活性氧介导5, 7- 二甲氧基黄酮增敏TRAIL 诱导肺癌细胞凋亡

目的研究5,7-二甲氧基黄酮(5,7-DMF)是否能增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导的人肺癌细胞凋亡及其作用机制。方法体外培养人肺癌A549细胞。MTT法测定细胞增殖活性;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)和ELISA试剂盒检测细胞凋亡;DCFH-DA荧光标记FCM检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果 5,7-DMF能增强TRAIL诱导的A549细胞凋亡和ROS生成。N-乙酰半胱氨酸能有效阻断5,7-DMF与TRAIL所诱导的A549细胞凋亡及ROS生成。结论 5,7-DMF通过促进A549细胞内活性氧生成从而增强TRAIL诱导的凋亡。     

汉黄芩素增强A549细胞对TRAIL诱导凋亡敏感性的研究

目的研究汉黄芩素对TRAIL诱导的A549细胞增殖抑制及凋亡的影响。方法将不同浓度的汉黄芩素和/或TRAIL作用于人肺癌细胞系A549细胞,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术Annexin V-FITC检测细胞凋亡。结果 IC50浓度的汉黄芩素联合TRAIL(100 ng/mL)及单药TRAIL分别作用于A549细胞24 h,联合组细胞增殖率明显低于TRAIL单药组(34.56%±0.52%vs 94.32%±3.28%,P<0.01);联合组细胞凋亡率明显高于TRAIL单药组(28.72%±3.66%vs 7.62%±1.05%,P<0.01)。结论汉黄芩素能够增强A549细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性。     

MAP30-PEG结合物对A549体外细胞增殖作用的研究

目的探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白MAP30及其聚乙二醇修饰物对人肺腺癌细胞A549增殖、细胞凋亡的影响和caspase3相关凋亡途径的诱导作用。方法用MTT法测定MAP30和MAP30-PEG结合物对人肺腺癌细胞A549的抑制率;通过Hoechst33258荧光染色观察A549细胞凋亡形态,并用流式细胞术测定细胞凋亡率以及用western blot检测凋亡细胞caspase3表达。结果 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性关系;MAP30-PEG结合物对A549细胞增值抑制率约为MAP30的60%;Hoechst33258荧光染色后均呈典型凋亡形态;流式细胞术检测显示,MAP30和MAP30-PEG结合物作用于A549细胞48 h后均可使A549细胞呈现Sub-G1凋亡峰,凋亡率分别为58.7%、42.7%;MAP30和MAP30-PEG结合物对胞内caspase3在凋亡过程中显示有激活作用。结论 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549增殖有明显的抑制作用;两者均能通过caspase3途径诱导细胞凋亡。     

TRAIL联合顺铂诱导骨肉瘤HOS-8603细胞凋亡研究

目的研究TRAIL联合顺铂诱导HOS-8603细胞的凋亡及其机制。方法 MTT法分别测定TRAIL,顺铂,和TRAIL+顺铂对HOS-8603细胞的抑制率,流式细胞法测定亚G1期细胞百分率及PI和Rh123双染色后细胞的ΔΨm。结果三组分别由TRAIL、顺铂、TRAIL+顺铂处理过的HOS-8603细胞用MTT法测抑制率分别为29%、33.6%、58.5%。随着药物作用时间增加,HOS-8603细胞凋亡数增加和ΔΨm降低(P<0.01),两者呈直线相关。结论 TRAIL和顺铂能协同诱导HOS-8603细胞凋亡,其机制可能是通过使线粒体膜通透性转运孔开放,ΔΨm降低来实现的。     

Ad-IL-24联合DDP对A549细胞体外生长的影响

目的探讨白细胞介素24基因腺病毒载体（Ad-IL-24）联合顺铂体外对人肺腺癌的抑制效应及诱导人肺腺癌的细胞凋亡机制。方法用Ad-IL-24、DDP、Ad-IL-24联合DDP分别体外作用于A549细胞12h、24h、48h,采用CCK8法及流式细胞术（FCM）分别检测细胞增殖抑制率和细胞凋亡率。结果 Ad-IL-24作用于A549细胞48h后细胞增殖抑制率为27.7%,Ad-IL-24联合DDP作用于A549细胞48h后细胞增殖抑制率为45.2%;Ad-IL-24作用于A549细胞48h细胞凋亡率为22.9%,联合用药后细胞凋亡率为35.9%。结论 Ad-IL-24对A549细胞具有生长抑制作用,能引起A549细胞凋亡,联合DDP用药后效果更佳,Ad-IL-24具有化疗增敏效应。     

培美曲塞联合顺铂通过TRAIL诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡发挥抗癌效果的研究

目的：初步探讨培美曲塞联合顺铂通过TRAIL诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡发挥的抗癌效果。方法：将肺癌细胞株A549做4种处理并分为4组：空白组（Blank组）、顺铂处理组（CDPP组）、培美曲塞处理组（MTA组）、培美曲塞联合顺铂处理组（MTA+CDPP组），应用CCK-8和流式细胞术检测4种处理细胞的细胞活性和细胞凋亡变化；qPCR检测顺铂单药治疗组和培美曲塞联合顺铂治疗组的细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）表达差异；干扰TRAIL后再次检测各处理组细胞的细胞活性和细胞凋亡变化；qPCR和WB检测干扰TRAIL后BCL-2转录水平和蛋白表达。结果：培美曲塞联合顺铂（CDDP）在非小细胞肺癌细胞中起到降低细胞活性和诱导细胞凋亡的作用，二者协同发挥抗肿瘤效果；培美曲塞联合顺铂治疗组TRAIL转录表达显著高于顺铂处理组；干扰TRAIL后，顺铂与培美曲塞联合诱导的细胞活力的降低作用被抑制，并逆转了顺铂与培美曲塞联合对细胞凋亡的促进作用；培美曲塞联合顺铂通过TRAIL降低Bcl-2的转录水平和蛋白表达来发挥促进肿瘤细胞凋亡的作用。结论：培美曲塞可联合顺铂（CDDP）在非小细胞肺癌细胞中发挥抗肿瘤效果，其通过TRAIL降低Bcl-2的表达来诱导肿瘤细胞凋亡，从而发挥抗肿瘤作用。     

异鼠李素诱导A549细胞凋亡的研究

目的观察异鼠李素是否能诱导人肺腺癌细胞株A549细胞凋亡及相关基因的变化。方法20μg/ml异鼠李素处理A549细胞,光镜电镜下观察细胞形态;进行集落形成实验,MTT法测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测凋亡峰及bax,bcl-2等凋亡相关基因的表达。结果10～640μg/ml异鼠李素可抑制A549细胞生长,抑制率有剂量依赖性。流式细胞仪检测20μg/ml异鼠李素处理后出现明显凋亡峰;药物可使bax表达上调,bcl-2表达明显下降,表达改变有浓度依赖性。结论异鼠李素可抑制A549细胞生长,诱导其凋亡,其诱导凋亡的作用与凋亡相关基因抗凋亡基因bcl-2表达明显下调,bax表达上调有关。     

鸦胆子油乳对肺癌细胞A549的抑制作用及其机制

目的研究鸦胆子油乳对肺癌细胞A549的抑制作用,并初步探讨其相关作用机制。方法以不同终质量浓度的鸦胆子油乳(0.50,1.25,2.50 g·L^-1)作用于肺癌细胞A549,并将其作为低、中、高3个质量浓度实验组,同时设置对照组(给予等量0.9%NaCl)。用4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法检测各组肺癌细胞A549凋亡的形态学变化,用噻唑蓝(MTT)法和免疫印迹法检测各组肺癌细胞A549增殖抑制情况及凋亡抑制蛋白Survivin表达情况。结果干预24 h后,对照组及低、中、高3个质量实验组肺癌细胞A549增殖抑制率分别为(0.31±0.19)%,(37.24±6.21)%,(49.33±5.96)%,(61.25±6.23)%,干预48 h后,增殖抑制率分别为(0.32±0.21)%,(58.14±6.33)%,(65.28±5.79)%,(73.46±5.37)%,干预72 h后,增殖抑制率分别为(0.38±0.23)%,(68.58±5.87)%,(76.35±6.02)%,(83.97±5.64)%。与对照组比较,实验组肺癌细胞A549增殖抑制率显著升高(P<0.01),且随着鸦胆子油乳质量浓度增大和作用时间延长,肺癌细胞A549增殖抑制率呈逐渐升高趋势(P<0.05或P<0.01)。对照组和低、中、高3个质量浓度实验组Survivin蛋白灰度值分别为0.95±0.07,0.83±0.10,0.66±0.12,0.51±0.09;对照组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01),且随鸦胆子油乳质量浓度增加,Survivin蛋白表达量呈逐渐降低趋势(P<0.01)。结论鸦胆子油乳可显著抑制肺癌细胞A549增殖,并诱导其凋亡,相关作用机制可能是其可有效抑制肺癌细胞A549中凋亡抑制蛋白Survivin的表达。     

三氧化二砷增强TRAIL杀伤人A549细胞的作用及机制研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)增强重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人非小细胞肺癌细胞(A549)的作用及其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测As2O3及联合TRAIL对人A549的IC50值;不同浓度As2O3与TRAIL联合作用48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR检测Survivin、Caspase-3 mRNA表达变化。结果 As2O3有抗肿瘤活性,IC50值为(42.44±0.66)μmol.L-1;As2O3与TRAIL联用时IC50值为(7.04±0.19)μmol.L-1;As2O3协同增强TRAIL的抗肿瘤活性,CDI值为0.94。联合药物组作用48h后,随As2O3浓度增高Survivin mRNA的表达降低,Caspase-3mRNA的表达增强。结论 As2O3是有效的化疗药物,通过下调Survivin mRNA的表达,上调Caspase-3 mRNA的表达,逆转A549的耐药性,协同TRAIL增强对肺癌细胞的杀伤作用。     

小檗碱增强TRAIL诱导白血病细胞凋亡

目的：探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）联合小檗碱诱导Molt-4细胞凋亡作用及其对NF-κBP65表达的影响。方法：采用四甲基偶氮唑（MTT）比色法测定TRAIL单独和联合应用小檗碱时对Molt-4细胞的生长抑制率；用流式细胞术和光镜细胞形态观察来检测凋亡；应用免疫印迹法检测单独和联合用荮组细胞凋亡相关蛋白酶caspase3，caspase8及NF-κB／P65表达。结果：（1）MTT结果发现小檗碱可增加TRAIL对Molt-4细胞的生长抑制率，且呈时间和剂量依赖性（P〈0．05）。（2）流式细胞术可以检测到凋亡，光镜细胞形态观察可见凋亡特异性形态改变。（3）Western blot结果显示（a）单独用TRAIL组及TRAIL联合小檗碱用药组caspase3，caspase8活化程度随TRAIL质量浓度依次增加，联合用药组活化作用更强。（b）单独用TRAIL组NF-κB／P65表达随剂量增加而增加。联合小檗碱用药组NF-κB／P65表达与单独用TRAIL组相比则明显受抑制。结论：（1）小檗碱可协同TRAIL诱导Molt-4细胞凋亡。（2）小檗碱协同TRAIL诱导Molt-4细胞凋亡的分子机制涉及抑制NF-κB／P65表达和caspase3，caspase8剪切活化。     

冬凌草甲素诱导人肺腺癌细胞株A549凋亡及其机制研究

目的:探讨冬凌草甲素(oridnin)对人肺腺癌细胞株A549细胞凋亡的影响。方法:利用MTT法检测oridnin对A549细胞增殖作用的影响;Hoechst33258染色观察给药后细胞形态改变;透射电镜观察给药后细胞超微结构改变;FITC-Annexin V/PI双标记检测细胞凋亡率。结果:Hoechst33258染色和透射电镜观察,oridonin给药后A549细胞出现空泡变性,染色质高度凝集;FITC-AnnexinV/PI双标记检测oridnin(25,50,100μmol/L)作用细胞48h后凋亡率分别为1.5%,6.2%,59.7%。结论:Oridonin对A549细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用。     

RGD修饰紫杉醇脂质体的制备及其肺癌靶向治疗研究

目的:制备RGD修饰载紫杉醇(paclitaxel,PTX)脂质体(RGDLP-PTX),研究其理化性质,并探究其肺癌靶向治疗作用。方法:采用薄膜分散法制备RGDLP-PTX。荧光分光光度法研究A549细胞和NCI-H446细胞对普通脂质体(LP)和RGD修饰脂质体(RGDLP)的摄取效率。噻唑蓝实验研究不同紫杉醇浓度对A549细胞和NCI-H446细胞的细胞毒性;流式细胞仪检测RGDLP-PTX对A549细胞和NCI-H446细胞的凋亡诱导作用。用A549细胞构建肺癌裸鼠异位肿瘤模型,研究RGDLP-PTX的体内抗肿瘤作用。结果:RGDLP-PTX的粒径为(106.3±15.2)nm,电位为(6.23±2.2)mV;A549细胞对RGDLP-PTX的摄取效率是LP-PTX的4.4倍,差异有统计学意义(P<0.01);NCI-H446细胞对RGDLP-PTX的摄取效率是LP-PTX的3.8倍,差异有统计学意义(P<0.01);RGDLP-PTX对A549细胞和NCI-H446细胞的增殖抑制率具有浓度依赖性;在相同紫杉醇浓度下,RGDLP-PTX对A549细胞和NCI-H446细胞的增殖抑制率显著强于LP-PTX和游离紫杉醇,差异有统计学意义(P<0.01);RGDLP-PTX,LP-PTX和游离紫杉醇诱导肺癌A549细胞的凋亡率分别为48.3%,27.4%和35.5%,与生理盐水组比较,差异有统计学意义(P<0.01);NCI-H446细胞凋亡率分别为41.3%,22.8%和34.1%,与生理盐水组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。RGDLP-PTX,LP-PTX和游离紫杉醇对肺癌肿瘤的抑制率分别为69.3%,47.5%和24.4%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:RGD修饰载紫杉醇脂质体能够高效抑制肺癌细胞的增殖和肿瘤的生长,是一种有效的肺癌靶向给药系统。     

益气养阴散结方含药血清对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨益气养阴散结方含药血清对人肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响。方法应用MTT比色法检测益气养阴散结方对肺癌细胞增殖的抑制率,并用AnnexinV/PI染色法检测凋亡率。结果药物组肺癌A549细胞的增殖明显弱于对照组（P〈0.05）,凋亡率明显高于对照组（P〈0.05）。结论益气养阴散结方含药血清能明显抑制A549细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

生姜醇提取物对人肺腺癌细胞(A549)增殖和凋亡的影响

目的:研究生姜醇提取物对人肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:用浓度为10、20、40μmol·L-1生姜醇提取物分别处理A549细胞24h,以未经生姜醇提取物处理的A549细胞为对照。MTT比色法检测A549细胞增殖能力;光镜观察细胞的生长情况、形态学改变;原位末端TdT酶标记技术(TUNNEL)检测细胞凋亡的情况。结果:MTT比色法结果表明,10、20、40μmol·L-1生姜醇提取物抑制率分别为14.87%、24.72%、38.21%,与对照组(0.04%)比较抑制率显著增加(P<0.01),并随生姜醇提取物浓度增高而显著增加;光镜观察对照组细胞生长正常,凋亡细胞少见,而生姜醇提取物处理的A549细胞生长疏散,凋亡细胞的比例增加,程度随生姜醇提取物浓度增高而加重,尤以40μmol·L-1作用24h最显著;TUNNEL检测的10、20、40μmol·L-1生姜醇提取物下的A549细胞凋亡细胞指数分别为(9.36±0.82)%、(13.74±1.15)%、(19.17±1.40)%,与对照组(4.81±0.36%)比较均有显著差异(P<0.01),并随生姜醇提取物浓度增高而显著增加。结论:生姜醇提取物能抑制人肺腺癌细胞的增殖,其作用呈明显剂量依赖性,即随剂量的增加而抑制率增加。     

羟基喜树碱对胃癌细胞凋亡和细胞周期的影响

目的 探讨羟基喜树碱诱导胃癌细胞凋亡与细胞周期变化的关系.方法 用MTT法测定不同浓度的HCPT对胃癌细胞的生长抑制作用,用流式细胞仪测定一定浓度下不同作用时间细胞凋亡率和细胞周期的变化.结果 在3.125～50.0 μg/ml浓度范围内药物对细胞的抑制率随浓度的增加而增加;在相同浓度下,随时间的延长细胞的凋亡率也逐渐增加,0、12、24、48h的凋亡率为2.8%、8.5%、10.2%,13.3%,在24h内S期细胞减少而G0/G1细胞增多,第二个24h S期和G2/M的阻滞.结论羟基喜树碱可诱导胃癌细胞凋亡,其细胞凋亡与细胞周期分布有关.     

L-氨基酸氧化酶对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响研究

目的:探讨L-氨基酸氧化酶(LAAO)对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响,为临床上寻找新的肺癌治疗方法提供参考。方法:将A549细胞制成浓度为5×104个/mL的细胞悬液,根据LAAO干预浓度的不同,将其分为4组:2.41、4.82、9.64、19.28mg·mL-1干预组,各组均干预24、48、72h。镜下观察各组细胞形态学改变,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,原位末端标记法检测细胞凋亡指数,另设立阴性对照组进行比较。结果:LAAO对A549细胞增殖的抑制率随时间延长和浓度增加而增加(P<0.05),凋亡指数随时间延长和浓度增加而增加(P<0.05)。结论:LAAO可抑制A549细胞增殖,诱导其凋亡,且呈时间、剂量依赖性。     

细胞外蛋白调节激酶依赖的survivin表达下调在干扰素-α增强胃癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体敏感性中的作用

目的观察干扰素(IFN)-α对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导胃癌细胞凋亡的影响,并探讨凋亡抑制蛋白survivin和其上游信号分子细胞外蛋白调节激酶(ERK)在此过程中的作用机制。方法流式细胞仪碘化丙啶(PI)染色检测IFN-α和/或TRAIL诱导的胃癌SGC7901细胞凋亡,蛋白质印迹法检测IFN-α和(或)TRAIL刺激后survivin、p-ERK和ERK的表达。结果 IFN-α预处理可协同TRAIL诱导胃癌SGC7901细胞凋亡。IFN-α能下调survivin的表达,同时激活ERK信号通路。抑制ERK的活性能部分逆转survivin表达的下调以及IFN-α和TRAIL协同诱导的胃癌细胞凋亡。结论 IFN-α能增强TRAIL诱导的胃癌细胞凋亡,其机制可能与ERK依赖的survivin表达下调有关。     

姜黄素抑制食管癌细胞增殖和诱导细胞的凋亡

目的 探讨姜黄素对人食管癌A549细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法 MTT法测定不同浓度姜黄素对人食管癌A549细胞的增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡率.结果 在一定的浓度范围内,随着姜黄素浓度的增加,细胞增殖的抑制率显著增加,呈明显量-效关系(r＝0.992, P＜0.01);姜黄素对人食管癌A549细胞的凋亡率为(18.89±0.58)%,明显高于对照组的(4.25±0.19)%(P＜0.01).结论 姜黄素可抑制人食管癌A549细胞的增殖、诱导细胞的凋亡.     

DC-CIK联合吉非替尼对A549细胞抑制作用分析

目的探讨DC-CIK联合吉非替尼对A549细胞的抑制作用。方法实验分DC-CIK组、吉非替尼组、DC-CIK联合吉非替尼A、B组（A组吉非替尼6.9umol/L;B组吉非替尼13.8umol/L）用MTT比色法检测各组对A549增殖的抑制率,流式细胞仪检测各组A549细胞的周期变化及凋亡。结果吉非替尼组对A549细胞的抑制率最低为（37.19±1.5）%、细胞凋亡率亦最低32.4%,DC-CIK联合吉非替尼B组抑制率最高为（69.62±2.30）%、凋亡率亦最高72.86%,各组对A549细胞的抑制作用差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 DC-CIK联合吉非替尼（吉非替尼13.8umol/L）能有效的抑制A549细胞增殖,促进其凋亡。促进非小细胞肺癌的治疗。     

多西紫杉醇联合斑蝥酸钠对人肺腺癌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨多西紫杉醇联合斑蝥酸钠对人肺腺癌A549细胞的抑制作用。方法:采用MTT法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果:斑蝥酸钠和多西紫杉醇均能显著抑制人肺腺癌A549细胞的增殖诱导细胞凋亡(P<0.05),联合使用抑制率及凋亡率均显著高于单药组(P<0.05)。结论:多西紫杉醇和斑蝥酸钠均可明显抑制人肺腺A549细胞,联合使用抑制作用增强。