安肾方对免疫复合物型肾炎大鼠凝血纤溶系统的影响

目的:观察安肾方在体内对免疫复合物型肾炎大鼠凝血纤溶系统的影响。方法:用阳离子化牛血清白蛋白制备免疫复合物型肾炎大鼠模型,用温阳化瘀作用的安肾方大、中、小剂量及潘生丁对照给药,用免疫组化染色定性定量评价肾组织纤溶酶原激活物(tPA)和PA抑制物(PAI-1)的蛋白表达。结果:与模型组相比,各治疗组肾组织tPA蛋白表达呈不同程度增加,PAI-1表达下降。结论:安肾方对慢性肾炎大鼠凝血纤溶系统有显著影响,并呈量效关系。     

肾乐胶囊对大鼠5/6肾切除肾衰模型作用机理的实验研究

目的 :通过对大鼠 5/6肾切除 (5/6NX)所致肾衰模型的研究 ,探讨中药复方肾乐胶囊治疗慢性肾衰的作用机理。方法 :采用纤维蛋白原平板溶环法 ,检测尿中纤溶酶原激活物PA的活性 ;用半定量法分析残肾组织中组织型纤溶酶原激活物 ,尿激酶型纤溶酶原激活物 /纤溶酶原激活物抑制物 (tPA ,uPA/PAI-1)的染色强度和面积 ;用Northernblot来观察转化生长因子β(TGF-β)mRNA的表达。 结果 :模型对照组大鼠尿PA活性下降 ,肾组织tPA ,uPA表达下降 ;而肾组织中PAI-1和TGF-βmRNA表达增高。肾乐胶囊治疗后 ,尿PA的活性升高 ,肾组织中tPA ,uPA的表达增强 ;而肾组织中PAI-1和TGF-βmRNA的表达却下降。 结论 :肾乐胶囊可以通过调节 5/6NX模型大鼠尿PA的活性 ,肾组织tPA ,uPA/PAI-1,TGF-βmRNA的表达 ,延缓肾小球硬化和间质纤维化病变的进展。     

生药水蛭对残肾大鼠肾组织纤溶酶原激活物蛋白定位表达的影响

目的:探讨慢性进展性肾小球硬化及小管间质纤维化过程中肾组织中组织型纤溶酶原激活物(tPA)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)蛋白表达及生药水蛭对其的影响。方法:以7/8肾切除 SD 大鼠为实验动物模型,予水蛭治疗后分别检测大鼠体重、血压、血尿生化、尿纤溶酶原激活物(PA)活性及残肾组织常规病理,用免疫组化染色定性定量评价残肾 tPA、uPA 蛋白表达。结果:于7/8肾切除后,大鼠肾功能进行性丧失,表现为尿蛋白、血压、血 BuN、SCr 及血脂增高,残肾组织出现肾小球硬化和间质纤维化。免疫组化染色提示肾组织 tPA、uPA 表达下降。经水蛭治疗后,大鼠肾功能改善,血压下降,尿蛋白下降,残肾组织 tPA、uPA 蛋白表达增加。结论:水蛭治疗可通过改善7/8肾切除大鼠 PAs 系统的紊乱而干预肾纤维化病变的进展。     

柔肝冲剂对血瘀型肝纤维化大鼠纤溶酶原激活系统影响的研究

目的:探讨柔肝冲剂对血瘀型肝纤维化大鼠纤溶酶原激活系统[尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)、纤溶酶原激活抑制因子-1(PAI-1)]在肝组织蛋白表达的调控作用。方法:将大鼠随机分为正常组、血瘀组和柔肝组。主要观察项目:大鼠血瘀体征;用免疫组化、酶联免疫吸附法检测肝组织中uPA、uPAR、PAI-1的表达。结果:血瘀组出现明显的血瘀表现,正常组与血瘀组体征差异显著。经柔肝冲剂治疗后,血瘀体征有明显改善。通过免疫组化、蛋白定量发现PAI-1、uPA、uPAR在各组大鼠肝组织中均有表达。PAI-1、uPA、uPAR表达在血瘀组较正常组为高,其差异有统计学意义,P<0.01。经柔肝冲剂治疗后它们表达均有下降,其差异有统计学意义,P<0.01。结论:uPA、uPAR、PAI-1在正常大鼠肝组织中有表达。血瘀型肝纤维化时,其在肝组织中蛋白表达增高,柔肝冲剂可降低其表达。柔肝冲剂可能通过影响纤溶酶原激活系统,起到抗肝纤维化作用。     

柔肝冲剂对血瘀型肝纤维化大鼠纤溶酶原激活系统影响的研究

目的：探讨柔肝冲剂对血瘀型肝纤维化大鼠纤溶酶原激活系统[尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）、尿激酶型纤溶酶原激活物受体（uPAR）、纤溶酶原激活抑制因子-1（PAl-1）]在肝组织蛋白表达的调控作用。方法：将大鼠随机分为正常组、血瘀组和柔肝组。主要观察项目：大鼠血瘀体征；用免疫组化、酶联免疫吸附法检测肝组织中uPA、uPAR、PAl-1的表达。结果：血瘀组出现明显的血瘀表现，正常组与血瘀组体征差异显著。经柔肝冲剂治疗后，血瘀体征有明显改善。通过免疫组化、蛋白定量发现PAl-1、uPA、uPAR在各组大鼠肝组织中均有表达。PAI-1、uPA、uPAR表达在血瘀组较正常组为高，其差异有统计学意义，P〈0．01。经柔肝冲剂治疗后它们表迭均有下降，其差异有统计学意义，P〈0．01。结论：uPA、uPAR、PAl-1在正常大鼠肝组织中有表达。血瘀型肝纤维化时，其在肝组织中蛋白表达增高，柔肝冲刑可降低其表达。柔肝冲剂可能通过影响纤溶酶原激活系统，起到抗肝纤维化作用。     

全蝎纯化液对静脉血栓形成大鼠纤溶和凝血系统的影响

目的通过观察全蝎纯化液对静脉血栓形成大鼠凝血和纤溶系统的影响,探讨全蝎抗静脉血栓形成的作用机制。方法SD大鼠随机分为空白组、模型组和全蝎纯化液大、中、小剂量组,全蝎纯化液各剂量组由颈外静脉分别注入全蝎纯化液,空白组和模型组注入等体积的生理盐水。采用结扎大鼠腹腔主静脉造成静脉血栓模型,观察其对激活部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、组织型纤溶酶原激活物（tPA）、纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）等凝血和纤溶指标的影响。结果全蝎纯化液大、中、小剂量能明显减轻血栓重量,与模型组相比,差异有统计学意义（均P〈0．01）,血栓形成的抑制率分别为75．23％、61．50％、51．05％;能明显延长APTT、PT、TT时间,与模型组相比,差异有统计学意义（均P〈0．01）;模型组tPA明显降低、PAI-1明显升高,而全蝎纯化液各剂量组能明显抑制PAI-1活性升高、增加tPA活性,与模型组相比,差异有统计学意义（均P〈0．01）。结论全蝎纯化液具有明显的抑制血栓形成的作用,其作用机制可能与其抗凝血及促纤溶作用有关。     

电针对急性脑梗死大鼠凝血和纤溶系统影响的实验研究

目的：探讨电针对急性脑梗死大鼠凝血和纤溶系统的影响。方法：采用线栓法阻塞大脑中动脉建立局灶性脑缺血模型；将40只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、模型电针组，每组10只；采用ELISA法检测各组大鼠血浆中组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）及D-二聚体含量，用凝固法测定Fib含量。结果：与正常组及假手术组比较，急性脑梗死大鼠血浆t-PA、PAI-1含量及血浆D-二聚体、Fib含量均显著升高（P〈0．01）。与模型组比较，模型电针组大鼠血浆t-PA、PAI-1含量及血浆D-二聚体、Fib含量均明显降低（P〈0．05～0．01）。结论：电针百会、水沟具有调节机体凝血和纤溶系统功能平衡的作用。     

益气活血方对大鼠凝血一纤溶系统影响的实验研究

目的：研究中药益气活血方对血瘀证大鼠凝血－纤溶系统的影响，探讨其防治心脑血管栓塞性疾病作用机理。方法：用益气活血方混悬液给予大鼠灌胃1周，第7日同时对大鼠皮下注射2次0.1％肾上腺素0.08ml/kg，其间进行一次冷刺激（冰水，0℃）5min，于第8日晨复制成血瘀实验模型，并采用测定血凝血－纤溶各指标。结果：益气活血方能明显降低纤维蛋白原（Fib)含量，延长凝血酶原时间（PT）及白陶土部分凝血活酶时间（APTT），提高血浆组织型纤溶酶原激活物（tPA)、纤溶酶（PL）活性，降低纤溶酶原激活物抑制剂（PAI）活性、纤溶酶原（PLg)活性，且大剂量组优于小剂量组及对照组。结论：益气活血方具有调节凝血－纤溶系统功能活性作用，这可能是临床上使用其防治缺血性心脑血管栓塞性疾病的机制之一。     

尿毒净液对慢性肾功能衰竭大鼠肾功能及肾组织中Nephrin、MCP-1和PAI-1表达的影响

目的:观察尿毒净液(Urea Nitrogen Cleaning Fluid,UNCF)对慢性肾功能衰竭大鼠模型肾脏功能的作用及其对肾组织肾病蛋白(nephrin)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达的影响。方法:应用5/6肾切除方法复制氮质血症大鼠模型,随机分为模型组、尿毒净液组,以假手术大鼠作为对照组,给药8周后检测各组大鼠血清尿素氮及24小时尿蛋白总量的水平,HE染色法观察肾小球组织形态学改变,免疫组化法、Western blot法及荧光定量PCR法检测各组大鼠肾组织中Nephrin、MCP-1和PAI-1蛋白及mRNA的分布表达。结果:尿毒净液16g/kg连续给药8周显著降低血BUN和尿蛋白,大鼠肾组织中PAI-1、MCP-1表达均显著低于模型组,Nephrin明显高于模型组。结论:尿毒净液能显著改善5/6肾切除大鼠的肾功能,延缓5/6肾切除大鼠慢性肾衰竭的进程,其机理与尿毒净液能抑制MCP-1和PAI-1的表达,同时又促进了Nephrin的表达相关。     

红花对局灶节段性肾小球硬化大鼠血纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制物-1干预作用的研究

目的探讨红花对局灶节段性肾小球硬化（FSGS）大鼠纤溶酶原激活物（t—PA）及纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）的干预作用。方法40只sD大鼠随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组和红花组，每组10只，除假手术组外，其余3组用一侧肾切除加尾静脉注射阿霉素的方法复制FSGS大鼠模型，同时，第1次尾静脉注射1周后红花组灌服红花4g/kg&#183;d：缬沙坦组灌服缬沙坦10mg／kg&#183;d。8周末采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血t—PA、PAI-1的含量，并进行光镜检查。结果各组之间t—PA的含量无明显差异（P〉0．05）。模型组PAI-1含量与假手术组相比明显升高（P〈0．01）；缬沙坦组、红花组与模型组比较PAI-1含量明显降低（P〈0．01），缬沙坦组与红花组之间无明显差异（P〉0．05）。结论FSGS模型大鼠存在着PAI-1的高表达，红花能减少血PAI-1的表达，纠正纤溶系统的紊乱，延缓其病理进程。     

3种他汀药物调控纤溶活性抑制人血管平滑肌细胞增殖与迁移

 目的 探讨3种常用他汀药物(普伐他汀、辛伐他汀和氟伐他汀)介导纤溶酶原激活物及其抑制剂对体外培养人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响。方法 采用四唑盐(MTT)比色法测定VSMC增殖活性,刮伤实验和改良Transwell chamber装置测定细胞迁移能力;用RT-PCR分析细胞tPA,uPA和PAI-1 mRNA表达;采用发光底物法测定细胞分泌tPA和PAI-1蛋白含量。结果 辛伐他汀和氟伐他汀可通过下调细胞PAI-1 mRNA表达和上调tPA mRNA表达,抑制10％胎牛血清诱导VSMC增殖和迁移,不同他汀药物对纤溶活性的调控时相不尽相同。普伐他汀在指定时间对基因转录活性无影响,随培养时间延长对tPA和PAI-1蛋白分泌伴有轻度增加和抑制。结论　他汀类药物抑制VSMC增殖和迁移可能与非调脂性抗动脉粥样硬化作用机制有关,辛伐他汀和氟伐他汀通过上调tPA mRNA和下调PAI-1 mRNA基因转录活性,而普伐他汀可能与tPA和PAI-1通过翻译后修饰或与辅助因子相互作用而调控纤溶酶及其抑制物活性,进而促进纤溶,抑制细胞增殖和移行。     

肾络宁对IgA肾病大鼠肾间质细胞外基质代谢的影响

[目的]通过复制免疫球蛋白A肾病(IgAN)大鼠模型,探讨肾络宁对IgAN大鼠肾间质细胞外基质(ECM)代谢的影响。[方法]口服并定时尾静脉注射牛血清白蛋白,复合葡萄球菌肠毒素感染的方法复制IgAN模型,同时给予肾络宁治疗,利用原位分子杂交和免疫组织化学的方法,结合计算机病理图像分析,观察肾络宁对IgAN大鼠肾间质Ⅲ型胶原(ColⅢ)、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)基因及蛋白表达的影响。[结果]1)肾络宁组肾间质ColⅢ蛋白及PAI-1、TIMP-1mRNA表达与模型组相比明显降低(P<0.01或0.05)。2)肾络宁组肾间质MMP-1mRNA表达与模型组相比显著升高(P<0.01)。[结论]肾络宁能降低IgAN模型大鼠肾间质ColⅢ蛋白的表达,下调PAI-1、TIMP-1mRNA的表达,上调MMP-1mRNA的表达,从而发挥调节ECM代谢的作用。     

HIF-1α和VEGF-C在胆囊癌中的表达及相关性

目的：探讨血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）和AngⅡ 1型受体拮抗剂缬沙坦对人体内皮细胞纤溶酶原激活因子（纤溶因子）表达的影响.方法：选用人脐静脉内皮细胞系（HUVECs）作为研究对象.采用不同浓度AngⅡ（10-5～10-9mol/L）与HUVECs共同培养,作为AngⅡ组,同期设立对照组和缬沙坦组.运用细胞酶联免疫法和发色底物法检测三组细胞培养上清液中组织型纤溶酶原激活剂（tPA）和I型纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）的活性与抗原浓度.结果：AngⅡ呈浓度依赖型刺激PAI-1的活性和含量水平,缬沙坦可降低AngⅡ对PAI-1分泌的作用.二者对tPA的分泌均无明显影响.结论：AngⅡ可促进HUVECs分泌PAI-1;缬沙坦可阻断Ang II的这种作用.     

水蛭地龙提取液对急性脑梗死大鼠纤溶影响的实验研究

目的：探讨水蛭地龙提取液对局灶脑缺血大鼠组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator；tPA)及其抑制剂(plasminogen activator inhibitor-1；PAI-1)活性和含量及DD二聚体(D-dimer；DD)含量的影响。方法：采用自体血栓阻塞大脑中动脉建立局灶脑缺血模型，分别用发色底物法及ELASA方法测定实验各组DD含量及tPA、PAI-1活性和含量。结果：水蛭地龙提取液治疗组DD含量、tPA活性和含量均高于假手术组及局灶脑缺血对照组；而PAI-1活性及含量均低于其他两组。结论：水蛭地龙提取液能够提高纤溶活性，从而促进血栓的溶解。     

三七皂苷对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的：观察三七皂苷（PNS）对糖尿病（DM）大鼠肾脏转化生长因子β1（TGFβ1）、纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI-1）mRNA表达的影响,探讨PNS对DM大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法：以四氧嘧啶复制DM大鼠模型,动物分为正常组、模型组、PNS高、低剂量治疗组。生化检测空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）及尿蛋白（Upro）;HE、PAS染色,光镜观察肾组织形态学改变;RT—PCR检测肾组织TGFβ1、PAI—mRNA表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠FBG、BUN、Cr、Upro、TC、TG水平升高（P〈0．01）,肾小球基底膜增厚,TGFβ1、PAI-1mRNA表达增加（P〈0．05）。PNS治疗组大鼠以上生化指标均降低,肾小球纤维化程度减轻,TGFβ1、PAI-1mRNA表达减少,与模型组比较,有显著性差异（P〈0．01）。结论：三七皂苷可能通过降低TGFβ1、PAI-1mRNA表达,进而对DM大鼠肾脏具有保护作用。     

益肾活血汤抗单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化作用及机制的研究

目的 探讨益肾活血汤对大鼠肾间质纤维化的拮抗作用及机制.方法 将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、益肾活血汤治疗组、贝那普利治疗组.制备单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型,在术后第21日处死大鼠留取梗阻侧肾组织观察肾间质病理变化,并用免疫组化法测定肾组织中纤溶酶原激活剂抑制物-1（PAI-1）、转化生长因子-β（TGF-β）及结缔组织生长因子（CTGF）的表达,处死前留取24 h尿测定尿蛋白,心腔穿刺取血测定血清尿素氮（BUN）、血清肌酐（Scr）.结果 益肾活血汤组24h尿蛋白、BUN、Scr水平、肾间质纤维化程度及PAI-1、TGF-β、CTGF的表达量均明显低于模型组（P＜0.05）,但与贝那普利组差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 益肾活血汤对肾间质纤维化具有拮抗作用,其机制可能为通过减少PAI-1、TGF-β、CTGF等致纤维化因子在肾组织中的过度表达来抑制肾间质纤维化.     

PAI-1 mRNA在糖尿病大鼠肾脏的表达与通心络胶囊的干预作用研究

目的研究纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）在糖尿病大鼠肾皮质的表达和中药通心络胶囊对其的干预作用。方法将SD大鼠随机分为两组,一组经链尿佐菌素诱发的糖尿病模型（DM）组,另一组为血糖正常对照组（C）,两组均再随机分为DMl组、DM2组、Cl组、C2组,其中DM2组、C2组给予通心络治疗5周。治疗前后称体重、监测血糖,最后取肾脏称重,采用逆转录一多聚酶链式反应（RT-PCR）观测肾皮质PAI-1mRNA表达量。结果 DM组大鼠肾重/体重值及PAI-lmRNA表达明显高于C组（P〈0.01）,DM2组PAI-1mRNA表达低于DMl组,差异有统计学意义（P〈0.05）,肾皮质PAI-1mRNA表达量在C1与C2组间无统计学意义（P〉0.05）。结论 PAI-1mRNA在糖尿病大鼠肾皮质的表达增高,PAI-1增高参与糖尿病肾病的病理生理过程。中药通心络对糖尿病时PAI-1mRNA肾皮质的表达增高有下调作用。     

补阳还五汤对激素性股骨头坏死大鼠血液流变学、凝血及纤溶的影响

目的:观察补阳还五汤对激素性股骨头坏死(SANFH)大鼠血液流变学、凝血及纤溶的影响,探讨其防治SANFH的机理。方法:取30只SD大鼠随机分为3组:正常对照组、模型组、治疗组。以每周2次注射醋酸泼尼松龙24.5mg/kg进行造模,正常对照组注射等容积生理盐水。造模同时给药,治疗组予补阳还五汤水提液灌胃,模型组及正常对照组喂生理盐水。第6周取血标本检测血液流变学、凝血及纤溶指标。结果:①血液流变学测定结果:模型组全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数明显高于正常对照组(P0.05),治疗组全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数明显低于模型组(P0.05),治疗组红细胞压积与模型组比较无显著变化(P0.05)。②凝血指标测定结果:模型组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)较正常组短(P0.05),而纤维蛋白原(FIB)升高(P0.05)。治疗组PT、APTT、TT较模型组延长(P0.05),而FIB降低(P0.05)。③纤溶指标测定结果:模型组的组织型纤溶酶原激活物(tPA)较正常组减少,而tPA抑制剂1(PAI-1)无明显差异(P0.05)。治疗组tPA较模型增加,PAI-1无明显差异(P0.05)。④治疗组血液流变学、凝血及纤溶各指标与正常对照组间比较无显著变化(P0.05)。结论:补阳还五汤能够改善因激素导致的异常血液流变状态、凝血及纤溶功能,改善高凝状态,有利于阻止或延缓SANFH的发生和发展。     

抗纤灵二号方对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质细胞外基质的调节

目的：通过观察抗纤灵二号方对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质转化生长因子-β1（TGF-β1）、纤维连接蛋白（FN）以及纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）表达的影响,探讨其对细胞外基质（ECM）沉积与降解的调节。方法：建立大鼠UUO模型,90只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、代文组和抗纤灵二号方低、中、高剂量组,于治疗4周后收集24h尿液检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）、B2-广微球蛋白（B2-MG）,取术侧肾组织,HE、Masson染色观察肾小管间质病变,免疫组织化学染色观察TGF-β1、FN及PAI-1在。在间质的表达,并应用图像分析系统进行半定量分析。结果：抗纤灵二号方能够显著减少UUO大鼠尿NAG、β2-MG的排泄．减轻肾间质胶原纤维的积聚．降低TGF-β1、FN及PAI-1在肾间质的表达。结论：抗纤灵二号方可能通过减轻肾小管损伤,减少胶原纤维积聚,下调TGF-β1、FN及PAI-1表达,抑制ECM沉积,促进ECM降解,从而达到改善肾间质纤维化的作用。     

肾安冲剂对阿霉素肾病大鼠肾组织TGF-β1、α-SMΑ、CTGF及Col-Ⅰ表达的影响

目的：探讨肾安冲剂对阿霉素肾病大鼠肾间质纤维化的影响。方法：将150只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、肾安冲剂小剂量组和肾安冲剂大剂量组、泼尼松加缬沙坦组。对除正常组外的其余组大鼠尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病模型。各组大鼠分别于造模后8、12、16周末分批处死,免疫组化法检测肾组织中TGF-β1、α-SMA、CTGF和Col-Ⅰ的表达。结果：各治疗组大鼠肾组织中TGF-β1、Col-Ⅰ、CTGF和α-SMA的表达均较模型组明显减少（P〈0.05）,且以肾安冲剂大剂量组最显著。结论：肾安冲剂可能通过下调肾组织TGF-β1、Col-Ⅰ、CTGF和α-SMΑ的表达而抑制ECM的合成,从而达到延缓阿霉素肾病大鼠肾小管间质纤维化的目的。