Microbubble ultrasound contrast agent with three esters and carboxylic methyl cellulose as main shell materials：Its preparation and imaging evaluation

Objective: To study on the preparation process of a new surfactant-based microbubble ultrasound contrastagent and to evaluate its contrast effects in vivo. Methods: Microbubble ultrasound contrast agent with three ester sur-factants and other additives as its shell materials was prepared by sonication. Sulfur hexafluoride was adopted as the in-ner gas of the microbubbles. New methods through the combination of optical microscope and some softwares were usedto measure the size distribution and the concentration of the microbubbles. Some parameters such as the pH value of thephosphate buffer, quantity of the carboxylic methyl cellulose in the shell materials, selection of the ultrasound powerand process time, were studied. Six hybirded dogs were used to verify the in vivo contrast imaging of the contrast agentusing second harmonic power Doppler modality. Safety and persistent time of the agent inner animal body were also in-     

KGDS血栓靶向超声造影剂的制备及其初步评价

目的：探讨制备靶向结合活化血小板的脂质超声造影剂的新方法,评价制备的靶向超声造影剂体外与血栓靶向结合的能力。方法：首先合成荧光标记的,能与血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体特异性结合的赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸多肽-棕榈酸化合物（KGDS-Palm）。采用“超声-高速剪切”法,以带荧光FITC的KGDS-Palm为主要原料之一,制备靶向脂质超声造影剂。马尔文公司粒径测定仪检测微泡大小及分布;Coulter计数仪分析浓度;荧光显微镜下观察KGDS多肽与微泡的结合情况;流式细胞仪评价多肽与微泡的结合效率;观察靶向微泡在体外的稳定性;采用体外血栓模型,检测靶向微泡与血栓靶向结合的特异性。结果：KGDS靶向超声造影剂呈淡黄色混悬液,微泡浓度约为1.5×109/mL,平均粒径为1.5 μm,98%的微泡小于5 μm。荧光显微镜显示靶向超声造影剂表面呈明亮的绿色荧光;流式细胞仪检测KGDS结合效率为90.04%;体外4 ℃保存48 h后微泡浓度及粒径无显著改变;体外靶向及其拮抗实验证实,靶向超声造影剂与血栓特异性结合。结论：采用“超声-高速剪切法”制备靶向超声造影剂,方法简单易行,有利于靶向造影剂的制备及纯化;KGDS靶向超声造影剂稳定性好、靶向结合特异性强。     

经静脉心肌造影二次谐波成像对犬心肌灌注的实验研究

目的：初步探讨经周围静脉心肌造影二次谐波成像对心肌灌注的应用效果及意义。方法：对１０只正常开胸犬经周围静脉注入ＳＨＵ－５０８Ａ在二次谐波功能支持下行左室乳头肌短轴切面超声心动图检查,用视频密度仪对造影的前后心肌视频密度进行定量分析。结果：造影剂主心肌的峰值强度,曲线下面积,时间密度改变及曲线升支斜率均较造影前差异显著。     

HER2靶向聚合物超声造影微泡的制备及其体外实验

目的：制备以HER2受体为靶点的靶向聚合物微泡超声造影剂,并观测其理化特性、体外肿瘤靶向性及体外超声显像效果。方法：利用生物素-亲和素法构建HER2靶向聚合物微泡,测定其粒径、电位,评价其稳定性。在体外肿瘤靶向性实验中观察其与HER2（+）的乳腺癌细胞BT-474以及HER2（-）的乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞结合情况。并观察靶向聚合物微泡体外超声显影效果。结果：HER2靶向聚合物微泡平均粒径为（1.78±0.37）μm,平均表面Zeta电位为（-37.40±5.74）mV。12 h内靶向聚合物微泡粒径变化差异无统计学意义（P＞0.05）。HER2靶向聚合物微泡在体外对HER2（+）肿瘤细胞具有特异靶向性。体外超声显像显示靶向聚合物超声造影剂呈细腻均匀的点状密集高回声。结论：HER2靶向聚合物微泡稳定性好,靶向能力较强,具有良好的体外超声显影效果,为进一步进行体内肿瘤靶向超声造影奠定了基础。     

N-羧甲基壳聚糖微泡超声造影剂的制备与性能评价

目的制备N-羧甲基壳聚糖微泡超声造影剂,观察其基本特征及对动物肝脏超声显影效果。方法采用(油/水)/油复合乳液-溶剂蒸发法制备微泡超声造影剂,通过光学显微镜和扫描电镜观察微泡的大小、形态及粒径分布,通过股动脉注射0·5ml该超声造影剂到动物体内,观察动物肝脏超声显影效果。结果N-羧甲基壳聚糖微泡为空心球形结构,分散均匀,形状规则,粒径在2~3μm,壁厚为250~300nm。该造影剂对动物肝脏超声显影效果明显增强。结论N-羧甲基壳聚糖微泡可作为一种性能较好的超声造影剂。     

多功能超声造影剂的研究现状及应用前景

【摘要】 近年来,随着超声造影剂的广泛应用,弥补了常规超声诊断的一些缺陷和不足,在一定程度上提高了超声诊断的准确性,但超声空间分辨率及敏感性仍然较低。随着超声分子探针的兴起,多功能超声造影剂已成为当前超声分子影像学研究的热点,与其他影像技术相结合,可达到“优势互补”的效果。多功能超声造影剂包括靶向超声造影剂、多模态造影剂及基于超声成像的诊疗一体化造影剂,以超声分子显像为核心,结合X 射线计算机体层扫描（CT）成像、磁共振成像（MRI）、正电子发射计算机断层扫描（PET）成像和荧光成像等其他技术优势,对活体状态下的生物过程以细胞和/或分子为成像靶点,利用图像可视化细胞功能及追踪分子过程,直观地反映体内生理和病理变化过程。多功能超声造影剂的研究有助于对疾病做出更加准确的诊断,通过携载基因或药物的方式可对疾病进行诊断后治疗,具有广阔的应用前景。     

胃肠超声造影剂联合静脉超声造影对胃癌的诊断价值

【摘要】 目的 探讨自制胃肠超声造影剂联合静脉超声造影对胃癌诊断及T分期的临床价值。方法 采用黑芝麻糊、山药粉作为原材料进行不同的组合,并与“天下牌”胃肠超声造影剂对92例胃肠超声检查患者进行比较,选择最优组合作为胃肠超声造影剂。对经病理检查确诊的151例胃癌患者,于手术前分别行口服自制胃肠超声造影剂胃肠超声检查和在口服自制胃肠超声造影剂的基础上联合静脉超声造影检查,分别做出胃癌的诊断及胃癌T分期的诊断,并与术后病理结果作对比分析。结果 在92例胃肠超声检查患者中,自制胃肠超声造影剂,造影区图像的超声直方图峰位与“天下牌”胃肠超声造影剂相比,差异无显著性（P＞0.05）。在151例胃癌患者中,单纯口服自制胃肠超声造影剂胃肠超声检查检出胃癌101例,诊断符合率为66.89 %,胃肠超声双重造影检出胃癌128例,诊断符合率为84.77%。口服自制胃肠超声造影剂胃肠超声检查正确判断T1、T2、T3+T4 期分别为24、46、31例,各期诊断符合率分别为53.33%、70.77%和75.61%。胃肠超声双重造影正确判断T1、T2和T3+T4 期分别为33、56和39例,各期诊断符合率分别约为73.33%、86.15%和95.12%。两者对胃癌术前T分期各期诊断差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 自制胃肠超声造影剂可用于对胃部疾病的诊断与静脉超声造影联合运用可明显提高胃癌的诊断率,对T分期具有较高的准确性,可在临床推广应用。     

多层聚电解质膜包覆的微泡超声造影剂的制备

目的制备多层聚电解质膜包覆的微泡超声造影剂,观察其对正常兔肝脏超声显影效果。方法采用声空化方法制备表面活性剂(Span60和Tween80)包裹全氟丙烷气体的超声造影剂微泡(ST68-PFC)。然后以微泡为模板粒子,用带相反电荷的聚赖氨酸(PLL)和海藻酸钠(Alg)为包膜材料,通过静电吸引层层自组装技术对微泡进行包覆和表面修饰,观察其对正常兔肝实质的造影效果。结果声空化法能够制备出粒径分布均匀的超声造影剂微泡,聚电解质有效地组装到ST68-PFC微泡表面。动物肝脏造影实验证明经过多层聚电解质膜包覆的微泡造影剂能够有效增强兔肝实质显像效果。结论经过层层自组装修饰的微泡造影剂在赋予更多功能的同时,并没有减弱其造影效果。通过选择含有氨基、羧基等基团的高分子材料作为微泡的最外层,可以方便地将特异性配体连接到微泡表面上,实现靶向目的。     

超声造影技术在脑灌注成像中的应用及进展

脑组织灌注是评估脑组织微循环的常用指标,在卒中、癫痫、阿尔茨海默病及颅内占位性病变等的评价中都有重要应用,超声造影脑灌注成像具有实时、便捷、过敏反应少等优点,其相关研究日趋增多。     

基于纳米技术的新型超声造影剂在肌肉骨骼关节疾病诊疗中的应用

随着超声医学和纳米医学的发展,超声造影技术已进入一个全新发展阶段,新材料的设计和精细纳米材料的制备进一步促进了纳米级超声造影剂的临床应用。相比传统的超声造影技术,基于纳米技术的新型超声造影剂具有生物相容性、血清稳定性和显影时间持久性等优势,纳米级超声造影剂技术在肿瘤等恶性疾病的精准诊疗一体化方面表现出令人惊喜的效果。结合笔者长期临床实践及文献报道,纳米级超声造影剂在肌肉骨骼关节领域有潜在价值,有望为相关肌肉骨骼关节疾病的诊疗及随访提供更可靠的指导。     

纳米液态氟碳脂质微球超声造影剂的制备及体外聚集实验研究

目的制备一种新型超声造影剂——纳米液态氟碳脂质微球造影剂,并研究其体外基本特性及聚集后增强超声显影性能。方法采用高压均质法制备纳米液态氟碳脂质微球超声造影剂,检测一般理化性质,再制备生物素化微球,以空白微球为对照组,分别在加入亲和素前后,观察体外聚集情况及超声显影效果,并用DFY超声图像定量分析统计软件计算、比较超声图像平均灰度值。结果所制备的液态氟碳脂质微球为外观呈乳白色的混悬液,镜下微球形态圆整,大小均一,性质稳定,粒径（171.9±91.0）nm;制备的生物素化微球在加入亲和素后聚集成团状,并可增强超声显影,经DFY软件分析,加入亲和素前后超声图像平均灰度值差异有统计学意义。结论成功制备出稳定的纳米液态氟碳脂质超声造影剂,并采用生物素亲和素法证明了该微球具有聚集后增强超声显影性能。     

基于微气泡的超声分子影像探针及其研究进展

微气泡是超声成像的传统造影剂,从而也成为超声分子成像中最重要的一类探针载体,多模态?多功能?智能化是微气泡类分子探针的发展趋势?近年来一批设计新颖?功能多样的微气泡类分子探针陆续出现,文章在阐述传统微气泡分子探针发展状况的基础上,对融合多种成像方式的多模态微气泡分子探针?诊疗一体化的多功能微气泡分子探针?由特殊病理环境触发的刺激响应型超声分子探针及组织穿透力更强的纳米尺度超声分子探针,在设计思路及研究现状等方面进行了综述?     

胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂的制备及体外评价

目的 制备一种胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂(T-UCA)并评价其体外靶向性效果。 方法 合成高分子聚合物PLGA-PEG-NHS并利用核磁共振氢谱检测;用乳化挥发法制备包裹全氟溴辛烷(PFOB)的PLGA纳米造影剂后连接Hedgehog抗体;BCA法测定抗体的连接率;透射电镜观察其形态,动态光散射法测定其粒径、电位;采用气相色谱-质谱法测定纳米造影剂的包封率及载药量;利用透析法测定纳米造影剂的体外释放特性;在人胰腺癌细胞株SW1990和CFPAC-1上,利用荧光显微镜和流式细胞仪定性和定量验证其体外靶向能力。 结果 所制得胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂平均粒径为198.9nm,zeta电位为-31.8mV,包封率(63.7?Ee3.9%),载药量(14.3?Ee0.9%),48小时释药量为85.3%;体外细胞实验显示靶向造影剂与高表达Hedgehog抗原的SW1990细胞大量结合,而靶向造影剂与不表达Hedgehog抗原的CFPAC-1细胞未见特异性结合。 结论 本研究通过乳化挥发法成功制备了胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂,其各项表征符合要求,并能特异性靶向Hedgehog高表达的胰腺癌细胞,有望成为胰腺癌诊断的超声造影剂。     

3D-ASL与DSC-PWI在脑肿瘤灌注成像中的一致性分析

目的 对比分析三维动脉自旋标记（3D-ASL）和动态磁敏感对比增强扫描灌注成像（DSC-PWI）在脑肿瘤灌注中脑血流量测量的一致性。方法 19例脑肿瘤患者,其中胶质瘤9例,脑膜瘤5例,血管母细胞瘤2例、转移瘤2例,海绵状血管瘤1例。所有病例均经手术病理证实。术前均行常规磁共振平扫、增强扫描及 3D ASL和 DSC-PWI灌注成像,比较19例脑肿瘤患者57个感兴趣区脑血流量(CBF)与相对脑血流量(rCBF)的差异,评价两者之间的一致性。结果 3D ASL所测CBF与DSC 所测rCBF值两者有显著相关性（P=0.005）,一致性较好。结论 3D-ASL与 DSC-PWI在评估脑肿瘤脑血流量方面具有一致性,3D-ASL可准确评估脑肿瘤灌注情况。     

可携基因超声造影剂的制备及其体内外显影效果

目的制备一种新型的超声造影剂,研究其理化性质及体内、外显影效果。方法选用体内可降解的两种脂质体二软脂酰卵磷脂（DPPC）和1,2-二油烯氧基-3-三甲氨基丙烷（DOTAP）,采用薄膜分散法制备超声造影剂,观察其外观和形态及粒径分布。以声诺维超声造影剂、PBS和水合液作为对照组,比较其基因携带能力。采用体内、外显影实验,观察自制超声造影剂的显影效果和时间。结果光学显微镜下显示,自制超声造影剂形态规则,呈球形,大小均一,平均粒径为6.969μm。自制超声造影剂与声诺维超声造影剂相比有较好的基因携带能力,而声诺维超声造影剂与PBS及水合液的携基因能力无明显差异。体外超声显影显示,自制超声造影剂在Skeletalmuscular模式下显影时间为18min,造影模式下显影时间为14min,两种模式下管内均表现为强回声,有很好的影像增强效果;体内超声显影（造影模式）显示,大鼠尾静脉注射造影剂后1s时下腔静脉开始显影,3s时腹主动脉中下段开始显影,内均可见强回声充填。结论脂质体包裹的微泡理化性质稳定,具有较好的基因携带能力,体内外显影效果较好,有望成为一种新型的可携带基因和药物的超声造影剂。     

超声静脉声学造影评价肾外伤血肿的实验研究

目的评价声学造影后使用二次谐波技术在肾外伤时的价值。方法选12只健康新西兰大白兔,应用外力造成左肾钝性损伤的动物模型。经耳缘静脉注入脂质体声学造影剂,分别观察造影前、后血肿显示情况;观察造影后血肿周围肾实质的灰阶显影,用视频灰阶分析技术评价造影效果。结果①造影前后血肿显示情况：造影前,12例中发现9例血肿,病变区轮廓模糊,余3例血肿未确切显示。造影后应用二次谐波显像,12例血肿均完整显示,血肿边界清晰;②视频分析结果：血肿区造影前、后灰阶值无显著性差异（P〉0．05）;周围正常肾实质造影后明显增强,造影前、后灰阶值差异有显著性（P〈0．01）;造影前、后血肿与周围肾实质灰阶差值差异有显著性（P〈0．01）,更能衬托出血肿影像。结论声学造影剂可明显增强肾实质显影,有助于区别血肿与周围肾实质,提高肾外伤后血肿检出率,为肾外伤血肿的诊断提供了新的手段。     

超声造影在肝脏的应用

超声造影剂通过改变声波与组织间的吸收、反射和折射,使所在部位的回声信号增强。新兴的超声造影显像技术包括二次谐波显像、间歇式谐波显像、脉冲反向谐波显像、次谐波显像等,使超声造影剂的显像得到极大提高。肝脏应用的超声造影剂分为自由微气泡、糖化微粒悬浮液、包裹微气泡、过氟化物气体微泡、组织特异性造影剂等几大类,可分别通过增强肝实质和肝肿瘤的不同血管结构的显示,或造影过程中时相变化提供的血流灌注信息等,为诊断提供更多的依据,提高肝占位病变的诊断特异性。     

经静脉声学造影后肝脏实质时间-强度曲线分析诊断肝硬化

目的探讨声学造影后肝实质灰度时间-强度曲线(time-intensity curve,TIC)在诊断实验性肝硬化中的应用价值.方法通过皮下注射四氯化碳复制大鼠肝硬化模型,经外周静脉声学造影后应用视频分析法形成肝脏实质灰度的时间-强度曲线,测量并分析峰值时间(time to peak,TP)、峰值强度(peakintensity,PI)、峰值减半时间(half time of descent,HT)、曲线下降斜率(descending slope,DS)、曲线下面积(area under the curve,AUC)和平均渡越时间(mean transit time,MTT)等参数.结果肝硬化组大鼠的TP、PI、DS和AUC测值明显低于正常对照组(P＜0.01),HT与MTT测值则明显升高(P＜0.01).结论声学造影后肝实质时间-强度曲线可以反映肝硬化时大鼠肝脏微循环与血流动力学改变,有望成为诊断肝硬化的新方法.     

靶向MAdCAM-1超声造影剂的制备及其体外寻靶实验研究

目的:制备适用于炎症性肠病超声诊断并靶向MAdCAM-1的长循环脂膜超声造影剂,并鉴定其物理性状及体外寻靶能力?方法:采用超声破碎法制备长循环脂膜超声微泡,通过“生物素-亲和素”法桥接超声微泡与抗MAdCAM-1单克隆抗体(MECA-367)?对制备出的靶向微泡造影剂进行物理性状检测;通过光镜和激光共聚焦显微镜观察该靶向造影剂对TNF-α诱导的炎症性肠病细胞模型的结合能力?同法制备携同型对照抗体IgG2a微泡作对照?结果:制备的靶向超声微泡形态好且粒径较均匀,平均粒径(464.5 ± 85.7)nm,Zeta电位(-19.3 ± 2.5)mV?SVEC4-10细胞MAdCAM-1的表达与TNF-α刺激时间成正相关?并且,当TNF-α浓度达到20 ng/ml时,MAdCAM-1的表达达到峰值?体外寻靶试验表明,该靶向造影剂较多并牢固地黏附到表达MAdCAM-1的细胞周围;携IgG2a的同型对照组未见明显结合?结论:成功制备出桥连MECA-367的靶向长循环脂膜超声造影剂,该造影剂在体外对高表达MAdCAM-1的炎性细胞模型有较强的特异性亲和力;TNF-α诱导SVEC4-10细胞建立炎症性肠病细胞模型的方法简便易行?     

Hydrogen peroxide myocardial perfusion contrast echocardiography: I. Experimental study

Summary Myocardial perfusion contrast two-dimentional echocardiography (2-DE) is a new method for determining the extent of experimental myocardial ischemia and infarction. 172 aortic root injections of a fresh mixture of 1 ml of 0.75 % hydrogen peroxide (H₂O₂) and blood, and 75 pulmonary wedge injections of 1 ml of 3 % H₂O₂ were given to 24 open-chest dogs before and after ligation of the left anterior descending coronary artery (LAD) and four short-axis and long-axis views of the left ventricle were examined. 164 (95%) aortic root injections and 30 (40 %P< 0.05) pulmonary wedge injections showed homogeneous echocardiographic contrast intensification of normal myocardium before ligation of LAD and distinctly delineated echocardiographic contrast defect after ligation of LAD. When compared with aortic root injection, H₂O₂ pulmonary wedge injection has the adventage of less invasiveness and remains to be further studied. This project was supported by the Science Fund of the Chinese Academy of Sciences