DNA疫苗的安全性研究

DNA疫苗作为第三代疫苗与传统疫苗相比具有很多优越性,对其安全性的评价主要包括DNA疫苗与宿主细胞基因整合的可能性,接种后诱导宿主免疫耐受和自身免疫病的可能性,以及临床试验中受试者的耐受性等方面。本文就DNA疫苗安全性研究进展和相应法规的制定情况作一综述。     

DNA疫苗的研究进展

自英国乡村医生Jenner用牛痘疫苗预防天花取得成功以来，疫苗作为一种有效的免疫预防剂在临床应用已有200多年历史。20世纪九十年代，Wolff等偶然发现给小鼠肌注编码基因的重组质粒(细菌染色体以外的环状双链DNA)后，可在体内检测到编码蛋白，同时诱导机体产生了特异性免疫     

DNA疫苗的研究进展

DNA疫苗是20世纪90年代发展起来的一项崭新的免疫技术，由Tang等首次报道，随后引起了广泛的关注。大量的疫苗研制工作如抗流感疫苗、HIV疫苗、乙肝病毒疫苗和肿瘤相关抗原疫苗等相继报道，被称为“第三次疫苗革命”，是继减毒疫苗、基因工程疫苗之后的第三代疫苗。     

布氏菌病双价DNA疫苗免疫保护效果的研究

【目的】构建布氏杆菌pcDNA3．1（＋）-L7／L12-BCSP31双价DNA疫苗，观察其免疫保护效果。【方法】分别克隆L7／L12、BCSP31基因，构建pcDNA3．1（＋）-L7／L12-BCSP31双价DNA疫苗。转染COS-7细胞，免疫细胞化学检测目的蛋白的表达。DNA疫苗免疫Balb／c小鼠，观察体液免疫和细胞免疫效果。布氏杆菌强毒株腹腔攻毒，观察双价DNA疫苗的免疫保护效果。【结果】构建的pcDNA3．1（＋）-L7／L12-BCSP31双价DNA疫苗在COS-7细胞有目的蛋白的表达。双价DNA疫苗免疫小鼠，ELISA检测双价DNA疫苗产生了高水平的特异性IgG抗体，且抗体亚型以IgG2a为主。FCM检测双价DNA疫苗的CD4^＋／CD8^＋比值明显下降。ELISPOT检测到疫苗免疫后小鼠分泌IFN-γ的T细胞增多。攻毒实验证明双价DNA疫苗能够产生有效的保护效果；部分数据及攻毒结果表明双价DNA疫苗的效果优于单价。【结论】研制的pcDNA3．1（＋）-L7／L12-BCSP31双价DNA疫苗免疫Balb／c小鼠能产生有效的免疫保护效果，且双价DNA疫苗效果优于单价。     

国产Vero纯化细胞（无佐剂）狂犬病疫苗的安全性研究

由于我国城市家庭喂养宠物的人群逐年增加，动物导致人体伤害事件也持续上升。在被伤害人群中，为预防狂犬病的发生而接种延犬病疫苗的种类和数量也相应增加。为探讨国产Vero细胞纯化，（无佐荆）狂犬病疫苗接种的安全性，我们对我市400例接种对象在接种疫苗后0～45天的局部副反应和全身副反应情况进行调查，发现国产纯化Vero细胞（无佐剂）狂犬病疫苗和国产纯化Vero细胞（含佐剂）狂犬病疫苗接种后的副反应（局部和全身）有高度显著性差真。其中局部副反应有高度显著性差异；全身副反应总体上无显著性差异。结论：国产纯化Vero细胞（无佐剂）狂犬病疫苗接种的安全性明显高于国产纯化Vero细胞（含佐剂）狂犬病疫苗。     

不同饮食习惯与Vero细胞狂犬病疫苗的安全性研究

目的：探讨不同的饮食习惯下接种Vero细胞纯化任犬病疫苗的安全性。方法：对我市600例接种对象在接种疫苗后0～30天的局部副反应和全身副反应情况进行临床观察。结果：接种国产（无佐剂）纯化Vero细胞狂犬病疫苗的安全性与是否食用辣椒、胡椒、花椒、葱姜、蒜以及饮茶、咖啡等刺激性食物无显著差异。其中局部副反应和全身副反应均无显著差异。     

流行性感冒裂解疫苗临床安全性及免疫原性研究

目的探讨流行性感冒病毒裂解疫苗的临床安全性与免疫效果。方法采用随机、双盲原则分为试验组和对照组，分别接种试验疫苗和对照疫苗，观察接种反应率和3型抗体阳转情况，微量血凝抑制试验测定流感抗体。结果接种试验疫苗后，儿童、成人、老年组整体全身反应率4．13％，局部反应率为4．13％，与对照疫苗比较无显著差异。试验疫苗免疫后各血清HI抗体阳转率分别为H1N1 88．34％、H3N2 77．67％、B（亚）型83．62％，与对照疫苗比较无显著差异；血清保护率分别为H1N1 99．26％（400／403）、H3N2 97．27％（392／403）、B（亚）型为92．31％（372／403），H，N。试验组高于对照组，差异有显著性；H1N1、H3N2和B（亚）型HI抗体GMT平均增长倍数试验疫苗和对照疫苗分别为12．3、10．8、12．1和20．2、16，0、9．7，平均增长倍数均大于2．5倍，B（亚）型试验组高于对照组，差异有显著性。结论试验疫苗的免疫效果达到欧盟标准，其安全性和免疫原性良好，适于推广使用。     

DNA疫苗的研究与应用前景

1前言 20世纪初以来，随着科学技术的进步，绝大多数人类和动物传染疾病都已有相应的可进行预防和控制的疫苗。但是，一些传染病（如流感、C型肝炎、疱疹、疟疾等）以及新出现的传染病（如艾滋病、猪兰耳病、疯牛病等）还没有十分有效的疫苗，无法有效控制其流行。即使有些传染病有了疫苗，仍不能够周延或持续提供疾病预防和治疗。这些足以说明发展新型疫苗的迫切性。随着现代生物技术、尤其是基因治疗技术的发展，新型疫苗——DNA疫苗的研制已经提到日程上来了，并得到了广泛的关注：利用基因生物学技术对疫苗的进行研究和探索已成为日前生物科技工作者研究的热点之一。     

TCR独特型DNA疫苗诱导抗淋巴系统肿瘤免疫反应的实验研究

本研究观察ＴＣＲ独特型ＤＮＡ疫苗诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠抗肿瘤免疫反应的情况。用ＣＥＭ淋巴瘤细胞系和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠作模型,ＲＴ－ＰＣＲ扩增ＣＥＭ系特异性重排的ＴＣＲ Ｖβ基因,克隆到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３中作为ＤＮＡ疫苗。用肌内注射法免疫小鼠,间接免疫荧光法检测小鼠抗体生成和用ＭＴＴ法测定ＣＴＬ活性以检测抗独特型的细胞免疫。结果发现,接种ＤＮＡ疫苗后第４周开始小鼠血清中即可检测到特异性抗独特型抗体     

国产流行性感冒裂解疫苗临床安全性与免疫原性评价研究

目的 评价国产流行性感冒裂解疫苗的安全性和免疫原性.方法 按整群随机抽样原则,以进口同类疫苗作为对照开展现场临床试验;比较两种疫苗免疫后临床反应率、抗体阳转率、保护率及几何平均滴度(GMT).结果 试验组及对照组接种后均无发热反应,局部反应率分别为1.8%和2.1%(P＞0.05),均为轻度反应;试验疫苗流感病毒H1N1、H3N2及B(亚)型的微量血凝抑制试验(HI)抗体总阳转率分别为93.6%、80.4%、88.8%,对照疫苗流感病毒H1N1、H3N2及B(亚)型的HI抗体总阳转率分别为89.0%、77.3%、86.6%,H1N1(亚)型HI抗体总阳转率试验组高于对照组,差异有统计学意义.试验疫苗流感病毒H1N1、H3N2及B(亚)型HI抗体增长倍数分别为23.9倍、8.6倍和12.9倍;对照疫苗流感病毒H1N1、H3N2及B(亚)型HI抗体增长倍数分别为20.0倍、6.6倍和9.7倍.HsN2、B(亚)型流感抗体增长倍数试验组高于对照组,差异有统计学意义.试验疫苗流感病毒H1N1、H3N2及B(亚)型HI抗体达到保护水平的保护率分别为94.8%、99.4%和87.0%;对照疫苗流感病毒H1N1、H3N2及B(亚)型HI抗体达到保护水平的保护率分别为92.4%、100%和83.0%.三(亚)型流感HI抗体达到保护水平的保护率差异均无统计学意义.结论 国产流感裂解疫苗发热反应和局部反应与进口同类疫苗无差异,部分指标优于进口同类疫苗,免疫后抗体阳转率较高,抗体滴度上升幅度较大,具有良好的临床安全性和免疫原性.     

HCV核心区DNA疫苗的构建及初步鉴定

目的 构建HCV核心蛋白DNA疫苗,观察其诱导BALB/C小鼠产生体液免疫应答的效果,为研制应用于人类的HCVDNA疫苗提供实验依据.方法 将HCVC基因片段插入真核表达载体pCDNA3.1(+),构建真核表达载体pCDNA3.1HCVcore,并用酶切分析鉴定;肌注BALB/C小鼠,以ELISA法检测小鼠血清HCV抗体.结果 经酶切分析证实重组质粒pCDNA3.1HCVcore构建正确;9只小鼠经3次DNA免疫后均出现抗HCV抗体.结论 成功地构建出HCVC区DNA疫苗,并可诱导BAIB/C小鼠体液免疫应答.     

精制狂犬疫苗与浓缩狂犬疫苗免疫效果与安全性配比分析

为了解精制狂犬疫苗与浓缩狂犬疫苗的免疫效果与接种反应的差异情况,我们于2001年2月-2002年2月对本市被动物咬(抓)伤后,前来我站预防门诊接种狂犬疫苗者,进行了接种后血清狂犬抗体与接种反应的观察与分析,现将结果报告如下。     

学校内学生接种疫苗安全因素分析

目的 分析相关因素,确保学生接种疫苗安全.方法 由学校向符合本次接种对象发放知情同意书, 家长同意接种者在同意书上签名,接种单位在学校内为学生规范接种疫苗.结果 共接种麻疹疫苗13 569人,有4人感觉轻微头晕;甲型H1N1流感疫苗864人,1人晕针,经对症处理后恢复.没有因接种疫苗引起的群体性心因性反应、无疫苗质量和实施差错事故发生.结论 协调好学校、家长及医院的配合,是学校内学生安全接种疫苗的重要保障.     

接种流脑疫苗、霍乱疫苗后脑脊髓炎(附3例报告)

1　病历简介　　例 1:男 ,11岁。因发热 2天伴右眼视物不清 1天于 1998年 10月 2 7日入院。 2天前发热 37.5～ 39.0℃ ,1天前右眼视物模糊 ,右眼外斜视 ,伴头痛、尿潴留及双下肢无力 ,不能独立行走 ,经抗感染、对症治疗 ,症状加重来我院。既往体健 ,第三胎 ,足月顺产 ,病前 18天接种流脑疫苗。查体 :体温 39.0℃ ,神志清楚 ,语言流利 ,精神萎靡 ,智力正常 ,右眼内收受限 ,双眼平视 ,垂直眼震阳性 ,右眼视力 5 0 cm手动 ,右眼直接对光反射可疑 ,左眼间接对光反射可疑 ,辐辏反射阳性。眼底 :右眼视乳头边界欠清 ,视网膜色红 ,动脉变细 ,无渗出…     

热休克蛋白70在DNA疫苗中的作用和应用前景

DNA疫苗作为一种新型疫苗,能引起体液免疫和激发较强的细胞免疫,现已成为疫苗研究的一个热点.但DNA疫苗仍然存在保护性抗原表达量不足,激发抗体能力尚需提高等问题.热休克蛋白(HSP) 70在分子进化上保守,无种属靶向性,具有免疫优势抗原的特点,作为分子伴侣和抗原载体参与调节提高机体的免疫反应.HSP70在免疫佐剂、分子伴侣、抗肿瘤效应等多个方面对DNA疫苗均有促进作用.     

结核分支杆菌MPT64 DNA疫苗研究进展

结核分支杆菌引起的结核病是一种人、兽共患的慢性传染病，短程督导化疗是治疗该病的主要措施，卡介苗是预防该病的唯一疫苗，但其免疫效果极不稳定。现介绍结核分支杆菌MPT64 DNA疫苗构建及其免疫机制等方面的研究进展。     

乙型病毒性肝炎疫苗快速接种方案效果初步观察

1 引 言我们在1998年2月至1999年10月为40名乙型病毒性肝炎疫苗接种者实施了3周内接种的方案,另以65名按传统方案接种作为对照,并对其效果进行观察,现将结果报告如下。2 材料与方法2．1 对象选择所有接种者均符合下列条件：没有乙型病毒性肝炎病史;没有接种过乙型病毒性肝炎疫苗;乙型肝炎病毒标记物HBcAb、HBeAb、HBeAg、HBsAb、HBsAg均为阴性;肝功能正常;接种前3个月内未使用过免疫调节药、免疫球蛋白或血制品;接种前3周未接种过其它疫苗。实验组共40名,其中儿童13名,男8名,女5名,1岁至15岁,中位年龄8岁;成人27名,男1…     

用基因组DNA制备独特型抗淋巴瘤核酸疫苗的实验研究

本研究观察从人B细胞淋巴瘤细胞系基因组DNA及RNA分别构建的表达载体作为核酸疫苗诱导小鼠产生抗肿瘤免疫反应的情况。分别提取人B淋巴瘤细胞系Namalwa细胞的基因组DNA及RNA，将免疫球蛋白重链可变区（IgHV)基因片段克隆到pcDNA3.0真核表达载体中作为独特型核酸疫苗，其中DNA 核酸疫苗用LipofectAMINE转染COS细胞，多面手用RT－PCR观察转录及剪接的情况。两种不同来源的核酸疫苗分别肌内注射免疫小鼠后，用间接免疫荧光法检测抗独特型抗体的生成。结果发现，基因组DNA来源的核酸疫苗在COS细胞中能成功地转录，转录产物大小为477bp，其中86bp的内含子区域被剪接；两种疫苗免疫动物后均可诱导针对Namalwa细胞特异的抗独特型抗体，并于第6周达高峰。结论提示，淋巴瘤基因组DNA和RNA来源的IgHV基因片段均可制备核酸疫苗，能诱发小鼠产生抗淋巴瘤免疫反应。