hEGF、TGFβ2对兔角膜内皮细胞损伤的作用及相关蛋白 p27Kip1和 Cdk4 的表达

目的：观察人表皮生长因子（hEGF）、转化生长因子β2（TGFβ2）对家兔角膜内皮细胞损伤的作用及相关蛋白 p27Kip1和Cdk4的表达。方法：体外培养家兔角膜内皮细胞传一代融合后，定量损伤直径3.5?mm范围内的细胞，培养液中分别加入不同浓度的hEGF和（或）浓度为10?ng/ml的TGFβ2，对照组不加任何药物。损伤后第1、3、5，7天倒置显微镜下照相并用计算机测量未愈合面积。应用免疫荧光染色法，检测损伤修复不同阶段p27Kip1和Cdk4的含量。结果：一定质量浓度的hEGF可加快体外培养的家兔角膜内皮细胞的损伤愈合并上调Cdk4的表达, 且具有剂量依存性，以10～40?ng/ml为最适宜。外源性TGFβ2抑制角膜内皮细胞损伤修复。hEGF孵育损伤模型24?h后，TGFβ2对此无抑制作用。 TGFβ2作用损伤模型24?h后，可抑制hEGF的促修复作用。结论：一定质量浓度的hEGF能促进体外培养的家兔角膜内皮细胞的损伤修复并上调Cdk4的表达。外源性TGFβ2可抑制家兔角膜内皮细胞的损伤修复并上调p27Kip1的表达。     

白细胞介素-1β上调人鼻黏膜上皮细胞黏蛋白MUC2和MUC5B mRNA的表达

目的:探讨白细胞介素-1β(1L-1β)对鼻黏膜上皮细胞黏蛋白MUC2和MUC5B mRNA表达的影响.方法:在培养的第二代人鼻黏膜上皮细胞加入IL-1β(10μg/L)刺激24 h后,采用荧光定量RT-PCR检测人鼻黏膜上皮细胞中MUC2和MUC5B mRNA的定量表达.结果:在培养的鼻黏膜上皮细胞上均检测到MUC2和MUC5B mRNA的表达,IL-1β刺激组MUC2 mRNA定量表达[(39.26±6.10)×104拷贝/μg]高于对照组[(5.70±4.16)×104拷贝/μg],差异有统计学意义(P<0.01);IL-1β刺激组MUC5BmRNA定量表达[(5.72±2.06)×105拷贝/μg]高于对照组[(1.11±0.72)×10.拷贝/μg],差异有统计学意义(P<0.05).结论:在培养的鼻黏膜上皮细胞中IL-1β组的MUC2和MUCSB mRNA表达均高于对照组,提示IL-1β可能具有上调鼻黏膜上皮细胞黏蛋白mRNA的表达作用.     

地塞米松对人鼻黏膜上皮细胞前炎性因子表达的抑制作用

目的观察地塞米松对脂多糖(lipopolysac-charide,LPS)诱导的人鼻黏膜上皮细胞缺氧诱导因子-1(hypoxic inducible factor-1,HIF-1)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达抑制情况及意义。方法无血清原代培养人鼻息肉和下鼻甲黏膜上皮细胞,以LPS100ng/ml,白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)20ng/ml,LPS100ng/ml加地塞米松13ng/ml,IL-1β20ng/ml加地塞米松13ng/ml作用于对数生长期的上皮细胞3、6、9小时后,采用免疫细胞化学和原位杂交方法检测HIF-1α和VEGF蛋白及mRNA的表达情况。结果①LPS和IL-1β作用于上皮细胞时,HIF-1α及VEGF表达增加具有时间依赖性,以LPS100ng/ml6小时组最明显(P<0.05),且鼻息肉中的表达明显高于下鼻甲(P<0.05);②LPS100ng/ml加地塞米松13ng/ml组和IL-1β20ng/ml加地塞米松13ng/ml组表达强度分别较LPS100ng/ml组和IL-1β20ng/ml组弱(P<0.05)。两抑制组间表达无显著性差异。结论炎性因子及感染性因子可以诱导人鼻黏膜上皮细胞大量表达HIF-1α及VEGF,而地塞米松对其表达有很强的抑制作用。     

沉默HIF-1α基因对鼻黏膜上皮细胞生长因子表达的影响

目的 采用短发夹 RNA(shRNA)特异性沉默人鼻黏膜上皮细胞(HNEC)缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)基因,观察对其表达血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF)β1、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 的影响。方法 体外培养原代鼻黏膜细胞,设计合成以腺病毒为载体GFP标记的shRNA,将HNEC分为空白对照组、阴性对照组(ad-HIF shRNA-neg)、ad-HIF shRNA干扰组。采用RT-PCR和Western blotting技术检测转染后相应因子蛋白和mRNA的表达情况。结果 成功合成ad-HIF shRNA并转染入HNEC中。转染ad-HIF shRNA后,HIF-1α蛋白及mRNA表达分别下降40%和39%(q=31.469,16.590);同时VEGF、TGF-β1、bFGF的蛋白及mRNA表达也随之下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1α mRNA的shRNA能有效地使HNEC的HIF-1α基因沉默,进而有效地抑制VEGF、TGF-β1和bFGF的表达, 提示HNEC中HIF-1α可能通过直接或间接途径调控着VEGF、bFGF和TGF-β1的表达。     

金黄色葡萄球菌肠毒素B对人鼻黏膜上皮细胞的促炎作用

目的探讨金黄色葡萄球菌肠毒素B（staphylococcus aureus enterotoxin B，SEB）对原代培养的人鼻黏膜上皮细胞释放促炎因子和（或）趋化因子的作用。方法将无血清原代培养的人鼻息肉及下鼻甲上皮细胞分别在SEB1、10、100ns／ml，白细胞介素（intedeukin，IL）1β 20ng／ml及SEB 10ng／ml＋地塞米松13ng／ml等不同条件下孵育，12、24和48h后采用原位杂交方法检测鼻黏膜上皮细胞分泌的IL-5和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（granuloyte macrophagc colony stimulating factor，GM-CSF）在mRNA水平的变化。结果①SEB刺激鼻黏膜上皮时，IL-5和GM—CSF mRNA表达增加，在一定范围内呈现时间和剂量依赖性，以10ng／ml、24h时最明显（P〈0．05），且鼻息肉组的表达高于下鼻甲组，差异具有统计学意义（P〈0．05）；②IL-1β 20ng／ml组IL-5和GM-CSF mRNA表达增加不及SEB 10ng／ml组明显，差异具有统计学意义（P值均〈0．05）；③SEB 10ng/ml＋地塞米松13ng／ml组的IL-5和GM-CSF mRNA表达强度较SEB 10ng／ml组弱，差异具有统计学意义（P值均〈0．05）。结论SEB对原代培养的人鼻黏膜上皮细胞具有促炎作用。     

顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶表达的影响

目的：观察顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶（calpain ）表达的影响,探讨顺铂致耳蜗毛细胞凋亡的机制。方法取出生后3 d的昆明小鼠300只（600耳）,分离出耳蜗基底膜600条,体外培养24 h后,随机分为对照组和4、8、16μg／ml顺铂组,每组150条;对照组加入2ml新鲜培养基,顺铂组分别加入2 ml含不同浓度顺铂（4、8、16μg／ml）的新鲜培养基,再继续培养24 h后,应用Hoechst 33258荧光染色观察耳蜗毛细胞凋亡情况,并应用免疫荧光染色和免疫印迹（Western blot）技术检测calpain 1（μ－calpain）和calpain 2（m －calpain）在耳蜗毛细胞的表达。结果4、8、16μg／m l顺铂组耳蜗毛细胞凋亡率分别为15．63％±0．20％、38．40％±2．64％和64．24％±0．05％,均高于对照组（5．55％±0．12％）,呈现明显的量效关系;不同浓度顺铂组μ－calpain和m －cal‐pain的表达均较对照组明显增强（ P＜0．01）,且m －calpain的表达随顺铂浓度的增高而明显增强（ P＜0．01）。结论顺铂可通过calpain通路诱导小鼠耳蜗毛细胞凋亡,从而发挥毒性效应。     

TGF-β1对HLEC发生EMT影响分析

目的 研究TGF-β1对人晶状体上皮细胞(HLEC)上皮间质转分化(EMT)的影响。 方法 根据处理不同,将细胞分为TGF-β1组、siRNA-TGF-β1组和空白对照组,培养24 h后观察细胞形态,Transwell法检测各组细胞迁移能力,实时荧光定量PCR检测各组细胞中TGF-β1、α-SMA、E-cadherin和vimentin基因表达,Western blotting法检测各组细胞中PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达。 结果 TGF-β1组迁移细胞数为(31.2±4.7)个,高于siRNA-TGF-β1组(14.6±5.3)个及空白对照组(3.9±1.4)个,且空白对照组高于siRNA-TGF-β1组;siRNA-TGF-β1组TGF-β1、α-SMA 及Vimentin的mRNA相对表达量均低于TGF-β1组及空白对照组,且空白对照组低于TGF-β1组;siRNA-TGF-β1组E-cadherin的mRNA相对表达量均高于TGF-β1组及空白对照组,且空白对照组高于TGF-β1组;siRNA-TGF-β1组细胞中PI3K蛋白及p-Akt蛋白相对表达量均低于TGF-β1组和空白对照组,且空白对照组低于TGF-β1组,siRNA-TGF-β1组Akt蛋白相对表达量高于TGF-β1处理组和空白对照组,且空白对照组高于TGF-β1组。 结论 TGF-β1可诱导HLEC发生EMT,且可促进HLEC迁移,其机制可能与细胞中PI3K/Akt信号通路活化有关。     

鼻息肉组织中固生蛋白C的表达与转化生长因子β1的关系

目的探讨细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)成分固生蛋白C(tenascinC,TNC)在鼻息肉组织中异常表达的原因。方法采用免疫组化方法检测TNC和转化生长因子β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)在鼻息肉组织中的表达和关系。进一步采用细胞培养、实时定量RTPCR和原位ELISA技术研究TGFβ1及嗜酸粒细胞对人呼吸道上皮细胞系BEAS2B细胞TNC表达的调控作用。结果①TNC和TGF-β1蛋白在鼻息肉组织中的表达显著上调,TNC表达强度与TGFβ1阳性细胞总数(r=-0.58,P<0.01)和TGFβ1阳性的嗜酸粒细胞数显著相关(r=-0.61,P<0.01);②浓度为1ng/ml和10ng/ml的TGFβ1刺激4h后BEAS2B细胞TNCmRNA的表达分别为未刺激状态下的(7.20±3.43,x±s,下同)倍和(22.48±5.35)倍,与未刺激状态下的表达水平相比差异有统计学意义(P值<0.01);与刺激24h后TNC蛋白表达的荧光强度相比差异亦有统计学意义(P<0.05);③BEAS2B细胞和嗜酸粒细胞以2∶1、1∶1和1∶2的数量比例进行共培养,4h后BEAS2B细胞TNCmRNA的表达与未刺激状态下的表达水平相比,差异均有统计学意义(P值均<0.01);24h后TNC蛋白表达的荧光强度与未刺激状态下的荧光强度相比差异亦均有统计学意义(P值均<0.05);嗜酸粒细胞的这种诱导作用可以被抗TGFβ1的中和抗体显著抑制(P<0.05)。结论TGF-β1和嗜酸粒细胞可以诱导呼吸道上皮细胞对TNC的表达,嗜酸粒细胞的作用部分通过TGFβ1介导,鼻息肉组织中TNC表达的增高同嗜酸粒细胞来源的TGF-β1有关。     

平阳霉素对血管内皮细胞天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3、p53、B淋巴细胞瘤-2和端粒酶活性表达的影响

目的　探讨平阳霉素抑制ECV304细胞生长的分子机制。方法　采用流式细胞术测定ECV304细胞的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（cysteinyl aspartatespecif ic protease-3,Capase-3）、p53、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）蛋白表达水平在平阳霉素作用后的变化;采用TRAP-银染法检测ECV304细胞的端粒酶活性。结果　平阳霉素可导致ECV304的caspase-3表达水平增高,但与浓度无关;ECV304的p53荧光强度在平阳霉素75 μg/ml和150 μg/ml随浓度的增加而提高,平阳霉素作用后ECV304的Bcl-2,ECV304细胞经15 μg/ml平阳霉素作用后端粒酶表达减弱,75、150 μg/ml组端粒酶活性被抑制。结论 平阳霉素对体外培养的人脐静脉内皮细胞系ECV304细胞的抑制作用主要是通过诱导细胞凋亡来实现的。     

白细胞介素-1β在过敏性鼻炎小鼠的表达及其对鼻上皮细胞肿瘤坏死因子α诱导蛋白2的影响

目的　探讨白细胞介素1β（IL-1β）在过敏性鼻炎（allergic rhinitis,AR）小鼠鼻黏膜的表达及其体外对鼻上皮细胞肿瘤坏死因子α诱导蛋白2（tumor necrosis factor-α-inducible protein-2,TNFAIP2）表达的影响。方法　建立AR小鼠模型,检测鼻黏膜IL-1β基因的表达;培养小鼠鼻原代上皮细胞,用不同剂量IL-1β刺激,检测上皮细胞中TNFAIP2基因和蛋白的表达。结果　AR小鼠鼻黏膜IL-1β基因表达相对值为8.7±1.74,显著高于对照组1.21±0.26（P =0.0017）;小鼠鼻上皮细胞经25、50 ng/ml IL-1β刺激后TNFAIP2基因表达的相对值分别为15.83±1.65、26.50±4.25,均显著高于对照组2.31±0.78（P <0.0001,P =0.0002）,且50 ng/ml刺激组显著高于25 ng/ml刺激组（P =0.04）;TNFAIP2蛋白表达呈相同趋势。结论　AR小鼠鼻黏膜IL-1β表达增强,IL-1β体外能够诱导鼻上皮细胞表达TNFAIP2,提示AR中IL-1β可能通过调节TNFAIP2的表达发挥作用。     

鼻息肉中血管内皮生长因子和转化生长因子β1的表达

目的探讨血管内皮生长因子/血管通透性因子( vascular endothelial growth factor/vasular permeability factor,VEGF/VPF)和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1 ,TGF-β1)在鼻息肉组织中的表达及意义。方法 34例鼻息肉标本及30例中鼻甲粘膜标本行VEGF/VPF及TGF-β1的免疫组化染色，光镜观察。结果①VEGF/VPF在鼻息肉组织的血管内皮细胞和腺体细胞的表达明显高于中鼻甲组织(P＜0.01和P＜0.05)；②TGF-β1在鼻息肉组织的细胞外基质和固有层浸润细胞的表达明显高于中鼻甲组织(P＜0.005)；③鼻息肉组织中TGF-β1阳性细胞的形态及分布相似于嗜酸粒细胞；④VEGF/VPF与TGF-β1阳性表达与鼻息肉的临床分型无关(P＞0.05)。结论①VEGF/VPF对鼻息肉发生过程中组织极度水肿的产生可能有非常重要的作用；②TGF-β1可能直接参与鼻息肉的病理变化，导致上皮基底膜增厚和基质纤维化；③嗜酸粒细胞可能为鼻息肉中TGF-β1的主要来源。     

豚鼠硫辛酸鼓室与静脉给药的内耳药代动力学比较

目的 比较静脉与鼓室给药,应用高效液相色谱技术(high-performance liquid chromatography,HPLC)研究豚鼠外淋巴中的硫辛酸(lipoic acid,LA)药代动力学特征,为临床选择给药方式和药物剂量提供参考.方法 54只豚鼠随机分为2组,每组27只,分别经鼓室和静脉给予LA,给药质量浓度为100 mg/ml.于给药后0.5、1、2、3、4、5、6、8、10 h用HPLC检测豚鼠外淋巴中LA的质量浓度.结果 豚鼠外淋巴中LA质量浓度在0.1～200μg/ml范围内线性关系良好(r~2=0.9996),鼓室给药后外淋巴检测到最大药物质量浓度为171.7 μg/ml,而静脉给药组为33.7 μg/ml;静脉给药组动物的药物平均滞留时间为2.9 h,鼓室给药组为3.7 h;静脉给药组药物的半衰期为2.1 h,鼓室给药组为1.8 h.结论 豚鼠LA静脉与鼓室给药后均能在外淋巴中检测到药物,但鼓室局部给药效果明显优于静脉全身给药.     

体外诱导人脐带间充质干细胞向内耳毛细胞样细胞分化的研究

目的 探讨并建立一种体外定向诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells ,hUC-MSCs)向内耳毛细胞样细胞分化的方法.方法 采用组织贴壁法培养获得hUC-MSCs,流式细胞仪鉴定其表面标记物;神经干细胞诱导阶段分为对照组(DFNB基础诱导培养基)、实验1组(DFNB基础诱导培养基+20 ng/ml EGF+20 ng/ml bFGF)、实验2组(DFNB基础诱导培养基+20 ng/ml EGF+20 ng/ml bFGF+琼脂糖包被),培养3~5天后采用免疫荧光法检测各组标记蛋白Nestin的表达;内耳毛细胞样细胞诱导分化阶段,分为对照组(DFNB基础诱导培养基+明胶包被)、诱导组[DFNB基础诱导培养基+20 ng/ml EGF+1 μM全反式维甲酸/全反式维生素A酸(all trans retinoic aid,ATRA)],培养4周后采用qRT-PCR和免疫荧光法检测各组毛细胞标记物Math1、MyosinⅦa、Brn3c的表达.结果 在神经干细胞诱导阶段,对照组、实验1组均无神经球结构,实验2组中hUC-MSCs分化3 d后细胞有明显神经球样结构,且Nestin阳性细胞数更高(P<0.05);而向内耳毛细胞样诱导分化4周后,诱导组毛细胞标记物Math1、MyosinⅦa、Brn3c的mRNA和阳性细胞数的表达水平明显升高(P<0.05).结论 体外诱导人脐带间充质干细胞先向神经干细胞方向分化再向内耳毛细胞分化方向诱导,可有效提高毛细胞标记物MyosinⅦa、Brn3c、Math1的表达水平,促进hUC-MSCs向类毛细胞样细胞分化,可能为将来感音神经性聋的内耳移植治疗提供更为适合的种子细胞.     

鼻息肉组织中固生蛋白C的表达与转化生长因子β1的关系

目的:探讨细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分固生蛋白C (tenascin C,TNC)在鼻息肉组织中异常表达的原因。方法:采用免疫组化方法检测TNC和转化生长因子β 1(transforming growth factor- β 1)在鼻息肉组织中的表达和关系。进一步采用细胞培养、实时定量RT-PCR和原位ELISA技术研究TGF- β1及嗜酸粒细胞对人呼吸道上皮细胞系BEAS-2B细胞TNC表达的调控作用。结果:①TNC和TGF- β 1蛋白在鼻息肉组织中的表达显著上调,TNC表达强度与TGF-β 1 阳性细胞总数(r=-0．58,P<0．01)和TGF-β 1阳性的嗜酸粒细胞数显著相关(r=-0．61,P<0．01);②浓度为1ng／ml和10ng／ml的 TGF-β 1刺激4h后BEAS-2B细胞TNC mRNA的表达分别为未刺激状态下的(7．20±3．43,x±s,下同)倍和(22．48±5．35)倍, 与未刺激状态下的表达水平相比差异有统计学意义(P值<0．01); 与刺激24h后的TNC蛋白表达的荧光强度相比差异亦有统计学意义(P <0．05);③BEAS-2B细胞和嗜酸粒细胞以2．1、1:1和1:2的数量比例进行共培养,4h后BEAS-2B细胞TNC mRNA的表达与未刺激状态下的表达水平相比,差异均有统计学意义(P值均<0．01);24h后 TNC蛋白表达的荧光强度与未刺激状态下的荧光强度相比差异亦均有统计学意义(P值均<0．05);嗜酸粒细胞的这种诱导作用可以被抗 TGF-β 1的中和抗体显著抑制(P<0．05)。结论:TGF-β 1和嗜酸粒细胞可以诱导呼吸道上皮细胞对TNC的表达,嗜酸粒细胞的作用部分通过TGF-β 1介导,鼻息肉组织中TNC表达的增高同嗜酸粒细胞来源的TGF-β 1有关。图9参16     

转化生长因子-β1和胰岛素对人鼻中隔软骨细胞增殖和分化影响的研究

目的 了解转化生长因子-β1(transforminggrowth factor-beta 1,TGF-β1)和胰岛素对人鼻中隔软骨细胞增殖和分化的影响。方法 体外培养人鼻中隔软骨细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)代谢和35S-Na2SO4掺入的检测比较不同浓度TGF-β1和胰岛素对人鼻中隔软骨细胞的增殖以及软骨基质蛋白多糖合成的影响,观察TGF-β1和胰岛素对软骨细胞表型的影响。结果在15％血清的培养条件下,TGF-β1和胰岛素均能显著促进软骨细胞增殖,且在各自一定的浓度范围内呈量效关系,联合作用效果累加;TGF-β1、TGF-β1和胰岛素联合作用促使软骨基质蛋白多糖的合成量明显提高;TGF-β1使传代软骨细胞去分化提前。结论一定浓度的TGF-β1、胰岛素和TGF-β1 胰岛素对体外培养的人鼻中隔软骨细胞具有显著的促增殖作用。     

DRB对人喉癌Hep-2细胞系中PK-CK2 mRNA表达的影响及其与细胞凋亡的关系

目的探讨5,6-二氯-1--βD-呋喃核糖苯并咪唑(DRB)对人喉癌Hep-2细胞系中蛋白激酶CK2(PK-CK2)mRNA表达的影响及其与细胞凋亡的关系。方法不同浓度的DRB作用于人喉癌Hep-2细胞后,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Hep-2细胞PK-CK2 mRNA表达水平的变化,采用流式细胞术检测Hep-2细胞凋亡率的变化。结果随着DRB浓度的增加或作用时间的延长,Hep-2细胞PK-CK2 mRNA表达水平呈下降趋势,实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),流式细胞术检测二倍体峰前出现凋亡峰,5、10、20、40、80μmmol/L DRB与Hep-2细胞共育2h后的细胞凋亡率分别为0.68%、1.17%、7.25%、10.40%、22.66%。结论DRB可下调Hep-2细胞PK-CK2 mRNA表达水平,诱导细胞凋亡,这些可能是DRB抗癌作用的重要机制之一。     

转化生长因子β1联合表皮生长因子诱导上皮向间质转化对人喉癌细胞株Hep-2侵袭能力影响的研究

目的探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)联合表皮生长因子(epithelial growth factor,EGF)诱导上皮向间质转化对人喉癌细胞株Hep-2侵袭能力的影响。方法应用TGF-β1单独刺激和TGF-β1联合EGF刺激人喉癌细胞株Hep-2后24、48 h观察细胞形态学的动态变化。应用Transwell检测细胞侵袭能力及RT-PCR和Western blot技术检测细胞上皮钙依赖黏附蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达。结果①TGF-β1单独处理48 h组和TGF-β1联合EGF处理24、48 h组均能刺激喉癌细胞株Hep-2发生细胞形态改变。②TGF-β1联合EGF处理组无论是24 h还是48 h,其Hep-2细胞的侵袭能力都明显强于相同时段TGF-β1单独处理组(P<0.05);TGF-β1单独处理48 h组细胞侵袭能力又明显强于对照组(P<0.05)。③TGF-β1联合EGF处理组E-cadherin的表达降低,而Vimentin表达却明显上升。结论 EGF能够协同TGF-β1诱导上皮向间质转化,从而使喉癌具有更强的侵袭能力。     

白细胞介素-17A对鼻黏膜上皮细胞表达黏蛋白MUC5AC的刺激作用及分子机制

目的观察重组人白细胞介素17A(interleukin-1 7 A,I L-1 7 A)刺激离体培养的人鼻黏膜上皮细胞(human nasal epithelial cells,HNECs)后黏蛋白MUC5AC mRNA的表达变化,并检测相关的信号通路。方法离体培养的HNECs经过IL-17A诱导0～6 h后,通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chainreaction,Q-PCR)技术检测MUC5AC mRNA的表达变化;通过Western blot技术检测有无特异性阻断剂作用时p38信号通路的活化情况及相应MUC5AC mRNA的表达情况。结果 IL-17A在1 ng/ml即能诱导HNECs中MUC5AC的mRNA水平上调,并在浓度为100 ng/ml时达到峰值(F=48.60,P<0.01);p38信号通路在IL-17A诱导后开始活化,并在第30分钟达到最大程度,之后信号递减并趋于正常;采用p38特异性阻断剂SB203580抑制p38信号通路后,MUC5AC mRNA的上调得到抑制(F=223.8,P<0.01)。结论 IL-17A能通过p38信号通路诱导HNECs表达MUC5AC mRNA的过程,阻断p38信号通路可能作为干预由IL-17A诱导导致的气道黏液高分泌状态的一个关键靶点。