PD小鼠模型的多巴胺转运蛋白mRNA转录

目的分析帕金森病(PD)小鼠模型中脑黑质多巴胺转运蛋白(DAT)基因转录状况.方法用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射C57BL小鼠,制作PD鼠模型,分10、18d两组;用相同体积生理盐水腹腔注射作为正常对照.以Dot-Blot方法检测小鼠中脑黑质部位DAT基因转录.结果与正常对照相比,MPTP组小鼠行为异常,中脑黑质部位TH(+)细胞减少,DATmRNA转录降低(P＜0.05).正常对照组中小脑部位DAT mRNA转录低于黑质部位(P＜0.05).结论多巴胺能神经元及其DAT mRNA转录量随PD的发生而减少或降低.DAT mRNA转录量可反映残存多巴胺神经元量或功能状况,反映PD的状况,高DAT mRNA转录的细胞对MPTP毒物敏感性增强.     

偏侧帕金森病患者葡萄糖代谢与多巴胺转运蛋白PET显像

评价葡萄糖代谢与多巴胺转运蛋白PET显像在偏侧帕金森病(PD)患者诊断中的价值。方法 正常对照组16例。偏侧PD患者34例，Hohn-YahrⅠ～Ⅱ级。其中16例偏侧(右侧肢体)PD患者进行18↑F-脱氧葡萄糖(HDG)PET显像，18例偏侧(右侧或左侧)PD患者进行埔18↑F-N-(3-氟丙基)-2甲酯基，3β(4’-碘苯基)去甲基托烷(Fp-β-CIT)显像，6例患者同时进行两种显像。静脉注射18↑F-FDG185～259MBq30min后进行脑三维采集，结果 应用感兴趣区(ROI)半定量分析和统计参数地图(SPM)分析。18↑F-FP-β-CIT显像于注射后2～3h进行，计算(各ROI计数,小脑计数)／小脑计数比值。结果 PD组与对照组比较，患侧肢体对侧基底节葡萄糖代谢减低，但差异无显著性。SPM分析结果显示，PD患者与对照组比较，葡萄糖代谢减低位于左侧前额叶、中额叶、下额叶及左侧中颞叶，而摄取增加区域除双侧额叶中央前回、双侧顶叶楔前叶、左侧枕叶外，还累及左侧丘脑。偏侧PD患者豆状核后部18↑F-FP-β-CIT摄取显著减低，且不仅见于症状对侧豆状核，同侧豆状核后部也可见摄取减低。结论 18↑F-FDG PET、显像对PD的早期诊断无特异性。18F-FP-β-CIT可早期发现PD纹状体多巴胺转运蛋白的变化，有助于PD的早期诊断和鉴别诊断；与18F-FDG PET显像结合，可显示大脑皮质的葡萄糖代谢变化。     

帕金森病猴模型多巴胺转运蛋白显像的实验研究

帕金森病(ＰＤ)是黑质纹状体多巴胺(ＤＡ)能神经元及其通路变性性疾病,黑质ＤＡ能神经元缺失,突触前膜的多巴胺转运蛋白(ＤＡＴ)会发生相应的密度变化,其变化将是反映ＤＡ能神经系统功能的一个重要指标,对于探讨ＰＤ的发病机制、早期诊断、监测治疗效果及预后的判断等均具有重要的意义。本研究采用放射性ＤＡＴ配体123ＩβＣＩＴ[甲基3β(4碘苯基)托烷2β羧酸盐][1]观察偏侧ＰＤ猴模型ＤＡＴ的变化,以探讨123ＩβＣＩＴ单光子发射计算机体层摄影术(ＳＰＥＣＴ)临床应用价值。一、材料与方法1偏侧ＰＤ猴模型制备:正常恒河猴3只(Ｍ1Ｍ3),年龄8…     

多巴胺转运蛋白单光子发射型计算机断层扫描显像用于早期诊断帕金森病的意义

帕金森病 (parkinsondisease ,PD)是一种中老年人常见的神经系统性疾病 ,随着我国人口老龄化的发展 ,PD的发病率呈逐年增高趋势。目前多巴胺转运蛋白 (DAT)单光子发射型计算机断层扫描 (SPECT)显像已成为诊断PD的重要辅助检查手段。一、资料与方法1.一般资料 :本研究选择 2 0 0 2年 8月～ 2 0 0 3年 3月在我院住院的 18例PD患者 ,男 10例 ,女 8例 ,年龄 46～80岁 ,平均为 (72 .5± 0 .3)岁。临床表现为静止性震颤、肌强直和运动减慢。病程为 3个月～ 6年 ,平均为 (2 .5± 0 .3)年。排除脑外伤、脑炎和脑血管病后引起的继发性PD。治…     

SPECT诊断帕金森病(PD)的临床研究

帕金森病(PD)又称震颤麻痹,主要病变在黑质和纹状体.是常见于中老年的神经系统疾病是中脑黑质神经元变性死亡、大脑内的神经递质多巴胺减少到不能维持调节神经系统正常.帕金森病在我国的发病率已达到1%,而目前临床诊断仅仅是根据其典型的临床症状,早期诊断是非常困难的.本研究是为了探讨多巴胺转运蛋白显像在帕金森病的诊断中的价值.     

MPTP诱导影响亚急性与慢性帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元

目的:探索1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的亚急性与慢性帕金森病(PD)模型小鼠的黑质多巴胺能神经元改变.方法:采用MPTP诱导亚急性与慢性PD小鼠模型,分析小鼠酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数目和小鼠行为学悬挂评分.结果:慢性与亚急性PD模型小鼠TH阳性神经元计数分别降至正常水平的21.02％与17.94％;且TH阳性神经元计数下降均早于行为学改变.结论:小鼠慢性模型比亚急性模型更接近帕金森病的病理与病程.     

胆汁淤积时肝细胞膜转运蛋白转录及其转录后的调控

正常生理情况下，胆汁的形成有赖于肝细胞血窦面基底膜上的Na^＋-牛磺酸共转运多肽[sodium-taurocholate cotransporting polypeptide，NTCP／Ntcp（按国际统一标准NTCP为人类种属转运蛋白，Ntcp为啮齿类动物种属转运蛋白，下同）]，有机阴离子转运蛋白（organic anion transporting protein，OATP／Oatp），多耐药相关蛋白3（muhidrug resistance-associated protein3，MRP3／Mrp3），多耐药相关蛋白4（multidrug resistance-associated protein4，MRP4／Mrp4）和小胆管侧肝细胞毛细胆管膜上分布的胆盐输出泵（canalicular bile salt-export pump，BSEP／Bsep），多耐药相关蛋白2（muhidrug resistance-associated protein，MRP2／Mrp2），多耐药糖蛋白1（muhidrug resistance-1P-glycoprotein，MDR1／Mdr1），多耐药糖蛋白2（muhidrug resistance-2P-glycoprotein，MDR2／Mdr2），多耐药糖蛋白3（multidrug resistance-3P-glycoprotein，MDR3／Mdr3）等多种转运体来完成。转录、转录后调控失常引发的上述转运蛋白在胞膜上表达、定位的异常在胆汁淤积的发生中起了关键作用。     

HO-1对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的作用

目的探讨抑制血红素加氧酶-1(HO-1)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元的作用。方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、MPTP组及锌原卟啉(ZnPPIX)+MPTP组,每组6只。腹腔注射MPTP(30mg/kg)5d制备帕金森病小鼠模型,MPTP组于MPTP注射前4d行侧脑室注射9g/L氯化钠溶液2μL,连续8d;ZnPPIX+MPTP组于MPTP注射前4d行侧脑室微注射ZnPPIX(50μg/kg)2μL,共8d;对照组以等量的9g/L氯化钠溶液取代ZnPPIX和MPTP。应用Western blots法检测黑质内HO-1和酪氨酸羟化酶(TH)的表达水平。结果 ZnPPIX+MPTP组小鼠黑质内HO-1表达明显低于对照组和MPTP组,差异有显著性(F=6.844,q=5.943、4.444,P<0.05);MPTP组、ZnPPIX+MPTP组黑质区TH表达较对照组明显下降(F=5.095,q=4.303、4.030,P<0.05),ZnPPIX+MPTP组小鼠TH表达量与MPTP组比较差异无显著性(q=0.234,P>0.05)。结论抑制HO-1表达对MPTP致帕金森病小鼠黑质内多巴胺能神经元的损伤无明显作用。     

二苯乙烯苷对 PD 模型小鼠干预作用的观察及机制初探

目的：观察二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucoside,TSG)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)拟帕金森病(Parkinson's disease,PD)模型小鼠行为学及多巴胺能神经元的影响。方法 C57BL小鼠按数字表法随机分为对照组、模型组、TSG 小剂量组(TSG 60 mg/ kg)和 TSG 大剂量组(TSG 120 mg/ kg)。 MPTP 30 mg/ kg 腹腔注射5 d 建立拟 PD 小鼠模型。采用爬杆实验、转棒实验和自主活动实验测试小鼠行为学变化。免疫组织化学法检测各组小鼠黑质处酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞的表达情况。高效液相色谱电化学检测法测定小鼠纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量。结果与对照组相比,MPTP 模型组小鼠爬杆时间显著延长,在转棒上的停留时间明显缩短,自主活动数减少,脑黑质处 TH 阳性细胞数量显著减少,纹状体内多巴胺及其代谢产物含量显著降低。与模型组小鼠相比,TSG 用药组小鼠运动协调性显著增强,脑黑质处 TH 阳性细胞数量增加,纹状体内多巴胺含量升高。结论 TSG 可改善 MPTP 模型小鼠的行为学,保护黑质多巴胺能神经元。 TSG 可能具有潜在的防治 PD 的作用。     

脑多巴胺转运蛋白SPECT显像在鉴别帕金森病与血管性帕金森综合征中的价值

目的探讨脑99mTc-TRODAT-1多巴胺转运蛋白(DAT)SPECT显像对鉴别帕金森病(PD)和血管性帕金森综合征(VP)的临床应用价值。方法对30例PD组患者、24例VP组患者及16例健康对照(组)者分别进行99mTc-TRODAT-1 SPECT脑显像,剂量为740MBq。应用计算机感兴趣区技术及2个数学模型分别计算PD患者、VP患者及健康对照者双侧纹状体体积(V,cm3)、质量(W,g),代表相应部位DAT的功能水平。结果PD组双侧纹状体体积和质量均低于健康对照组及VP组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);PD患者症状对侧纹状体体积和质量均显著低于症状同侧(P<0.01)。VP组双侧纹状体体积和质量与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其症状对侧与症状同侧纹状体体积和质量比较差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论99mTc-TRODAT-1 DAT SPECT脑显像有助于PD与VP的鉴别诊断。     

帕金森病患者脑多巴胺转运体SPECT功能显像研究进展

单光子发射计算机断层显像(single photon emission computed tomography,SPECT)利用特异放射性核素与人脑多巴胺神经元突触前膜脑多巴胺转运体(DAT)的高度亲和性,可进行帕金森病(PD)患者脑DAT显像,目前已广泛应用于PD患者的临床实践.大量研究表明,SPECT对于PD患者的早期诊断、鉴别诊断、病情监测、疗效评价及预后具有重要意义.本文对PD患者脑DAT SPECT显像的图像分析及临床应用研究进展作一综述.     

SLC6A3基因多态性与帕金森病关联性研究Meta分析

目的探讨SLC6A3基因多态性与帕金森病(PD)易感性的关系。方法检索PubMed和中国国家知识资源数据库(CNKI),根据检索词‘dopamine transporter’,‘DAT’,‘SLC6A3’和‘Parkinson's disease or PD’搜集1995年1月至2012年10月关于SLC6A3与PD关系的研究,对相关研究进行同质性检验,合并数据进行Meta分析。结果东亚人群中,SLC6A33'非翻译区(UTR)可变数目串联重复序列(3'VNTR,rs72527228)是10-重复的等位基因为PD保护性等位基因[OR:0.78,95%可信区间(CI)(0.65,0.94),P=0.009]。而在高加索人群,3'VNTR未显示等位基因PD易感性差异。在高加索人中,携带SLC6A3启动区域单核苷酸多态性rs2652510 G等位基因,PD发病风险增加(Gvs A,OR:1.26,95%CI(1.04,1.54),P=0.018;GG vs GA+AA,OR:1.37,95%CI(1.03,1.84),P=0.032)。结论SLC6A3基因多态性与PD发病风险相关,在分析SLC6A3基因多态性与PD发病风险关联性时需要考虑种族因素。     

美多巴对帕金森病大鼠模型脑多巴胺转运体影响的自显影

【目的】研究美多巴对帕金森病大鼠模型脑多巴胺转运体的影响。【方法】立体定位右侧纹状体注射6-羟多巴胺制备偏侧帕金森病大鼠模型,模型成功后给予美多巴灌胃治疗5周。分4组(正常组、帕金森病模型大鼠组、帕金森病模型大鼠经美多巴治疗组、帕金森病模型大鼠未治疗组)行脑多巴胺转运体99mTc-TRODAT-1放射自显影,每组4只。图像分析得到左、右侧纹状体及小脑的光密度值,计算左、右侧脑多巴胺转运体的特异性放射性摄取比值(纹状体/小脑-1),比较各时间点(正常、术后4周、术后9周)多巴胺转运体比值的变化。【结果】正常大鼠脑多巴胺转运体对99mTc-TRODAT-1的特异性摄取比值左、右两侧无显著性差异;术后4周大鼠成为帕金森病模型后,大鼠两侧脑多巴胺转运体的比值较正常均降低,右侧(损毁侧)降低明显。术后9周未治疗组帕金森病模型大鼠双侧脑多巴胺转运体的比值均较4周刚成为模型时明显升高;经美多巴治疗后,双侧的比值均较未服药组明显降低,右侧(损毁侧)降低幅度更大。【结论】长期美多巴治疗可能会使帕金森病模型大鼠脑多巴胺转运体的数量减少。     

NMDA受体和GABA受体拮抗剂对小鼠帕金森模型的行为药理学影响

目的为研究帕金森氏病的发病机理及兴奋性氨基酸受体拮抗剂对帕金森氏病的防治提供实验资料。方法采用ＭＰＴＰ腹腔注射建立Ｃ５７ＢＬ小黑鼠帕金森氏病模型的过程中，同时用兴奋性氨基酸ＮＭＤＡ受体拮抗剂Ｋｅｔａｍｉｎｅ和ＧＡＢＡ受体拮抗剂Ｂｉｃｕｃｕｌｉｎ，观察其行为药理学变化。结果Ｋｅｔａｍｉｎｅ＋ＭＰＴＰ组和Ｂｉｃｕｃｕｌｉｎ＋ＭＰＴＰ组及ＭＰＴＰ组和生理盐水组比较，行为药理学指标都有明显改变。结论ＮＭＤＡ受体拮抗剂对小鼠帕金森氏病模型具有防治作用，ＧＡＢＡ神经元的功能降低可加重帕金森氏病的症状。     

MPTP诱发C57—BL小鼠黑质细胞凋亡

目的对神经毒素1－甲基－4苯基－1，2，3，6－四氢吡啶（MPTP）引起的中脑黑质细胞死亡本质进行研究。方法应用MPTP腹腔注射C_57－BL小鼠，分别用DNA末端转移酶介导的dUTP－x缺口末端标记法（TUNEL）和流式细胞术法（FACS）定性和定量检测黑质细胞凋亡。结果制备C_57－BL小鼠帕金森病（PD）模型的MPTP常规剂量（30mg／kg）连续注射7d明显地导致黑质细胞凋亡，连续注射3d轻度引起黑质细胞凋亡。低剂量MPTP（10mg／kg）连续注射7d未能引起黑质细胞凋亡，此剂量不能制备PD小鼠模型。结论由MPTP制备的PD小鼠模型，导致中脑黑质多巴胺能神经元毁损的本质可能是细胞凋亡。     

人参皂苷Rg1拮抗MPTP诱导小鼠黑质中铁增高的作用

目的研究人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1,Rg1)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)致帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠黑质多巴胺(dopamine,DA)能神经元变性的保护作用及其可能机制。方法 C57BL6小鼠随机分为正常对照组(NS,i.p.)、MPTP组(30 mg/kg×5 d,i.p.)及Rg1(5 mg/kg×8 d,i.p.)预处理组。应用免疫组织化学法、Perls’铁染色、逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)以及图像分析等技术观察黑质内多巴胺转运蛋白(dopamine transporter,DAT)免疫反应活性变化、铁染色阳性细胞数的变化和DAT mRNA的表达水平的变化,用高效液相色谱法(HPLC)检测小鼠纹状体内DA及其代谢物二羟基苯乙酸(dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)和高香草酸(homovanillic acid,HVA)含量。结果与正常对照组相比,MPTP组黑质内铁染色阳性细胞数增高以及纹状体内DA及其代谢产物DOPAC和HVA的含量明显减少;与MPTP组相比,Rg1预处理组黑质内铁染色阳性细胞数降低以及纹状体内DA及其代谢产物DOPAC和HVA的含量明显增加(P<0.01)。与正常对照组相比,MPTP组黑质内DAT免疫反应活性和DAT mRNA的表达明显降低(P<0.01);与MPTP组相比,Rg1预处理组黑质内DAT免疫反应活性和DAT mRNA的表达有所增高(P<0.05)。结论 Rg1对MPTP致PD小鼠黑质DA能神经元的损伤具有一定的保护作用,其机制可能与Rg1能通过降低MPTP诱导的铁过多聚积从而拮抗氧化应激反应有关。     

偏侧帕金森病猴模型的评价

目的通过测定行为、纹状体多巴胺转蛋白、多巴胺及黑质纹状体多巴胺能神经元评价应用ＭＰＴＰ制备的偏侧帕金森病猴模型。方法经右侧颈总动脉注射ＭＰＴＰ制备偏侧帕金森病猴模型,应用９９ｍＴｃ－ＴＲＯＤＡＴ－１ＳＰＥＣＴ显像观察纹状体多巴胺转运蛋白功能;采用微透析结合高效液相一电化学法检测纹状体细胞外液多巴胺（ＤＡ）及其代谢产物（ＤＯＰＡＣ、ＨＶＡ）含量;免疫组化法观察黑质纹状体酪氨酸羟化酶（ＴＨ）阳性神经元及纤维。结果ＭＰＴＰ注射侧多巴胺转运蛋白密度低于未注射侧,左右侧纹状体感兴趣区的比值为１．１０～１．１８。与未注射侧相比,ＭＰＴＰ注射侧纹状体细胞外液ＤＡ、ＤＯＰＡＣ、ＨＶＡ分别降低７０％、３４％和３８％,黑质和纹状体ＴＨ阳性细胞及纤维为对侧的１０％～１５％。结论应用ＭＰＴＰ制备的偏侧帕金森病猴模型与人类早期帕金森病有一定的相似性。微透析和ＳＰＥＣＴ在体检测多巴胺转运蛋白和多巴胺是研究帕金森病的有效手段。     

二氢麦角毒对MPTP帕金森病模型小鼠的作用

目的：观察二氢麦角毒对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）帕金森病模型小鼠行为学、脑超氧化物歧化酶（SOD）活性及纹状体多巴胺及其代谢产物含量的影响。方法：小鼠腹腔注射MPTP30mg／kg，2次／d，连续5d致帕金森模型，用YSD-4G药理生理实验多用仪测定小鼠自发活动记数，用高效液相色谱（HPLC）法测定纹状体内多巴胺及其代谢产物含量，酶法测脑SOD活性。结果：二氢麦角毒能明显增加MPTP帕金森病模型小鼠的自发活动、脑SOD活性和纹状体内多巴胺及其代谢产物含量。结论：二氢麦角毒能改善MPTP帕金森病模型小鼠的自发活动减少的症状，其机制可能与增加脑SOD活性及纹状体内多巴胺含量有关。