健脾理气方联合rIL—2对荷瘤小鼠化疗免疫抑制的影响

研究联合应用中药健脾理气方和重组白细胞介素－２对肿瘤化学治疗免疫抑制的影响。方法用环磷酰胺给Ｈ２２荷瘤小鼠化疗，造成免疫抑制，应用中药健脾理气方和ＩＬ－２联合治疗后，用＾３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测荷瘤小鼠的ＮＫ、ＬＡＫ细胞活性＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测脾细胞增殖活性，ＦＡＣＳ法检测ＩＬ－２受体，Ｌ３Ｔ４，ＬＹ２阳性细胞数。结果采用大剂量ＣＴＸ后，荷瘤鼠脾重，脾细胞数，脾细胞增殖及杀伤能力均明显降低。Ｔ细     

肺癌常用化疗药物对IL－2诱导LAK细胞活性的影响

选用３Ｈ－ＴｄＲ释放法及掺入法分别检测ＬＡＫ细胞活性、ＬＡＫ细胞增殖功能及９种临床常用肺癌化疗药物对ＬＡＫ细胞抗肿瘤活性的影响。结果显示，不同化疗药物对ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性的影响不同，同种化疗药物不同浓度间的影响也有差异。卡铂（Ｃａｒｂｏ）、足叶乙甙（ＶＰ１６）、５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）有增强作用；环磷酰胺（ＣＴＸ）、顺铂（ＣＤＤＰ）、长春新碱（ＶＣＲ）、甲氨喋呤（ＭＴＸ）对ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性无明显影响；阿霉素（ＡＤＭ）、丝裂霉素（ＭＭＣ）在较高浓度时，抑制ＬＡＫ细胞活性产生。除ＣＴＸ外的８种药物均显著抑制ＬＡＫ细胞增殖功能。实验表明：常规剂量的化疗不会抑制ＬＡＫ细胞活性的产生，５－Ｆｕ、Ｃａｒｂｏ、ＶＰ１６与ＩＬ－２结合抗癌可望产生协同疗效．ＩＬ－２先于化疗给药并维持至化疗后一定时间，其联合抗癌效果可能更佳。     

可溶性白细胞介素－2受体在体外对白细胞介素－2介导免疫反应的抑制

用酶联免疫吸附法￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法探讨了可溶性白细胞介素－２受体（Ｓｏｌｕｂｌｅｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｓＩＬ－２Ｒ）与ｒＩＬ－２的结合特性以及ｓＩＬ－２Ｒ对ＩＬ－２依赖性ＣＴＬＬ－２细胞、ＰＨＡ激活的正常人外周血淋巴细胞增殖反应的作用，结果显示ｓＩＬ－２Ｒ保持了与ｒＩＬ－２结合的特性。在体外ｓＩＬ－２Ｒ对ＰＨＡ诱导正常人ＰＢＬ增殖以及ＣＴＬＬ－２细胞、ＰＨＡ－ＰＢＬ对ＩＬ－２依赖性增殖均有明显的抑制作用，尤其高浓度的ｓＩＬ－２Ｒ抑制作用更为突出。     

人IL－4抗肿瘤的实验研究

在ＭＬＲ中，ＩＬ－４诱导的特异ＣＴＬ的杀伤活性强于ＩＬ－２，但ＩＬ－２对ＣＴＬ的促增殖作用强于ＩＬ－４。用人急性淋巴细胞白血病细胞株ＴＢＬ－Ｅ在裸鼠建立了人的实体瘤模型。用人ＩＬ－４十人ｒＩＬ－２联合诱导的人ＬＡＫ细胞注入荷瘤裸鼠，同时输注细胞因子。结果显示ＩＬ－２组疗效好于ＩＬ－４组，ＩＬ－２＋ＩＬ－４组疗效和ＩＬ－２相似，但可延长肿瘤形成的时间。     

可溶性白细胞介素—2受体在体外对白细胞介素—2介导免疫反应的…

用酶联免疫吸附法及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法探讨了可溶白细胞介素－２受体与ｒＩＬ－２的结合特性以及ｓＩＬ－２Ｒ对ＩＬ－２Ｒ依赖性ＣＴＬＬ－２细胞、ＰＨＡ激活的正常人外周血淋巴细胞增殖反应的作用。结果显示ｓＩＬ－２Ｒ保护了与ｒＩＬ－２结合的特性。     

人IL—4抗肿瘤的实验研究

在ＭＬＲ中，ＩＬ－４诱导的特异ＣＴＬ的杀伤活性强于ＩＬ－２，但ＩＬ－２对ＣＴＬ的促增殖作用强于ＩＬ－４。用人急性淋巴细胞白血病细胞株ＴＢＬ－Ｅ在裸鼠建立了人的实体瘤模型。用人ＩＬ－４十人ｒＩＬ－２联合诱导的人ＬＡＫ细胞注入荷瘤裸鼠，同时输注细胞因子。结果显示ＩＬ－２组疗效好于ＩＬ－４组，ＩＬ－２＋ＩＬ－４组疗效和ＩＬ－２相似，但可延长肿瘤形成的时间。     

联合应用IL—2和IL—3的基因疗法增强骨髓移植后骨髓细胞毒活…

探讨联合应用成纤维细胞介导和ＩＬ－２和ＩＬ－３的基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠抗肿瘤作用的效果及机理。将分别转梁ＩＬ－２基因及ＩＬ－３基因的ＮＩＨ３Ｔ３的细胞以单独或联合方式移植至ＢＭＴ的荷瘤小鼠腹腔内８ｄ后，取出小鼠骨髓细胞检测杀伤活性的变化以及ＩＬ－２受体的表达，并观察荷瘤小鼠的存活期。结果：ＩＬ－３基因治疗虽然可加速ＢＭＴ后造血重建过程，但对骨髓细胞的ＮＫ，ＬＡＫ活性具有一定的抑制作用；     

联合应用IL-2和IL-3的基因疗法增强骨髓移植后骨髓细胞毒活性及抗肿瘤效果的实验研究

目的：探讨联合应用成纤维细胞介导ＩＬ２和ＩＬ３的基因疗法对骨髓移植（ＢＭＴ）后荷瘤小鼠抗肿瘤作用的效果及机理。方法：将分别转染ＩＬ２基因及ＩＬ３基因的ＮＩＨ３Ｔ３细胞以单独或联合方式移植至ＢＭＴ的荷瘤小鼠腹腔内８ｄ后，取出小鼠骨髓细胞检测杀伤活性的变化以及ＩＬ２受体的表达，并观察荷瘤小鼠的存活期。结果：ＩＬ３基因治疗虽然可加速ＢＭＴ后造血重建过程，但对骨髓细胞的ＮＫ、ＬＡＫ活性具有一定的抑制作用；ＩＬ２基因治疗可明显提高骨髓细胞的杀伤活性；联合应用基因治疗后荷瘤小鼠骨髓ＮＫ、ＬＡＫ活性及骨髓细胞ＣＤ２５表达升高，明显延长大剂量化疗后接受ＢＭＴ的荷瘤小鼠的存活期。结论：联合应用ＩＬ２和ＩＬ３的基因疗法能协同提高骨髓细胞ＩＬ２受体表达水平，提高骨髓细胞毒活性，增强ＢＭＴ后的抗肿瘤效果。     

抗瘤Ⅰ号对小鼠体内细胞因子产生及NK细胞活性的影响

抗瘤Ⅰ号（ＡＴ－Ⅰ）是临床抗肿瘤及肿瘤辅助治疗的有效复方中药制剂。实验检测了ＡＴ－Ⅰ对正常及荷瘤小鼠体内ＩＬ－２、ＩＬ－６产生及ＮＫ细胞活性的影响，结果显示ＡＴ－Ⅰ对正常小鼠ＩＬ－２、ＩＬ－６及荷瘤小鼠ＩＬ－２产生均有促进作用；同时还能提高正常及荷瘤小鼠ＮＫ细胞的杀伤活性，提示ＡＴ－Ⅰ是具有生物反应调节作用的中药制剂。     

协同刺激信号α—CD28单抗增强肿瘤特异性CTL体内外的杀瘤活性

目的 采用α－ＣＤ２８单抗增强α－ＣＤ３单抗刺激的肿瘤特异性Ｔ细胞的杀瘤活性。方法 采用２种方案培养ＦＢＬ－３免疫的小鼠脾细胞。（１）使用α－ＣＤ３单抗４８ｈ后,加入α－ＣＤ２８单抗同时使用４８ｈ后,加入α－ＣＤ３单抗、α－ＣＤ２８单抗和２０Ｕ／ｍｌ ｒＩＬ－２（α－ＣＤ３＋α－ＣＤ２８＋ＩＬ－２组）。＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测两组效应细胞的增殖水平。标准４ｈ－＾５１Ｃｒ释放法检测两组效应细胞的杀伤     

健脾理气方药抑制HepG2人肝癌细胞增殖及诱导其凋亡的形态学研究

目的：探讨中药复方健脾理气治疗肝癌的作用机制。方法：采用血清药理学方法，制备药物血清。应用MTT法测定细胞增殖抑制率，通过电镜技术检测药物血清作用后对细胞凋亡的影响。结果：药物血清作用24h，中药小剂量组未见明显抑制作用，其余各组均表现出不同程度的抑制作用，中药大剂量组抑制率达8．81％；作用48h，中药小剂量组出现抑制作用,各药物血清组随着作用时间的延长抑制更明显，中药大剂量组抑制率达39．27％,抑制效应呈时间依赖性。药物血清作用48h后，电镜观察，可见肝癌细胞出现典型的细胞凋亡的形态学改变。结论：健脾理气具有明显抑制人肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞凋亡的作用，提示抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡是健脾理气方药治疗肝癌的重要作用机制之一。     

仁术健脾理气颗粒对阿托品致胃肠动力障碍大鼠胃肠运动的影响

[目的] 观察仁术健脾理气颗粒对阿托品致胃肠动力障碍大鼠胃肠运动的影响。[方法] SD大鼠72只,随机分为正常组、模型组、仁术健脾理气颗粒高、中、低剂量组、吗丁啉组,每组各12只。各组大鼠予生理盐水或相应剂量药物10 mL/kg灌胃,持续5 d。末次给药20 min后正常组大鼠予腹腔注射生理盐水,其余各组均予腹腔注射硫酸阿托品注射液（2 mg/kg）,20 min后以半固体营养糊灌胃法检测各组大鼠胃残留率和小肠推进率。[结果] 与模型组相比,仁术健脾理气颗粒各剂量组和吗丁啉组胃残留率均显著降低（P<0.05,P<0.01）,小肠推进率显著升高（P<0.01）。[结论] 仁术健脾理气颗粒可改善胃肠动力障碍大鼠胃肠运动功能。     

健脾理气、祛湿化瘀解毒法治疗晚期结直肠癌临床研究

目的 评估健脾理气、祛湿化瘀解毒法治疗晚期结直肠癌的临床疗效.方法 将80例晚期结直肠癌患者随机分为中药组和对照组,每组各40例,中药组予以健脾理气、祛湿化瘀解毒中药,同时给予必要对症治疗,对照组给予单纯最佳支持治疗(BSC),观察两组临床症状、生存质量(KPS)、免疫指标、心电图、血常规及肝肾功能的变化情况,并随访患者疾病进展时间(TTP).结果 在改善临床症状方面中药组治疗后较治疗前症状积分降低,前后比较有统计学意义(P＜0.05),治疗后两组比较,中药组显著优于对照组(P＜0.05);在提高生存质量(KPS)方面,中药组治疗后较治疗前KPS评分升高,前后比较有统计学意义(P＜0.05),治疗后中药组生存质量优于对照组有统计意义(P＜0.05);在免疫指标方面,中药组治疗后NK细胞活性及CD4/CD8比值均上升,前后比较有显著统计学意义(P＜0.05),治疗后中药组免疫指标提高较对照组有统计意义(P＜0.05);治疗前后两组心电图、血常规、肝肾功能无明显变化;在疾病进展时间方面,中药组的TTP为6个月,对照组TTP为3个月,中药组TTP较对照组延长3个月,两组比较有显著统计学意义(P＜0.05).结论 健脾理气、祛湿化瘀解毒法治疗晚期结直肠癌患者在改善临床症状、提高生存质量和免疫力、延长无疾病进展时间等方面都具有较好的疗效.     

黄芪注射液对环磷酰胺治疗H22荷瘤小鼠免疫功能的影响

[目的]研究黄芪注射液对环磷酰胺(CTX)化疗H22荷瘤小鼠的增效减毒作用及机制.[方法]采用移植性H22肝癌小鼠模型,随机分为模型组、CTX处理组、CTX+黄芪注射液高、中、低剂量联合用药组.各治疗组腹腔注射CTX 20 mg/kg,隔日1次,共5次;每次注射后6h分别腹腔注射生理盐水以及12、8、4 g/kg黄芪注射液0.2 ml/只,于末次给药后24 h,检测各组小鼠的抑瘤率、外周血白细胞数、脾指数、胸腺指数、IL-2、TNF-α等指标.分析黄芪注射液对CTX的增效减毒作用及机制.[结果]单用CTX组抑瘤率为61.8％,联用黄芪注射液低、中、高剂量组的抑瘤率分别为61.3％、67.5％、77.5％,其中CTX+黄芪注射液高剂量联合用药组与单用CTX组抑瘤率比较,抑瘤率有显著性差异(P＜0.05).黄芪注射液各组联用CTX与单用CTX组比较,可不同程度地升高荷瘤小鼠的白细胞数和胸腺指数、脾指数,且能提高荷瘤小鼠血清中IL-2和TNF-α的水平(P＜0.05).[结论]黄芪注射液可明显提高化疗后免疫缺陷小鼠的免疫功能,临床上可用于化疗后的辅助治疗.     

健脾理气方配合肝动脉化疗灌注栓塞治疗原发性肝癌的临床疗效及安全性分析

目的分析健脾理气方配合肝动脉化疗灌注栓塞治疗原发性肝癌的临床疗效及安全性。方法选取2015年2月～2019年2月在我院接受治疗的原发性肝癌患者86例,采用随机数字表法分为两组,各43例。两组均行肝动脉化疗栓塞治疗,对照组在肝动脉化疗栓塞治疗后给予常规西医治疗,观察组则加用健脾理气方治疗。对比两组临床疗效、治疗前后肝功能水平变化及不良反应。结果观察组治疗有效率为60.47%,高于对照组37.21%,差异有统计学意义(P0.05);观察组治疗后ALT水平为(66.42±18.25)U/L、AST水平为(73.66±10.28)U/L、TBIL水平为(30.63±11.29)mmol/L,均低于对照组的(90.17±16.34)U/L、(120.41±20.69)U/L、(36.28±13.71)mmol/L,差异有统计学意义(P0.05);观察组骨髓抑制、感染、恶心呕吐、肝功能损伤发生率分别为25.58%、6.98%、16.28%、27.91%,均低于对照组的46.51%、23.26%、34.88%及48.84%,差异有统计学意义(P0.05)。结论健脾理气方配合肝动脉灌注化疗栓塞介入治疗原发性肝癌可获得较好的临床疗效,有利于改善肝功能指标,缓解化疗产生的不良反应,值得推广应用。     

益气健脾方对化疗后骨髓及免疫功能影响简

目的：探讨益气健脾方对环磷酰胺化疗后骨髓抑制及免疫抑制的影响。方法：灌胃第11天：眼眶取血,进行血细胞分析;采用称重法测定胸腺、脾脏重量并计算脏器指数;腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定;NK细胞活性检测。结果：益气健脾方显著提高化疗小鼠胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性。结论：益气健脾方具有促进骨髓细胞生长,提高机体免疫功能,抵御化疗所引起的骨髓抑制及免疫功能下降的作用。     

补肾健脾固冲方对未成年雌性大鼠子宫内膜微环境的影响

目的:探讨补肾健脾固冲方对未成年雌性大鼠子宫内膜微环境的影响。方法:选用未成年雌性Wistar大鼠75只,随机分为空白对照组、已烯雌酚组、补肾健脾固冲高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组15只,空白对照组给予等体积去离子水,己烯雌酚组给予已烯雌酚0.067 mg·kg~(-1),补肾健脾固冲高、中、低剂量组给药剂量分别为30 g·kg~(-1)、15 g·kg~(-1)、7.5 g·kg~(-1)(以生药量计)。各组每日灌胃给药1次,均连续给药4周。末次给药后,测定血清及子宫内膜组织前列腺素E2含量、子宫内膜微血管密度以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。结果:与空白对照组比较,己烯雌酚组、补肾健脾固冲高剂量组、中剂量组血清及子宫内膜组织中前列腺素E2表达均较低,差异有统计意义(P0.05);空白对照组子宫内膜微血管密度显著低于己烯雌酚组及补肾健脾固冲高、中、低剂量组,差异均有统计学意义(P0.01),补肾健脾固冲高、低剂量组与己烯雌酚组比较,差异有统计学意义(P0.05);空白对照组子宫内膜功能层腺上皮细胞和间质细胞VEGF蛋白表达程度显著低于己烯雌酚组及补肾健脾固冲高、中、低剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:补肾健脾固冲方可以降低大鼠血清和组织中的前列腺素E2含量,增加子宫内膜微血管密度,提高VEGF蛋白表达,从而调节子宫内膜微环境。     

补虚化瘀方拮抗细胞毒剂所致荷瘤小鼠骨髓抑制的实验研究

目的　观察补虚化瘀方对荷瘤小鼠化疗后骨抑制及血液流变学的影响。方法　对接种P388白血病瘤株的小鼠 ,当天即开始予补虚化瘀方灌胃 ,连用 1 3天。将给药小鼠分为高、低剂量组 ,另设正常、模型、化疗对照组。接种后第 6日、 7日分别给化疗、高剂量、低剂量组腹腔注射环磷酰胺(1 5 0mg/kg)、阿糖胞苷 (1 5 0mg/kg)联合冲击化疗。用流式细胞仪检测小鼠骨髓细胞增殖周期以及血液流变学的变化。结果 (1 )化疗使荷瘤小鼠骨髓细胞合成期 (S)细胞数降低 (P <0 0 1 ) ,在中药高剂量组骨髓细胞合成期 (S)细胞数升高 (P <0 0 1 ) ,并恢复至正常水平 (P >0 0 5 )。 (2 )小鼠荷瘤状态血液粘滞度增高 ,微循环障碍 ,化疗又进一步加重以上反应。中药高剂量组血液粘滞度降低、微循环得到改善 (P <0 0 5 )。结论　补虚化瘀方对环磷酰胺、阿糖胞苷所致荷瘤小鼠骨髓抑制有一定的保护作用 ;对异常的血液流变学有一定的改善作用     

化疗联合中药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长及TMSG-1表达的影响

目的 探讨磷酰胺（CTX）与破壁灵芝孢子粉联合用药、CTX与健脾益肾颗粒联合用药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长及TMSG-1蛋白表达的影响,为转移性乳腺癌的分子诊断和临床用药治疗提供实验理论依据.方法 将乳腺癌细胞株MCF-7注入裸鼠体内,建立移植瘤模型.将24只移植瘤接种成功的裸鼠分为CTX模型组、CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组和生理盐水对照组,每组6只.观察各组裸鼠的一般情况、体重及移植瘤体积、重量,用免疫组化检测各组移植瘤细胞TMSG-1蛋白的表达水平,用流式细胞仪检测各组移植瘤癌细胞凋亡情况.结果 CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组能有效抑制裸鼠皮下移植瘤体积及重量,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组的抑瘤率高于模型组（P〈0.01）;CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组移植瘤的TMSG-1蛋白表达明显高于对照组和模型组（P〈0.05）;流式细胞仪定量分析显示模型组、CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组的细胞凋亡率明显高于对照组（P〈0.05）.结论 破壁灵芝孢子粉与CTX联合用药、CTX与健脾益肾颗粒联合用药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长有显著抑制增殖和促凋亡作用,同时还可以上调TMSG-1蛋白的表达起到抗肿瘤转移作用.     

环磷酰胺对小鼠淋巴瘤对数杀灭动力学与"治愈性"化疗策略

目的：探讨化疗对肿瘤细胞对数杀灭效果定量评价对肿瘤“治愈性”化疗策略的指导意义。方法：移植津白Ⅱ号小鼠淋巴瘤（L－TA2）,直径达10mm时开始环磷酰胺（CTX）50mg/kg腹腔内注射,每6天1次,共3次治疗,复发瘤以大剂量CTX（HD－CTX）100mg/kg腹腔内注射,每6天1次,共3次解救。计算治疗后隔日体积与细胞对数。结果：每次治疗杀灭对数在0－3．0范围波动明显,妆治对数杀灭呈递增趋势,部分缓解复发瘤对HD－CTX高度敏感,完全缓解后复发瘤明显耐药,且非足程治疗肿瘤仍复发。结论：一定剂量药物并非按恒定比例（对数）杀灭肿瘤细胞,定量评价每次化疗对肿瘤细胞对数杀灭效果和治疗后残瘤细胞负荷,对肿瘤“治愈性”化疗策略的制订和调整有重大指导意义。