_7受体作为P2X受体家族最独特的成员,其与其它成员在结构和功能上有显著差异,属于低分子溶质转运的非选择性离子通道~([1-3])。P2X_7受体作为嘌呤能受体,与其它P2受体有明显     

TLR4 在炎性癌症中的研究现状

正炎性癌症是指由炎症引发的癌症。大多数癌症的发生往往与炎症有着密不可分的联系~([1]),例如:长期的宫颈炎提高了宫颈癌变的可能性;幽门螺旋杆菌所致的胃炎被普遍认为是胃癌的始发原因;严重的溃疡性结肠炎可能会导致结肠癌的发生~([2]);慢性肝炎则是造成肝纤维化、肝硬化、最终形成肝癌的罪魁祸首之一~([3])。TLR4是Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)家族中发现最早、研究最深入的成员,它在体内的分布     

Ⅲ型干扰素抗病毒应用研究进展

干扰素(interferon,IFN)为庞大的细胞因子家族,具有抗病毒、抑制细胞生长和免疫调节等作用.根据氨基酸序列和受体的不同,干扰素可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型三种类型~([1-3]).     

钙敏感受体在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

目的:观察钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用。方法:Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠肺动脉平滑肌细胞。应用Western blotting技术及免疫荧光染色分析CaSR蛋白在肺动脉平滑肌的表达;采用激光共聚焦扫描技术检测不同处理因素对细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,应用MTT法分析不同处理因素对细胞存活率的影响。结果:大鼠肺动脉平滑肌细胞有CaSR蛋白表达。缺氧能够增加CaSR和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达、细胞存活率及[Ca2+]i(与对照组比较,P0.05)。GdCl3(CaSR激动剂)能够增强缺氧的上述作用,NPS2390(CaSR抑制剂)则能够减弱缺氧的作用。结论:缺氧诱导的CaSR表达增加参与了缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖。     

TRPC通道参与疼痛信号传递过程与作用机制的研究进展

<正>瞬时受体电位通道(transient receptor potential,TRP)家族是一类六次跨膜的非选择性阳离子通道,主要包括TRPC、TRPA、TRPM、TRPV、TRPP和TRPML六个亚家族。近年来越来越多的实验证据表明TRP通道是痛觉信息传递系统的"前沿哨兵",响应细胞及机体内外伤害性热、冷、机械和化学等刺激,并将其转换为动作电位向脊髓及上位脑中枢传递最终产生痛感觉~([1,2])。其中哺乳动物TRPC通道家族的七个成员     

PPARs在不同类型心力衰竭中作用的研究进展

正过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs)是1990年发现的核受体超家族的成员,迄今为止共发现了3种PPARs(α、β/δ和γ)。PPARs主要在肝、脂肪、心肌等组织表达,发挥促进脂肪酸摄取、转运和氧化,参与能量代谢平衡的功能~([1])。心力衰竭(简称"心衰")时心脏重塑的机制与能量稳态直接相关~([2]),随着糖尿病、高血压等代谢性疾病所致慢性心衰的发病率逐年上升,代谢调控在心衰治疗中的作用受到了广泛关注~([3-4])。     

不同鼠龄大鼠心肌组织中钙敏感受体的表达及与缺氧-再灌注损伤的关系

目的：观察不同鼠龄大鼠心肌组织钙敏感受体（CaSR）的表达规律及与心肌缺氧-再灌注损伤的关系。方法： 采用RT-PCR技术，检测不同情况下心肌组织CaSR的表达差异；Lagendorff离体心脏灌流的方法复制心脏缺氧-再灌注模型；用透射电镜观察心肌超微结构的变化。结果：大鼠出生后，心肌组织中CaSR的表达逐渐升高，1个月时达到高峰，2、3个月保持在出生水平，此后上升并维持在较高水平。大鼠心肌缺氧40 min及再灌注1 h、2 h心肌组织CaSR的mRNA表达升高，再灌注3 h、4 h后降低；同时随再灌注时间延长，心肌超微结构损伤愈严重结论：大鼠心肌组织存在钙敏感受体，其表达与月龄有一定关系，并可能参与心肌缺氧-再灌注损伤的发生。     

钙敏感受体在大鼠心肌缺血/再灌注损伤的表达变化及与心肌损伤关系

目的： 观察钙敏感受体（CaSR）在大鼠心肌缺血/再灌注时的表达变化，揭示其与心肌缺血/再灌注损伤的关系。方法： Wistar大鼠随机分为5组：假手术组（sham组）、缺血再灌注1、2、4和6 h组（I/R 1 h、2 h、4 h、6 h组）。采用冠状动脉结扎和松结的方法，复制大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤模型，记录左室收缩压（LVSP）和左室内压最大变化速率（±dp/dtmax），测定血清LDH、SOD活性和MDA含量，透射电镜观察心肌超微结构变化， RT-PCR法检测心肌组织中CaSR mRNA的表达变化。结果：LVSP、左室内压±dp/dtmax及SOD活性随再灌注时间延长而减低，LDH活性和MDA含量在再灌注2 h时最高；心肌超微结构损伤在再灌注1 h、2 h较重，随再灌注时间延长而减轻；大鼠心肌缺血/再灌注1 h、2 h心肌组织CaSR的mRNA表达升高，再灌注4 h、6 h后降低。结论： CaSR mRNA表达多时心肌损伤较重，CaSR可能参与了心肌缺血/再灌注损伤。     

Effects of calcium-sensing receptors on apoptosis in rat hippocampus during hypoxia/reoxygenation through the ERK1/2 pathway

Objectives: To explore the effects of calcium-sensing receptors (CaSR) on apoptosis in rat hippocampus during hypoxia/reoxygenation (H/R). Methods: After rat hippocampus was isolated, the cultures were subjected to H/R, and meanwhile gadolinium chloride (GdCl₃, agonist of CaSR) and NPS 2390 (antagonists of CaSR) were added to reperfusion solution. The number of hippocampal neuron, cell viability and apoptosis rate were determined by inverted microscope, 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and flow cytometer (FCM), respectively. Besides, caspase-3, Bax, cytochrome C (Cyt-c), extracellular signal-regulated protein kinase (ERK) 1/2, pERK1/2, P38 and pP38 were analyzed by Western blotting. Results: The hippocampal neuron number and cell viability were significantly decreased during H/R, and were further significantly reduced when co-treatment with CaSR agonist GdCl₃. But the effects of GdCl₃ were attenuated by NPS-2390. Whereas, apoptosis rate, the expression level of caspase-3, Bax and Cyt-c were all significantly increased under H/R condition, and was further significantly increased by GdCl₃, but were reversed by NPS-2390 (P < 0.05). Moreover, there were no significant differences in expression of ERK1/2, P38 and pP38 among different groups. However, the expression of pERK1/2 was significantly increased during H/R, but was significantly reduced by NPS 2390 (P < 0.05). Conclusion: The results suggest that CaSR might play significant roles in the induction of hippocampus apoptosis in rat during H/R through phosphorylation of ERK1/2.     

CaSR在淫羊藿苷诱导的胚胎干细胞向心肌细胞分化中的作用

 目的: 观察钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)对淫羊藿苷(ICA)诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化的影响。方法: 129小鼠ES-D3细胞经直接悬浮法形成拟胚体(EBs),应用ICA定向诱导,透射电镜观察分化细胞的超微结构;免疫荧光和Western blot分别检测细胞有无α-辅肌动蛋白(α-actinin)和肌钙蛋白I(cTnI)的表达;流式细胞术检测细胞分化率;Western blot检测心肌特异转录因子NKx2.5、GATA-4和CaSR的蛋白表达。结果: ICA诱导2 d后,可见自发性收缩的细胞簇;随着诱导分化时间的延长,α-actinin和cTnI蛋白的表达逐渐增多;CaSR、NKx2.5和GATA-4蛋白在分化早期表达最多,持续表达至晚期;电镜观察分化细胞中可见连接结构、肌丝;CaSR激动剂新霉素能够增加早期EBs中CaSR、NKx2.5和GATA-4的表达,CaSR抑制剂NPS2390能够阻断上述作用。结论: CaSR在胚胎干细胞分化的心肌细胞中有表达,CaSR活化可通过增加NKx2.5和GATA-4的表达促进心肌细胞的分化。     

Ghrelin reduces rat myocardial calcification induced by nicotine and vitamin D3 in vivo

Ghrelin, a newly discovered bioactive peptide, initially was identified as a strong stimulant for the release of growth hormone (GH) and that has improved cardiac function in patients suffering from end-stage chronic heart failure. Increasing evidence has demonstrated that ghrelin may have myocardial protective effects. However, the role of ghrelin in the pathogenesis of cardiovascular diseases remains unclear. In this study, an in vivo model of rat myocardial calcification induced by vitamin D3 and nicotine was used to study the possible mechanism in the regulatory action of ghrelin on the calcified myocardium. Calcification increased total Ca2+ content and 45Ca2+ deposition in the myocardium and alkaline phosphatase (ALP) activation in the plasma. Compared with the control group, ghrelin mRNA expression was up-regulated and the myocardium calcium content was significantly increased in vitamin D3 and nicotine-treated rats. Rats were subcutaneously injected with 1 or 10 nmol/kg ghrelin. Rats treated with both low- and high-dose ghrelin decreased total Ca2+ content and 45Ca2+ deposition in cardiac muscle and inhibited ALP activation in the myocardium and plasma, in a concentration-dependent manner. In addition, osteopontin (OPN) mRNA expression significantly decreased and that of endothelin (ET-1) significantly increased with myocardial calcification. Ghrelin treatment increased OPN expression at the mRNA level and reduced ET-1 mRNA expression in a dose-dependent manner. These results indicate that exogenous administration with ghrelin attenuates myocardial calcification induced by nicotine and vitamin D3, and that the possible mechanism is via the ghrelin-induced increase in the OPN mRNA levels and decrease in the ET-1 mRNA expression in the myocardium.     

鸟氨酸脱羧酶/多胺系统在大鼠缺血预适应心肌保护中的作用

目的：探讨鸟氨酸脱羧酶（ODC）/多胺系统在缺血预适应（IPC）心肌保护中的作用。方法:应用离体灌流大鼠心脏复制模拟心肌缺血/再灌注模型。心脏随机分为6组：对照组 (control)、缺血/再灌注组 (IR)、弱缺血预适应组 (IPCw)、强缺血预适应组 (IPCs)、IPCw+多胺抑制剂组 (DF-EG-IPCw)和IPCs+多胺抑制剂组(DF-EG-IPCs)。免疫印迹法定量分析多胺合成限速酶鸟氨酸脱羧酶 (ODC)的表达;高效液相色谱测定心肌组织中的多胺（腐胺、精脒、精胺）含量;Powerlab多导生理记录系统记录心脏功能;氯化三苯基四氮唑 (TTC) 染色检测心肌梗死面积;TUNEL方法检测细胞凋亡率,比较其中的差异性。结果:（1）与对照组比,IR组ODC表达下调,腐胺含量增加,精胺含量减少,总多胺池减少（P<0.05）,此时心功能下降（LVDP、HR、CF均低于对照组,P<0.05）,心肌梗死面积及心肌细胞凋亡率增加（P<0.05）;（2）与IR组比,弱及强缺血预处理组（IPCw、IPCs）心肌ODC表达上调,腐胺含量减少,精胺含量增加,总多胺池增加（P<0.05或P<0.01）,此时大鼠心功能有明显改善（LVDP、HR、CF与IR组比,P<0.05）,心肌梗死面积及心肌细胞凋亡率均明显降低（P<0.01）;（3）给予多胺抑制剂后,心肌ODC表达,腐胺、精脒、精胺及总多胺池含量均明显降低（DF-EG-IPCw组 vs IPCw组;DF-EG-IPCs组vs IPCs组,P<0.05或P<0.01）,心功能明显下降（P<0.05）,心肌梗死面积及细胞凋亡率均明显增加（P<0.05）。结论:缺血预适应能明显上调大鼠心肌ODC/多胺系统,减轻缺血/再灌注心肌损伤;多胺合成代谢抑制剂取消了预适应介导的心功能改善、缩小心肌梗死面积及减少心肌细胞凋亡的作用,提示ODC/多胺系统可能参与了缺血预适应介导的心肌保护作用。     

circRNA001131通过结合miR-25-3p抑制心肌成纤维细胞中纤维化相关基因的表达

目的:研究环形RNA(circRNA)001131对大鼠心肌成纤维细胞(CFs)纤维化表型的影响及分子机制。方法:采用Masson三色染色法对腹主动脉缩窄(AAC)手术诱导的心肌重构大鼠心肌进行胶原纤维的染色观察。利用芯片检测AAC手术诱导的大鼠心肌中circRNA表达谱的变化。RT-qPCR检测AAC大鼠心肌及血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)诱导的大鼠CFs中circRNA001131的表达。利用放线菌素D和RNase R实验检测circRNA001131的稳定性。利用重组circRNA001131腺病毒(rAd-circRNA001131)感染大鼠CFs,检测CFs中纤维化相关基因Ⅰ型胶原α1链(Col1a1)、Ⅲ型胶原α1链(Col3a1)和肌动蛋白α2(Acta2)的mRNA和蛋白表达。双萤光素酶报告基因实验验证circRNA001131与miR-25-3p的结合作用。结果:RT-qPCR结果证实,circRNA001131在AAC手术诱导的大鼠心肌和Ang-Ⅱ处理的大鼠CFs中表达增强。放线菌素D和RNase R实验结果显示,circRNA001131与其宿主基因--第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(Pten)mRNA相比,降解水平明显降低。过表达circRNA001131可显著抑制大鼠CFs中纤维化相关基因Col1a1和Col3a1的表达。双萤光素酶报告基因实验证实circRNA001131与miR-25-3p间存在结合作用,miR-25-3p可以减弱circRNA001131对大鼠CFs中纤维化相关基因表达的抑制作用。结论:circRNA001131在心肌纤维化中表达增强,并通过结合miR-25-3p发挥抑制心肌纤维化的作用。     

转化生长因子β1在大鼠骨髓间充质干细胞移植修复梗死心肌中的作用

背景：大量研究显示,骨髓间充质干细胞是通过旁分泌作用,促使移植部位大量肌纤维母细胞聚集,分泌大量胶原蛋白,从而使梗死后心脏得到有利修复,并改善心脏收缩舒张功能。 目的：探讨转化生长因子β1在大鼠骨髓间充质干细胞修复梗死心肌过程中的作用。 方法：①体外实验：模拟心肌梗死后微环境培养大鼠骨髓间充质干细胞,检测其分泌肿瘤坏死因子α、血小板衍生生长因子、转化生长因子β1浓度。②体内实验：将大鼠Brdu标记的骨髓间充质干细胞、转化生长因子β1、PBS分别移植到梗死后心肌内,免疫细胞化学染色、PCR、Wester-blot等方法检测移植后大鼠心肌胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ形成的差异。 结果与结论：心肌梗死后微环境下培养大鼠骨髓间充质干细胞14 d可检测到培养基内有高浓度转化生长因子β1。移植骨髓间充质干细胞、转化生长因子β1大鼠心肌部位可检测到肌纤维母细胞的聚集及胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达。结果显示大鼠骨髓间充质干细胞移植梗死心肌后,可促进胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ的生成,从而改善心脏收缩功能,其中骨髓间充质干细胞所分泌的转化生长因子β1可能发挥重要作用。