具有黄嘌呤氧化酶抑制活性和清除氧化应激活性的韭菜提取物

韭菜Allium tuberosum Rottler提取物具有黄嘌呤氧化酶抑制活性和清除氧化应激活性，可药用和食用，防治痛风或与痛风相关的疾病，如高血压、肥胖症、高脂血症、动脉硬化、糖尿病、慢性酒精中毒、癌症、冠心病、白内障、肝炎、局部缺血或再灌注损伤、风湿性关节炎或心机能不全，无毒副作用。     

2-苯基-四氢噻喃并嘧啶类化合物的合成及黄嘌呤氧化酶抑制活性

以4-羟基苯甲腈为原料,经醚化、水解、酰化、加成等反应,共合成12个新型的2-苯基-四氢噻喃并嘧啶类化合物(6a~6d,8a~8h),并进行抑制黄嘌呤氧化酶活性测试。结果表明:化合物8a~8h(100 μmol/L)均表现出不同程度的抑酶活性,其活性明显强于化合物6a~6d,即嘧啶环上引入羧基有利于提高抑酶活性;在化合物8a~8h中,以嘧啶环上异丙酸取代,苯环羟基乙醚化的8f活性最强,IC₅₀为76.0 μmol/L。     

迷迭香酸对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

目的:研究迷迭香酸对黄嘌呤氧化酶的抑制作用.方法:将20、40、60 μg/ml迷迭香酸或1 μg/ml阳性对照别嘌呤醇,分别加入黄嘌呤溶液(测尿酸生成量:1 mmol/L;测超氧离子:50 μmol/L)和0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶中,用生化仪测定5 min尿酸生成量和超氧离子生成(NBT显色法).在1 ml 2×105/ml HL-60细胞悬液中加入100 μl 6 mol/L黄嘌呤、100 μl 0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶、500 μg/ml迷迭香酸,分别以AnnexinⅤ-PI双标试剂盒法(以1 μg/ml别嘌呤醇为阳性对照)或细胞周期法(以100 U/ml SOD为阳性对照)测定细胞凋亡率.结果:迷迭香酸显著抑制尿酸生成和超氧离子引起的NBT显色,两种方法测得其IC50分别为56 μg/ml和21 μg/ml;对细胞凋亡的抑制率均在40%以上.结论:迷迭香酸是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂.     

海洛因对大鼠脾中腺苷脱氨酶、黄嘌呤氧化酶和血尿酸的影响

目的：研究海洛因依赖对大鼠血浆尿酸含量和脾中腺苷脱氨酶(ADA)、黄嘌呤氧化酶（XOD）的影响。 方法：剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,50只正常雄性Wistar大鼠随机分为对照组、3 d给药组、9 d给药组、3 d戒断组及8 d戒断组,每组10只。测定各组脾组织中ADA、XOD和血浆中尿酸的含量。 结果：3 d和9 d给药组大鼠血尿酸含量均明显高于对照组（P<0.01）,戒断组均低于9 d给药组,但差异无显著性（P>0.05）。脾中ADA 3 d和9 d给药组均明显高于对照组（P<0.05）, 8 d戒断组与9 d给药组相比明显下降（P<0.05）;脾中XOD 9 d给药组与对照组相比明显升高（P<0.05）,戒断组与9 d给药组比较差异无显著性（P>0.05）,但呈下降趋势。 结论：海洛因给药使脾中ADA、XOD活力升高,引起嘌呤核苷酸分解代谢增强,而且脾细胞核苷酸分解代谢增强是海洛因依赖引起的免疫力下降的重要原因。     

心血管病患者血中次黄嘌呤,黄嘌呤和尿酸含量的测定

本文用高效液相色谱法测定了正常人及心绞痛和高血压病患者血中次黄嘌呤，黄嘌呤和尿酸的含量，并进行了ｔ检验分析。结果表明，心绞痛和高血压病患者血中尿酸的含量与正常人无明显差异，而心绞痛和高血压患者血中次黄嘌呤和黄嘌呤的含量明显高于正常人，Ｐ〈０．０５。因此我们认为测定血中次黄嘌呤和黄嘌呤和尿酸的含量具有一定的临床意义。     

红花中酪氨酸酶抑制成分的快速筛选和分析

目的 通过红花中酪氨酸酶抑制剂的筛选,明确红花中酪氨酸酶抑制剂成分,为美白祛斑剂的研发提供实验依据。方法 采用索氏提取法依次提取红花石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇和水5种提取物,分别检测其对酪氨酸酶的抑制作用;针对活性组分通过UPLC-Q/TOF鉴定活性成分,并结合分子对接和酶学检测验证药效成分。结果 初步筛选结果显示红花水层提取物具有较强的抑制作用,并进一步通过液相色谱分离,质谱检测,以及分子对接预测技术,推测其中9种成分可能具有酪氨酸酶抑制作用,选取代表性单体羟基红花黄色素A进行验证,确认其具有较强的抑制作用。结论 谱效结合构效的筛选模式为天然产物中美白祛斑成分的筛选提供了便捷方法;红花中羟基红花黄色素A对酪氨酸酶具有明显的抑制作用。     

痛风康对酵母膏致高尿酸血症大鼠尿酸代谢及黄嘌呤氧化酶活性的影响

目的观察痛风康对高尿酸血症大鼠的尿酸（uric acid,UA）代谢及黄嘌呤氧化酶（xanthine oxi-dase,XO）活性的影响。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,别嘌呤醇组,痛风康高（460mg/kg）、中（230 mg/kg）、低（115 mg/kg）剂量组,灌胃给药;采用酵母膏致高尿酸血症模型;检测各组大鼠血UA水平和血清XO活性,并测定大鼠24 h尿量及尿UA水平,计算24 h UA排泄量。结果酵母膏能明显升高大鼠血UA水平,降低尿量和24 h UA排泄量。痛风康高、中剂量组大鼠血清UA水平显著降低;痛风康中、低剂量组大鼠24 h UA排泄量均明显增加。痛风康各剂量组血清XO活性均明显降低,尿量显著增加。结论痛风康能明显降低高尿酸血症大鼠血UA水平及促进UA排泄,该作用可能与其抑制XO活性和利尿作用有关。     

基于谱效-构效关系筛选大黄中酪氨酸酶活性抑制成分的方法研究

目的 建立一种基于谱效-构效结合的高效天然化合物活性筛选体系,并采用该体系筛选大黄中酪氨酸酶抑制剂。方法 根据酪氨酸酶催化底物发生反应的原理,以大黄为例依次经过不同极性溶剂提取,分别检测各极性提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用;针对活性组分通过UPLC-Q/TOF鉴定活性成分,采用计算机辅助药物设计评价构效关系,进一步筛选抑制剂分子,并结合酶学检测验证药效成分。结果 通过建立的谱效-构效结合筛选体系获得大黄中大黄素、藜芦酚-4′-O-β-D-葡萄糖苷等9种具有间二羟基苯酚、邻三羟基苯酚结构的化合物可能具有酪氨酸酶活性抑制作用。结论 大黄中大黄素和藜芦酚衍生物对酪氨酸酶活性具有明显的抑制作用;谱效-构效相结合的筛选模式为天然化合物活性筛选提供了便捷方法。     

植物源抗菌活性成分的研究进展

介绍近年来国内外研究发现的多种已知结构类型及新结构类型的植物源抗菌活性成分。简要归纳了其抗菌活性及其相应的MIC值。同时对构效关系进行了分析。并对其中抗菌活性较强。具有进一步研究开发价值的化合物及结构类型进行了概括。     

改良的黄嘌呤氧化酶-羟胺法检测血清SOD活性

超氧化物歧化酶 (SOD)是体内清除超氧离子(O- 2 )的重要酶类 ,其在血清或组织细胞中的含量改变与炎症、肿瘤、损伤、糖尿病等疾病[1] [2 ] [3 ] [4 ] 的发生发展以及衰老过程有关。因此 ,检测患者体内的SOD活性 ,有助于相关疾病的诊断和治疗。SOD活性测定方法很多 ,常见的有邻苯三酚自氧化法、化学发光法、酶联免疫法、黄嘌呤氧化酶 NBT法等。但这些方法均存在一定的缺点 ,如需要即时测定数值 ,或只能通过其蛋白含量来反映其活性等。近年来 ,黄嘌呤氧化酶 羟胺法[5] [6 ] [7] 由于其简便、快速 ,易于实现批量化和白动化操作而得到广…     

不同产地叶下珠中4种酚酸类成分的测定

目的 建立RP-HPLC同时测定不同产地叶下珠中没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的方法。方法 采用Diamonsil C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-0.2%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为270 nm,体积流量1 mL/min,柱温35 ℃。结果 没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的线性范围分别为0.062 2～0.622 0 μg（r＝0.999 7）、0.130 4～1.304 0 μg（r＝0.999 4）、0.246 4～2.464 0 μg（r＝0.999 2）、0.081 2～0.488 0 μg（r＝0.999 3）;平均回收率分别为103.62%、101.20%、100.09%、100.27%,RSD分别为1.29%、2.08%、1.40%、2.98%。结论 本测定方法简便、准确、重复性好,可用于叶下珠中没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的测定。     

半枝莲黄酮类化学成分分析

目的分析半枝莲黄酮类化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20等多种色谱方法,依据波谱数据对其结构进行分析和鉴定。结果半枝莲中共分离了12个化合物,分别为圣草酚、野黄芩素、三裂鼠尾草素、黄芩苷、芹菜素、汉黄芩素、4'-羟基汉黄芩素、木犀草素、4',5-二羟基-3',5',6,7-四甲氧基黄酮、柚皮素、7-羟基-5,8,2'-三甲氧基黄烷酮、大波斯菊苷。结论分离得到的化合物类型均为黄酮苷元和苷类化合物,可为半枝莲的黄酮成分分析提供一定的科学依据。     

蝙蝠蛾拟青霉和中国弯颈霉蛋白质氨基酸分析及质量评价

目的 对蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)和中国弯颈霉(Tol ypocladium sinenis)2种虫生真菌菌丝的蛋白质氨基酸进行含量分析及质量评价,为2种真菌的其他相关研究和应用提供依据.方法 采用盐酸水解法水解菌丝粉,用Agilent 1200高效液相色谱仪C18反相柱梯度进行分离,上柱前加入邻苯二甲醛-氯甲酸芴甲酯(OPA-FMOC)自动衍生化.参照标准品氨基酸,计算待测样品的氨基酸含量.结果 测定了17种蛋白水解氨基酸的含量,其中蝙蝠蛾拟青霉中有4种氨基酸(天冬氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸)的含量高于中国弯颈霉,中国弯颈霉中有11种氨基酸(谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、精氨酸、丙氨酸、酪氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、脯氨酸)的含量高于蝙蝠蛾拟青霉.中国弯颈霉氨基酸总量、必需氨基酸总量、非必需氨基酸总量高于蝙蝠蛾拟青霉,蝙蝠蛾拟青霉支链氨基酸含量高于中国弯颈霉.两者必需氨基酸的模式均符合世界卫生组织和联合国粮农组织(WHO/FAO)提出的必需氨基酸模式谱和参考标准.结论 蝙蝠蛾拟青霉与中国弯颈霉均具有较高的营养价值,但两者的蛋白质氨基酸含量并不等同.     

线叶菊总黄酮抗细菌性感染实验研究

目的 探讨线叶菊总黄酮抗细菌性感染的作用。方法 采用管碟法进行体外抑菌试验,检测线叶菊总黄酮对临床常见致病细菌的抑菌效果;采用耐青霉素金黄色葡萄球菌腹腔感染小鼠模型,以保护率为指标,观察线叶菊总黄酮的体内抗菌活性;采用小鼠体内淋巴细胞转化实验及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能实验,检测线叶菊总黄酮对小鼠免疫功能的影响;检测线叶菊总黄酮的急性毒性。结果 线叶菊总黄酮对多种实验菌均有抑制作用,尤其对耐青霉素金黄色葡萄球菌有明显抑菌作用,剂量为442 mg/kg时,明显降低感染耐青霉素金黄色葡萄球菌小鼠的死亡率;还可促进淋巴细胞的转化和增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,与对照组比较差异显著（P＜0.01）。毒性实验未见小鼠死亡,属实际无毒级。结论 线叶菊总黄酮毒性低,体外对多种细菌有抑制作用,且体内、外对耐青霉素金黄色葡萄球菌均有良好的抑菌作用,并可提高小鼠的免疫功能。     

化橘红黄酮类成分UPLC与HPLC指纹图谱的比较研究

目的 比较超高效液相色谱（UPLC）法与HPLC法分析化橘红总黄酮指纹图谱的效果。方法 分别采用UPLC法与HPLC法对17批化橘红药材的黄酮类成分进行指纹图谱分析。结果 分别建立了化橘红黄酮类成分的UPLC与HPLC指纹图谱共有模式。其中UPLC法标识出21个共有峰，HPLC法标识出17个共有峰，17批样品的相似度均大于0.9。结论 2种方法均可用于化橘红的质量控制，UPLC法较HPLC法更高效、快速、灵敏。     

肿节风多糖SGP-2的高级结构解析及构效关系研究

肿节风多糖SGP-2是前期研究中从肿节风全草中提取、分离纯化得到的一种具有良好降血糖活性的酸性多糖。采用激光粒度分析、透射电子显微镜（TEM）及原子力显微镜（AFM）分析技术进行结构表征，分别对SGP-2在纯水及盐溶液中的高级结构以及不同理化条件处理后SGP-2及其衍生物的高级结构进行分析，并探讨了上述各样品的体外α-葡萄糖苷酶抑制活性。在纯水中SGP-2以聚集体及高分支球体两种构象存在，AFM分析得到SGP-2球体平均直径为33 nm，平均高度为1.84 nm。而在0.05 mol/L Na₂SO₄溶液中SGP-2主要表现为具有高分支结构的紧密球体且粒径降低。SGP-2经0.5 mol/L尿素处理并透析后的球体结构在1 000 μg/mL下抑制率可达原型SGP-2抑制率的98.8%；140 ℃加热后的SGP-2呈现分支杆状结构，于1 000 μg/mL下抑制率高达83.3%，对α-葡萄糖苷酶抑制的活性高于同浓度下的原型SGP-2；而羧基还原后的衍生物呈缠结链结构，对于α-葡萄糖苷酶的抑制活性大大降低。因此，球状结构或分支杆状结构对于SGP-2的活性发挥具有重要的作用。本研究为深入探讨多糖分子的高级结构与活性间的构效关系提供了理论依据。     

柱前衍生RP-HPLC法分析淡豆豉和大豆中氨基酸

目的 分析淡豆豉Sojae Semen Preparatum和大豆Glycine max中游离及水解氨基酸。方法 用0.1 mol/L HCl作溶剂超声提取得到淡豆豉和大豆中的游离氨基酸;用6 mol/L HCl水解提取得到水解氨基酸,以异硫氰酸苯酯（PITC）为柱前衍生化试剂,采用柱前衍生RP-HPLC法进行分析。结果 淡豆豉和大豆中均含有16种氨基酸,这16种氨基酸浓度在0.031～1.750 mmol/L内呈良好的线性关系,r均大于0.997 9,平均回收率91.02%～102.04%,RSD1.01%～4.81%。结论 本方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,16种氨基酸能在样品杂质量较多的情况下得到分离,且采用普通C₁₈色谱柱成本低,可广泛应用于富含氨基酸样品的分析。     

黄葵总黄酮对CYP450酶的抑制作用

研究黄葵总黄酮对人肝微粒体中细胞色素P450(CYP450)酶不同亚型的影响机制并在大鼠体内对受抑制最为显著的CYP2C9亚型进行验证。利用HPLC-MS/MS技术,通过鸡尾酒法在体外评估黄葵总黄酮对人CYP3A4、CYP2C9、CYP2C19、CYP2E1、CYP1A2和CYP2D6的抑制效应,考察其抑制机制,计算酶抑制动力学参数。在大鼠体内通过比较单次或多次给药200 mg/kg黄葵总黄酮与等剂量CMC-Na后甲苯磺丁脲的药代动力学行为差异,评估黄葵总黄酮对大鼠CYP2C11酶(CYP2C9同工酶)的影响。结果表明黄葵总黄酮对CYP2C9和CYP2E1存在显著抑制作用,IC₅₀分别为3.22和8.64μg/mL,对其他亚型也表现出一定的抑制作用,IC₅₀介于20～30μg/mL。黄葵总黄酮并非为潜在的时间依赖性抑制剂,它能竞争性抑制CYP2E1和CYP2C9,抑制常数K_i分别为3.84和6.33μg/mL,对CYP3A4介导的睾酮-6β-羟基化和咪达唑仑-4-羟基化的抑制方式为非竞争性抑制,K_i...     

微波辅助提取络石藤总黄酮的工艺研究

目的 优选微波辅助提取络石藤总黄酮的工艺。方法 以总黄酮提取率为考察指标,采用正交试验研究微波辅助提取络石藤总黄酮的工艺条件。结果 最佳提取工艺为微波功率500 W、微波提取时间30 min、反应温度70 ℃、乙醇体积分数70%、料液比1∶20;在此条件下,总黄酮的提取率为3.94%。结论 优化后的工艺简便可行,为络石藤总黄酮提取纯化工艺的产业化提供理论依据。