越桔原花青素对新生大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

0 引言 原花青素(procyanidin,PC)是越桔重要的生物活性成分,是表儿茶素和表没食子儿茶素的低聚体或多聚体.有研究[1-3]发现,PC具有抗氧化、抗肿瘤、抗衰老及抗炎症等作用,但对越桔PC药理活性的相关研究还少见报道.     

葡萄籽原花青素预防大鼠肝纤维化的实验研究

目的观察葡萄籽原花青素(GSPE)抑制四氯化碳(CCL4)诱导大鼠肝纤维化形成的效果,并探讨其可能的作用机制。方法 50只大鼠随机选取20只分为空白对照组(10只)和溶剂组(10只),其他大鼠采用CCL4腹腔注射法,每周2次,8周制造大鼠肝纤维化模型,将造模成功的24只大鼠分为模型组(12只)和GSPE干预组(12只)。GSPE干预组从第5周给予GSPE 150 mg/(kg.d)灌胃,8周后处死大鼠,留取肝脏和血清,采用自动生化分析仪检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL),放射免疫法检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ),肝组织碱水解法检测羟脯氨酸(HyP),化学比色法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH),同时取固定部位肝脏组织HE染色,观察其肝纤维化程度。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血清中的ALT、AST、TBIL、HA、LN、PCⅢ水平均显著升高(P<0.05),肝组织中GSH和SOD降低,MDA和Hyp含量升高(P<0.05);与模型组比较,GSPE干预组大鼠血清ALT、AST、TBIL、HA、LN、PCⅢ水平均显著降低(P<0.05),肝组织中GSH和SOD升高,MDA和Hyp含量降低(P<0.05);与模型组比较,GSPE干预组肝组织纤维化病变明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。结论GSPE对CCL4诱导的大鼠肝纤维化形成具有明显的抑制作用,其作用机制可能与保护肝细胞、抑制脂质过氧化和抑制胶原合成有关。     

越橘中原花青素抑制新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及其作用机制

目的 研究越橘中原花青素对血管紧张素Ⅱ (angiotensin Ⅱ, AngⅡ) 诱导新生大鼠心肌成纤维细胞 (cardiac fibroblast, CFb) 增殖的影响及其作用机制。方法 用 AngⅡ诱导新生大鼠 CFb 增殖,采用 MTT 法检测细胞增殖,ELISA 法测定Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及转化生长因子β1 (TGF-β1) 的量,硝酸还原酶法、分光光度法检测 NO、一氧化氮合酶 (iNOS) 活性,流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学法测定 p27 蛋白的量。结果 原花青素 (25、50、100 mg/L) 可抑制 AngⅡ 诱导的 CFb 增殖、胶原合成增加及TGF-β1蛋白量增多,并明显提高 CFb NO 的量、iNOS 的活性,同模型组比较差异有显著性 ( P ＜0.05、0.01),且呈现剂量依赖性。流式细胞仪检测表明 G0/G1 期细胞比例随原花青素质量浓度增加而增加,S期细胞比例随原花青素质量浓度增加而减少,与模型组相比差异有显著性 ( P ＜005、0.01),免疫细胞化学染色结果也表明原花青素可增加 p27 的蛋白表达,与模型组相比具有统计学意义 ( P ＜0.01)。结论 原花青素通过促进 p27 的表达,使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而抑制 CFb 增殖和胶原分泌量的增加。     

原花青素降低家兔动脉血压的机制研究

目的：研究葡萄籽提取物原花青素（procyanidins,PC）降低家兔动脉血压的作用及机制。方法：采用颈总动脉插管测量动脉血压,将动物随机分为：PC、左旋硝基精氨酸、甲烯蓝、异搏定、普萘洛尔、吲哚美辛、缬沙坦7组。PC组为静脉累积注射PC（4．0、8．0、16、32、64、84mg／kg）后,记录血压并计算下降百分率（％）,其余各组先注射不同的阻断剂对血压无影响后。再注射PC（64mg／kg）测量各组血压并计算下降百分率（％）.结果：PC能显著降低家兔动脉血压,并具有量效依赖性（收缩压：r=0．92,t=17．44,P〈0．01;舒张压：r=0．92,t=17．47,P〈0．01）。左旋硝基精氨酸和甲烯蓝能明显减弱PC（64mg／kg）的降压作用（P〈0．01）;异搏定、普萘洛尔、吲哚美辛、缬沙坦对PC的降压作用无明显影响。结论：PC低家兔动脉血压的机制可能与内皮释放的NO有关。     

黑果越桔中花青素对内毒素引起的大鼠循环衰竭和多器官功能障碍的作用

作者研究了黑果越桔Vaccinium myrtillus中花青素对内毒素休克大鼠循环障碍和多器官功能障碍的治疗作用，及其对一氧化氮合成酶（iNOS）和环氧化酶（COX-2）活性的影响。     

沙棘原花青素对糖尿病小鼠心肌保护作用机制的研究

目的:初步探讨沙棘原花青素(Sea buckthom procyanidins,SBPC)对糖尿病小鼠心肌组织氧自由基的影响。方法:6月龄ICR小鼠,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)150mg/kg制备糖尿病小鼠模型,小鼠随机分为糖尿病心肌病变组(DC)、SBPC高、中、低剂量组和二甲双胍阳性药物对照组(Metformin,MET),每组20只。以正常小鼠为对照,每周测体重和血糖一次,4周后形成早期糖尿病心肌病变,持续4周给药,第5周应用分光光度计法测定各组小鼠心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总一氧化氮合酶(NOS)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:与糖尿病心肌病变组比较,SBPC高、中、低剂量组MDA含量、NOS活性明显降低,GHS-Px和SOD活性明显增强。结论:SBPC对6月龄糖尿病心肌病变小鼠心肌组织氧化损伤有减轻作用。     

葡萄籽原花青素对兔心肌再灌注损伤诱发的细胞凋亡保护作用

目的：探讨葡萄籽原花青素（grape seed proanthocyanidin extract，GSPE）对兔实验性心肌再灌注损伤（myocardial reperfusion injury，MRI）诱发的心肌细胞凋亡的保护作用。方法：建立兔在体心肌再灌注损伤模型，24只兔随机平分为4组：假手术对照组（A）、缺血再灌注模型组（B）分别用生理盐水灌胃，低剂量GSPE治疗组（C）用GSPE（100?mg/kg）灌胃，高剂量GSPE治疗组（D）用GSPE（200?mg/kg）灌胃，共喂养21?d。各组测定再灌注前后不同时间血清心肌肌酸激酶同工酶MB（CK MB）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量，对照观察各组兔心肌超微结构变化及心肌细胞凋亡情况。结果：与B组相比， C、D组的血清CK MB和MDA显著降低（P＜0.05，P＜0.01)，血清SOD明显升高（P＜0.01)；病理分析显示，C、D组兔心肌细胞损伤明显减轻，心肌细胞凋亡的数目明显减少，D组凋亡指数（AI）明显降低（P＜0.01)。结论：GSPE在减轻兔MRI的同时，对其引起的细胞凋亡有明显的保护作用，可能是其抗MRI的机制之一。     

原花青素对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞iNOS表达的影响

目的:研究原花青素对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)基因表达的影响。方法:建立大鼠佐剂性关节炎(AA)模型。硝酸还原酶法测大鼠关节液中NO的含量;RT-PCR和Western blot分别检测大鼠腹腔巨噬细胞内iNOS mRNA和蛋白的表达;同时ELISA检测大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-α的含量。结果:原花青素显著减低AA大鼠足跖炎症组织中NO的含量以及血清中IL-1β、TNF-α的水平,同时下调AA大鼠腹腔巨噬细胞iNOS mRNA和蛋白的表达。结论:原花青素对大鼠佐剂性关节炎的抗炎作用可能与其降低TNF-α和IL-1β的水平,抑制iNOS的mRNA和蛋白表达从而减少NO的释放有关。     

葡萄籽原花青素对肾血管性高血压大鼠血管重塑保护作用机制的研究

目的 探讨葡萄籽原花青素(GSP)对肾血管性高血压大鼠血管重塑保护作用机制.方法 采用两肾一夹(2K1C)法,复制肾血管性高血压(RH)大鼠模型,并设立假手术组(control,n=7).术后2周,选取鼠尾动脉收缩压(SBP)升至130mmHg以上的大鼠28只为RH大鼠,并随机分为4组(n=7):高血压模型组(RHmodel)、GSP低剂量治疗组[low GSP,50mg/(kg·d)]、GSP高剂量治疗组[high GSP,200mg/(kg·d)]和卡托普利阳性对照治疗组[(captopril,30mg/(kg·d)].治疗6周后,分别测定各组大鼠尾动脉SBP、胸主动脉中膜厚度(MT)及管腔内径(LD);ELISA法测定腹主动脉中超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量;Western blotting法检测腹主动脉中白介素-10(IL-10)的蛋白表达.结果 治疗6周后,与control组比较,RH model组大鼠尾动脉SBP、MT及MDA含量明显升高,而腹主动脉中SOD活性、T-AOC、NO含量、LD和IL-10的蛋白表达明显降低.与RH model组比较,GSP能显著降低大鼠尾动脉SBP、MT及MDA含量,升高腹主动脉中SOD活性、T-AOC、LD和IL-10的蛋白表达.NO含量虽然增多,但无统计学意义.结论 GSP能显著降低RH大鼠的尾动脉SBP,同时可以通过增强大鼠抗氧化能力,增加腹主动脉中NO含量及抑炎因子IL-10的蛋白表达来发挥保护血管重塑的作用.     

牛磺酸对异丙肾上腺素引起大鼠心肌纤维化的保护作用

目的 研究牛磺酸(Taurine,Tau)对异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso)引起大鼠心肌纤维化的保护作用及其机制.方法 用Iso 5 mg/(kg·d)背部皮下注射,连续7天,建立大鼠心肌纤维化模型.造模第2天起给大鼠腹腔注射Tau 80、160和320 mg/(kg·d) ,连续用药14 d,测量大鼠心脏重量指数(heart weight/body weight, HW/BW)和左心室重量指数(left ventricular weight/body weight, LVW/BW);分光光度法检测左心室心肌组织中羟脯氨酸(hydroxyproline, Hyp)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性;自动生化仪检测血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH) 、肌酸激酶(creatine kinase, CK)含量.结果 与对照组比较,Iso模型组大鼠心重指数和左心室重量指数明显增大,左心室心肌组织中Hyp含量增高,MDA含量增高,SOD水平下降,血清中LDH和CK含量增加;给Tau 80、160 和320 mg/(kg·d)均能降低心重指数和左心室重量指数,提高心肌组织中的SOD含量,增强SOD活力,抑制MDA产生,降低Hyp含量,抑制胶原的产生,降低血清中LDH和CK的含量.结论 Tau对Iso引起大鼠心肌纤维化具有一定的改善作用,该作用与抑制胶原的形成、抗脂质过氧化、清除氧自由基及减少心肌酶的漏出有关.     

慢性低氧致大鼠右心室心肌纤维化作用及其机制的研究

目的 探讨慢性低氧大鼠右心室心肌纤维化的表现特征及其发生机制。方法 将40只Wistar大鼠分为两组。每组20只。慢性低氧组：大鼠置于模拟5000m的高原地区饲养30和60d，每天低氧8h；对照组：在平原地区饲养30和60d。测定左、右心室收缩压、动脉血氧分压、红细胞压积、心室重量指数、心肌胶原浓度和含量及心肌Ⅰ／Ⅲ型胶原比值，观察心肌形态学变化。结果 慢性低氧组PaO2下降，右心室收缩压及右心室重量指数增高，右心室心肌胶原浓度和含量及心肌Ⅰ／Ⅲ型胶原比值明显增高，而左心室则无明显变化。病理学检查示慢性低氧组右心室出现心肌内血管周围纤维化和局灶性纤维化。结论慢性低氧可导致右心室心肌纤维化。右心室压力负荷增加是其发生的重要因素。     

氧化樟脑注射液对大鼠心肌纤维化的改善作用

目的: 探讨氧化樟脑注射液对异丙肾上腺素(Iso)所致大鼠心肌纤维化的作用,阐明其抗心肌纤维化的作用机制,为其临床应用奠定基础。方法: 60只SD大鼠随机分为对照组、Iso模型组、维生素C组和不同剂量氧化樟脑注射液组;采用2 mg·kg^-1·d^-1Iso皮下注射制备大鼠心肌纤维化模型,连续14d,不同剂量氧化樟脑注射液组和维生素C组大鼠同时腹腔注射氧化樟脑注射液 (0.8、1.6和3.2 mg·kg^-1·d^-1)和维生素C(80 mg·kg^-1·d^-1),连续28 d。实验结束后采用BL-420 E⁺生物机能实验系统检测各组大鼠心电图和心功能,测定心脏质量指数(HMI)和左心室质量指数(LVMI);紫外分光法检测心肌组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性;酶标仪检测心肌组织中乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(NO)含量;ELISA法检测心肌组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)和Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)含量;HE染色观察心肌组织病理学。结果: 与对照组比较,Iso模型组大鼠心率增快、左室收缩压(LVSP)降低、左室内压最大上升速率(LVdp/dt_max)降低(P<0.05或P<0.01);HMI和LVMI升高,但差异无统计学意义(P>0.05);左心室心肌组织中MDA含量和LDH活性增高, NO含量降低,SOD和iNOS活性降低,ColⅠ和Col Ⅲ含量增高(P<0.05或P<0.01)。与Iso模型组比较,不同剂量氧化樟脑注射液组大鼠HMI和LVMI降低,且呈剂量依赖性,但差异无统计学意义(P>0.05);不同剂量氧化樟脑注射液组大鼠心肌组织匀浆中LDH活性、MDA含量降低,NO含量增加(P<0.05或P<0.01),ColⅠ和Col Ⅲ含量降低(P<0.05或P<0.01),iNOS和SOD活性升高(P<0.05或P<0.01)。结论: 氧化樟脑注射液可抑制Iso所致的大鼠心肌纤维化,其机制可能与抗氧化、提高NO水平进而抑制胶原的合成有关。     

氯沙坦和曲尼司特抗高血压大鼠心肌纤维化的对比观察

目的 对比观察氯沙坦和曲尼司特抗心肌纤维化的疗效,并探讨两种药物抗心肌纤维化作用机制.方法 完全随机法将自发性高血压大鼠(SHR)分为3组,每组8只:高血压对照组(SHR组)、曲尼司特治疗组[曲尼司特片300mg/(kg·d)]、氯沙坦治疗组[氯沙坦片30mg/(kg·d)1,治疗16周.治疗期间每周监测血压,16周后处死大鼠,计算心脏重构指标心脏重量指数(HWI)及左室重量指数(LVMI),病理检查观察心肌胶原形态学改变并计算心肌纤维化指标心肌胶原容积分数(CVF)和心肌内血管周围胶原面积(PVCA),放射免疫法检测血清Ⅲ型前胶原(PcⅢ)水平,ELISA法检测心肌组织转化生长因子-β 1(TGF-β 1)和结缔组织生长因子(CTGF)水平.结果 氯沙坦能有效降低SHR血压水平;氯沙坦和曲尼司特能有效降低HWI、LVMI、CVF、PVCA及血清PcⅢ水平;但氯沙坦组HWI、LVMI、CVF、PVCA、血清Ⅲ型前胶原水平、心肌组织TGF-β1及CTGF水平降低较曲尼司特组显著.结论 曲尼司特和氯沙坦均有效逆转高血压左室肥厚和心肌纤维化,而氯沙坦疗效较曲尼司特更为显著,其机制除降压外,还与其更显著降低心肌局部TGF-β 1及CTGF水平有关.     

Effects of Ligustrazine on Myocardial Fibrosis in Rats with Pressure Overload

Objective: To investigate the effects of ligustrazine (Li) on myocardial fibrosis in rats with pressure overload. Methods: Pressure overload rat models were established by constricting the abdominal aorta. Sixty-three SD rats were divided into 3 groups: Sham operated group (SOG, n=21), operated group (OG, n=21) and operated combined with ligustrazine group (OG Li, n=21). Each group was randomly assigned to seven time points: The 1st, 2nd, 4th, 7th, 14th, 21st and 30th day after operation. Three rats were included in each time point. Serial sections of cardiac tissues were examined and the morphological or morphometric analysis of the SOG, OG and OG Li done by histopathological and computer image analyzer technique. Results: (1) It showed that there were reactive fibrosis (from the 4th day on after operation) and reparative fibrosis (from the 21st day on after operation) in the OG, while myocardial fibrosis in the OG Li was alleviated. Though reactive fibrosis (from the 21st day on after operation) was shown, reparative fibrosis wasn′t seen. (2) Perivascular collagen area (PVCA) in the OG (2. 09±0. 45) was significantly higher than SOG (0.83±0.06) from the 1st day on after operation and then steadily increased, while in the OG Li (1. 16±0.06), it was significantly lower than OG at the same time; collagen volume fraction (CVF) in the OG (3. 08±0.56) significantly increased compared with the SOG (2. 78±0.64) from the 2nd day on after operation and showed a trend of rapid ascending from the 21st day on after operation; and in the OG Li (4. 69±0.85), it was significantly decreased compared with the OG (7. 56±0.88) from the 21st day on after operation, with all P＜0. 05. Conclusion: Ligustrazine could alleviate and postpone the accumulation of myocardial collagen and has protective effects on the heart.     

中药复方861合剂对大鼠急性心肌梗死后心肌纤维化影响的初步研究

目的探讨中药复方861合剂对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌纤维化、心室重构的影响.方法雄性SD大鼠结扎左冠状动脉前降支制成心肌梗死模型,随机分为未治疗组(M组)、中药复方861合剂治疗组(T组)及假手术组(S组).术后第14日及第56日时测定大鼠体重(BW)、心脏重量(HW)、左室重量(LVW)、心脏重量/体重比(HW/BW)、左室重量/体重比(LVW/BW)及心肌胶原含量.各组心肌组织MASSON染色,光镜下观察病理改变.结果T组在术后第14日HW、LVW、HW/BW、LVW/BW均明显低于M组及S组,术后第56日的上述指标显著低于M组但高于S组.T组术后14d及56d的胶原含量均显著低于M组,但仍高于S组.结论中药复方861合剂有明显的抑制和减轻大鼠AMI后心肌纤维化的作用,但并不能完全阻止其发生.     

鸢尾黄素对大鼠心肌纤维化的作用及其机制

目的：探讨鸢尾黄素对大鼠心肌纤维化（MF）的作用并阐明其作用机制,为临床用药提供参考。方法：60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药（卡托普利）对照组和低、中、高剂量鸢尾黄素组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠采用异丙肾上腺素（Iso）皮下注射（5 mg·kg^-1·d^-1）,连续7d,构建大鼠MF模型。除正常对照组和模型组外,其他各组于造模第2天灌胃给药,分别给予25、50、100 mg·kg^-1·d^-1鸢尾黄素和10 mg·kg^-1·d^-1卡托普利,连续28d。实验结束后采用BL-420 E+生物机能实验系统检测大鼠心功能,测量心质量指数（HMI）和左心室质量指数（LVMI）,紫外分光法检测心肌组织中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）活性,酶标仪检测血清中乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）活性及一氧化氮（NO）水平,ELISA法检测血清中Ⅰ型胶原（ColⅠ）和Ⅲ型胶原（Col Ⅲ）水平,HE染色观察各组大鼠心肌组织病理表现。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠心率（HR）加快、左室收缩压（LVSP）降低（P<0.01）;HMI和LVMI升高（P<0.05）;左心室心肌组织中MDA水平升高（P<0.01）,SOD活性降低（P<0.01）;血清中ColⅠ和Col Ⅲ水平升高,LDH和CK活性升高（P<0.01）;而NO水平降低（P<0.01）。与模型组比较,各鸢尾黄素组大鼠HR减慢（P<0.05或P<0.01）,LVSP升高（P<0.05或P<0.01）;HMI和LVMI均降低;心肌组织中MDA水平降低（P<0.05或P<0.01）,SOD活性升高（P<0.05或P<0.01）;血清中ColⅠ、Col Ⅲ水平和CK活性均降低（P<0.05或P<0.01）;中、高剂量组LDH活性明显降低（P<0.01）,各剂量组NO水平升高（P<0.05或P<0.01）。结论：鸢尾黄素可抑制Iso所致的大鼠MF,其机制可能与抗氧化、清除自由基进而抑制胶原的合成有关。     

硒和维生素E对克山病病区粮喂饲大鼠心肌纤维化的影响

目的:观察适时适量补充硒(Se)和维生素E(VE)对心肌纤维化和心肌重构的影响,探讨克山病病区的低Se和低VE膳食是否在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用.方法:30只Wistar 大鼠随机分为:正常对照组(Control,混合饲料喂养)、病区粮饲料组(EG,病区粮喂养)、病区粮饲料加Se组(EG+Se)、病区粮饲料加...     

洛沙坦抑制急性心肌梗死大鼠心肌纤维化的作用机制

目的 观察洛沙坦对急性心肌梗死大鼠心肌组织中盐皮质激素受体(MR)mRNA及心肌纤维化的影响.方法 结扎左冠状动脉致急性心肌梗死大鼠模型.随机分为急性心梗组和洛沙坦治疗组,而对照组为仅打开心包腔而未行冠状动脉结扎大鼠.在洛沙坦治疗4周时,用超声心动图和血流动力学指标评价心脏功能,心肌Masson染色法测定心肌胶原密度,放射性免疫法测定心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛同酮(Ald)含量,实时荧光定量PCR检测心肌MRmRNA表达.结果 (1)急性心梗组大鼠心肌组织中AngⅡ、Ald含量较对照组显著增加,心肌MRmRNA表达显著升高,同时心肌胶原密度显著增加(P<0.01).(2)洛沙坦治疗4周后,治疗组大鼠心肌组织中AngⅡ、Ald较急性心梗组显著减低(P<0.05),MRmRNA表达显著降低,心肌胶原密度也有显著降低(P<0.01).结论 洛沙坦可以抑制急性心肌梗死大鼠心肌组织中Ald信号通路.并且还可能通过下调心肌MRmRNA表达来抑制心肌纤维化.