CD69+T细胞在银屑病皮损中的表达及其临床意义

目的 探讨银屑病患者皮肤CD69+T细胞的表达及其与疾病活动性的关系.方法 免疫组化检测31例银屑病患者皮损和非皮损中CD69+T细胞在皮肤中的表达,与6例健康人进行对照.结果 CD69+T细胞主要分布于皮肤真皮.31例银屑病患者皮损和非皮损的真皮中,CD69+T细胞分别为(35.16±12.67)％和(8.70±3.29)％,皮损明显高于非皮损(t=12.5,P＜0.01).6例健康人对照皮肤中CD69+T细胞(8.71±2.55)％,明显低于银屑病皮损(t=5.03,P＜ 0.01),与非皮损相比,差异无统计学意义(t=0.05,P＞ 0.05).20例急性期与1 1例稳定期银屑病患者皮损中CD69+T细胞分别为(40.89±10.31)％和(24.46±9.49)％,急性期明显高于稳定期(t=0.36,P＜ 0.01).结论 银屑病患者皮损中CD69+T细胞表达增高,与疾病的活动性有关.     

银屑病皮损CD8αα+ T细胞表型鉴定

目的 探究银屑病皮损局部浸润的CD8+ T细胞表型及其在银屑病发病中的作用。方法 收集2017年1 - 12月第四军医大学西京皮肤医院明确诊断的8例进行期斑块状银屑病患者皮损,男女各4例,年龄24 ~ 50岁。8例健康对照皮肤来源于整形外科手术剩余皮肤,男女各4例,年龄23 ~ 46岁。采用免疫荧光技术检测皮损CD8+ T细胞的分布及亚群比例,鉴定其免疫学表型及炎症因子白细胞介素（IL）17A的表达。结果 8例银屑病皮损真、表皮均可见CD8+ T细胞浸润,其中CD8αα+ T细胞表型占88.48% ± 7.39%,8例健康人皮肤局部仅有个别CD8+ T细胞浸润,其中CD8αα+ T细胞表型占14.43% ± 13.14%,两组比较,t = 11.5,P < 0.01。银屑病皮损表皮CD8αα+ T细胞表达组织局部定植标志CD103,真皮CD8αα+ T细胞不表达CD103。银屑病皮损CD8αα+ T细胞表达CD45RA-CCR7-效应记忆性T细胞表型,不表达CD8+ 调节性T细胞标志Foxp3、CD25和CD122。银屑病皮损CD8αα+ T细胞中分泌IL?17A的细胞比例为24.85% ± 4.25%,对照组CD8αα+ T细胞不分泌IL?17A,两组差异有统计学意义（t = 5.853,P < 0.01）。结论 银屑病皮损浸润的CD8αα+ T细胞是效应记忆性T细胞,可能通过分泌IL?17A参与银屑病的发生发展。     

银屑病患者皮肤中T细胞与黑素细胞的检测及临床意义

目的 研究银屑病患者皮肤中CD4+和CD8+ T细胞与黑素细胞的关系和临床意义。 方法 取29例进行期银屑病患者皮损和非皮损、5例消退期患者皮损和非皮损及6例健康人皮肤。免疫组化检测CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的数量和分布,并对比基底层黑素细胞和色素颗粒情况。采用SPSS18.0软件进行统计分析,多组间比较采用单因素方差分析（ANOVA）,两组间比较采用最小显著差异法（LSD）,相关性分析采用Pearson检验。 结果 银屑病患者皮损中每个高倍（× 200）视野CD4+ T细胞平均数（表皮5.29 ± 4.66,真皮77.50 ± 43.66）明显高于非皮损（表皮为0,真皮9.67 ± 7.73）,皮损与非皮损比较,均P ＜ 0.05;而CD8+ T细胞的数量（表皮7.83 ± 6.27,真皮46.08 ± 34.26）亦明显高于非皮损（表皮0.71 ± 1.20,真皮5.54 ± 4.43）,皮损与非皮损比较,均P ＜ 0.05。与健康对照皮肤相比,银屑病患者皮损中CD4+ T细胞和CD8+ T细胞均明显增多,差异有统计学意义（均P ＜ 0.05）。银屑病皮损处基底层黑素细胞数量（103.45 ± 16.96）明显高于非皮损（43.62 ± 14.20,P ＜ 0.05）及健康人皮肤（P ＜ 0.05）,但色素颗粒阳性细胞比例（7.45% ± 3.86%）明显低于非皮损（43.10% ± 14.91%,P ＜ 0.05）及健康人皮肤（P ＜ 0.05）。非皮损处CD8+ T细胞、CD4+ T细胞、黑素细胞数量及色素颗粒阳性细胞比例与健康人比较差异均无统计学意义。消退期皮损黑素细胞数量高于消退后白斑（P ＜ 0.05）,色素颗粒阳性细胞比例略低于消退后白斑,但差异无统计学意义;与健康人比较,消退期皮损黑素细胞数量高,而色素颗粒阳性细胞比例低,均有统计学差异（均P ＜ 0.05）,消退后白斑的黑素细胞数量与健康人比较差异无统计学意义,而色素颗粒阳性细胞比例降低（P ＜ 0.05）。进行期患者皮损中CD4+、CD8+ T细胞数与黑素细胞数及色素颗粒阳性细胞比例均无相关性（均P > 0.05）,而非皮损中CD4+、CD8+ T细胞数与黑素细胞数呈正相关（r值分别为0.46和0.56,均P ＜ 0.05）,但与色素颗粒阳性细胞比例无明显相关性（P > 0.05）。 结论 在银屑病进行期皮损中,CD4+ T细胞和CD8+ T细胞明显增多,基底层黑素细胞数量增加,但色素颗粒明显减少;皮损消退后,黑素细胞数量及色素颗粒逐渐接近健康人水平。     

活化抗原CD69、HLA-DR在寻常性银屑病外周血单一核细胞和皮损中的表达

目的 探讨活化抗原CD69和HLA-DR在寻常性银屑病患者外周血CD3+T淋巴细胞和皮损中的表达变化。 方法 流式细胞仪检测20例寻常性银屑病患者和20例健康对照外周血CD3+T细胞中CD69和HLA-DR的表达,同时采用免疫组化的方法检测15例寻常性银屑病患者和10例健康对照皮损组织中HLA-DR的表达并进行对比。两组统计学分析采用双侧t检验。 结果 CD69和HLA-DR在寻常性银屑病患者外周血CD3+T细胞中的表达率分别为（4.70 ± 1.90）%、（8.97 ± 1.79）%,比健康对照组［（1.56 ± 0.95）%、（3.02 ± 1.15）%］明显升高（均P < 0.01）。Pearson相关性分析发现,CD3+HLA-DR+细胞百分比与银屑病皮损和严重程度评分指数（PASI）评分呈正相关（r = 0.5626,P < 0.05）。与健康对照组比较,寻常性银屑病患者皮损真皮中HLA-DR表达升高,但表皮中HLA-DR表达降低（均P < 0.05）,HLA-DR在健康人主要分布在血管周围,而在寻常性银屑病患者则广泛表达于真皮组织。 结论 寻常性银屑病患者外周血CD3+T淋巴细胞及皮损中的炎症细胞存在异常活化,外周血CD3+HLA-DR+细胞与疾病严重程度存在相关性。     

窄谱中波紫外线治疗前后银屑病皮损中CD1a^＋DC、Ki-67的表达

目的探讨窄谱中波紫外线（NB—UVB）治疗对银屑病患者皮损中CD1a^＋树突细胞（CD1a^＋DC）及Ki-67水平的影响。方法采用免疫组化法分析寻常性银屑病患者NB—UVB治疗前后皮损中及非皮损中CD1a^＋DC及Ki-67的表达。采用银屑病皮损面积和严重性指数（PASI）进行病情严重程度评分。结果27例银屑病患者中,治疗前皮损中CD1a^＋DC及Ki-67表达水平（15±4;53±12）高于非皮损（9±3;22±6）及治疗后患者皮损的表达量（9±3;25±1）（P〈0．05）。银屑病皮损的严重程度PASI评分与Ki-67表达相关（r=0．29,P〈0．05）。银屑病皮损的严重程度PASI评分与CD1a抗原的表达量之间无相关性（r=-0．27,P〉0．05）。结论NB—UVB可以通过调节皮肤免疫系统达到治疗目的。银屑病患者皮损中Ki-67表达水平与银屑病皮损的严重程度PASI评分有关。     

银屑病患者皮肤中原位记忆T淋巴细胞的检测

目的 研究皮肤组织原位记忆T淋巴细胞在银屑病发病过程中的作用。 方法 收集32例进行期斑块状银屑病患者的临床资料,采集每例患者的皮损和非皮损组织、9例患者皮损消退后皮肤标本;10例健康人皮肤为对照。采用免疫组化法检测组织原位记忆T淋巴细胞的特征性表面标志CD69和CD103,分析组织原位记忆T淋巴细胞在银屑病发病不同时期的情况。两组免疫组化结果进行t检验。 结果 32例进行期银屑病患者皮损和非皮损每高倍视野中CD69+CD103+ T淋巴细胞数量分别为11.34 ± 7.60和2.72 ± 4.20,皮损区明显高于非皮损区（t = 8.46,P ＜ 0.01）;其中9例患者皮损消退前后每高倍视野中CD69+CD103+ T淋巴细胞数量分别为14.33 ± 2.21和12.00 ± 4.58,皮损消退前后比较差异无统计学意义（t = 1.98,P = 0.08）;健康对照组为1.70 ± 2.98,与银屑病患者非皮损区比较,差异无统计学意义（t = 0.71,P > 0.05）。 结论 银屑病患者皮肤中原位记忆T淋巴细胞可能在皮损的形成和复发过程中起作用。     

窄谱中波紫外线治疗前后银屑病皮损中朗格汉斯细胞的表达

采用免疫组化SP法染色技术检测了27例寻常型银屑病患者NB-UVB治疗前后皮损及皮损周围正常皮肤临近非LC的表达;采用银屑病皮损面积和严重性指数(PASI)进行病情严重程度评分.27例银屑病患者中,治疗前银屑病患者皮损中LC的表达水平高于非皮损及治疗后皮损(P<0.05);银屑病皮损的严重程度PASI评分与CD1a抗原的表达量之间无相关性(r=-0.27,P>0.05).推测NB-UVB可以通过诱导表皮中朗格汉斯细胞凋亡,调节皮肤免疫系统发挥治疗作用.     

某些细胞因子在天疱疮皮损中的表达

目的:检测Th2类细胞因子在天疱疮皮损中的表达.方法: 选用单克隆抗体CD4,CD8,CD25,CD54和CD124等,对40例天疱疮患者的皮损及皮损周围皮肤标本用S-P法进行免疫组化研究,同时以20例正常人皮肤组织为对照.结果: CD4+和CD8+的T细胞见于全部标本真皮浸润的单一核细胞内,且以CD4+的T细胞为主(P<0.01),在表皮CD8+的T细胞在寻常型天疱疮和红斑型天疱疮比较有显著性差异(P<0.01),27例病人显示CD25染色阳性,与皮损周围相比CD54在皮损处表达增多(P<0.05).某些CD124阳性细胞见于表皮及真皮.对照组中CD4+和CD8+T细胞稀少,CD4/CD8比值为1.4,在皮损及皮损周围的皮肤中CD25的表达无显著性差异(P>0.05),而角质形成细胞不表达CD25.CD54的表达见于血管内皮细胞和真皮血管周围的单一核细胞,与皮损周围相比,皮损处CD54+增加(P<0.05).结论:细胞免疫在天疱疮的发病中有重要作用.     

自然杀伤细胞和T淋巴细胞在银屑病发病中作用的研究

用免疫组化法检测10例银屑病患者皮损、皮损周围外观正常皮肤和正常对照组自然杀伤细胞（NK细胞）、T细胞表面抗原的表达。结果表明：患者皮损处真皮乳头NK细胞表面抗原CD16、CD56、CD57、CD94、CD158a，T细胞表面抗原CD2、CD3、CD4、CD8和皮肤白细胞相关抗原（CLA）阳性表达的细胞数，较皮损周围外观正常皮肤和正常对照组增多（P＜0．05或＜0．01）。作者认为：T细胞、NK细胞共同参入银屑病的发病，并分析了二者之间相互关系。     

寻常型银屑病患者外周血髓系树突状细胞CD47的表达

目的：检测寻常型银屑病患者外周血髓系树突状细胞（mDCs）表面整合素相关蛋白（CD47）的表达水平。方法：流式细胞仪检测寻常型银屑病患者和健康对照者外周血mDCs表面CD47及CD4+调节性T细胞（Treg）表达水平；Luminex液相芯片技术检测上清液IL-23、IL-17和TNF-α浓度。结果：共检测46例患者和46名健康对照，患者组mDCs细胞CD47表达水平为32.8低于对照组的63.6，差异有统计学意义（P<0.05）。患者组mDCs细胞CD47表达水平与银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI）负相关（r=-0.651, P<0.05）；患者组Treg细胞比例显著低于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）；IL-23、IL-17和TNF-α浓度显著高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：银屑病外周血mDCs表面CD47及Treg细胞表达下降。     

寻常性银屑病患者表皮中DNA总体甲基化水平检测

目的通过检测寻常性银屑病患者表皮DNA总体甲基化水平,探讨DNA甲基化在银屑病发生发展过程中的作用。方法采用荧光比色法检测寻常性银屑病患者表皮DNA总体甲基化水平,与同一患者非皮损部位及健康对照者表皮进行对照研究,并分析其与病情严重程度的相关性。以PASI评分评估银屑病病情严重程度。结果在30例银屑病患者皮损、非皮损部位表皮及28名健康对照者表皮中检测到不同程度的DNA甲基化,分别为(4.92±2.12)%、(2.85±1.35)%和(2.32±0.99)%。银屑病患者皮损部位表皮DNA总体甲基化水平显著高于同一患者的非皮损部位(P<0.0001)及健康对照者(P<0.0001),而非皮损部位DNA总体甲基化水平与健康对照者之间差异无统计学意义(P>0.05)。银屑病患者皮损部位表皮中DNA总体甲基化水平与PASI评分之间存在显著相关性(P<0.0001)。结论寻常性银屑病患者表皮中DNA总体甲基化水平明显升高,且与疾病严重程度呈正相关。     

Intraepidermal lymphocytes in psoriatic lesions are activated GMP-17(TIA-1)+CD8+CD3+ CTLs as determined by phenotypic analysis

The onset and persistence of psoriatic lesions are linked to the presence of an inflammatory infiltrate of CD3+ lymphocytes that includes CD4+ and CD8+ subsets. Since a primary susceptibility factor for psoriasis is the Class I HLA-Cw6 molecule, we set out to learn more about the features of the epidermal CD8+ lymphocytes. The markers tested were GMP-17, a cytotoxic granule protein found in activated cytotoxic lymphocytes (CTLs), and the alpha chain of the IL-2 receptor (CD25), a plasma membrane molecule found on activated T cells. Lymphocytes in lesional skin expressed the GMP-17 protein, whereas lymphocytes in non-lesional skin, resolving lesional skin and normal skin had little or no GMP-17. By flow cytometry analysis, lesional epidermal GMP-17+ cells were CD8+CD3+, with a subpopulation expressing the activation marker CD25+. Due to the abundance of activated GMP-17+CD8+CD3+ lymphocytes (the phenotype of activated cytotoxic cells) in psoriatic lesions compared to non-lesional and normal skin, we hypothesize that they are contributing directly to the psoriatic phenotype.     

Th17细胞、IL-17A mRNA及IL-23R mRNA与寻常性银屑病的关系

目的 探讨寻常性银屑病（PV）皮损中IL-17A mRNA及IL-23R mRNA水平、外周血CD4+IL-17+ T细胞数量及它们与疾病严重程度的关系。方法 PV组25例,对照组14例。对PV皮损面积和严重指数（PASI）评分,用RT-PCR检测皮肤中IL-17A mRNA及IL-23R mRNA的水平,并用流式细胞仪测定20例PV患者及10例对照组外周血CD4+IL-17+ T细胞的数量。结果 PV组IL-17A mRNA的水平明显高于对照组（0.996 ± 0.231比0.437 ± 0.096,t = 10.57,P < 0.05）,IL-23R mRNA水平也明显高于对照组（1.006 ± 0.339比0.491 ± 0.196,t = 6.02,P < 0.05）。PV皮损中IL-17A mRNA与IL-23R mRNA的水平与PASI均呈线性正相关（分别为r s ＝ 0.67,P < 0.05;r s ＝ 0.70,P < 0.05）。外周血CD4+IL-17+ T细胞数量在两组差异无统计学意义。PV组中,外周血中CD4+IL-17+ T细胞数量与皮损中IL-17A mRNA、IL-23R mRNA水平无相关性。结论 PV皮损中IL-17A mRNA及IL-23R mRNA 的水平升高,与疾病严重程度相关,外周血Th17细胞数量无改变。     

In situ localization of CD83-positive dendritic cells in psoriatic lesions

BACKGROUND: Dendritic cells (DC) are considered to be the most potent antigen-presenting cells, and CD83 is expressed at a high level on immune-competent, activated and mature DC. Although changes in the number or localization of mature and activated CD83+ DC could be expected in psoriasis, there is little information on such changes. AIM: Morphological identification of CD83+ DC in psoriatic skin lesions. MATERIALS AND METHODS: Immunohistochemical staining was performed in 5 specimens of psoriasis vulgaris and 6 specimens of pustular psoriasis. Formalin-fixed, paraffin-embedded sections were used for examination in this study. The skin sections were pretreated with 0.1% trypsin for 60 min at 37 degrees C prior to immunostaining for CD83. RESULTS: A small but significant subpopulation of CD83+ DC was found in the upper dermis. In addition, CD83+ DC were occasionally scattered in the epidermis. The most common distribution pattern of CD83+ DC was as clusters with mononuclear lymphoid cells in the upper dermis. CD83+ DC were in close contact with lymphocytes. High-intensity staining of CD83 antigens was detected not only on the surface, but also in the cytoplasm of DC. CONCLUSION: These results indicate that activated and mature CD83+ DC may play a role in the immune response in psoriasis and provide in vivo support for the concept that CD83+ DC provide signals for direct intralesional T cell activation.