游离脂肪酸对大鼠胰岛分泌功能和胰岛细胞凋亡的影响研究

目的：研究游离脂肪酸对体外培养SD大鼠胰岛功能和胰岛细胞凋亡的影响并探讨可能机制。方法：取健康雄性SD大鼠胰岛原代分离培养,分为6组,培养1d：NC1组（5．6mmol／L葡萄糖）、FFA1组（0．25mmol／L）、FFA2组（0．5mmol／L）;培养3d：NC2组（5．6mmol／L葡萄糖）、FFA3组（0．25mmol／L）、FFA4组（0．5mmol／L）;每组6个样本,每个样本20个胰岛。采用RT—PCR扩增胰岛素、PDX-1、Bax、Caspase-3基因mRNA表达,TUNEL法检测胰岛细胞凋亡率,放射免疫法检测胰岛素水平。结果：①FFA1、FFA2组Insulin、PDX-1基因表达量、胰岛素分泌较NC1组明显下降,FFA1、FFA2组凋亡基因Bax、Caspase-3表达量及胰岛细胞凋亡率较NC1组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;②FFA3、FFA4组Insulin、PDX-1基因表达量、胰岛素分泌较NC2组明显下降,FFA3、FFA4组凋亡基因Bax、Caspase-3表达量及胰岛细胞凋亡率较NC2组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：游离脂肪酸抑制体外培养SD大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌功能,其可能机制是FFA抑制胰岛素基因、PDX-1基因的合成,刺激胰岛细胞凋亡基因Bax、Caspase-3表达,并导致胰岛细胞凋亡,最终导致胰岛细胞分泌功能下降。     

细胞凋亡和线粒体凋亡途径在糖脂毒性导致胰岛β细胞功能衰竭中的作用

目的 探讨糖脂毒性引起高脂肥胖大鼠胰岛β细胞功能障碍的可能机制.方法 将高脂肥胖雄性Wistar大鼠18只分为3组.对照组6只经颈静脉插管输入生理盐水;高游离脂肪酸组(FFA组)6只输入脂肪乳+肝素:高糖高FFA组(GS-FFA组)6只输入葡萄糖液及脂肪乳+肝素.输注持续时间48 h.于输液前及输液结束时经颈动脉采血测定血β-羟丁酸(β-HBA)水平.输液结束后,采用静脉葡萄糖耐量试验(PCGTT)评价3组动物胰岛B细胞分泌功能.IVGTT后处死动物,留取胰尾组织病理标本,采用TLFNEL技术检测胰岛细胞凋亡水平,采用免疫组化技术测定胰岛细胞Cvt C、凋亡诱导因子、caspase-9和caspase-3表达水平.结果 (1)静脉输液结束时,3组大鼠血β-HBA水平均较基础值升高,其中GS-FFA组血p-HBA生成显著增加(P<0.05).(2)GS-FFA组大鼠ⅣGTT时胰岛素分泌指数(AI/AG)较对照组、FFA组明显减低(P<0.05).(3)3组大鼠中,GS.FFA组胰岛细胞凋亡比例显著增加(P<0.05),同时GS-FFA组胰岛细胞CytC、凋亡诱导因子、caspase-9及caspase-3表达水平显著增高(P相似文献   

血糖正常的肥胖患者胰岛β细胞功能和胰岛素敏感性的临床评价

目的用Botnia钳夹术评价血糖正常的肥胖患者胰岛β细胞功能和胰岛素敏感性。方法分别对15例正常人和15例肥胖患者进行Botnia钳夹术,即0～60min先进行静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）,随后60～180min进行高胰岛素正葡萄糖钳夹试验（简称正糖钳夹术）。以正糖钳夹稳态期胰岛素介导的葡萄糖利用率（Rd）来判定周围组织胰岛素敏感性,以IVGTT测定的第一时相胰岛素分泌（FPIR）与Rd值的乘积——处置指数（DI）来判定β细胞功能。结果肥胖者Rd（P=0.009）、DI（P=0.011）明显低于正常人。Rd与血清游离脂肪酸（FFA）明显负相关（r=-0.528,P=0.003）,FPIR与血尿酸（UA）、FFA明显负相关（r=-0.431,P=0.017;r=-0.473,P=0.008）。结论血糖正常的肥胖患者存在外周IR与β细胞功能异常。腹型肥胖,特别是高FFA血症可能在其中发挥重要作用。     

肥大细胞活化在高脂饲养大鼠胰岛纤维化形成中的作用

目的:探讨胰腺肥大细胞(MC)活化在高脂饲养大鼠胰岛纤维化发生中的作用。方法:8周龄雄性SD大鼠40只随机分为2组,正常饲养组(NC,n=20)、高脂饲养组(HF,n=20),每组各20只。每组大鼠饲养20周后检测空腹血糖、血胰岛素(Ins)、胰高糖素(Glc)、游离脂肪酸(FFA);正常血糖高胰岛素钳夹评价外周胰岛素抵抗程度;胰岛细胞表面灌注评价β及α细胞分泌功能;检测外周血炎症指标:TNF-α、IL-6,取胰腺组织制片,甲苯胺蓝染色显示肥大细胞并计数定量,免疫组织化学标记胰岛IL-6、TNF-α、苦味酸-天狼星红胶染色鉴别胰岛内沉积的胶原纤维类型。结果:(1)HF组大鼠葡萄糖输注率(GIR)明显低于NC组,血Ins、Glc、FFA水平显著高于NC组;(2)HF组大鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能明显下降(P<0.01);HF组大鼠基础Glc的分泌是NC组的3倍(P<0.01),16.7mmol/L葡萄糖灌注后Glc分泌未受抑制;(3)HF组大鼠胰岛纤维化,肥大细胞数量明显增多,部分细胞呈脱颗粒状。肥大细胞IL-6呈阳性表达。苦味酸-天狼星红胶染色结果:根据胰岛内纤维化的范围,将胰岛纤维化程度分为轻、中、重三度:轻度纤维化范围<30%;中度纤维化范围在>30%<60%之间;重度纤维化范围>60%胰岛纤维化,偏振光显微镜观察胰岛内沉积的纤维,主要为I型及III型胶原纤维,炎细胞浸润。结论:长期高脂饲养脂毒性使肥大细胞增生、活化脱颗粒释放致炎因子IL-6、TNF-α从而促进了胰岛内胶原纤维沉积。     

老龄SD大鼠胰岛β细胞形态功能研究

目的观察3组不同月龄SD大鼠糖脂代谢指标变化，了解在基础及葡萄糖刺激下胰岛β细胞胰岛素分泌、结构变化与老龄糖耐量减退的关系，探讨老龄糖耐量受损的机制。方法采用免疫组化、细胞体视学、透视电镜等方法观察5～6、11～12、20～24月龄SD大鼠胰岛及胰岛β细胞形态及胰岛素分泌水平；将胰岛β细胞分离后与两种不同质量浓度的葡萄糖培养，观察葡萄糖刺激下老龄大鼠β细胞胰岛素分泌水平。结果20～24月龄大鼠体质量、空腹血糖及血脂水平有增高；11～12、20～24月龄大鼠血清中游离脂肪酸（FFA）水平显著增高；对葡萄糖刺激出现峰值降低、达峰时间延迟；胰岛β细胞体积增大和细胞内胰岛素分泌量减少。老龄胰岛β细胞内线粒体和内质网肿胀，空泡变性。从11～12月龄大鼠开始，胰腺中平均胰岛面积随着年龄的增加而减少；但每个胰岛中平均胰岛β细胞的面积比例却有增加。结论老龄鼠在空腹血糖正常时即已具备胰岛素抵抗的某些特征；老龄大鼠胰岛β细胞虽然有面积比例增大，但β细胞基础和葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能减低。提示一旦糖代谢受损出现糖尿病，应尽早考虑胰岛素治疗同时改善胰岛素抵抗。     

不同饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠模型的比较

目的:应用不同饮食喂养大鼠,观察大鼠产生胰岛素抵抗(IR)的情况,同时观察大鼠游离脂肪酸(FFA)的变化。方法:分别以普通饲料、高糖饲料、高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周后,行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,对大鼠胰岛素抵抗程度进行评估,应用酶联免疫吸附方法检测大鼠血清中游离脂肪酸,测量大鼠体重、附睾脂肪垫重量。结果:高脂饲料、高糖高脂饲料组大鼠产生胰岛素抵抗,普通饲料、高糖饲料组未出现胰岛素抵抗,胰岛素抵抗组大鼠游离脂肪酸明显高于非胰岛素抵抗大鼠,胰岛素抵抗组大鼠体重及附睾脂肪垫重量明显高于非胰岛素抵抗大鼠。结论:高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周可成功地诱导大鼠产生胰岛素抵抗,胰岛素抵抗的产生可能与肥胖、高游离脂肪酸有关。     

氧化应激与β细胞脂性凋亡关系及机制研究

目的:观察长期高脂饮食对大鼠胰岛β细胞凋亡影响,探讨氧化应激相关因子及基因表达与β细胞脂性凋亡关系及可能机制.方法:41只SD雄性大鼠随机分为高脂饲料喂养的肥胖组(n=21)和普通饲料喂养的正常对照组(n=20),喂养28周后,检测血浆及胰腺组织中的丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)浓度;静脉葡萄糖耐量试验评价早相胰岛素分泌反应(AIR);TUNEL法观察胰岛β细胞凋亡情况并计数每个胰岛中β细胞凋亡率;采用荧光定量PCR(Real-time PCR)比较两组大鼠胰岛细胞解偶联蛋白-2(UCP-2)mRNA表达的情况.结果:28周时高脂饲养组血浆及胰腺组织中MDA高于正常饲养组(P<0 05),而高脂饲养组血浆及胰腺组织中GSH低于正常饲养组(P<0 01).与基础值比较,高脂饲养组糖负荷后胰岛素增高的幅度低于正常饲养组(3 0倍vs 5 7倍,P<0 05).高脂饲养组1 min后血糖浓度下降缓慢,3、5、10 min血糖水平均高于正常饲养组(P<0 05).高脂饲养组胰岛β细胞凋亡率比正常饲养组增加40 0%(P<0 01).高脂饲养组胰岛细胞UCP-2基因mRNA表达与正常饲养组相比升高22 4%(P<0 01).结论:高脂喂养28周后SD大鼠胰岛β细胞凋亡率明显增加,血浆及胰岛细胞中MDA升高、GSH降低, 而且胰岛细胞UCP-2基因mRNA表达升高,提示氧化应激可能参与了高脂引起的β细胞脂性凋亡.     

Exenatide对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性及脂联素、瘦素水平的影响

目的探讨Exenatide对高脂诱导胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠胰岛素敏感性及血浆脂联素、瘦素水平的影响。方法将69只清洁级健康雄性(SD)大鼠分为对照组(NC组,n=22),高脂组(HF组,n=23),Exenatide治疗组(HE组,n=24)。高脂诱导胰岛素抵抗大鼠给予Exenatide10周后,采用扩展胰岛素钳夹技术测定机体胰岛素敏感性和糖脂代谢,并观察血浆脂联素、瘦素水平的变化。结果高脂诱导IR大鼠经Exenatide处理(HE组)后,Lee's指数、空腹血浆游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇酯(TC)、低密度脂蛋白(LDL)明显降低(P<0.01),高密度脂蛋白(HDL)明显升高(P<0.01)。同时,HE组血浆脂联素水平明显升高(P<0.01),瘦素水平明显降低(P<0.01)。在钳夹稳态时,高脂组(HF)与对照组(NC)相比,血浆FFA、胰岛素(INS)水平均明显升高(P<0.01),葡萄糖输注率(GIR)、葡萄糖清除率(GRd)明显降低(P<0.01),且胰岛素对肝糖输出(HGP)的抑制作用明显障碍(仅抑制16%)。经Exenatide处理后,血...     

胰岛素抵抗大鼠肌肉中IRS-1、P70S6K的表达

目的 应用不同饮食喂养大鼠,测定大鼠产生胰岛素抵抗(IR)的情况,观察大鼠骨骼肌IPS-1、P70S6K的表达及大鼠血清中游离脂肪酸(FFA)和超敏C反应蛋白(hsCRP)的变化.方法 4周龄Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组,分别以普通饲料、高糖饲料、高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周后,行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,对大鼠胰岛素抵抗程度进行评估,应用酶联免疫吸附方法 检测大鼠血清中游离脂肪酸及超敏C反应蛋白,分别用Western-Blot、Rt-PCR检测大鼠骨骼肌中的IRS-1、P70S6K.结果 高脂饲料、高糖高脂饲料组大鼠产生胰岛素抵抗,普通饲料、高糖饲料组未出现胰岛素抵抗,胰岛素抵抗组大鼠游离脂肪酸及超敏C反应蛋白明显高于非胰岛素抵抗大鼠(P<0.01),IRS-1在胰岛素抵抗组大鼠明显低于非胰岛素抵抗组大鼠、P70S6K在胰岛素抵抗组大鼠明显高于非胰岛素抵抗组大鼠体重.结论 高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周可成功的诱导大鼠产生胰岛素抵抗,胰岛素抵抗的产生可能与肥胖、高游离脂肪酸及炎症反应有关.IRS-1在胰岛素抵抗大鼠中的表达降低,P70S6K升高.     

老龄SD大鼠胰岛β细胞形态功能研究

目的观察3组不同月龄SD大鼠糖脂代谢指标变化,了解在基础及葡萄糖刺激下胰岛β细胞胰岛素分泌、结构变化与老龄糖耐量减退的关系,探讨老龄糖耐量受损的机制。方法采用免疫组化、细胞体视学、透视电镜等方法观察5~6、11~12、20~24月龄SD大鼠胰岛及胰岛β细胞形态及胰岛素分泌水平;将胰岛β细胞分离后与两种不同质量浓度的葡萄糖培养,观察葡萄糖刺激下老龄大鼠β细胞胰岛素分泌水平。结果20~24月龄大鼠体质量、空腹血糖及血脂水平有增高;11~12、20~24月龄大鼠血清中游离脂肪酸(FFA)水平显著增高;对葡萄糖刺激出现峰值降低、达峰时间延迟;胰岛β细胞体积增大和细胞内胰岛素分泌量减少。老龄胰岛β细胞内线粒体和内质网肿胀,空泡变性。从11~12月龄大鼠开始,胰腺中平均胰岛面积随着年龄的增加而减少;但每个胰岛中平均胰岛β细胞的面积比例却有增加。结论老龄鼠在空腹血糖正常时即已具备胰岛素抵抗的某些特征;老龄大鼠胰岛β细胞虽然有面积比例增大,但β细胞基础和葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能减低。提示一旦糖代谢受损出现糖尿病,应尽早考虑胰岛素治疗同时改善胰岛素抵抗。     

软脂酸对美吡哒和高糖刺激大鼠胰岛β细胞功能抑制作用的研究

目的 观察软脂酸对美吡哒和高糖刺激的大鼠胰岛细胞β细胞功能的影响。方法 以0、0．25、0．5、1．0mmol/L软脂酸原代培养SD大鼠胰岛细胞,在24h、72h、120h测定上清胰岛素、葡萄糖浓度及细胞内胰岛素。结果 在不同培养时间不合软脂酸组上清中胰岛素、葡萄糖及细胞内胰岛素含量差别无统计学意义（P〉0．05）;而含软脂酸组随软脂酸浓度增加和培养时间延长,胰岛素分泌量、葡萄糖利用量和细胞内胰岛素含量逐渐减少（P〈0．05）。结论 在体外软脂酸抑制了美吡哒和高糖刺激的大鼠胰岛β细胞功能,这种抑制作用与胰岛细胞本身胰岛素抵抗相关。     

单纯性肥胖患者外周胰岛素抵抗与﹀细胞功能的研究

目的　研究血糖“正常”的单纯性肥胖患者胰岛素抵抗与β细胞功能的关系,探讨游离脂肪酸(FFA)在2型糖尿病(T2 DM)发病中的作用。方法　10例血糖“正常”的单纯性肥胖患者和10例年龄、生活习惯相匹配的非肥胖者(对照) ,均不吸烟、血压及血胆固醇正常。所有研究对象均完成以下检查:1空腹血脂及FFA。2血清免疫活性胰岛素(IRI)、前胰岛素(PI)及真胰岛素(TI) ;3静脉注射葡萄糖后早相胰岛素分泌反应(AIR) ;4正常血糖高胰岛素钳夹试验,评价外周组织葡萄糖的摄取率(GDR)。结果　肥胖患者IRI、PI和TI增高,PI/ (PI TI)比值也高于对照组(P<0 .0 1)。肥胖患者AIR增高,曲线下面积也高于对照组(P<0 .0 5 ) ,但肥胖患者在3、5及10 min的血糖也高于对照组(P<0 .0 5 )。肥胖组达到稳态时GDR明显降低(P<0 .0 5 )。肥胖组血脂除TG增高(P<0 .0 5 )外,其余正常。血FFA浓度高于正常组(P<0 .0 5 )。肥胖组血FFA与GDR成负相关(r=- 0 .76 7,P<0 .0 1)。结论　血糖“正常”的单纯性肥胖患者存在外周胰岛素抵抗与β细胞功能异常,且二者可能同时发生。高FFA血症可导致外周胰岛素抵抗与β细胞功能异常。     

不同糖耐量者血清游离脂肪酸与胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能的关系

比较不同糖耐量者空腹、糖负荷后30min及120min血清游离脂肪酸水平、各时间点游离脂肪酸与胰岛素抵抗以及胰岛β细胞功能的相关性。结果显示3组间空腹及糖负荷后游离脂肪酸水平差异有统计学意义，空腹、糖负荷后30min及120min游离脂肪酸水平与胰岛素分泌功能以及胰岛素敏感性指数呈负相关。提示游离脂肪酸对胰岛β细胞功能和胰岛素敏感性存在负面、毒性作用。     

2型糖尿病家系一级亲属的胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能研究

目的评估2型糖尿病家系一级亲属不同糖耐量状态下的胰岛素抵抗状况和胰岛β细胞功能。方法 440名2型糖尿病家系一级亲属分为2型糖尿病组(T2DM组,n=144)、糖调节受损组(IGR组,n=139)和糖耐量正常组(NGT组,n=157),另选取121名无糖尿病家族史、血糖异常史和妊娠糖尿病病史的糖耐量正常者作为正常对照组(NC组)。所有受试者进行口服葡萄糖耐量试验和胰岛素释放试验,以稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素作用指数(IA I)评估胰岛素敏感性,以基础胰岛素分泌功能指数(HOMA-β)、早期胰岛素分泌功能指数(ΔI30/ΔG30)、修正的胰岛β细胞功能指数(MBCI)和葡萄糖处置指数(D I)评估胰岛β细胞功能。结果与NGT组和NC组比较,T2DM组和IGR组的IAI明显降低,HOMA-IR显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);T2DM组的HOMA-IR也显著高于IGR组(P<0.05);NGT组与NC组的HOMA-IR和IAI比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。胰岛β细胞功能指标比较结果显示:各项指标均为NC组>NGT组>IGR组>T2DM组,除NGT组的HOMA-β...     

生物钟基因Bmal1通过氧化应激信号通路调节胰岛茁细胞凋亡的研究

目的探讨生物钟基因brainandmuscleArnt-likeprotein-1（Bmal1）对胰岛β细胞凋亡的调节作用。方法实验分为正常对照组（含5.5mmol/L葡萄糖,NC组）、高糖组（含33.3mmol/L葡萄糖）、正常糖浓度+无关RNA转染组（含5.5mmol/L葡萄糖,NC+siRNA组）、正常糖浓度+Bmal1基因沉默组（NC+Bmal1-/-组）、高糖+无关RNA转染组（含33.3mmol/L葡萄糖,高糖+siRNA组）、高糖+Bmal1基因沉默组（高糖+Bmal1-/-组）。NC组不加干预因素。采用RNA干扰技术沉默大鼠胰岛茁细胞瘤株（INS-1）Bmal1基因,应用TUNEL法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测活性氧（ROS）含量,ATP检测试剂盒测定三磷酸腺苷（ATP）含量,实时荧光定量PCR检测Bmal1、去乙酰化酶sirtuin1（Sirt1）mRNA表达情况。结果与NC+siRNA组比较,NC+Bmal1-/-组ATP含量下降,ROS水平增加,Sirt1mRNA表达下降（均P＜0.01）。与NC组比较,高糖组ATP下降,ROS增加,Sirt1mRNA表达下降（均P＜0.01）,细胞凋亡增加（P＜0.05）。与高糖+siRNA组比较,高糖+Bmal1-/-组ATP下降,ROS增加,细胞凋亡增加（均P＜0.01）,Sirt1mRNA表达有下降趋势,但无统计学差异（P＞0.05）。结论Bmal1可通过调节氧化应激信号通路影响胰岛茁细胞功能和凋亡。     

Exendin-4对高脂大鼠脂代谢及胰岛β细胞功能的影响

目的 探讨Exendin-4对高脂喂养的肥胖人鼠胰岛β细胞功能及糖脂代谢的影响.方法 SD大鼠40只用简单随机分组法分为2组,分别给予普通饲料(NC组,10只)及高脂饲料(30只).喂养10蒯后,高脂喂养大鼠分为高脂(HF)组,0.5、2μg/kg Exendin-4治疗高脂组(HFL、HFH组),每组10只.治疗6周后,崩静脉葡萄糖耐量实验(IVGT)和胰岛索耐量实验(ITT)来评价机体的胰岛β细胞功能及机体对胰岛素的敏感性,同时检测基础血脂水平.结果 高脂诱导肥胖大鼠经Exendin-4处理后,lee's指数、空腹血浆游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)明显降低(P＜0.01);IVGTT和ITT指标明显改善(P＜0.05),胰岛素分泌水平增高(P＜0.01),胰岛β细胞功能改善(P＜0.05),HFH组较HFL组上述指标改善更为明显.结论 Exendin-4可改善肥胖大鼠的胰岛β细胞功能和糖脂代谢,并可能呈剂量-效应关系.     

高尿酸血症诱发糖代谢紊乱大鼠胰岛细胞功能变化

目的观察高尿酸血症（HUA）诱发糖代谢紊乱大鼠胰岛细胞功能的变化,探讨HUA诱发和加重糖代谢紊乱的发病机制。方法健康雄性Wistar大鼠66只,随机分为正常对照组（NC组）、糖尿病（DM组）和HUA组。采用高酵母饲料饲养、腺嘌呤溶液灌胃及皮下注射氧嗪酸钾溶液的方法建立HUA诱发糖代谢紊乱大鼠模型,采用高糖高脂饲料饲养、腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法建立DM组大鼠模型,每隔2周测定大鼠空腹血糖、空腹血清尿酸的水平;通过酶联免疫吸附法（ELISA法）测定空腹血清胰岛素、胰高血糖素的水平;苏木精-伊红（HE）染色和胰岛细胞双重染色观察持续HUA对胰岛组织学形态及胰岛α、β细胞占胰岛比例的影响。结果HUA组大鼠4、8、12、16周空腹血糖、空腹血清尿酸水平明显升高,与0周比较差异有显著性（F=11.933、17.606,q=3.632-7.342,P〈0.01）;HUA组大鼠第8、12周空腹血清胰岛素水平均较0周显著升高（F=4.680,q=1.916、2.035,P〈0.01）,至第16周差异无显著性（P〉0.05）;HUA组大鼠0、4、8、12周空腹血清胰高血糖素水平无明显变化（P〉0.05）,16周降低,与0周比较差异有显著性（F=3.409,q=1.623,P〈0.01）;HUA组与NC组比较,空腹血糖、血清尿酸、血清胰岛素、血清胰高血糖素在0周时差异均无显著意义（P〉0.05）,16周时差异有显著意义（t=-2.569-11.854,P〈0.05）。HE染色显示,NC组胰岛大小不等,分布均匀,形态规则,无水肿,胰岛细胞正常;DM组胰岛分布弥散,胰岛数量明显减少,部分胰岛轻度肿胀;HUA组与NC组比较胰岛形状变得不规则,胰岛数目减少,但仍然较DM组多。HUA组第16周胰岛α、β细胞分布比例与NC组比较无明显变化（P〉0.05）;HUA组内0、4、8、12、16周不同时间胰岛α、β细胞所占比例动态变化无显著差异（P〉0.05）。结论实验性HUA诱发糖代谢紊乱的机制可能主要与胰岛素抵抗、胰岛β细?     

老年大鼠的糖代谢和胰腺β细胞质量和功能的改变

目的研究衰老大鼠的糖代谢和胰腺β细胞质量和功能的改变,并探讨胰岛β细胞功能与血中SOD活力的关系。方法采用70周龄的Wistar雄性老年大鼠（n=12）和10周龄的Wistar雄性大鼠（n=12）作为研究对象,采用腹腔注射20％葡萄糖溶液作糖耐量实验,测定β细胞对糖刺激的分泌（胰岛素曲线下面积与葡萄糖曲线下面积比值,AUCI／AUCG）及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,应用免疫组化测定β细胞质量和单位体重的β细胞质量,利用羟胺法测定血清和胰腺组织的SOD活力。结果两组糖耐量基本正常,胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）年老组显著高于年轻组（0．242±0．126 vs 0．045±0．038,P〈0．05）,AUCI／AUCG年老组显著高于年轻组（0．187±0．048 vs0．098±0．028,P〈0．05）,单位体重的β细胞质量年轻组明显高于年老组（6．15±0．86 vs 5．80±0．92,P〈0．05）．年轻组血中SOD活力显著高于年老组（10．04±2．87 vs 6．88±3．56）,而胰腺组织SOD活力两组差异无显著性。结论年老大鼠较年轻大鼠呈现胰岛素抵抗、高胰岛素分泌及β细胞相对储备能力降低的特点,年老大鼠的胰岛素抵抗可能与血中的SOD活力降低有关。     

胰岛素信号转导基因表达的改变与α细胞胰岛素抵抗的实验研究

目的探讨高脂喂养及大剂量链脲佐菌素(STZ)去β细胞处理的肥胖大鼠胰岛α细胞信号转导通路分子的表达情况及其可能机理。方法 30只 SD 大鼠分为高脂饲料喂养的肥胖(HF)组和普通饲料喂养的正常对照(NC)组。喂养20周后,(1)检测空腹血胰岛素(Ins)、胰高糖素(Glc)、游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)水平。(2)正常血糖高胰岛素钳夹试验评价外周胰岛素抵抗程度(NC 组7只,HF 组7只)。(3)NC 组和 HF 组各8只,给予大剂量链脲佐菌素(STZ)去β细胞处理,即 NC-B 组,HF-B 组。使用胰岛素控制血糖,5d 后处死动物,分离胰岛细胞。(4)采用实时定量聚合酶链反应方法比较两组大鼠α细胞 Glc、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)、磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)的 mRNA 表达的情况。结果(1)HF 组葡萄糖输注率(GIR)明显低于NC 组(5.3 mg·min~(-1)·kg~(-1)±1.2 mg·min~(-1)·kg~(-1)vs 13.6 mg·min~(-1)·kg~(-1)±1.7 mg·min~(-1)·kg~(-1),P<0.01),HF 组血 FFA、Ins 及 Glc 水平显著高于 NC 组(FFA 508(394～622)μmol/L vs 325(240～410)μmol/L,Ins 23.7(14.0～33.4)mIU/L vs 11.5(3.6～19.4)mIU/L;Glc 345(298.6～391.4)pg/ml vs 256(226.4～285.6)pg/ml;P<0.05);(2)HF-B 组比 NC-B 组α细胞 Glc mRNA 的表达高34.2%±2.1%,IRS-2及 PI3K mRNA 分别低28.5%±1.8%、21.3%±1.6%(均 P<0.01),而IRS-1仅降低7.0%±1.2%(P>0.05)。(3)相关分析显示,HF 组血 FFA 水平与 GIR 呈负相关(r=-0.675,P<0.01);且与α细胞 IRS-2 mRNA 表达也呈负相关(r=-0.458,P<0.05)。结论高脂饮食诱导的去β细胞肥胖大鼠胰岛α细胞存在胰岛信号转导分子表达降低,且与血 FFA 水平升高有关。     

单纯性肥胖患者外周胰岛素抵抗与β细胞功能的研究

目的研究血糖"正常"的单纯性肥胖患者胰岛素抵抗与β细胞功能的关系,探讨游离脂肪酸(FFA)在2型糖尿病(T2DM)发病中的作用.方法 10例血糖"正常"的单纯性肥胖患者和10例年龄、生活习惯相匹配的非肥胖者(对照),均不吸烟、血压及血胆固醇正常.所有研究对象均完成以下检查①空腹血脂及FFA.②血清免疫活性胰岛素(IRI)、前胰岛素(PI)及真胰岛素(TI);③静脉注射葡萄糖后早相胰岛素分泌反应(AIR);④正常血糖高胰岛素钳夹试验,评价外周组织葡萄糖的摄取率(GDR).结果肥胖患者IRI、PI和TI增高,PI/(PI+TI)比值也高于对照组(P<0.01).肥胖患者AIR增高,曲线下面积也高于对照组(P<0.05),但肥胖患者在3、5及10min的血糖也高于对照组(P<0.05).肥胖组达到稳态时GDR明显降低(P<0.05).肥胖组血脂除TG增高(P<0.05)外,其余正常.血FFA浓度高于正常组(P<0.05).肥胖组血FFA与GDR成负相关(r=-0.767,P<0.01).结论血糖"正常"的单纯性肥胖患者存在外周胰岛素抵抗与β细胞功能异常,且二者可能同时发生.高FFA血症可导致外周胰岛素抵抗与β细胞功能异常.