慢性间歇性低氧激活NLRP1炎性小体引起小鼠肝损伤

目的 探讨慢性间歇性低氧(CIH)是否能激活含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白1(NLRP1)炎性小体引起肝损伤。方法 将C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、 CIH组。CIH组小鼠放入CIH仓进行造模(每天8 h,连续4周)。造模后,采用HE染色观察肝组织细胞形态、试剂盒检测小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,二氢乙啶(DHE)标记检测肝组织活性氧(ROS)的水平,免疫组织化学染色法检测小鼠肝组织NLRP1、含胱天蛋白酶激活和募集结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和胱天蛋白酶1(caspase-1)的表达和定位,Western blot法检测小鼠肝组织中NLRP1、 ASC、 caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白表达,ELISA检测小鼠血清IL-1β、 TNF-α水平。结果与对照组相比,CIH组肝细胞病变明显,细胞出现破裂、坏死、炎症细胞聚集,ALT、 AST、 ROS、 IL-1β和TNF-α水平显著升高;NLRP1、 ASC、caspase-1、IL-1β和TNF-α的蛋白表达升高。结...     

肝硬化患者肝活检组织中IL-8 mRNA表达

目的 探讨肝硬化患者外周血IL-8含量及肝活检组织中IL-8 mRNA的表达.方法 筛选典型HBV感染后肝硬化患者,以ELISA法检测血清IL-8水平;实时PCR检测肝活检组织中IL-8mRNA含量,以lg cDNA/Ig GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)代表其mRNA水平.结果 肝硬化患者血清IL-8及肝活检组织中其mRNA水平分别为(431.39±97.39)μg/L、1.3647±0.2203,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);肝活检组织HBV-DNA(+)者血清IL-8及肝活检组织内其mRNA水平分别为(502.43±102.24)μg/L、1.5142±0.2245,与HBV-DNA(-)者相比,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05).丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)升高者血清IL-8及肝活检组织内其mRNA明显升高,与对照组差异有统计学意义(P<0.01).结论 肝硬化患者外周血IL-8及肝活检组织内IL-8 mRNA表达增高,并与肝内HBV复制水平、肝细胞损伤程度密切相关.IL-8参与肝内局部炎性浸润,有可能在介导肝炎后肝硬化进展中起一定作用.     

余甘子总酚对动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠肝脏保护作用机制的研究

目的：研究余甘子总酚对载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）动脉粥样硬化模型小鼠的肝脏保护作用,初步探讨其作用机制。方法：建立高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型,给予余甘子总酚灌胃8周后,酶联免疫法检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）水平;观察小鼠肝脏病理模型切片;酶联免疫法检测小鼠肝脏组织匀浆中的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;Western blot法检测小鼠肝脏组织相关蛋白的表达。结果：余甘子总酚干预可降低ApoE-/-小鼠血清中AST和ALT水平（P<0.05）,减缓小鼠肝脏脂肪性病变及炎症细胞浸润现象;同时,余甘子总酚可显著降低肝脏组织匀浆中TC、TG和LDL-C水平,提高HDL-C水平（P<0.05）,显著降低炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α含量（P<0.05）;此外,余甘子总酚还可显著升高模型小鼠肝脏组织ATP结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白水平（P<0.0...     

吡格列酮对非酒精性脂肪肝模型大鼠内质网应激性高血脂、炎性因子和Caspase-12水平的影响

目的:观察吡格列酮(PIG)对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠内质网应激(ERS)标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、血脂、炎性细胞因子和细胞凋亡分子Caspase-12水平的影响。方法:23只SD大鼠采用连续高脂饮食8周,复制NAFLD模型,将20只成模大鼠随机平分为模型组和PIG干预组。另取10只未行造模SD大鼠普通饲料喂养8周作为对照组。PIG干预组采用PIG溶液2ml(药物剂量1.6mg/kg)灌胃,1次/日,模型组和对照组给予等体积生理盐水灌胃。4周后,取三组大鼠下腔静脉血,酶法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平;比色法检测游离脂肪酸(FFA)水平;ELISA检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。取三组大鼠肝组织,用ELISA和Western Blotting分别检测肝组织匀浆中TNF-α、IL-6和GRP78、Caspase-12水平。结果:三组大鼠ALT、TC、TG、FFA、TNF-α、IL-6、GRP78及Caspase-12水平差异有统计学意义(P均<0.01)。模型组与对照组相比,ALT、TC、TG、FFA、TNF-α、IL-6、GRP78及Caspase-12水平均显著升高(均P<0.01)。PIG干预组与模型组相比,ALT、TC、TG、FFA、TNF-α、IL-6、GRP78及Caspase-12水平均下降(P<0.05或P<0.01)。结论:PIG干预可能减轻NAFLD大鼠肝细胞ERS从而改善脂质代谢和炎症,减少细胞凋亡。     

雷帕霉素对糖尿病大鼠肝组织IL-1与IL-6表达的影响

目的研究糖尿病(DN)大鼠模型经静脉注射PI3K抑制剂雷帕霉素后肝组织白介素-1(IL-1)与白介素-6(IL-6)表达的变化。方法成年健康清洁级SD雄性大鼠60只,随机分为对照组(20)、糖尿病组(20)和雷帕霉素组(20)。采用高脂饲料喂养和小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔内注射方法,建立2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝动物模型。评价各组大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(CHO)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平,采用免疫组织化学方法和Western blot方法检测三组大鼠肝组织IL-1与IL-6蛋白的表达。结果糖尿病组大鼠血清ALT、AST、TG、CHO、LDL-C水平比对照组显著升高,而雷帕霉素组比糖尿病组显著降低(P0.01)。糖尿病组大鼠肝组织IL-1与IL-6蛋白的阳性表达量比对照组显著升高,而雷帕霉素组比糖尿病组显著降低(P0.01)。结论雷帕霉素改善2型糖尿病大鼠肝功能可能与下调IL-1与IL-6的表达相关。     

Nrf2减轻小鼠非酒精性脂肪性肝炎

目的研究Nrf2对小鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的作用及其可能机制。方法通过蛋氨酸-胆碱缺乏饲料(MCD)饲喂小鼠获得NASH模型;随机分为对照组、模型组以及Nrf2组,Nrf2组灌胃姜黄素0.9 mL/d,对照组和模型组给予相应体积的0.9%氯化钠注射液灌胃。4周后检测肝组织中Nrf2含量,肝指数,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶水平(AST)、葡萄糖(GLU)、三酰甘油(TG)和胆固醇(Chol)含量;对肝脏进行油红O染色;检测肝组织中TG、Chol、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;并检测细胞色素C和ATP含量。结果与模型组小鼠相比,Nrf2组小鼠的血清中ALT,AST和GLU含量下降(P<0.05),肝组织中TG、Chol和MDA含量下降(P<0.05),GSH水平、SOD活性升高(P<0.05);同时细胞色素C漏出降低,ATP含量上升(P<0.05)。结论 Nrf2对由蛋氨酸-胆碱缺乏所引起的NASH具有一定的保护作用,其机制可能是通过减少氧化应激,提高线粒体活性实现的。     

柴芪汤对非酒精性脂肪肝大鼠模型血清TNF-α和IL-6表达的影响

目的:观察柴芪汤对非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠炎症因子TNF-α和IL-6的影响,探讨其延缓NAFLD进展的作用机制.方法:SPF级雄性SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组和治疗组,高脂饲料喂养造模,8周后,空白组与模型组各取8只处死取材,评价模型.造模成功后治疗组每天给予柴芪汤5.67 g/kg灌胃,8周后,处死各组动物,检测血清AST,ALT,TG,TC,LDL-C,HDL-C,TNF-α及IL-6水平,空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)及胰岛素(fasting insulin,FINS)水平,评价胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI);取肝组织,镜下观察病理形态.结果:高脂饲养8周后,模型组大鼠血清ALT,AST,FBG,FINS及IRI水平高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05),可见肝细胞脂肪变性;柴芪汤治疗8周后,大鼠血清ALT,AST,TG,TC,LDL-C,TNF-α及IL-6水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),肝细胞脂肪变性程度较模型组轻,肝细胞坏死及炎性细胞浸润不明显.结论:高脂饲养8周后,NAFLD大鼠模型制备成功;柴芪汤可减轻NAFLD大鼠模型肝脏炎症反应和肝细胞脂肪变性程度,下调炎性因子TNF-α和IL-6的表达,降低血清TG,TC及LDL-C,改善胰岛素抵抗.     

白刺果提取物花色苷通过抑制肝脏纤维化及炎症减轻非酒精性脂肪性肝病

目的:探讨白刺果提取物花色苷对高脂饮食导致的小鼠非酒精性脂肪肝的治疗作用和潜在机制。方法:高脂饮食建立小鼠非酒精性脂肪肝模型,用花色苷进行干预后,测量小鼠肝脏重量,检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;肝脏组织经过HE染色、油红O染色及Masson染色,观察小鼠组织形态、脂滴沉积和胶原纤维增生的情况;Western blot检测肝脏组织中炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6及IL-10的水平;免疫组化检测肝脏组织中巨噬细胞、白细胞和单核细胞的浸润情况及肝脏组织趋化因子CCL7和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达。结果:白刺果提取物花色苷能显著抑制由高脂饮食引起的小鼠肝重、ALT、AST、TG、TC及LDL-C的增高;肝脏切片染色显示花色苷能缓解由高脂饮食引起的肝脏纤维化及炎性细胞的浸润;花色苷能降低肝脏中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10及炎性趋化因子CCL7和MCP-1的水平。结论:白刺果提取物花色苷显著缓解由高脂饮食引起的非酒精性脂肪性肝病,其机制主要是通过抑制肝脏中的炎性因子和炎性细胞的浸润并降低炎性趋化因子来实现的。     

利拉鲁肽通过microRNA-33对2型糖尿病小鼠肝损伤的治疗作用

目的:观察利拉鲁肽对2型糖尿病小鼠肝组织微小RNA-33(microRNA-33,miR-33)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)及肝细胞凋亡通路相关蛋白的影响,探讨其可能作用机制,为临床应用提供药效学依据。方法:采用高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射复制C57BL/6小鼠2型糖尿病模型。小鼠随机分为4组,每组15只:对照组为正常小鼠皮下注射等量的生理盐水;模型组为T2DM小鼠皮下注射等量的生理盐水;利拉鲁肽低剂量组为了2DM小鼠皮下注射100μg·kg~(-1)·d~(-1)利拉鲁肽;利拉鲁肽高剂量组为T2DM小鼠皮下注射200μg·kg~(-1)·d~(-1)利拉鲁肽。给药4周后进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),检测各组小鼠空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量;HE染色检测肝组织病理学变化;免疫荧光检测肝组织的cleaved caspase-3;Western blot法检测p-AMPK/AMPK及凋亡相关蛋白Bcl-2、caspase-3的水平;实时定量PCR检测肝组织miR-33的水平。结果:与模型组相比,利拉鲁肽高、低剂量组小鼠FBG、TG、TC、LDL-C、ALT及AST含量明显降低,HDL-C含量明显升高(P0.05);肝组织病理结构的紊乱得到明显改善;免疫荧光结果可见,利拉鲁肽高、低剂量给药组小鼠的cleaved caspase-3明显降低;Western blot实验结果可见,利拉鲁肽高、低剂量给药组小鼠肝组织的Bcl-2表达明显增高,caspase-3表达显著下降(P0.05)肝组织AMPK磷酸化水平显著增加(P0.01);且肝组织miR-33水平显著降低(P0.01),且呈一定的剂量依赖性。结论:利拉鲁肽可以缓解2型糖尿病小鼠肝损伤,其机制可能与降低肝组织miR-33表达,从而增加AMPK磷酸化水平,进而抑制肝细胞凋亡有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对ConA所致小鼠肝损伤的保护作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其作用机制。方法 40只小鼠随机分为对照组、EGCG对照组、ConA模型组及EGCG+ConA组。采用ELISA法检测血清ALT、AST、TNF-α、IFN-γ、IL-4及IL-6的变化,HE法检测小鼠肝脏形态学改变。结果 ConA模型组小鼠血清转氨酶水平明显高于对照组(P<0.05),EGCG对照组与对照组比较无变化(P>0.05)。与ConA模型组相比,EGCG+ConA组小鼠血清转氨酶水平下降(P<0.05)。ConA模型组小鼠肝脏病理切片示较多肝细胞坏死,对照组和EGCG对照组小鼠肝脏形态学基本正常,EGCG+ConA组示肝细胞炎症坏死程度较ConA模型组有所减轻。ConA模型组小鼠血清TNF-α、IFN-γ、IL-4及IL-6水平明显高于对照组(P<0.05),EGCG对照组与对照组比较无明显差异(P>0.05)。EGCG+ConA组小鼠血清TNF-α、IFN-γ、IL-4及IL-6水平均下降,与ConA模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论 EGCG对ConA所致小鼠肝损伤有明显的保护作用,可能与其对炎性因子的调节有关。     

金丝桃苷对支原体肺炎模型小鼠TLR-4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨金丝桃苷对支原体肺炎模型小鼠TLR-4/MyD88/NF-κB信号通路的影响。方法60只BALB/c小鼠通过随机数表法分为对照组(Control)、模型组(MP)及金丝桃苷组(Hyp),每组20只,采用支原体菌液滴鼻感染建立支原体肺炎小鼠模型。HE染色观察各组小鼠肺组织病理学变化;全自动生化分析仪检测血清中C-反应蛋白（CRP）、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌型肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平,检测肺组织中活性氧簇（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）水平;酶联免疫方法（ELISA）检测血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Western blot方法检测各组小鼠肺组织TLR-4、MyD88与NF-κB蛋白的表达。结果 金丝桃苷能够减轻MP感染小鼠肺组织的炎症反应;降低MP感染小鼠血清CRP、ALT、AST、LDH和CK-MB表达水平（P<0.01）;降低血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量（P<0.01）;降低MP感染小鼠肺组织ROS...     

敲低剪接因子Prp17对小鼠肝组织形态学和肝功能的影响

目的　探讨敲低剪接因子Prp17对小鼠肝组织形态学和肝功能的影响。 方法　构建敲低剪接因子Prp17腺病毒（Ad-shPrp17）。随机将C57BL/6小鼠分为Control组和Ad-shPrp17组,每组8只。Ad-shPrp17组通过内眦静脉注射Ad-shPrp17。10 d后采集小鼠血清和收集肝组织。用苏木精-伊红染色法观察肝组织形态学变化;酶法测定血清谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）活性;荧光定量聚合酶链式反应分析基因表达情况。 结果　与Control组比较,Ad-shPrp17组小鼠：（1）肝的质量和肝指数显著增加（P<0.01）;（2）肝细胞排列散乱,细胞肿胀,胞质疏松化,肝细胞由多角形变成圆形,胞质透明,呈气球样变,部分细胞发生坏死;（3）血清AST和ALT的酶活力显著升高（P<0.01）;（4）肝组织TNF-α、IL-1β表达升高（P<0.05）。 结论　敲低剪接因子Prp17可造成小鼠肝组织形态发生病理改变和肝功能损伤,其机制可能与诱导肝炎症反应有关。这为肝疾病的防治提供新的治疗靶点和理论依据。     

人参皂苷Rg1通过TLR4/MyD88/NF-κB p65通路调控小鼠急性肾损伤诱导的急性肝损伤的机制研究

目的：探讨人参皂苷Rg1(GRg1)对小鼠急性肾损伤所诱导的急性肝损伤的保护作用及其调控机制。方法：昆明小鼠随机分为假手术（sham）组、模型（model）组、GRg1组和necrostatin-1 (Nec-1)组，每组10只。制备急性肾损伤模型，24 h后收集血液。采用生化试剂盒检测小鼠血清肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）、天冬氨酸转氨酶（AST）、谷氨酸转氨酶（ALT）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平。采用ELISA法检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。HE染色观察组织病理学改变，采用免疫组织化学和Western blot法检测TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白的表达水平。结果：与假手术组比较，model组小鼠出现明显的肝细胞坏死、肝肾功能减退，血清中SCr、BUN、AST和ALT均显著升高（P<0.01）,MDA含量显著上升，SOD活性显著降低（P<0.01），且血清中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量显著升高（P<0.01）,TLR4、MyD88和N...     

糖尿病非酒精性脂肪肝病大鼠肝组织胰岛素受体、瘦素受体 mRNA的表达

目的：观察2型糖尿病大鼠肝脏的病理变化,探讨肝组织胰岛素受体（insulin R）、瘦素受体（leptin R）mRNA表达在糖尿病性非酒精性脂肪肝病（NAFLD）发病机制中的作用。方法：SD大鼠随机分成2组：正常组与2型糖尿病组。2型糖尿病组在以高脂饮食4周后,加小剂量(30 mg/kg)链脲佐菌素（STZ）诱导2型糖尿病性非酒精性脂肪性肝病大鼠模型,继续给予高脂饮食12周。分别采用HE染色、苏丹Ⅲ染色、Masson染色光镜下观察肝脏组织的病理改变;透射电镜观察肝脏超微结构改变;生化法检测血糖、血甘油三酯（TG）、血总胆固醇（TC）、丙氨酸转氨酶（ALT）和天门冬氨酸转氨酶（AST）水平;放免法检测血清胰岛素水平;ELISA法检测血清瘦素水平;RT-PCR法检测肝组织磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）、insulin R、leptin R mRNA表达水平。结果：糖尿病大鼠肝细胞明显脂肪变性、碎片状坏死伴炎细胞浸润及肝纤维化病变,电镜下主要表现为肝细胞核固缩,胞浆内含大量脂滴,狄氏间隙胶原纤维增生;血糖、血胰岛素、TG、ALT、AST水平明显升高（P<0.01）,TC水平升高(P<0.05）,血清瘦素水平明显下降（P<0.01）;肝组织insulin R、leptin R mRNA表达显著升高（P<0.01）,PEPCK、G6Pase mRNA表达无显著变化。结论：2型糖尿病时的胰岛素抵抗是NAFLD发生的根源,由于胰岛素抵抗而致的低血清瘦素水平、肝组织insulin R、leptin R 表达上调参与了NAFLD的发生。     

CD38蛋白下调炎症因子的表达减轻脂多糖联合D-氨基半乳糖诱导的急性肝脏损伤

目的研究CD38蛋白在脂多糖联合D-氨基半乳糖(LPS/D-GalN)所诱发的小鼠急性肝损伤中的作用。方法野生型C57BL/6小鼠(WT)和CD38基因敲除小鼠(CD38 KO)随机分为正常对照组,模型早期组和模型晚期组。在造模后2 h和6 h处死动物,检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST),实时荧光定量PCR检测肝脏组织炎症因子的表达,HE染色检测组织病理改变。结果在LPS/D-GalN诱导的模型小鼠中,与WT小鼠相比,CD38 KO小鼠血清ALT和AST水平显著升高,肝脏组织中炎性因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及γ干扰素(IFN-γ)的表达水平显著升高;病理组织学检测显示肝脏组织出血严重,肝实质细胞空泡变形明显增多,肝细胞死亡显著增加。结论 CD38蛋白通过下调炎症因子的表达,减少肝细胞死亡,减轻LPS/D-GalN诱导的急性肝脏损伤。     

雷帕霉素对内毒素性肝损伤小鼠肝组织Bcl-2表达的影响

目的探讨雷帕霉素对内毒素性肝损伤小鼠肝组织Bcl-2表达的影响。方法健康雄性昆明小鼠36只,随机分为正常组(12)、模型组(12)和雷帕霉素组(12)。应用脂多糖10mg/kg腹腔注射小鼠诱导内毒素肝损伤模型。造模后6h取血,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组小鼠肝组织Bcl-2的表达。结果模型组血清ALT、AST含量明显高于正常组(P0.01);雷帕霉素组血清ALT、AST含量明显降于模型组(P0.05)。与正常组相比,模型组小鼠肝组织Bcl-2表达显著降低(P0.01);而与模型组相比,雷帕霉素组小鼠肝组织Bcl-2表达显著升高高于(P0.01)。结论雷帕霉素能够上调内毒素性肝损伤小鼠肝组织Bcl-2的表达。     

盐酸小檗碱对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏氧化应激水平及Nrf2表达的影响

目的探讨盐酸小檗碱(berberine hydrochloride, BBR)对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)生化指标、氧化应激状态、炎性水平、Nrf2 m RNA及Nrf2表达的影响。方法大鼠随机分为4组:对照组(normal diet,ND)、模型组(high-fat diet,HFD)、盐酸小檗碱(berberine hydrochloride BBR)组和多烯磷脂酰胆碱(polyene phosphatidylcholine,PPC)组。高脂饲料喂养大鼠12周制备NAFLD模型,油红O染色观察大鼠肝细胞脂肪量。给药12周后取材,HE染色检测大鼠肝组织病理学变化;采用全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。酶联免疫吸附反应(ELISA)检测肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β炎性因子表达水平以及ROS、MDA氧化应激水平。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肝组织Nrf2 m RNA表达。Western blot法检测肝组织核内Nrf2蛋白表达。高速成像流式细胞仪检测NRf2核转位水平。结果盐酸小檗碱能够显著缓解肝组织脂肪变,减少炎性细胞浸润,降低NAS积分;降低ALT、AST、TC及LDL-c水平;降低肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β水平;降低ROS、MDA表达;增加大鼠肝组织Nrf2 mRNA表达;增加大鼠肝组织核内Nrf2表达。结论盐酸小檗碱能够缓解NAFLD,减轻炎症状态,可能与降低氧化应激水平,增高Nrf2核内表达有关。     

柴胡疏肝散对NAFLD大鼠肝脏脂质代谢及AMPK/SIRT1通路的影响

 目的: 观察柴胡疏肝散对高脂饮食建立的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织脂质代谢和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/sirtuin 1(SIRT1)通路相关蛋白的影响。方法: 选用SPF级SD大鼠24只,随机分为正常(NC)组、高脂(HFD)组和柴胡疏肝散(CSP)组,每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠16周建立NAFLD大鼠模型,用药组大鼠同时灌服柴胡疏肝散浸膏剂(9.6 g·kg^-1·d^-1)进行干预,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清和肝匀浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)以及血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)含量;HE染色观察肝组织病理损伤变化;油红O染色观察肝组织脂质蓄积程度,透射电镜观察肝细胞内超微结构变化;Western blot法检测肝组织AMPK、磷酸化AMPK(pAMPK)、SIRT1和解偶联蛋白2(UCP2)的蛋白水平。结果: 大鼠肝组织HE染色、油红O染色和电镜结果证实肝细胞脂质蓄积严重,提示NAFLD大鼠模型建立成功。与NC组比较,HFD组血清和肝组织匀浆TC、TG含量显著升高(P < 0.01),血清AST含量显著升高(P < 0.01),肝组织pAMPK和SIRT1蛋白水平显著降低(P < 0.01),UCP2蛋白水平显著升高(P < 0.01);与HFD组比较,CSP组大鼠肝组织脂质蓄积程度明显改善,血清和肝匀浆TC和TG含量呈下降趋势,其中肝匀浆TC和TG含量下降显著(P < 0.05),血清AST含量显著降低(P < 0.05),肝组织pAMPK和SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05),UCP2蛋白水平显著下调(P < 0.01),但各组大鼠总AMPK蛋白水平差异无统计学显著性。结论: 柴胡疏肝散能够改善16周高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与其激活AMPK/SIRT1通路有关。     

白介素-10表达上调介导脂氧素在急性肝损伤中的保护效应

目的研究脂氧素对四氯化碳诱导的肝损伤的保护作用与保护性细胞因子白介素-10的关系。方法小鼠腹腔注射四氯化碳诱导急性肝损伤。以脂氧素受体激动剂BML-1111mg/kg腹腔注射,或再应用抗-IL-10中和抗体后,取肝组织切片、HE染色观察肝细胞受损情况;收集血清检测转氨酶ALT和AST活性;RT-PCR检测肝组织中IL-10mRNA含量;ELISA检测血浆IL-10和TNF-α浓度。结果BML-111促进四氯化碳损伤的小鼠肝组织中IL-10mRNA表达、升高血浆IL-10浓度。抗-IL-10中和抗体可明显削弱BML-111对肝组织损伤及血清转氨酶水平的抑制作用,这一效应伴有血浆TNF-α浓度的升高。结论脂氧素受体激动剂BML-111可增强四氯化碳损伤的肝组织中白介素-10的表达,白介素-10是介导BML-111的保肝效应的重要细胞因子。