SCID小鼠在制备人单克隆抗体中的应用

由CB-17纯系小鼠突变而来的重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠的突出特点为T-B淋巴细胞功能联合缺陷.此特点决定了它可接受人器官组织移植物,形成人-鼠嵌合体:SCID-hu小鼠,为以往不能在人体上进行的人类生物医学实验开辟了一条新的途径,同时也为人单克隆抗体的深入研究头来了新的希望.本文讨论了在SCID小鼠中进行异种移植的条件以及利用SCID-hu小鼠进行人单抗研究的一些进展.     

人化SCID小鼠对肝癌抗原的体液免疫应答

为了较真实地反应人体内免疫系统对肝癌抗原的免疫应答，我们选择了ＳＣＩＤ小鼠作为模型。实验选择４～１２周龄ＳＣＩＤ小鼠（免疫缺陷特性稳定），用人胎肝和胸腺细胞悬液（２×１０７／只）经腹腔注射途径及用适量（５００Ｕ／只）ＩＬ－２诱导，对其进行了免疫重建。...     

人源化NOD/SCID小鼠的细胞免疫重建

目的探讨人脐带血CD34+细胞移植于非肥胖性糖尿病/重症联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠后的免疫重建作用。方法免疫磁珠法分选人脐血CD34+细胞,经外侧尾静脉移植于亚致死量照射的NOD/SCID小鼠。移植后4、6、8、10周流式细胞术动态监测小鼠外周血人源CD45+、CD3+、CD56+细胞的数量;10周后PCR检测小鼠骨髓人ALU基因的表达,免疫组织化学染色检测小鼠脾脏人源CD3+、CD56+细胞的表达。结果 NOD/SCID小鼠经照射后骨髓腔内有核细胞及巨细胞数量均明显减少或消失,达到理想的清髓预处理效果;移植后4、6、8、10周,移植组所有存活小鼠外周血均可检测到人源性CD45+、CD3+、CD56+细胞的表达,人源淋巴细胞的数量随时间的延长而变化,8周时达到高峰,10周仍有较高的比例。10周时移植组所有存活小鼠骨髓细胞均检测到人ALU基因的表达,脾脏均检测到人CD3+、CD56+细胞;未移植组小鼠照射后2周内全部死亡。结论经照射后的NOD/SCID小鼠通过移植人脐血CD34+细胞成功地建立了hu-SRC-NOD/SCID模型,并有效地重建了小鼠细胞免疫系统。     

人源化SCID小鼠模型的建立及其鉴定

目的：探讨在SCID小鼠体内移植人免疫细胞，建立人源化SCID小鼠模型及其特性鉴定。方法：SCID小鼠腹腔注射环磷酰胺（CTX）抑制骨髓造血，连续4天后，通过腹腔注射移植人外周血单个核细胞（PBMC）。4、8和12周后分别取小鼠外周血、脾脏、肝脏。荧光显微镜下观察SCID小鼠外周血中人CD3^＋、CD19^＋细胞；流式细胞仪测定全血中人CD3^＋、CD19^＋细胞百分率；免疫组织化学分析SCID小鼠肝脏和脾脏中人CD3^＋、CD19^＋细胞；ELISA检测SCID小鼠血清中人免疫球蛋白含量。结果：（I）SCID小鼠移植人外周血单个核细胞4、8和12周后在小鼠外周血中通过荧光显微镜下可观察到人CD3^＋、CD19^＋细胞，4周后流式细胞仪测得小鼠外周血单个核细胞中人CD19^＋、CD3^＋细胞百分率分别为10．6％、31．7％；（2）免疫组织化学结果显示在小鼠脾脏中存在人CD3^＋、CD19^＋细胞；（3）移植人外周血单个核细胞4、8和12周后ELISA测得小鼠血清中人免疫球蛋白的含量分别为390、1100和1040μg／ml。结论：成功地在SCID小鼠体内建立了人免疫系统。     

脐血造血干/祖细胞移植SCID小鼠的实验研究

目的 :检测扩增后脐血造血干 祖细胞的体内移植能力和造血活性 ,建立脐血细胞体外扩增优化方案和体内移植的SCID小鼠模型。方法 :采用无基质接触的液体悬浮培养方法扩增脐血CD34 细胞 ,将扩增前后的细胞移植给预先经过亚致死量辐照的SCID小鼠 ,4w后通过免疫荧光标记、PCR等检测存活小鼠体内的人源细胞。结果 :连续培养一定时间后 ,FL TPO SCF IL 6组脐血细胞得到持续扩增 ,并能维持一定比例的CD34 细胞 ;SCF IL 3 IL 6 GM CSF EPO组在第 2周时集落形成数已降低 ,第 4周时集落形成的细胞、CD34 细胞已基本检测不到。移植至少 4w后 ,在存活小鼠体内检测到人CD4 5 细胞和Alu基因。结论 :因子组合FL TPO CSF IL 6可以有效扩增脐血CD34 细胞 ,而且扩增后的细胞具有较高的移植效率和造血活性     

SCID小鼠体内人体肿瘤移植及其人体免疫功能重建

目的观察高转移性人肺巨细胞癌系（ＰＧ）及转染了白细胞介素６基因的ＰＧ细胞（ＰＧＴＳ７）在ＳＣＩＤ小鼠及免疫重建ＳＣＩＤ小鼠体内的生长及转移行为,阐明ＰＧＴＳ７自分泌的白细胞介素６增强人体免疫的抗肿瘤作用。方法皮下移植人体肿瘤,部分受体鼠同时经腹腔注射人体外周血淋巴细胞。观察成瘤潜伏期、成瘤率、生长速度、体积、肺及淋巴结转移率和小鼠血清中人体免疫球蛋白（ＨＩｇ）的含量。结果全部动物见肿瘤生长,但ＰＧＴＳ７在免疫重建鼠体内成瘤潜伏期延长,肿瘤体积小、淋巴结转移率低,而血清中ＨＩｇ含量高。结论（１）ＳＣＩＤ小鼠亦为研究ＰＧ及ＰＧＴＳ７生长及转移的良好动物。（２）ＰＧＴＳ７自分泌白细胞介素６能刺激小鼠体内人淋巴细胞增殖、活化,增加ＨＩｇ的产生,降低肿瘤生长及淋巴结转移。     

重建SCID小鼠免疫功能对肝癌抗原的体液免疫应答

为在ＳＣＩＤ小鼠体内获得人免疫Ｂ淋巴细胞，将１２～１４周龄的胎儿肝细胞（１～２）×１０１０／Ｌ腹腔注射于ＳＣＩＤ小鼠，然后再分次接种肝癌细胞。用ＥＬＩＳＡ法于第４，５，６周连续检测ＳＣＩＤ－ｈｕ小鼠血清人ＩｇＧ；用免疫组化ＡＢＣ法检测各种组织中的人淋巴细胞。各实验小鼠均检测到人ＩｇＧ的存在，最高为３９１μｇ／Ｌ，且随时间的延长呈上升趋势。在ＳＣＩＤ－ｈｕ小鼠肝、脾及腹腔接种瘤组织的周边，可见人ＣＤ３＋和ＣＤ２０＋的淋巴细胞。上述结果表明，用人胎肝细胞移植可在ＳＣＩＤ小鼠体内获得人淋巴细胞，并对人肝癌细胞抗原产生免疫应答，分泌一定水平的抗人肝癌的抗体。提示：用人胎肝细胞在ＳＣＩＤ小鼠体内可建立人免疫系统的部分功能。     

两种人化SCID小鼠的建立及其免疫应答性

将人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）和腹腔淋巴结淋巴细胞（ＰＬＮＬ）移植入严重联合免疫缺陷疾病（ＳｅｖｅｒｅＣｏｍｂｉｎｅｄＩｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｔＤｉｓｅａｓｅ，ＳＣＩＤ）小鼠腹腔，建立人化ＳＣＩＤ小鼠（即ＳＣＩＤ－ｈＰＢＬ，ＳＣＩＤ－ｈＰＬＮＬ）。两个月后，两种人化小鼠体内淋巴器官都可以检测到人Ｔ、Ｂ淋巴细胞分布；小鼠血清人源性ＩｇＧ和抗ＥＢ病毒壳抗原ＩｇＧ抗体水平（ＩｇＧ／ＶＣＡ）比较显示，用Ｂ９５８死细胞作为ＶＣＡ来源所诱导的实验组１０只小鼠，ＩｇＧ／ＶＣＡ阳性率为７０％（７／１０），对照组为１７％（２／１２）。１４只ＳＣＩＤ－ｈＰＬＮＬ小鼠血清内人ＩｇＧ／ＶＣＡ的几何平均滴度（ＧＭＴ）和血清ＩｇＧ浓度在１∶１０８和９６．２±５６．４μｇ／Ｌ；在另８只ＳＣＩＤ－ｈＰＢＬ中为１∶７．９和１３．８４±６．０μｇ／Ｌ。实验提示，ＳＣＩＤ－ｈＰＬＮＬ小鼠较ＳＣＩＤ－ｈＰＢＬ小鼠更适合于人源性特异ＩｇＧ的诱导。     

SCID小鼠接种人白血病细胞HL-60的流式细胞术分析

腹腔及静脉注入人白血病细胞HL 6 0建立人白血病异种移植模型 ,采用流式细胞仪检测HL 6 0细胞表面标志CD33、DNA含量及周期分布 ,及病理组织学检查观察其生长特性。结果显示 ,实验接种的HL 6 0细胞在放射线处理或未处理的SCID小鼠体内均能生长 ,发生全身性白血病。 3周时外周血即可见白血病细胞浸润 ,受累肝、脾增生期细胞比例增加 ,iv接种 5× 10 6HL 6 0细胞 ,在发病晚期 ,骨髓细胞中CD33+ 细胞占 3 79%和 2 97% ;ip接种 1 0× 10 7的SCID小鼠 ,其骨髓细胞中CD33+ 率为 12 32 %。提示HL 6 0 /SCID小鼠模型为良好的肿瘤体内研究模型 ,以CD33阳性率判断模型中肿瘤细胞浸润指标能快速、客观地判断病情。     

SCID小鼠在脐血造血干/祖细胞移植研究中的应用

严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠是研究人造血干细胞增殖分化的一个理想的体内试验模型 ,近年来脐血造血干 /祖细胞体外扩增的研究成为干细胞移植领域备受关注的课题 ,通过采用有效的体内试验模型来进一步深入了解扩增后脐血造血细胞的移植潜能和造血活性。本文就SCID小鼠在脐血造血干 /祖细胞体外扩增和移植中应用作一综述     

SCID小鼠-人白血病模型在白血病研究中的应用新进展

本文综述了白血病细胞在重症联合免疫缺陷（severe combined immunodetlciency,SOD）小鼠体内的增殖、分化及发病机制的研究进展，并介绍了SCID小鼠．白血病模型在白血病发病学、白血病细胞生物学、临床诊疗措施和病人预后判断等方面的可能性应用价值，SCID小鼠-人白血病模型为白血病的深入研究提供了新的手段。     

SCID小鼠-人白血病模型在白血病研究中的应用新进展

本文综述了白血病细胞在重症联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠体内的增殖、分化及发病机制的研究进展,并介绍了SCID小鼠-白血病模型在白血病发病学、白血病细胞生物学、临床诊疗措施和病人预后判断等方面的可能性应用价值,SCID小鼠-人白血病模型为白血病的深入研究提供了新的手段。     

用SCID小鼠可提供高产量的抗人HLA单抗

用ＳＣＩＤ小鼠可提供高产量的抗人ＨＬＡ单抗［英］／ＰｉｓｔｉｌｌｏＭｐ…／／ＨｕｍａｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ。－１９９２，２５（１）。－２５６～２５９ＳＣＩＤ（严重联合免疫缺陷症）小鼠缺乏功能性Ｔ，Ｂ淋巴细胞，但仍有ＮＫ细胞功能。最近，ＳＣＩＤ小鼠已用...     

SCID小鼠在脐血造血干／祖细胞移植研究中的应用

严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠是研究人造血干细胞增殖分化的一个理想的体内试验模型，近年来脐血造血干／祖细胞体外扩增的研究成为干细胞移植领域备受关注的课题，通过采用有效的体内试验模型来进一步深入了解扩增后脐血造血细胞的移植潜能和造血活性。本文就SCID小鼠在脐血造血干／祖细胞体外扩增和移植中应用作一综述。     

人源化NOD/SCID小鼠免疫细胞的动态变化与鉴定

目的： 比较脐血干细胞与单个核细胞移植NOD/SCID鼠所建立的人源化SCID模型，分析人源化淋巴细胞重建。方法： 磁珠分选法分离脐血中CD34⁺细胞，淋巴细胞分层液分离脐血单个核细胞，分别经尾静脉输入NOD/SCID小鼠。每隔2周采血至10周，流式细胞术动态检测人源淋巴细胞CD45、CD19、CD3抗原。第10周处死小鼠收集外周血、骨髓、胸腺组织，RT-PCR检测模型鼠组织中人β₂M基因及RAG2基因。结果： 两种类型细胞移植均可重建人源免疫细胞，人源淋巴细胞表达水平均在第8周达高峰。骨髓中人源淋巴细胞表达水平明显高于外周血。RT-PCR在外周血与骨髓检测到人β₂M基因及RAG2基因标志。结论： CD34⁺细胞移植重建人源化NOD/SCID免疫系统模型效果要好于脐血单个核细胞。人源T淋巴细胞在模型鼠骨髓中分化成熟。     

SCID小鼠NK细胞功能及其对异基因移植的影响

重症联合免疫缺陷病小鼠(SCID)由C.B-17纯系小鼠基因突变而来。其突出特点是T、B淋巴细胞功能联合缺陷,能接受人的器官移植物,被称为活体动物试管。接受人体器官移植后的SCID 小鼠称为SCID-人,这种人-鼠嵌和体代表人类生物学研究的新途径,其有可能代替人体而应用于任何在人体上无法进行的实验研究,特别是AIDS 病的研究,但SCID 体内NK 细胞比正常C.B-17小鼠高4倍,经Poly(?)-C 诱导后增强7倍。其脾细胞无成熟T、B 细胞表面标志(Ig,lyt-1,lyt-2)而NK 细胞表面标志高(NK2.1,GM-1,MAC-1)。同时SCID 小鼠LAK 细胞功能也比正常对照高。在异基因组织移植研究中,SCID 小鼠能排斥异基因的骨髓移植物,这种排斥作用是由NK 细胞引起的,因此,SCID 体内的NK、LAK 细胞必然影响SCID-人动物型的完满建立。用进一步缺陷的小鼠有可能替代SCID 小鼠,推动人-鼠嵌合体的研究。     

014 SCID小鼠在脐血造血干/祖细胞移植研究中的应用

严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠是研究人造血干细胞增殖分化的一个理想的体内试验模型,近年来脐血造血干/祖细胞体外扩增的研究成为干细胞移植领域备受关注的课题,通过采用有效的体内试验模型来进一步深入了解扩增后脐血造血细胞的移植潜能和造血活性.本文就SCID小鼠在脐血造血干/祖细胞体外扩增和移植中应用作一综述.