本刊干细胞研究栏目组稿重点:神经干细胞研究相关文章

快速老化与正常老化小鼠脑内神经干细胞增殖的差异刘洁,尹海燕,余能伟,等.2010;14(32):5935-5938[关键词]老化;神经干细胞;海马;嗅球;皮质;增殖[基金]国家自然科学基金重大研究计划(90709032);四川省青年科技基金     

本刊干细胞研究栏目组稿重点：神经干细胞研究相关文章

快速老化与正常老化小鼠脑内神经干细胞增殖的差异 刘洁,尹海燕,余能伟,等. 2010;14（32）：5935-5938 [关键词]老化;神经干细胞;海马;嗅球;皮质;增殖 [基金]国家自然科学基金重大研究计划（90709032）;四川省青年科技基金     

针刺对快速老化小鼠生长因子及受体基因表达的影响

目的:探讨快速老化小鼠(senescenceacceleratedmouse,SAM)脑衰老的机制,揭示“益气调血、扶本培元”针法改善SAMP10脑衰老症状的部分机制。方法:选取7月龄雄性清洁级SAMP10小鼠20只,单纯随机分为2组,即SAMP10对照组、SAMP10“益气调血、扶本培元”针刺法组(简称针刺组);选取7月龄雄性SAMR110只,为SAMR1对照组。应用cDNAArray技术,观察快速老化小鼠SAMP10与正常老化小鼠SAMR1前脑588个基因表达的差异,同时观察“益气调血、扶本培元”针法对上述基因表达的影响。结果:SAMP10与SAMR1相比,胰岛素样生长因子ⅠA、胰岛素样生长因子Ⅱ前体、生长激素受体、雌激素受体伴快速老化,其表达分别下调了16,1.6,20.2和7.6倍,胰岛素样生长因子I受体α亚单位的表达则上调了1.6倍。针刺后其表达水平趋向于正常老化的R1品系,其表达分别上调11.5,4.1,17.1和3.8倍,上调1.8倍。结论:SAMP10脑衰老可能与胰岛素样生长因子系统、生长激素等的异常表达有关,针刺可改善上述生长因子的表达,进而起到延缓脑衰老作用。     

APP/PS1小鼠不同时期灰质体积变化与Aβ沉积和学习记忆功能的相关性分析

目的:分析阿尔兹海默病(AD)双转基因APP/PS1模型小鼠大脑灰质体积变化与其学习记忆能力和相关脑区β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积的相关性,以期为探明AD动物模型的病理特征提供可靠的行为学和影像学依据。方法:共纳入野生组(WT)和APP/PS1组2组小鼠,每组36只。WT组小鼠选用C57-BL/6小鼠,APP/PS1组选用APP/PS1双转基因小鼠,2组均分别由2、6、12不同月龄小鼠组成,每组每个月龄小鼠12只。通过Morris水迷宫测试(定位航行实验和空间探索实验)检测2组小鼠空间记忆学习能力和空间记忆提取能力;采用磁共振T2加权成像(MRI T2WI)扫描检测小鼠大脑双侧内嗅皮质和海马的灰质体积变化情况;分离和制备2组不同月龄小鼠大脑石蜡切片,采用Thioflavine-s(Th-s)荧光染色检测2组小鼠大脑双侧内嗅皮质和海马的Aβ沉积情况;采用Pearson相关分析法分析2组小鼠不同时期的灰质体积变化与其学习记忆能力和对应脑区Aβ沉积的相关性。结果:①Morris水迷宫测试结果:与WT组比较,APP/PS1组2月龄小鼠行为学结果无明显区别,差异无统计学意义(P0.05);APP/PS1组6、12月龄小鼠逃避潜伏期明显增加、穿越平台次数明显减少,差异具有统计学意义(P0.05)。②MRI T2WI扫描结果:与WT组比较,APP/PS1组2月龄小鼠灰质体积无明显变化,差异无统计学意义(P0.05);APP/PS1组6月龄小鼠内嗅皮质体积明显缩小,APP/PS1组12月龄小鼠内嗅皮质和海马体积均明显缩小,差异具有统计学意义(P0.05)。③Th-s荧光染色检测结果:WT组、APP/PS1组2月龄小鼠均未检测出Aβ沉积;与WT组比较,APP/PS1组小鼠6月龄内嗅皮质和海马可检测到少量Aβ沉积,而12月龄时内嗅皮质和海马则可检测出大量致密Aβ斑块,差异具有统计学意义(P0.05)。④相关性分析结果:APP/PS1组小鼠内嗅皮质和海马体积变化与逃避潜伏期呈明显负相关关系(r=-0.729,P0.001;r=-0.643,P0.001);APP/PS1组小鼠内嗅皮质和海马体积变化与穿越平台次数呈明显正相关关系(r=0.705,P0.001;r=0.719,P0.001);APP/PS1组小鼠内嗅皮质和海马体积变化与Aβ沉积呈明显负相关关系(r=-0.865,P0.001;r=-0.885,P0.001)。结论:APP/PS1转基因小鼠可能于6月龄时就发生学习记忆功能障碍,且随时间渐进性加重;这种学习记忆功能障碍可能与大脑内嗅皮质和海马体积萎缩有关;而Aβ过度沉积可能是导致大脑灰质体积萎缩的因素之一。     

新生小鼠海马、嗅球及皮质神经干细胞的分离培养及鉴定

背景：从体外分离培养出高纯度、生物学性能均一的神经干细胞,建立起一套完整的神经干细胞培养体系,是进行神经干细胞研究的基础。 目的：建立新生小鼠海马、嗅球、皮质组织神经干细胞的分离培养体系,并对其生物学特性进行分析。 方法：分离新生昆明小鼠海马、嗅球、皮质组织,采用机械分离和胰酶消化法提取原代神经干细胞。采用无血清培养技术、机械吹打和酶消化法进行传代培养神经干细胞。以体积分数为10%的胎牛血清诱导分化神经干细胞。对神经干细胞及其分化产物行CD133、巢蛋白、β-微管蛋白Ⅲ、胶质纤维酸性蛋白免疫荧光染色鉴定。 结果与结论：从新生小鼠海马、嗅球、皮质可提取出具有自我更新和多向分化能力的神经干细胞,经巢蛋白、CD133免疫荧光染色检测呈阳性;神经干细胞经胎牛血清诱导后可分化为β-微管蛋白Ⅲ、胶质纤维酸性蛋白阳性细胞,并证实染色阳性细胞为神经元和星形胶质细胞。该实验建立了一套神经干细胞体外分离培养、纯化、鉴定、诱导分化方案,为后续神经干细胞研究的顺利进行奠定了实验基础。     

艾灸对快速老化模型小鼠海马神经干细胞分化的影响

目的:研究艾灸疗法对快速老化模型(SAMP8)小鼠海马神经干细胞(NSCs)分化的影响。方法:24只SAMP8小鼠随机分为模型组与艾灸组,12只抗快速老化型(SAMR1)小鼠作为正常对照组,艾灸组选用"百会"穴进行艾灸治疗。每天治疗1次,7d为1个疗程,共治疗3个疗程。处死前1周开始给予小鼠50mg/kg的溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)腹腔注射,治疗结束后,取海马组织,用免疫荧光双标方法检测NSCs分化。结果:①各组小鼠海马均有新生神经元免疫荧光双标阳性细胞表达。与模型组比较,艾灸组有促进或诱导NSCs向成熟神经元及未成熟神经元分化的倾向(P0.05)。②模型组成熟星形胶质细胞神经胶质纤维酸性蛋白表达增多,艾灸能使其表达下降(P0.05);模型组未成熟星形胶质细胞表达减少,艾灸能促进其表达(P0.05)。③与对照组比较,模型组少突胶质细胞增多(P0.05);艾灸能减少其表达(P0.05)。结论:经过3个疗程的艾灸治疗,能抑制小鼠海马NSCs向少突胶质细胞分化,促进其向未成熟星形胶质分化,同时其也有向神经元分化倾向。     

针刺对快速老化小鼠生长因子及受体基因表达的影响

目的：探讨快速老化小鼠(senescence accelerated mouse，SAM)脑衰老的机制，揭示“益气调血、扶本培元”针法改善SAMP10脑衰老症状的部分机制。方法：选取7月龄雄性清洁级SAMP10小鼠20只，单纯随机分为2组，即SAMP10对照组、SAMP10“益气调血、扶本培元”针刺法组(简称针刺组)；选取7月龄雄性SAMR1 10只，为SAMR1对照组。应用cDNA Array技术，观察快速老化小鼠SAMP10与正常老化小鼠SAMR1前脑588个基因表达的差异，同时观察“益气调血、扶本培元”针法对上述基因表达的影响。结果：SAMP10与SAMR1相比，胰岛素样生长因子ⅠA、胰岛素样生长因子Ⅱ前体、生长激素受体、雌激素受体伴快速老化，其表达分别下调了16，1．6，20．2和7．6倍，胰岛素样生长因子Ⅰ受体α亚单位的表达则上调了1．6倍。针刺后其表达水平趋向于正常老化的R1品系，其表达分别上调11．5，4．1，17．1和3．8倍，上调1．8倍。结论：SAMP10脑衰老可能与胰岛素样生长因子系统、生长激素等的异常表达有关，针刺可改善上述生长因子的表达，进而起到延缓脑衰老作用。     

中药天年饮对衰老大鼠皮质、海马甘氨酸含量的影响

目的：观察中药天年饮对衰老大鼠皮质、海马抑制性氨基酸甘氨酸（Gly）含量的影响。方法：30只SD大鼠随机分为3组，正常组、衰老模型组和犬年饮用药组，每组10只。胁半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型。采用高效毛细管电泳法检测各组大鼠大脑皮质、海马Gly的含量。结果：与正常大鼠比较，衰老大鼠皮质、海马Gly的含量明显下降（P〈0．01）；中药天年饮可明显提高衰老大鼠各脑区Gly的含量（天年饮用药组大鼠与模型组大鼠比较P〈0．01）。结论：中药天年饮可改善衰老大鼠皮质、海马甘氨酸的代谢，具有延缓脑老化的作用。     

HD02对慢性前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化的影响

目的:观察HD02对慢性前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化的变化。方法:结扎双侧颈总动脉制备慢性前脑缺血大鼠模型,采用免疫单标和双标方法检测成体大鼠神经干细胞及分化的功能细胞。给予模型大鼠HD02水煎剂灌胃,分别于造模后15,30d观察神经干细胞增殖分化的变化。结果:与正常对照组相比,慢性前脑缺血大鼠大脑皮质、室周区、海马BrdU阳性细胞数和BrdU+NF200,BrdU+NeuroD,BrdU+GFAP免疫荧光双标细胞数于造模后15d明显增多(P<0.01),但造模后30dBrdU阳性细胞数和BrdU+NF200,BrdU+NeuroD,BrdU+GFAP免疫荧光双标细胞数与正常对照组相比差异无显著性意义(P>0.05);造模后30d,HD02组BrdU阳性细胞数和BrdU+NF200,BrdU+NeuroD,BrdU+GFAP免疫荧光双标细胞数较慢性前脑缺血组明显增多(P<0.01)。结论:HD02可显著增加慢性前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化能力     

快速老化小鼠SAMP8的增龄性老化特征研究

目的探讨快速老化小鼠8(SAMP8)增龄性学习记忆能力、海马区Tau蛋白磷酸化及电镜下细胞超微结构等老化特征。方法用Morris水迷宫评测2、7和12月龄SAMP8和抗衰老系列小鼠1(SAMR1)小鼠的学习和空间记忆能力。利用蛋白免疫印迹法分别检测不同月龄SAMP8和SAMR1小鼠海马区磷酸化Tau蛋白的水平,利用透射电镜观察SAMP8和SAMR1小鼠海马神经元的超微结构变化。结果与SAMR1小鼠相比,7、12月龄的SAMP8小鼠出现明显学习、记忆功能下降(P均<0.05)。7、12月龄SAMP8小鼠的海马和皮质区Tau[pS199]蛋白表达水平明显升高(P均<0.05)。透射电镜观察示7月龄SAMP8小鼠与对照组相比,海马神经元内细胞核出现线粒体轻度肿胀、脊和膜轻度消失,内质网肿胀;12月龄的SAMP8小鼠海马神经元出现胞浆空泡化,核质边移,细胞器减少,线粒体肿胀,在胞浆和轴突内可见大量的致密物。结论 SAMP8小鼠在7和12月龄时表现出学习和记忆能力下降,Tau蛋白磷酸化水平增高,并且细胞超微结构出现相应改变,表现出年龄相关的神经退行性变特征,是优质的快速脑老化动物模型。