山茱萸环烯醚萜苷对家兔、大鼠血小板聚集及出血时间的影响

目的：研究山茱萸环烯醚萜苷（CIG）对血小板聚集和出血时间的影响。方法：应用比浊法测定家兔（体外实验）及血瘀模型大鼠（体内实验）的血小板聚集率;断尾法观察大鼠出血时间。采用肾上腺素加冰水刺激法制备血瘀大鼠模型。结果：在体外实验中,CIG（0.75～3 mg/mL）能明显抑制二磷酸腺苷（ADP）或花生四烯酸（AA）诱导的家兔血小板聚集（P〈0.05,P〈0.01）,对血小板活化因子（PAF）诱导的血小板聚集无显著影响,但更大剂量（6～12 mg/mL）能抑制PAF诱导的血小板聚集（P〈0.01）。在体内实验中,CIG大剂量（180 mg/kg）灌胃给药能显著抑制ADP诱导的血瘀模型大鼠血小板聚集（P〈0.01）,延长正常大鼠的出血时间（P〈0.05）。结论：山茱萸环烯醚萜苷具有抗血小板聚集作用,大剂量能够延长出血时间。     

冰片对灯盏花素在大鼠体内药动学的影响

目的:观察冰片对灯盏花素在大鼠体内药动学的影响。方法:建立高效液相色谱(HPLC)方法测定大鼠血浆中灯盏乙素的浓度。大鼠尾静脉注射灯盏花素注射液(灯盏乙素24 mg.kg-1)及灯盏花素冰片注射液(灯盏乙素24 mg.kg-1 冰片0.96 mg.kg-1),用HPLC法测定大鼠给药后不同时间血浆灯盏乙素的浓度,BAPP数据处理软件计算药动学参数。结果:灯盏乙素在0.05~60μg.mL-1范围内线性良好(r=0.999 4)。灯盏花素与冰片配伍给药可使灯盏花素中灯盏乙素的药动学参数t1/2α,t1/2β和t1/2γ较单独给药时明显减小[t1/2α:(1.87±0.14)vs(3.46±0.45),P<0.01;t1/2β:(11.18±2.07)vs(14.74±2.89),P<0.05;t1/2γ:(53.31±8.21)vs(161.16±15.48),P<0.01],而K12较单独给药时明显增大[(0.120±0.042)vs(0.039±0.037),P<0.05]。结论:冰片可加快灯盏花素在大鼠体内的分布与消除。     

丰城鸡血藤总黄酮抗血小板聚集及抗血栓作用研究

目的 研究丰城鸡血藤总黄酮对实验性大鼠血小板聚集和血栓形成的影响。方法 以二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、胶原和凝血酶作诱导剂诱导大鼠血小板聚集,丰城鸡血藤总黄酮按25,50,100 mg·kg^-1的剂量灌胃给药,测定大鼠血小板聚集率,计算聚集抑制率;用血栓法测定大鼠血栓形成重量。结果 丰城鸡血藤总黄酮各剂量均能抑制ADP、胶原和凝血酶诱导的大鼠血小板聚集,并能减少血栓形成的重量。结论 丰城鸡血藤总黄酮具有明显的抗血小板聚集及抗血栓形成的作用。     

低分子肝素钙对不同剂量灯盏花素注射剂在大鼠体内药动学特征的影响

目的研究低分子肝素钙对不同剂量灯盏花素注射剂在大鼠体内药动学特征的影响。方法实验设单独用药组和联合用药组,其中单独用药组大鼠予灯盏花素注射剂50、25、12.5 mg·k^-1,经快速静脉注射;联合用药组大鼠皮下注射低分子肝素钙注射剂0.5 mL（2 000 U）后,快速静脉注射灯盏花素注射剂50、25、12.5 mg·kg^-1。采用HPLC法测定大鼠血浆中灯盏花素的浓度,用3P97数据处理软件计算药动学参数。应用超滤法对灯盏花素与大鼠血浆的蛋白结合率进行测定。结果灯盏花素单独给药及与低分子肝素钙联合给药后,灯盏花素在大鼠体内过程均符合二室模型。单独给药后,灯盏花素在给药剂量范围内大鼠体内消除过程呈现线性消除过程,与大鼠的血浆蛋白结合率不随剂量而变化（P>0.05）,平均值为94.46%。而与低分子肝素钙联合应用后,灯盏花素在给药剂量范围内大鼠体内呈现非线性动力学特征,与大鼠的血浆蛋白结合率随剂量增加保持恒定（P>0.05）,平均值下降至89.93%。结论本研究建立的测定大鼠血浆中灯盏花素浓度的HPLC法专属性强,精密度与回收率高,稳定性良好。首次探明低分子肝素钙对灯盏花素体内药动学的影响,为临床上两者合用设计合理的给药方案奠定了研究基础。     

木瓜蛋白酶体外对血小板聚集的抑制作用

目的：以洗涤血小板为模型,观察木瓜蛋白酶在体外对血小板聚集的抑制作用,以探讨其抗血栓作用的可能机制。方法：将不同剂量木瓜蛋白酶与洗涤血小板作用,以血小板聚集分析仪检测ADP、花生四烯酸（AA）、胶原和凝血酶诱导的血小板最大聚集率,以流式细胞仪检测活化血小板膜纤维蛋白原受体（FIB-R）和P-选择素表达水平,以SDS-PAGE分析血小板肌动蛋白聚合体的变化。检测ADP诱导的原发性高血压（PH）及急性心肌梗死（AMI）患者血小板最大聚集率和FIB-R表达水平。结果：木瓜蛋白酶剂量依赖性地抑制血小板聚集,降低血小板最大聚集水平,血小板聚集水平与木瓜蛋白酶剂量呈负相关（P〈0.01）。木瓜蛋白酶剂量依赖性地抑制ADP诱导的血小板FIB-R表达,降低FIB-R表达水平（P〈0.01）。木瓜蛋白酶降低ADP诱导的血小板膜P-选择素表达水平和抑制肌动蛋白聚合体增加（P〈0.01）。木瓜蛋白酶抑制PH及AMI患者血小板聚集和FIB-R表达（P〈0.01）。结论：木瓜蛋白酶通过抑制活化血小板膜纤维蛋白原受体的表达,并抑制肌动蛋白聚合以及释放反应从而剂量依赖性地抑制血小板的聚集反应,有抗血栓形成作用。     

灯盏花乙素苷元对大鼠血栓形成和血液流变学的影响

目的:研究灯盏花乙素苷元对大鼠血栓形成、血小板聚集和血液流变学的影响。方法:大鼠连续灌胃灯盏花乙素苷元(100,50,25 mg.kg-1)7 d。电刺激大鼠颈动脉复制动脉血栓模型,记录血栓形成时间;结扎大鼠下腔静脉复制静脉血栓模型,记录血栓湿重和干重;采用0.5×10-4mol.L-1的二磷酸腺苷(adenosine d iphosphate,ADP)诱导血小板聚集,测定最大聚集率;大鼠皮下注射肾上腺素复制血瘀模型,测定红细胞沉降率、全血表观黏度和血浆黏度。同时设灯盏花乙素(100 mg.kg-1)阳性对照。结果:灯盏花乙素苷元能够明显延缓大鼠动脉血栓形成时间,抑制静脉血栓形成,抑制ADP诱导血小板聚集,降低血瘀模型大鼠的红细胞沉降率和血黏度。结论:灯盏花乙素苷元具有抗血栓形成、抗血小板聚集、改善血液流变学指标的作用,疗效优于灯盏花乙素。     

高效液相色谱法测定灯盏乙素血药浓度及其脂质体大鼠药代动力学的评价

目的研究灯盏乙素脂质体及水剂在大鼠体内的血药浓度,考察大鼠灌胃给药后体内药代动力学参数。方法通过大鼠灌胃灯盏乙素水溶液和脂质体后,用高效液相色谱法测定不同时间点的血浆药物浓度,用DAS2.0软件对血药浓度数据拟合分析,比较药动学参数。结果灯盏乙素水剂和脂质体大鼠灌胃给药后,Cmax分别是(15.35±1.37)μg/mL和(22.04±1.67)μg/mL,AUC0-∞分别为(50.03±13.45)μg/(h·mL)和(80.96±15.26)μg/(h·mL),灯盏乙素包衣脂质体大鼠口服给药后药动学呈双室模型特征,与灯盏乙素水剂相比,其脂质体的灌胃AUC0-∞显著提高(P<0.01)。结论本高效液相色谱法对大鼠血浆灯盏乙素测定,稳定性、灵敏度及专属性强,灯盏乙素脂质体可显著提高灯盏乙素的生物利用度。     

银杏总内酯抗血小板聚集与抗血栓作用

目的：探讨银杏总内酯抗血栓形成及抑制血小板聚集的作用.方法：采用大鼠动静脉旁路血栓模型和Chandler氏血栓形成法,利用血小板活化因子（platelet activating factor,PAF）、花生四烯酸（arachidonic acid,AA）和二磷酸腺苷（adenosine diphosphate,ADP）诱导家兔血小板聚集,测定血栓形成抑制率、血小板在不同时间点的聚集率以及最大聚集率.结果：银杏总内酯可不同程度地抑制大鼠动静脉旁路血栓和Chandler氏体外血栓形成,减轻血栓重量,血栓形成抑制率分别达到 41.58%和 59.31%;银杏总内酯可抑制PAF和ADP诱导的家兔血小板在不同时间点的聚集,降低其最大聚集率.结论：银杏总内酯可明显对抗血栓形成,并具有显著的抗PAF和ADP诱导血小板聚集作用.     

噻氯匹啶对血小板聚集功能的抑制作用研究

观察了噻氯匹啶（TP）对血小板聚集的影响,结果表明在体外可显著抑制ADP、花生四烯酸和凝血酶诱导的大鼠或人血小板聚集,其IC50分别为1．035、1.047和0．092mmol／L,在体内连到给药（TP：50－200mg／kg·d－1）7d可抑制ADP和凝血酶诱导的大鼠血小板聚单,提示TP是一个较强的血小板聚集抑制剂。     

贻贝多活素的药理学研究——Ⅱ对大鼠实验性血栓形成及血小板聚集的影响

观察了贻贝多活素(MSM)对实验性血栓形成和血小板聚集的影响。大鼠经igMSM1.35、2.7和5.4g/(kg·d)连续28d后,对“旋转环法”所形成的大鼠实验性血栓有明显抑制作用,其血栓湿重分别为105.1、97.3和89.3mg,与生理盐水(NS)~-对照组的142.7mg相比较,差异非常显著(P<0.01);其血栓干重亦明显低于NS组(P<0.01)。同样的给药途径和剂量,MSM可抑制ADP诱导的大鼠血小板聚集,使其最大聚集率降低,聚集速度减慢,聚集抑制率分别为27％、33％和21％。MSM体外用药亦可降低胶原诱导的家兔血小板最大聚集率和聚集速度,抑制率分别为45％、58％和64％。结果表明,MSM可通过降低血小板的聚集功能从而抑制动脉血栓的形成。     

Comparative pharmacokinetics of breviscapine liposomes in dogs, rabbits and rats

AIM: To compare pharmacokinetics of intravenous breviscapine liposomes in Beagle dogs, rabbits and rats. METHODS: Six Beagle dogs, 6 rabbits and 12 rats were intravenously administrated with breviscapine liposomes and commercial injection (breviscapine solution) by the crossover design (two periods), respectively. Plasma concentration of scutellarin, the main active component in breviscapine, at different time intervals was determined by reverse phase-HPLC. The pharmacokinetic parameters including area under the curve (AUC), clearance (CL(s)) and volume of distribution (V(c)) were calculated. RESULTS: The plasma concentration-time profiles were fitted to a two-compartment model. Breviscapine liposomes exhibited significant difference from injection in CL((s)) and AUC, examined by a one-way analysis of variance (ANOVA). With regard to both breviscapine liposomes and commercial injection (free breviscapine), the logarithm values of AUC, CL(s) and V(c) were all related to the logarithm of the body weight by the allometric equation: Y=axW(b). CONCLUSION: The allometric equation might be applied to extroplate dosage for human from animal data and also for dosage adjustment of breviscapine liposomes in order to achieve same AUC as commercial injection. Compared with the breviscapine solution, breviscapine liposomes delivered more scutellarin into the plasma.     

灯盏花素及其β-环糊精包合物在大鼠体内的药代动力学

目的建立测定大鼠血浆中灯盏乙素浓度的反相高效液相色谱法，研究灯盏花素及其β-环糊精包合物(灯盏花素-β-CD)大鼠灌胃后体内药代动力学行为。方法以甲醇-水-醋酸盐缓冲液为流动相，Shim-pack C₁₈为固定相；12只大鼠随机均分为2组，分别灌胃灯盏花素及其包合物后，检测血浆药物浓度。药时数据采用3P97药代计算程序处理。结果线性范围10-400 ng·mL^-1，方法回收率95.32%-98.81%；灯盏花素和包合物的C_max分别为(154±18) ng·mL^-1和(328±31) ng·mL^-1；AUC_0-12h分别为(710±126) ng·h·mL^-1和(1 093±200)ng·h·mL^-1，经t检验两者有极显著性差异(P<0.01)。结论该法准确、灵敏，适用于灯盏乙素血浆浓度的测定；制备的灯盏花素包合物与灯盏花素相比吸收显著增加。     

灯盏乙素在兔体内药代动力学

目的建立测定灯盏乙素血浆浓度的固相萃取-高效液相色谱（SPE-HPLC）法,并研究家兔iv灯盏花素的药代动力学。方法采用甲醇-水-磷酸为流动相，Nucleosil C₁₈色谱柱为固定相,紫外检测波长335 nm,外标法定量。给家兔分别iv灯盏花素10,20和40 mg·kg^-1,SPE-HPLC法检测血浆药物浓度。结果线性范围0.02～10.0 mg·L^-1,最低检测浓度0.02 mg·L^-1,方法回收率96.15%～99.31%,日内、日间RSD值均小于10%。家兔iv灯盏花素时,灯盏乙素血浆浓度变化符合三房室模型。灯盏乙素低、中剂量组的主要药代动力学参数无显著性差异,而高剂量组与低、中剂量组比较差异显著。结论该法准确、灵敏、简便,适用于灯盏乙素血浆浓度的测定。灯盏花素经兔iv后的药代动力学符合三房室模型，剂量为10～20 mg·kg^-1时,药物的体内变化为线性动力学过程,而40 mg·kg^-1时未表现线性动力学特征。     

两种方法测定灯盏花素经Caco-2细胞模型的转运

目的研究灯盏花素经Caco-2细胞模型转运的特性。方法用培养于Transwell上的Caco-2单层细胞模型研究灯盏花素双向转运;采用生物活性测定及HPLC的方法测定介质中灯盏花素或灯盏乙素的转运量。结果两种方法测定结果显示灯盏花素与灯盏乙素的双向转运Papp具有高度一致性,两者Papp(A-B)均小于1×10-6cm.s-1,流出率ER均大于2。结论采用生物活性法测定灯盏花素Papp具可行性。灯盏花素在Caco-2细胞单层吸收上存在明显外排,这可能是其生物利用度极低的重要原因。     

pH调节剂对野黄芩苷大鼠相对生物利用度的影响

目的研究pH调节剂对大鼠灌胃灯盏花素（主要活性成分为野黄芩苷）后生物利用度的影响。方法采用HPLC-UV法测定大鼠血浆中野黄芩苷的浓度。大鼠按以下3种方案灌胃灯盏花素40mg·kg-1（以野黄芩苷计）：（A）不加pH调节剂的灯盏花素混悬剂;（B）预灌pH6．2碳酸氢钠-柠檬酸缓冲液后,给予不加pH调节剂的灯盏花素混悬剂;（C）灯盏花素混悬剂以碳酸氢钠-柠檬酸缓冲液调节pH值至6．2后,灌胃。结果以方案A为参比,方案B和C的相对生物利用度分别为183．1％与162．4％。方案B和C间的AuG0→1差异无统计学意义。以方案A给药时吸收存在1～2h的时滞,而以方案B和C给药时药物吸收迅速。溶解度-pH曲线表明,野黄芩苷在酸性条件下难溶,随着pH值升高,其溶解度增大。结论pH值是影响野黄芩苷口服吸收的一个重要因素,预灌或共服pH调节剂以提高胃液的pH值,可以增加野黄芩苷在胃肠道上段的溶解度,从而增加吸收的速率与程度,使时滞明显缩短、生物利用度显著提高。     

Pharmacokinetics of scutellarin and its aglycone conjugated metabolites in rats.

Scutellarin, a flavonoid glycoside, is the primary active ingredient in breviscapine that is a mixture of flavonoid glycosides extracted from a Chinese herb Erigeron breviscapus (Vant.) Hand.-Mazz. The pharmacokinetics of scutellarin and its aglycone conjugated metabolites after intraperitoneal injection and oral administration of breviscapine was investigated in rats. The plasma concentration of scutellarin and scutellarein conjugates in serial samples was measured by validated high-performance liquid chromatography methods. The pharmacokinetic results indicated that scutellarin underwent rapid and extensive biotransformation in vivo. After intraperitoneal injection, scutellarin was absorbed rapidly. The profiles of scutellarin and scutellarein conjugates were fitted to a two-compartment open model. Scutellarin and scutellarein conjugates showed a similar time course. No significant difference in tmax, t0.5(alpha) and t0.5(beta) was observed between scutellarin and scutellarein conjugates (p>0.05). After oral administration, fluctuations were observed in the concentration-time profiles of both scutellarin and scutellarein conjugates and the pharmacokinetics could not be explained by classical compartment model. The relative bioavailability of oral administration was very low, 10.67 % +/- 4.78% for scutellarin and 7.92% +/- 1.90% for scutellarein conjugates.     

大鼠口服灯盏花素的肠淋巴通道转运研究

建立清醒大鼠肠系膜淋巴管和颈静脉的双插管模型,以探索灯盏花素口服经肠淋巴通道的转运规律。采用HPLC法测定血浆和淋巴液中灯盏乙素浓度。双插管大鼠模型分别进行静注和口服灯盏花素的药动学实验。灯盏乙素静脉注射后存在从血液循环向肠淋巴系统的分布,肠淋巴累积转运量为(2.78±0.25)μg,是静注剂量的0.079 2%。灯盏乙素口服经肠淋巴通道12 h累积转运量为(0.92±0.08)μg,是口服剂量的0.008 3%;口服主要经门静脉通道吸收,绝对生物利用度为4.91%。灯盏乙素与乳糜微粒表面载脂蛋白的结合可能是其肠淋巴转运的主要形式。本研究为通过促进灯盏乙素肠淋巴转运而获得高生物利用度的灯盏花素脂质给药系统的研制提供了生物药剂学基础。     

注射用灯盏花素脂质体在Beagle犬体内的药代动力学

目的制备灯盏花素脂质体，研究灯盏花素脂质体在Beagle犬体内的药代动力学。方法采用双周期交叉试验法，6只Beagle犬分别单剂量(以灯盏乙素计为28 mg/只)静脉注射自制灯盏花素脂质体和市售普通注射液，用反相高效液相色谱法测定不同时间血浆中灯盏乙素的浓度，采用3P97计算药代动力学参数，并进行统计学分析。结果脂质体和市售注射液的T_1/2α分别为(4.4±0.7) min和(1.8±1.3) min；T_1/2<>分别为(55±27) min和(28±23) min；V_c分别为(1 580±265) mL和(2 460±2 200) mL；CL_s分别为(88±10) mL·min^-1和(324±69) mL·min^-1； AUC_0-720分别为(363±42) μg·min·mL^-1和(102±19) μg·min·mL^-1。两种制剂的T_1/2α，CL_s及AUC_0-720经方差分析后均存在极显著或显著性差异。结论与市售普通注射液相比，灯盏花素脂质体Beagle犬静脉注射给药后，大大提高了血药浓度，显著改善了灯盏乙素原药的药代动力学性质，具有缓释作用。     

灯盏乙素和灯盏花素对急性心肌梗死的保护作用

目的研究灯盏乙素和灯盏花素对急性心肌梗死的保护作用。方法建立大鼠急性心肌梗死模型后,腹腔注射不同剂量灯盏乙素和灯盏花素,4h后取出心脏行氯化硝基四氮唑蓝（NBT）染色,测量心肌梗死面积,比较两种药物对心肌梗死面积影响的量效关系;建立犬急性心肌梗死模型,股静脉注射50mg/kg灯盏花素或灯盏乙素,记录不同时间点的心外膜电图,比较两种药物对心肌缺血程度和范围的影响。结果灯盏乙素单体能够降低心肌梗死面积,抑制梗死区心肌细胞的凋亡,50mg/kg灯盏乙素能够降低左冠状动脉前降支结扎后犬心外膜电图抬高的∑ST段。结论灯盏乙素单体是灯盏花素的主要药理活性成分,较灯盏花素具有更好的量效关系。     

Protective effects of scutellarin and breviscapine on brain and heart ischemia in rats

Scutellarin is an active molecule existing in Erigeron breviscapus (vant.) Hand-Mazz. The present work was designed to study the antiischemic effects of scutellarin and its mixture with another substance, breviscapine, in male Sprague-Dawley (SD) rats. Ligature of left anterior descending arteries was performed to induce acute myocardial infarction (MI), and the middle cerebral artery occlusion was created to induce focal cerebral ischemia. The MI size was significantly reduced by scutellarin (15 and 50 mg/kg) but not by breviscapine (5 to 50 mg/kg); the effect of scutellarin on the anti-MI was dose-dependent. Compared with control group, scutellarin (50 mg/kg) reduced the myocardium cell apoptosis in MI rats. The two drugs together (5 to 50 mg/kg) significantly reduced infarction size in focal brain ischemic rats (P < 0.05). There were no significant differences among the 3 dosages in breviscapine-treated rats, and the effect of scutellarin on the anticerebral ischemia was dose-dependent. The results demonstrate that the protective effects of scutellarin on cardiovascular and cerebrovascular ischemia were better than its mixture, breviscapine, in rats.