血管内皮细胞生长因子在法医病理学中的应用

血管内皮细胞生长因子(vascular endothelium growth faictor,VEGF)是一种高效、特异地作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子.其对血管内皮细胞的增殖、迁移、水解基底膜和血管构建均起作用,在基础医学及临床医学上有较多应用.现就近年来对有关VEGF的分子生物学及其在损伤修复中的作用,以及在法医病理学中应用的研究进展综述如下.     

血管内皮细胞生长因子抑制剂对成骨肉瘤生长的影响

通过动物接种方法研究血管内皮细胞生长因子 (VEGF)抗体对骨肉瘤生长的抑制作用。将OS 732骨肉瘤细胞以 1 0 70 / (mL·只 )的剂量接种于BALB/C型裸鼠腋窝部皮下 ,并分成 4组 :A组于接种次日于瘤体局部注射VEGF抗体 ,B组于接种后 2周瘤体局部注射抗体 ,C组于接种次日于瘤体局部注射PBS ,D组不注射抗体。VEGF注射剂量为 2 0 0 μg/ (只·次 ) ,每周 3次 ,共 3周。 4周后处死A、C2组裸鼠 ,6周后处死B、D 2组裸鼠。每组均取出瘤组织作病理切片。计算肿瘤体积及肿瘤内微血管密度 ,并对结果进行分析。结果显示 ,A组的肿瘤体积小于B、C、D 3组 ,在接种后 2 5d与D组有统计学差异 (P <0 .0 5 ) ;B、C、D 3组间无统计学差异。 4组肿瘤内微血管密度的比较 ,无统计学差异。提示 ,VEGF抗体对骨肉瘤早期的生长有明显的抑制作用 ,可作为转移病灶的预防及治疗方法之一。     

血管内皮细胞生长因子促进缺血皮瓣存活的实验研究

目的：本实验旨在观察并探讨血管内皮细胞生长因子对缺血皮瓣血循环重建和皮瓣存活面积比的影响。方法：以大鼠为研究动物,将其分为VEGF组和对照组,并在其背部制作典型缺血皮瓣,术后7天观察皮瓣存活面积,计算存活面积比、单位面积微血管计数、光镜观察组织愈合情况、透射电镜观察成纤维细胞结构和功能。结果：两个组中VEGF组的皮瓣存活面积比较对照组明显增高。单位面积微血管计数显示VEGF组较对照组多,且有显著性差异。电镜观察结果显示VEGF组成纤维细胞形态和功能较对照组好。结论：VEGF能促进缺血皮瓣的血运重建,从而加强组织修复,促进缺血皮瓣存活。     

内皮细胞表达血管内皮细胞生长因子的研究

目的 观察体外培养的内皮细胞表达和分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)的情况。方法 以脐静脉内皮细胞系ECV-304为研究对象，采用RT-PCR、流式细胞仪、ELISA法分别观察佛波脂(PMA)对ECV-304合成与分泌VEGF的作用。结果 100ng／ml PMA能明显上调VEGF mRNA的表达、VEGF蛋白的合成及分泌。其对VEGF mRNA表达及细胞内VEGF合成的作用在12h最为明显；而分泌至上清液中的VEGF量则在18h达到高峰。PMA的上述作用能够被放线菌素D所抑制。结论 PMA能够诱导内皮细胞ECV-304表达、合成及分泌VEGF，该作用呈剂量和时间依赖性。其对VEGF mRNA的作用涉及核苷酸的从头合成途径。     

血管内皮细胞生长因子与抗肿瘤转移治疗的研究

血管内皮细胞生长因子（VEGF）是最重要的刺激血管新生的细胞因子。VEGF的生物学效应是通过其特异性的膜受体即VEGF受体介导实现的。本文就VEGF及其受体的基因和蛋白结构、生物学作用、信号转导通路及在抗肿瘤血管新生治疗方面的研究进展作一综述。     

血管内皮细胞生长因子在足细胞内的分布及表达多种亚型的研究

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）在足细胞内的布及其所表达的VEGF亚型。方法：应用免疫荧光法观察VEGF在足细胞内的分布;逆转录PCR（RT－PCR）检测足细胞表达不同分子质量VEGF的mRNA和免疫蛋白印迹检测VEGF蛋白等。结果：VEGF在足细胞内以细胞核为中心向胞质呈放射状分布,体外培养的足细胞可以表达VEGF121、VEGF165和VEGF189,前两者表达较多,蛋白产物主要以VEGF165为主。结论：该研究首次发现足细胞在体外培养的条件下表达VEGF,并且在细胞内分布具有一定的规律性,为进一步研究VEGF在自身细胞和肾脏病中的作用提供了可靠的实验方法。     

小鼠视网膜血管内皮细胞生长因子与视网膜新生血管的相关性研究

目的 研究氧诱导视网膜新生血管小鼠模型中视网膜血管内皮细胞生长因子（VEGF）与视网膜新生血管的相关性。方法 通过建立氧诱导视网膜新生血管小鼠模型,分别于12、14、17、21 d龄随机抽取2组幼鼠各6只,一侧眼球测定视网膜VEGF水平,另一侧眼球进行视网膜铺片、ADP酶染色,考察其相关性。结果 模型组小鼠左眼球ADP酶染色结果显示,模型组12 d龄小鼠血管迂曲、扩张、变形,随时间延长血管变形加重,17 d时最严重,且视乳头周围出现大片无灌注区,视网膜周边可见大量新生血管生成,到21 d时模型开始恢复。视网膜VEGF测定结果显示,12 d龄模型小鼠VEGF开始升高,17 d达峰值,以后下降。结论 视网膜VEGF变化和视网膜血管形态具有很好的正相关性,17 d时新生血管形成最多。     

细胞生长因子在血管内皮细胞损伤中作用的研究进展

在心血管系统疾病中，常发现内皮细胞有不同程度的损伤，并伴随着细胞生长因子的改变而改变，这两者的关系目前研究甚多。本文就近年来细胞生长因子在内皮细胞损伤中作用的研究进展作一综述。     

血管内皮细胞生长因子与肿瘤治疗

血管内皮细胞生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ)作为内皮细胞特异性的有丝分裂原 ,在血管的发生和形成过程中起着重要的调节作用。ＶＥＧＦ在肿瘤的血管形成和维持中亦起着重要的作用 ,与肿瘤的生长、转移、预后关系密切。正因如此 ,越来越多的研究将ＶＥＧＦ及其受体作为靶点用于肿瘤的治疗。以下对ＶＥＧＦ及其受体以及以它们为靶点的肿瘤治疗进行综述。1　ＶＥＧＦ及其受体ＶＥＧＦ是一种 3 4～ 42ｋＤ的同型二聚体糖蛋白 ,属于胱氨酸结生长因子超家族 ,具有强大的促进血管形成、使血…     

血管内皮细胞生长因子及其受体研究进展

<正>1983年Senger等发现用癌性腹水作Mile试验,可使豚鼠皮肤对美兰的通透性增加。并且在癌性腹水和肿瘤细胞培养上清液中分离、纯化出可使微血管与小静脉血管通透性增加的活性物质,称作血管通透因子(Vascular Permeability Factor,VPF)。后来发现该因子特异性作用于血管内皮细胞,并促进血管内皮细胞的增殖,因此又称血管内皮细胞生长因子(Vascular EndotheUal Growth Factor,VEGF)。实验和临床研究发现,实体肿瘤在血管未形成时,肿瘤的增殖、生长有限,     

血管内皮生长因子促血管形成作用及其调控

血管内皮生长因子是一种具有促血管生成活性的功能性蛋白,它通过与特异性受体的结合,发挥生理功能:(1)促血管内皮细胞分裂从而促进新生血管形成;(2)增强血管通透性的功能.其活性的发挥受到多因素、多水平的调节,如:缺氧、癌基因、细胞因子、细胞间质成分等.本文从血管内皮生长因子的促血管形成机制及其调控因素等方面对其生物学行为和特性作一综述.     

血管内皮细胞生长因子在哺乳动物细胞的表达

目的：本实验试图构建具有生物学活性的ＶＥＧＦ真核表达载体,为ＶＥＧＦ基因治疗提供载体。方法：将已获得的ｈＶＥＧＦ１６５ ｃＤＮＡ克隆到ＧＳＴ融合表达载体,构建原核表达质粒,转染大肠杆菌ＤＨ５α,ＩＰＴＧ诱导表达,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定表达产物。在此基础上构建真核表达载体ｐｃＤＮＡ３ ／ｈＶＥＧＦ１６５,脂质体介导转染ＣＨＯ－Ｋ１细胞,Ｇ－４１８筛选,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ,Ｗｅｓｔ－ｅｒｎ ｂｌｏｔ分别检测其在细胞内的转录和表达情况,３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测表达蛋白的活性。结果：实验组的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ出现特异性条带,而对照组在相应部位未出现条带。实验组的大鼠心肌血管内皮细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入率明显高于对照组（Ｐ＜ ０．００１）。结论：本实验所构建的ＶＥＧＦ真核表达质粒能够在真核细胞内获得表达,其表达产物具有血管内皮细胞增殖刺激活性。     

糖尿病周围神经病变患者血管内皮生长因子与可溶性血管内皮生长因子受体-2的研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)与可溶性血管内皮生长因子受体-2(sVEGFR-2)对糖尿病周围神经病变发生的影响。方法检测30例糖尿病周围神经病变患者(病变组)及31例未并发周围神经病变的糖尿病患者(无病变组)的血清VEGF及sVEGFR-2浓度。结果周围神经病变组患者血清VEGF水平高于无周围神经病变组,差异有统计学意义(P<0.01)。周围神经病变组患者血清sVEGFR-2水平稍低于无周围神经病变组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论糖尿病患者血清中VEGF水平升高未能阻止周围神经病变的发生,sVEGFR-2可能未参与周围神经病变的形成。     

血管内皮生长因子与非小细胞肺癌相关性的研究

目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与肿瘤血管形成、临床分期、淋巴结转移的关系.方法 应用免疫组织化学方法和酶联免疫吸附试验检测112例NSCLC患者的肺癌组织和血清中VEGF的表达,并分析其临床意义.结果 NSCLC组织中VEGF的表达明显高于正常黏膜组织和癌旁组织(P＜0.01).NSCLC患者血清VEGF水平显著高于正常对照组(P＜0.01).NSCLC组织、血清中VEGF的表达,均随肺癌分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ期的顺序明显上升(P＜0.01),淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P＜0.01).结论 VEGF在NSCLC中表达明显增高,并与NSCLC的发生、发展及淋巴结转移有关,血清VEGF是NSCLC增生和转移的重要指标.     

血管内皮生长因子在糖尿病眼部并发症中的作用

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病眼部并发症发生、发展中的作用.方法:利用ELISA方法分别测定糖尿病并发症患者玻璃体、房水中VEGF的含量.利用免疫组化法检测VEGF在糖尿病并发症患者虹膜组织中的表达.结果:①糖尿病视网膜病变玻璃体中VEGF浓度明显高于对照组(P＜0.001).②糖尿病视网膜病变及新生血管性青光眼房水中VEGF浓度明显高于对照组(P＜0.001).③糖尿病引发的新生血管性青光眼虹膜组织中VEGF异常表达(P＜0.05).结论:VEGF在糖尿病并发症患者玻璃体、房水及虹膜组织中高度异常表达.     

VEGF-C及其受体VEGFR-3在阴茎鳞癌淋巴转移中的作用

目的 探讨VEGF-C/ VEGFR-3在阴茎鳞癌淋巴道转移中的作用和意义.方法 应用SP免疫组织化学技术检测26例阴茎鳞状细胞癌原发灶及18例腹股沟淋巴结转移灶中VEGF-C及VEGFR-3蛋白的表达.结果 VEGF-C和VEGFR-3蛋白在阴茎鳞癌中的阳性率(61.5%,53.8%)均显著高于正常阴茎鳞状上皮.VEGF-C和VEGFR-3蛋白的表达与阴茎癌淋巴结转移呈正相关(P=0.041,P=0.005);与年龄、临床T分期、组织分级、病理类型无相关性(P＞0.05).VEGF-C蛋白的表达与VEGFR-3蛋白的表达呈正相关(P=0.014),阴茎鳞癌原发灶与淋巴结转移灶之间VEGF-C及VEGFR-3的表达有显著性差异(P=0.045,P=0.042).结论 VEGF-C通过受体VEGFR-3在阴茎鳞癌的淋巴道转移中发挥重要作用.     

脐动脉波形异常伴妊高征患者胎盘血管内皮生长因子的表达及其意义

目的 :探讨胎儿脐动脉波形异常伴妊高征 ( PIH)与胎盘血管内皮生长因子 ( VEGF)表达水平的关系。方法 :采用彩色多普勒超声 ,对 5 0例妊娠晚期孕妇进行脐动脉搏动指数 ( PI)、阻力指数 ( RI)及收缩期末最大血流速度与舒张期最小血流速度比值 ( S/D)测定 ,根据脐动脉波形变化分为 4组 :脐动脉波形异常伴 PIH组 7例 ,脐动脉波形异常不伴 PIH组 1 0例 ,脐动脉波形正常伴PIH组 8例 ,脐动脉波形正常不伴 PIH组 2 5例。用蛋白免疫印迹技术测定 4组患者胎盘组织中VEGF的水平。用免疫组化法 ,用抗 F8因子抗体标记 4组孕妇胎盘中的血管密度。结果 :4组孕妇胎盘 VEGF积分吸光度值分别为 1 72 73± 2 0 74、31 0 2 7± 465 2、2 35 84± 1 780、41 90 3± 1 1 0 0 9。脐动脉波形异常伴 PIH组与脐动脉波形正常不伴 PIH组比较 ,差异有显著性 ( P<0 .0 1 )。结论 :胎盘的 VEGF表达下降使胎盘血管密度降低与脐动脉波形异常及妊高征的发生有关。     

血管内皮细胞生长因子的研究进展

目的　探讨血管内皮细胞生长因子的生物学作用及机制。方法　检索近年国内外相关文献进行分析。结果　血管内皮细胞生长因子被认为是最具特异性 ,是直接作用于血管内皮细胞促进血管形成的关键性因子 ,其主要生物学作用可概括为 :(1)增加血管内皮细胞的通透性 ;(2 )促进肿瘤血管生成 ;(3)促进血管内皮细胞的增殖 ;(4 )破坏血 -脑屏障等。结论　血管内皮细胞生长因子可作为抗血管生成的靶向 ,抑制或促进血管的生成 ,以治疗疾病     

血VEGF和尿bFGF在血管性疾病鉴别诊断中的应用价值

目的 探讨血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)和尿碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在血管性疾病鉴别诊断中的应用价值.方法 采用ELISA法测364例各种血管性疾病患儿(增生期血管瘤组146例,消退期血管瘤组106例,血管畸形组112例)及阴性对照组111例患儿的血清VEGF浓度和440例各种血管性疾病患儿(增生期血管瘤组154例,消退期血管瘤组148例,血管畸形组138例)及阴性对照组115例患儿的尿bFGF相对浓度;对测得的数值以SAS 6.12软件进行统计分析,并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),确定诊断界点.结果 增生期血管瘤组的血VEGF浓度、尿bFGF相对浓度均显著高于消退期血管瘤组、血管畸形组和阴性对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.01),而后三组之间差异均无统计学意义(均P＞0.05);血VEGF、尿bFGF鉴别增生期血管瘤与消退期血管瘤、血管畸形和阴性对照的诊断界点分别为99.6 pg/mg和0.16 ng/mmol;血VEGF和尿bFGF的ROC曲线下面积、诊断灵敏度及特异度分别为99.7%、99.3%、99.7%和91.9%、98.7%、71.1%;血VEGF与尿bFGF的ROC曲线下面积差异无统计学意义(P＞0.05).结论 血VEGF、尿bFGF均有助于血管性疾病的鉴别诊断,在临床诊断中均具有较高的应用价值.

Abstract：

Objective To evaluate the role of serum vascular endothelial growth factor(VEGF)and urine basic fibroblast growth factor(bFGF)in the differential diagnosis of vascular anomalies by receiver operating characteristic curve.Methods Using the method of enzyme linked immunosorbent assay (ELISA),364 cases of various vascular anomalies(proliferating hemangiomas,n=146;hemangiomas,n=106;vascular malformations,n=112)and 440 cases of various vascular anomalies(proliferating hemangiomas,n=154;involuting hemangiomas,n=148;vascular malformations,n=138)subjects were examined for the serum levels of VEGF and the urine bFGF respectively.Nonparametric statistical tests were used for data analysis.The VEGF levels of proliferating hemangioma,involuting hemangioma,vascular malformation and control groups were analyzed by the Kruskal-Wallis test.When there was significance (P＜0.05),a subgroup analysis was performed by the Mann-Whitney U test. A receiver operator characteristic(ROC)curve was constructed for both the serum levels of VEGF and urine bFGF to determine the optimal diagnostic cut-off to differentiate proliferating hemangioma from involuting hemangioma,vascular malformation and controls.Results The serum level of VEGF and the urine bFGF in proliferating hemangiomas were significantly higher than those in involuting hemangiomns,vascular malformations and negative controls(P＜0.01). And the differences among the latter three groups were not statistically significant(P＞0.05).The optimal diagnostic cut-off point of serum VEGF and urine bFGF to differentiate proliferating hemangioma from involuting hemangioma,vascular malformation and controls was 99.6 pg/mg and 0.16 ng/mmol respectively. The area under ROC curve,the sensitivity and specificity were 99.7%,99.3%,99.7% and 91.9%,98.7%,71.1% respectively. The differences of the area under ROC curve of serum VEGF and urine bFGF showed no statistical significance(P＞0.05).Conclusion Serum VEGF and urine bFGF are helpful for differentiating proliferating hemangioma from involuting hemangioma,vascular malformation and controls.Both parameters have higher values of clinical application.     

血管内皮生长因子拮抗缺氧诱导的血管内皮细胞凋亡及其机制研究

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧对血管内皮细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2与Apo-1/FasmRNA表达的影响,探讨VEGF用于预防经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)后再狭窄的机制。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞(hUVEC)分成对照组、缺氧处理组、缺氧 VEGF处理组,12h后采用原位末端标记法、流式细胞术观察各组细胞的凋亡发生情况,通过RT-PCR法观察各组细胞中凋亡相关基因Bcl-2与Apo-1/FasmRNA表达的变化。结果与对照组和缺氧 VEGF处理组比较,缺氧处理组凋亡细胞及FasmRNA表达明显增加,Bcl-2mRNA表达明显下降,而VEGF能拮抗上述作用。结论VEGF能拮抗缺氧诱导的内皮细胞凋亡,其抗凋亡的机制可能与上调Bcl-2mRNA表达与下调Apo-1/FasmRNA表达有关。从而为VEGF预防再狭窄进一步提供了理论依据。