CD16/CD13表达模式可以有效鉴别粒细胞相关疾病

CD16是流式细胞术检测发育阶段粒细胞常用标志,因其编码基因和抗体的复杂性,一些相关疾病呈现相似又不同的表型,需要加以区分。CD13表达强度随着粒细胞分化成熟而变化,所以CD16/CD13是临床监测粒细胞发育情况的常用抗体组合。本文介绍正常对照以及几种容易误诊的粒细胞相关疾病的CD16及CD16/CD13表达模式,以研究其在鉴别不同疾病中的作用。     

CD16CD56NK细胞在重症肌无力发病机制中的作用

目的:研究重症肌无力(MG)患者外周血CD16+CD56+ NK细胞的水平,及其在MG发病机制中的作用.方法:应用流式细胞仪检测16例MG患者与20名正常对照外周血CD16+CD56+NK细胞的百分率.结果:MG组外周血CD16+CD56+NK细胞百分率(13.81±5.59)%明显高于对照组的(7.23±1.95)%,P <0.05.结论:NK细胞在MG发病中起重要作用,既可通过分泌IFN2γ等细胞因子途径促进MG的发病,也可通过细胞毒作用发挥免疫效应.     

抗CD16/CD30双特异性单克隆抗体治疗难治性霍奇金氏病

尽管放、化疗对霍奇金氏病(HD)的治愈率较高.但最终至少有1/3的进展期病人治疗失败。采用双特异性单克隆抗体进行的免疫治疗,可能对这类患者有效。HRS-3/Aq即抗CD16/CD30双克隆特异性抗体,它的一端连接于NK细胞及单核巨噬细胞所表达的Fcr-受体Ⅲ区(CD16抗原),另一端与HD及Reed-Srernberg细胞上的CD30抗原相联。体外实验及动物模型发现,HRS-3/Aq可特异性诱导CD30~+肿瘤细胞溶解,且可直接激活NK细胞,从而杀伤肿瘤细胞,单次剂量即可使完全缓解率达100％。本文报告HRS-3/Aq对15例难     

急性冠脉综合征患者CD14＋CD16＋单核细胞亚群检测及意义

目的探讨急性冠脉综合征患者外周血CD14＋CD16＋单核细胞亚群的检测及临床意义。方法采用流式细胞术分析68例冠心病患者（稳定性心绞痛患者47例，急性冠脉综合征21例）、10例正常对照者外周血单核细胞及其亚群的分布特征，并检测受试者血脂、hsCRP水平及白细胞计数，分析各组间统计学差异。结果冠心病患者组较正常对照组HDL—C水平显著性降低，hsCRP水平显著升高，急性冠脉综合征组较稳定性心绞痛组hsCRP水平显著性升高。急性冠脉综合征组外周血单核细胞计数较其他两组有升高趋势，但未达统计学意义。各组间外周血单核细胞计数、占有核细胞百分比、CD14＋＋CD16-亚群比例及CD14＋CD16-亚群比例未见统计学差异。稳定性心绞痛组CD14＋＋CD16＋亚群较急性冠脉综合征组和正常对照组显著性升高。急性冠脉综合征组CD14＋CD16＋亚群比例较稳定性心绞痛组和正常对照组显著性升高，稳定性心绞痛组与正常对照组间无统计学差异。结论急性冠脉综合征患者外周血CD14＋CD16＋亚群比例显著升高，CD14＋CD16＋单核细胞亚群可望成为急性冠脉综合征诊断及易损斑块识别的新的筛查指标。     

急性冠脉综合征患者CD14＋CD16＋单核细胞亚群检测及意义

目的探讨急性冠脉综合征患者外周血CD14＋CD16＋单核细胞亚群的检测及临床意义。方法采用流式细胞术分析68例冠心病患者（稳定性心绞痛患者47例，急性冠脉综合征21例）、10例正常对照者外周血单核细胞及其亚群的分布特征，并检测受试者血脂、hsCRP水平及白细胞计数，分析各组间统计学差异。结果冠心病患者组较正常对照组HDL—C水平显著性降低，hsCRP水平显著升高，急性冠脉综合征组较稳定性心绞痛组hsCRP水平显著性升高。急性冠脉综合征组外周血单核细胞计数较其他两组有升高趋势，但未达统计学意义。各组间外周血单核细胞计数、占有核细胞百分比、CD14＋＋CD16-亚群比例及CD14＋CD16-亚群比例未见统计学差异。稳定性心绞痛组CD14＋＋CD16＋亚群较急性冠脉综合征组和正常对照组显著性升高。急性冠脉综合征组CD14＋CD16＋亚群比例较稳定性心绞痛组和正常对照组显著性升高，稳定性心绞痛组与正常对照组间无统计学差异。结论急性冠脉综合征患者外周血CD14＋CD16＋亚群比例显著升高，CD14＋CD16＋单核细胞亚群可望成为急性冠脉综合征诊断及易损斑块识别的新的筛查指标。     

一例成年男性CD19与CD16＋56双阳性淋巴细胞的报道

我们曾在2006年检测到一例门诊患者部分淋巴细胞CD19与CD16＋56双阳性,报道如下。 一、材料和方法 1．研究对象患者,男,50岁,到浙江医院门诊做体检,包括生化检删、血常规、淋巴细胞分群、特种蛋白检测等。该患者血常规结果显示,     

CD3-CD16+CD56+细胞在脐血与成人外周血中的初步研究

目的探讨脐血、成人外周血中自然杀伤（NK）细胞分化（CD）抗原百分含量的并同，分析在进行脐血（CB）与成人外周血（PB）造血干细胞移植（HSCT）时的利弊。方法采用流式细胞术（FCM），双色荧光素单克隆抗体标记，检测CB与PB中的NK细胞分化抗原（CD3^-CD16^＋CD56^＋）的百分含量。结果成人外周血中自然杀伤细胞分化抗原的百分含量明显高于脐血，经统计学处理两者差别具有显著性意义（P〈0．01）。结论脐血中NK细胞的含量与成人外周血存在不同程度的差异。这可能与两者进行造血干细胞移植后发生移植物抗宿主病（GVHD）、移植物抗白血病（GVL）作用的强弱相关。     

外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率对血小板减少性疾病鉴别诊断的价值

目的探讨外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率对不同血小板减少性疾病鉴别诊断的价值。方法应用流式细胞术检N28例正常对照者、47例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者、16例再生障碍性贫血（AA）患者、18例骨髓增生异常综合征（MDS）患者、13例急性淋巴细胞白血病（ALL）患者、37例急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患者、11例慢性粒细胞白血病（CML）患者、6例慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者和12例自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率。结果ITP组外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率低于正常对照组（P〈0．05）;AA组低于正常对照组（P〈0．05）,高于MDS（P〈0．05）;白血病组较正常对照组明显降低（P〈0．05）,ALL组、ANLL组、CML组、CLL组之间无明显差异,白血病患者外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率随病情发展、复发而降低,病情控制缓解而上升;AIHA组与正常对照组相比无明显差异。结论外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率的检测对鉴别血小板减少性疾病有重要意义,对患者的疗效及预后判断有一定的参考价值。     

细胞因子诱导杀伤细胞／自然杀伤细胞培养过程中CD16及CD11a的表达变化

背景:由于细胞因子诱导杀伤细胞、自然杀伤细胞上表达的CD16和CD11a均与其介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用和直接接触杀伤的抗肿瘤效应密切相关.因此了解两种细胞扩增过程中这两种分子表达的强弱,对根据免疫效应细胞的最终用途决定两种细胞的最佳收获时机具有重要意义.目的:了解细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞在培养过程中的CD16和CD11a表达的变化规律.设计、时间及地点:细胞移植免疫学动态观察,于2006-09/2008-03在中山大学附属第二医院完成.材料:脐血来自本院健康足月妊娠产妇.方法:采用Ficoll-Hypaque法分离脐血单个核细胞,接种于含体积分数为0.15胎牛血清的IMDM,双抗生素青、链霉素各1×105U/L24孔培养板中,在培养体系中加入白细胞介素2、白细胞介素7、白细胞介素15、干细胞因子及FLT3L制备细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞,每隔3天半量换液及全量补充上述细胞因子.主要观察指标:流式细胞仪榆测CD3+CD56+细胞因子诱导杀伤细胞以及CD3-CD56+自然杀伤细胞在4周培养过程中CD16和CD11a表达的变化.结果:CD16在细胞因子诱导杀伤细胞、自然杀伤细胞上的表达随着培养时间的延长逐渐增加,在两类细胞上均在培养的第4周达到最高峰,分别为(55.99±3.90)%和(7.86±1.66)%,但CD16存自然杀伤细胞上表达比例较低,整个培养过程中自然杀伤细胞上CD16的均数表达没有超过8%.CD11a在细胞因子诱导杀伤细胞培养的第3周,自然杀伤细胞培养的第2周达到最高峰,分别为(49.32±6.32)%和(82.31±11.33)%,之后逐渐出现下降,到培养第4周几乎消失.结论:CD16和CD11a在细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞上的表达随培养时间呈动态变化,使用单克隆抗体联合细胞因予诱导杀伤细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用效应时,细胞的收获期可在细胞培养的第4周,利用细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞的直接杀伤效应进行细胞过继免疫,那么收获细胞的时间以细胞培养的第3周为宜.     

高纯度CD3~-CD56~+CD16~+NK细胞体外扩增技术的研究

本研究探索高纯度CD3-CD56+CD16+NK细胞体外扩增技术。应用免疫磁珠分选法(MACS)分离出高纯度的CD3-CD56+CD16+NK细胞,置于含10%人AB血清的造血干细胞培养基(SCGM)中,加入细胞因子IL-2、IL-15、SCF组成不同培养体系进行体外扩增。采用细胞计数法、流式细胞术免疫表型分析和CCK-8试剂盒检测对K562细胞的杀伤率等方法比较不同培养体系对NK细胞增殖前后的数量、纯度及杀伤活性的影响;并采取相同方法对IL-2的浓度与NK细胞增殖效率及杀伤活性之间的关系进行探讨。结果发现,经免疫磁珠分选法所得的高纯度CD3-CD56+CD16+NK细胞扩增18天后,IL-2/IL-15/SCF组扩增倍数显著高于其他组(p0.05);含细胞因子组的NK细胞对K562细胞的杀伤活性显著提高,尤其是IL-2/IL-15组和IL-2/IL-15/SCF组在效靶比10∶1时杀伤活性均高达90%以上。低、中、高浓度IL-2组扩增倍数之间比较差异无显著性(p0.05),而在对K562细胞杀伤率的比较上,高浓度组明显高于低、中浓度组(p0.05)。结论:在10%人AB血清的SCGM中加入IL-2/SCF/IL-15细胞因子组合,可使经MACS纯化的NK细胞在体外高效地活化及增殖;本培养体系中IL-2浓度较低(1 000U/ml)时,NK细胞的扩增效率及对K562细胞的杀伤率与IL-2的浓度高低无相关性;而高浓度的IL-2(≥1 000U/ml)可进一步激活纯化后NK细胞的体外杀伤活性。     

单核细胞HLA-DR和CD16检测在炎症性疾病中的应用价值

目的探讨单核细胞人白细胞抗原-DR (HLA-DR)和CD16检测在炎症性疾病中的应用价值。方法选取炎症性疾病患者56例,以体检健康者40名作为正常对照组。采用流式细胞术检测所有对象外周血单核细胞HLA-DR和CD16表达量[HLA-DR平均荧光强度(MFI)、CD16 MFI]、阳性细胞百分比(HLA-DR+%、CD16+%)及阳性分子的MFI(HLA-DR+MFI、CD16+MFI),并分析单核细胞HLA-DR、CD16表达与白细胞各项指标[中性粒细胞绝对数(NEUT#)、中性粒细胞百分数(NEUT%)、淋巴细胞绝对数(LYMPH#)、淋巴细胞百分数(LYMPH%)、单核细胞绝对数(MO#)、单核细胞百分数(MO%)及中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)]之间的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估单核细胞HLA-DR、CD16诊断炎症性疾病的价值。结果炎症性疾病组NEUT#、NEUT%、MO#及NLR均明显高于正常对照组(P0.01),而LYMPH#和LYMPH%均明显低于正常对照组(P0.01)。炎症性疾病组单核细胞HLA-DR MFI、HLA-DR+%及HLA-DR+MFI均明显低于正常对照组(P0.01),而单核细胞CD16 MFI、CD16+%及CD16+MFI均明显高于正常对照组(P0.01)。单核细胞HLA-DR+%、HLA-DR MFI、HLA-DR+MFI、CD16 MFI和CD16+MFI与NEUT#、NEUT%、LYMPH#、LYMPH%、NLR、MO#均相关(P0.01),与MO%无相关性(P0.05);单核细胞CD16+%与NEUT#、LYMPH#、LYMPH%、NLR、MO#、MO%相关(P0.05),与NEUT%无相关性(P0.05)。ROC曲线分析显示,单核细胞HLA-DR+%、HLA-DR MFI、HLA-DR+MFI、CD16+%、CD16 MFI和CD16+MFI诊断炎症性疾病的曲线下面积(AUC)分别为0.944、0.944、0.924、0.722、0.911、0.979。结论单核细胞HLA-DR和CD16可用于炎症性疾病的诊断,还可作为辅助评估炎症反应程度及监测机体免疫状态的指标。     

原发免疫性血小板减少症患者外周血CD14~+CD16~+单核细胞增高及临床意义

目的探讨原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血CD14+CD16+单核细胞数量的变化及其临床意义。方法采用流式细胞术检测ITP患者治疗前组(n=31)、治疗后缓解组(n=25)和健康对照组(n=30)受检者外周血CD14+CD16+单核细胞数量,采用ELISA方法检测血清TNF-α、IL-12和IL-10浓度,使用Sysmex XE-2100做血小板计数。结果 CD14+CD16+单核细胞(%):ITP患者治疗前组、治疗后缓解组与健康对照组分别为6.49±0.87vs 2.60±0.75 vs 1.10±0.58(P0.01);TNF-α,IL-12和IL-10在3组之间的表达差异均有统计学意义(P0.01),ITP患者治疗前组CD14+CD16+单核细胞比例与血小板计数,TNF-α和IL-10浓度具有相关(r=-0.623;r=0.492;r=-0.661,P0.05)。结论 CD14+CD16+单核细胞数量在ITP患者中明显增高,并且与细胞因子的异常表达相关,提示CD14+CD16+单核细胞可能通过调控细胞因子的表达参与疾病的发生发展,为未来临床判断ITP的治疗效果提供了新的潜在标志物。     

CD3^-CD16^＋CD56^＋细胞在脐血与成人外周血中的初步研究

目的探讨脐血、成人外周血中自然杀伤（NK）细胞分化（CD）抗原百分含量的并同，分析在进行脐血（CB）与成人外周血（PB）造血干细胞移植（HSCT）时的利弊。方法采用流式细胞术（FCM），双色荧光素单克隆抗体标记，检测CB与PB中的NK细胞分化抗原（CD3^-CD16^＋CD56^＋）的百分含量。结果成人外周血中自然杀伤细胞分化抗原的百分含量明显高于脐血，经统计学处理两者差别具有显著性意义（P〈0．01）。结论脐血中NK细胞的含量与成人外周血存在不同程度的差异。这可能与两者进行造血干细胞移植后发生移植物抗宿主病（GVHD）、移植物抗白血病（GVL）作用的强弱相关。     

肺癌患者手术前后外周血CD3^＋和CD4^＋与CD16^＋及CD4^＋／CD8^＋T细胞的表达及临床意义

目的 研究肺癌患手术前后，外周血中CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等T淋巴细胞亚群的定量变化，并探讨其临床意义。方法 取肺癌术前及术后第10天外周血，用流式细胞仪检测CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等T细胞，进行定量分析，并与对照组比较。结果 肺癌患手术前CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等均低于对照组（P＜0．01）。肺癌未转移（淋巴结阴性）手术后CD3^ 等T细胞明显高于术前（P＜0．05）。但肺癌已转移（淋巴结阳性），手术后CD3^ 等T细胞继续下降，与术前无差异（P＞0．05）。结论 监测CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等淋巴细胞亚群，对肺癌患免疫功能的评价及判断预后有重要意义。     

CD3^+CD56^+CD16^+ NKT细胞、T淋巴细胞亚群在URSA患者外周血表达的意义

目的探讨CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞、T淋巴细胞亚群在不明原因反复自然流产患者(URSA)外周血表达的意义。方法选择53例URSA患者和22例体检健康妇女(健康对照组)的外周血,通过流式细胞术检测CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞、T淋巴细胞亚群的表达情况。结果CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞在URSA患者外周血的表达率为(8.35±11.48)%,明显高于健康对照组(1.12±0.52)%,差异有统计学意义(t=2.924,P<0.01);Th/Tc比值为1.50±0.61,较健康对照组(1.23±0.22)偏高,差异有统计学意义(t=2.045,P<0.05);CD3+T细胞、CD3+CD4+Th细胞、CD3+CD8+Tc细胞在URSA患者外周血表达率与健康对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞与Th/Tc比值的相关系数为0.0048,其无正相关关系(P>0.05)。结论CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞、Th/Tc比值在URSA患者外周血表达水平的增高对反复自然流产的发生有一定的关系,通过检测CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞和Th/Tc比值对评估USRA患者的免疫功能状态和临床对患者免疫功能的有效干预有重要的意义。     

原因不明习惯性流产患者外周血CD3~+CD16~+CD56~+自然杀伤T细胞的表达及意义

目的探讨自然杀伤T细胞(natural killer T cell,NKT)在原因不明习惯性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)发生机制中的作用。方法有URSA史患者50例,其中未孕者20例为URSA非孕组,难免流产者30例为UESA难免流产组,52例正常体检者中正常未生育者20例为正常未育组,正常妊娠孕妇20例为正常妊娠组,有正常生育史12例为正常生育组,采用流式细胞术检测各组外周血中CD3+CD16+CD56+NKT细胞的表达水平。结果外周血CD3+CD16+CD56+NKT细胞百分率正常未生育组[(4.62±1.38)%]与正常生育组[(4.90±3.00)%]比较差异无统计学意义(P0.05);URSA非孕组外周血CD3+CD16+CD56+NKT细胞百分率[(2.42±1.52)%]低于正常生育组(P0.05),URSA难免流产组[(4.18±2.77)%]低于正常妊娠组[(14.40±2.27)%](P0.05);正常妊娠组外周血中NKT细胞百分率是正常生育组的3倍,而URSA难免流产组是URSA非孕组的2倍。结论 URSA患者外周血NKT细胞表达水平降低,NKT细胞可能参与了URSA的发生。     

银屑病患者外周血CD3^＋CD（16＋56）^＋NK T细胞和CD3^＋CD4^-CD8^-双阴性T细胞显著减少

目的分析银屑病患者外周血中CD3^＋CD（16＋56）＋自然杀伤T细胞（NK T）和CD3^＋CD4^-CD8^-双阴性（DN）T细胞的变化。方法应用三色流式细胞术分析结合CD45/侧向散射信号（SSC）和CD3/SSC设门分析外周血淋巴细胞亚群并应用Flow Count（荧光球进行绝对计数。结果银屑病组NK T细胞的比例3.58%±2.09%,显著低于健康对照组7.73%±5.8%（P〈0.01）;银屑病组NK T细胞绝对数（72.68±51.18）细胞/mm^3也显著低于健康对照（193.15±160.09）细胞/mm^3（P〈0.01）。银屑病组DN T细胞绝对数（78.92±58.67）细胞/mm^3同样显著低于健康对照组（148.33±118.00）细胞/mm^3（P〈0.01）;而其比例在两组间差异无统计学意义。银屑病组总T细胞（1 254.73±411.73）细胞/mm^3和抑制性T细胞（Ts）（465.23±212.65）细胞/mm^3均分别显著低于健康对照组[T：（1 721.72±712.45）细胞/mm^3;Ts：（800.23±581.79）细胞/mm^3],P值均〈0.01,银屑病组CD4/CD8比值显著升高（P〈0.05）。结论银屑病患者外周血NK T细胞和DN T细胞显著减低。我们推测这两类细胞的异常减低与银屑病患者体内免疫调节功能失衡有关。