大鼠脑缺血再灌注损伤中星形胶质细胞活化与热休克蛋白70表达上调的关系

业已证实 ,脑缺血性损伤可诱导热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达上调。HSP70作为分子伴侣参与了细胞修复过程 ,在脑缺血损伤中具有神经保护作用。以往认为 ,HSP70主要由神经元及小胶质细胞产生 ,近年来研究发现 ,脑缺血时 ,活化的星形胶质细胞也可表达HSP70。但有关二者关系的报道极少 ,我们观察了可逆性大脑中动脉阻塞后再灌注不同时点HSP70与星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达变化 ,初步探讨二者在脑缺血再灌注损伤中的关系及意义。　　一、材料和方法　　 1 动物分组 :健康雄性Sprague Dawley大鼠共 4 2只 ,体重 2 …     

黄芪甲苷对大鼠脑缺血再灌注后小胶质细胞的影响

目的研究不同剂量黄芪甲苷(astragaloside,AST)预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后小胶质细胞的影响。方法选择SD大鼠60只,随机分为5组:假手术组、模型组、AST 10 mg组、AST 40 mg组和AST 100 mg组,每组1 2只。AST各组分别于缺血前30 min注射相应剂量的AST。采用线栓法制作大鼠一侧大脑中动脉缺血再灌注模型,通过免疫组织化学法观察各组缺血区和半暗带区OX12表达水平的变化情况。结果与假手术组比较,模型组缺血半暗带区OX42阳性细胞数明显增多,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,AST 40 mg组和AST 100 mg组脑梗死体积、神经功能缺损评分、半暗带区OX42阳性细胞数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与AST 10 mg组比较,AST 40 mg组神经功能缺损评分明显减少.AST 40 mg组和AST 100mg组脑梗死体积、半暗带区OX42阳性细胞数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 AST可通过降低脑缺血再灌注后OX42表达起到脑保护作用。     

小胶质细胞与脑缺血

小胶质细胞是脑内的主要免疫效应细胞,在神经元的生理活动中起支持、营养、保护和修复等重要功能。脑缺血后,小胶质细胞迅速活化和增殖,发挥巨噬细胞的吞噬效应,并通过产生神经毒性分子和神经营养因子发挥双重作用。因此,研究小胶质细胞与脑缺血的关系,充分发挥其保护功能,降低其损害作用,将有助于提高缺血性脑损伤的救治效果。     

脑缺血时星形胶质细胞与谷氨酸的相互作用

星形胶质细胞是中枢神经系统的一大类细胞 ,具有重要的生理功能。脑缺血时神经细胞外兴奋性氨基酸 ,特别是谷氨酸浓度大大增高 ,而谷氨酸的兴奋毒性在神经元死亡中起重要作用。星形胶质细胞与谷氨酸的相互作用可保护神经元 ,从而减轻缺血性脑损伤。     

脑缺血后胶质纤维酸性蛋白表达的变化

胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP )是脑内星形胶质细胞 (astrocyte ,Ast)中间纤维的结构蛋白组成成分 ,由Eng等 (1971)首先从脑内星形胶质细胞中分离出来 ,逐渐被人们看做成熟和反应性星形胶质细胞的特征性标记物 ,Zilles(1991)将其作为全脑所有Ast的特异性免疫组化标记物〔1〕。GFAP在脑缺血后不同时间、不同脑区的表达有明显差异 ,反映了Ast活化程度不同。本文就脑缺血后GFAP的表达作一综述。1　GFAP的生物学特点GFAP是一种线性结构蛋白质 ,与波形蛋白、巢状蛋白一起组成Ast的中间纤维。人GFAP是由 43 …     

脑老化及阿尔茨海默病患者脑中星形胶质细胞及小胶质细胞改变的观察

目的观察人脑老化及阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)患者脑中星形胶质细胞与小胶质细胞形态的改变。方法应用胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)及铁蛋白免疫组织化学方法,观察28例正常增龄病例(分为老年组和对照组)尸检脑标本额叶、枕叶、壳核、海马及6例AD病例(AD组)海马标本中星形胶质细胞与小胶质细胞的分布及形态学改变。结果铁蛋白免疫组织化学方法能够清晰地显示石蜡切片中的小胶质细胞。对照组患者GFAP阳性星形胶质细胞主要分布于白质,铁蛋白阳性小胶质细胞主要分布于灰质。老年组患者星形胶质细胞呈不同程度增生、肥大,小胶质细胞出现增生、活化,部分出现老年斑的正常老龄脑皮质中可见活化小胶质细胞聚集成团。个别病例小血管内外均见到活化小胶质细胞。结论星形胶质细胞及小胶质细胞增生、活化是脑老化的重要形态学改变,活化小胶质细胞有可能参与了老年斑的形成。     

星形胶质细胞与缺血性卒中

缺血性卒中时,作为“神经血管单元”的重要组成成分,星形胶质细胞可通过摄取过量兴奋性氨基酸、提供能量物质、维持胞外K+和水的平衡、清除氧自由基以及分泌神经营养因子等方式对神经元提供保护作用.文章就近年来星形胶质细胞参与缺血性卒中的机制进行了阐述.     

星形胶质细胞在脑缺血中的双重作用

星形胶质细胞是中枢神经系统中数量最多的神经细胞,发挥着重要的生理作用.在脑缺血过程中,星形胶质细胞活化是中枢神经系统的主要变化之一.活化的星形胶质细胞可通过维持离子平衡、调节能量代谢、清除兴奋性氨基酸、对抗氧化应激、分泌神经保护物质等机制发挥神经保护作用.然而,脑缺血后星形胶质细胞活化也有其不利的一面.文章对星形胶质细胞活化在脑缺血中的保护与损害作用进行了综述,探讨了其调控机制,旨在为缺血性卒中的治疗提供新的思路.     

复方菖蒲益智汤对脑缺血再灌注损伤小鼠小胶质细胞的影响

目的观察复方菖蒲益智汤对脑缺血再灌注损伤小鼠小胶质细胞的影响。方法采用阻断双侧颈总动脉法制备脑缺血再灌注模型。运用CD11b兔抗原的免疫组化染色方法检测模型小鼠脑组织小胶质细胞的表达水平。结果模型组小胶质细胞的表达水平明显高于假手术组(P0.05)。复方菖蒲益智汤高剂量组小胶质细胞的表达水平明显低于模型组、复方菖蒲益智汤低剂量组、尼莫地平组(P0.05)。复方菖蒲益智汤低剂量组与尼莫地平组小胶质细胞的表达水平无明显统计学差异(P0.05)。结论复方菖蒲益智汤可能通过抑制小胶质细胞的激活降低脑缺血再灌注的损伤程度。     

小胶质细胞与脑缺血

小胶质细胞是脑内的主要免疫效应细胞 ,正常时处于“休眠”状态 ,无吞噬功能。脑缺血或受其他损害后 ,小胶质细胞被迅速活化 ,通过形态、免疫显型和功能的改变 ,产生瀑布效应 ,发挥免疫调节、组织修复和细胞损伤的“双刃”作用。在其活化的早期 ,适当抑制它的活化反应 ,能减少不必要的细胞毒性作用和病理损害。     

小鼠局灶性脑缺血后原蛋白转化酶1及神经肽Y的表达

目的观察小鼠局灶性脑缺血后脑皮质神经细胞内原蛋白转化酶1(PC1)及其作用底物神经肽Y(NPY)的表达变化,探讨PC1在神经细胞缺血损伤中的作用。方法将24只雄性C57小鼠用计算机随机法分为假手术组和缺血-再灌注4、24 h组,每组各8只。采用线栓法制备小鼠大脑中动脉阻塞模型,阻塞1 h再灌注。采用Western Blot法、实时荧光定量核酸扩增检测小鼠脑皮质神经细胞中PC1及NPY蛋白、mRNA的表达变化。结果 (1)与假手术组比较,缺血侧皮质脑组织PC1mRNA缺血-再灌注4 h组表达增加(2.66±0.24),缺血-再灌注24 h组增加(2.07±0.23),差异均有统计学意义(均P0.05)。与假手术组比较,缺血-再灌注4 h组PC1前体蛋白水平明显增加(P0.05),24 h组差异无统计学意义(P0.05)。(2)与假手术组比较,缺血-再灌注4 h组前体NPY前体蛋白水平及mRNA增加(P0.05),mRNA表达为2.31±0.27;24 h组蛋白前体水平增加(P0.05),NPY mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。结论小鼠脑缺血-再灌注后PC1前体表达增多,从而影响PC1的加工活性,导致PC1的作用底物NPY蛋白以前体形式堆积,可能为神经细胞缺血损伤的内在机制之一。     

脑缺血后神经发生

脑缺血后神经发生是神经科学领域的研究热点之一.文章主要从脑缺血后神经发生的主要过程、调节因子、信号通路、微环境以及如何促进脑缺血后神经发生等方面阐述神经发生的研究进展,旨在为卒中后神经功能恢复提供新的治疗思路.     

Signal transduction pathways involved in melatonin-induced neuroprotection after focal cerebral ischemia in mice

Because of its favorable action profile in humans, melatonin is a particularly interesting candidate as a neuroprotectant in acute ischemic stroke. Until now, the signaling mechanisms mediating melatonin's neuroprotective actions remained essentially uninvestigated. Herein, we examined the effects of melatonin, administered either orally for 9 wk as a stroke prophylactic (4 mg/kg/day) or intraperitoneally immediately after reperfusion onset (4 mg/kg), on the activation of signal transduction pathways in mice submitted to 90 min of intraluminal middle cerebral artery occlusion, followed by 24 hr of reperfusion. In these studies, melatonin significantly reduced ischemic infarct size by approximately 30-35%, as compared with animals receiving diluent (sham) treatment, independent of whether the indole was administered prior to or after ischemia. Under both conditions, animals receiving melatonin exhibited elevated phosphorylated Akt levels in their brains, as determined by Western blots. Additionally, phosphorylation levels of mitogen-activated protein kinase/extracellular-regulated kinase (ERK)-1/-2 and Jun kinase (JNK)-1/-2 were increased following prophylactic, but not acute, melatonin treatment. Our data suggest a role of phosphatidyl inositol-3 kinase/Akt signaling in acute melatonin-induced neuroprotection, while ERK-1/-2 and/or JNK-1/-2 rather appear to be involved in melatonin's long-term effects.     

丙氨酰谷氨酰胺对脑缺血再灌注损伤小鼠肠道通透性改变的影响

目的探讨丙氨酰谷氨酰胺(alanyl-glutamine,GLN)对脑缺血再灌注损伤小鼠肠道通透性改变的影响。方法选择普通C57BL/6雄性小鼠28只,喂养1周后随机分为假手术组、大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组、溶剂对照组(生理盐水灌胃)、GLN干预组(GLN 0.02g/只灌胃),每组7只,假手术组仅充分游离右侧颈总动脉及其颈动脉分叉,不插入栓线,其他3组建立MCAO模型。采用氯化三苯基四氮唑染色评估脑梗死面积,流式细胞术检测循环单核细胞亚群比例,检测血浆脂多糖及D-乳酸盐水平,采用异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(FD4)法间接检测肠道通透性变化。结果与假手术组比较,MCAO组、溶剂对照组及GLN干预组小鼠Ly6Chi单核细胞比例、血浆脂多糖及FD4水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。GLN干预组Ly6Chi单核细胞亚群比例[(61.13±7.50)%vs (74.43±4.50)%和(75.26±3.39)%]及血浆脂多糖[(2.88±0.32)EU/ml vs (4.23±0.57)EU/ml和(4.22±0.40)EU/ml]明显低于MCAO组与溶剂对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。GLN干预组D-乳酸盐水平及FD4水平较MCAO组与溶剂对照组降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠脑缺血再灌注损伤后GLN干预可有效缓解炎性反应,减轻脑损伤。     

Effects of cerebral ischemia in mice deficient in Persephin

Persephin (Pspn), a recently cloned member of the transforming growth factor-beta superfamily (TGF-beta) and glial cell line-derived neurotrophic factor (GDNF) subfamily, is distributed throughout the nervous system at extremely low levels and is thought to function as a survival factor for midbrain dopaminergic and spinal motor neurons in vivo. Here, we report that mice lacking Pspn by homologous recombination show normal development and behavior, but are hypersensitive to cerebral ischemia. A 300% increase in infarction volume was observed after middle cerebral artery occlusion. We find that glutamate-induced Ca(2+) influx, thought to be a major component of ischemic neuronal cell death, can be regulated directly by the Persephin protein (PSP) and that PSP can reduce hypoxia/reperfusion cell death in vitro. Neuronal cell death can be prevented or markedly attenuated by administration of recombinant human PSP in vivo before ischemia in both mouse and rat models. Taken together, these data indicate that PSP is a potent modulator of excitotoxicity in the central nervous system with pronounced neuroprotective activity. Our findings support the view that PSP signaling can exert an important control function in the context of stroke and glutamate-mediated neurotoxicity, and also suggest that future therapeutic approaches may involve this novel trophic protein.     

肿瘤坏死因子受体1对脑缺血小鼠神经血管发生的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子受体1(tumor necrosis factor receptor 1,TNFRI)在脑缺血小鼠血管发生和神经发生中的作用.方法 24只野生型和24只TNFR1基因敲除小鼠随机分为假手术组和局灶性脑缺血组(每组12只),在脑缺血和假手术后第3天腹腔注射5-溴脱氧尿苷(5-bromodeoxyuridine,BrdU).脑缺血后第7和第28天,应用葡萄糖载体-1(glucose transporter-I,Glut-1)/BrdU免疫荧光染色双标记评价梗死周围区新生血管,标记BrdU检测侧脑室下区神经干细胞增殖,分别采用双皮质素(doublecortin,DCX)/3rdU和神经元核抗原(neuronal nuclei antigen,NeuN)/BrdU双标记检测神经干细胞迁移和存活.结果 在正常情况下,野生型(418.000±28.404)和TNFR1基因敲除(528.000±60.597)小鼠血管发生和室管膜下区(subventricular zone,SVZ)的BrdU阳性细胞数无显著性差异(t=-1.644,P=0.131);脑缺血后第7天,TNFR1基因敲除小鼠Glut-I/BrdU阳性细胞数量显著少于野生型小鼠(14.833±2.182对27.500±4.209;t=2.672,P=0.023),DCX/BrdU阳性细胞数也显著少于野生型小鼠(163.000±11.106对257.168±12.213;t=5.705,P=0.000);脑缺血后第28天,TNFR1基因敲除小鼠NeuN/BrdU阳性细胞数显著少于野生型小鼠(6.000±0.577对11.000±1.571;t =2.988,P=0.014).结论 TNFR1可能在脑缺血后期的神经血管再生中起着促进作用.     

激肽-激肽释放酶系统与脑缺血后血管发生

近年来,有关脑梗死治疗的研究已转向神经保护药方面,促进卒中后脑血管发生将成为脑梗死治疗的新途径之一.研究表明,脑缺血后激肽释放酶-激肽系统激活,可促进脑梗死后血管发生,改善神经功能缺损,降低病死率和致残率.文章就激肽释放酶-激肽系统在脑缺血后血管发生中的调控机制进行了综述.     

陷窝蛋白-1与脑缺血后炎性反应

陷窝蛋白-1作为陷窝的标志蛋白,通过其脚手架结构域寡聚许多细胞信号转导分子,参与许多病理生理过程,也通过不同的途径调控脑缺血后炎症反应。文章对近年来陷窝蛋白-1与缺血性卒中后炎性反应相关研究进展进行了回顾,重点讨论其炎症调控机制。     

小鼠大脑中动脉缺血后海马星形胶质细胞变化的研究

目的观察小鼠大脑中动脉缺血后海马星形胶质细胞的动态改变。方法昆明小鼠64只随机分为脑缺血组48只、正常组4只和假手术组12只。脑缺血组用线栓法制作小鼠右侧大脑中动脉缺血模型;TTC染色观察缺血1、3、6、12、24和48h的脑缺血部位及范围;HE染色法观察不同缺血时间海马神经元的变化;用免疫组织化学方法观察不同缺血时间海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化。结果与正常组比较,脑缺血组3、6、12、24和48h脑梗死体积显著增加[(19.67±5.46)%,(33.68±3.46)%,(54.65±6.13)%,(76.85±7.15)%,(81.81±4.09)%,P=0.000]。HE染色显示,脑缺血组缺血侧海马神经元产生损伤并不断加重,缺血6h后出现不可逆性损伤。与正常组及假手术组相比,脑缺血组缺血侧海马各区GFAP表达随缺血时间的延长数量不断增多(P0.05),细胞体肿胀,突起不断增粗延长,GFAP阳性细胞增长在6h时增速最快,48h达到高峰(P0.05)。结论小鼠大脑中动脉缺血后,可引起缺血侧海马神经元损伤,并刺激星形胶质细胞过度反应和增殖。