硫酸雌酮对染料木素及其Ⅱ相结合物在乳腺细胞中代谢的影响

目的研究硫酸雌酮对染料木素及其Ⅱ相结合物在乳腺细胞中代谢的影响。方法以人乳腺癌细胞系T47D和非癌乳腺细胞系MCF-10A为研究对象,采用体外孵化模型,将硫酸雌酮(estrone-3-sulfate,E1S)分别与染料木素(genistein,GEN)及染料木素-4'-硫酸结合物(genistein-4'-sulfate,G-4'-S)、染料木素-7-硫酸结合物(genistein-7-sulfate,G-7-S)、染料木素-4'-葡萄糖醛酸结合物(genistein-4'-glucuronide,G-4'-G)和染料木素-7-葡萄糖醛酸结合物(genistein-7-glucuronide,G-7-G)4个染料木素Ⅱ相结合物共同孵化24 h后,收集孵化液,采用LC-MS/MS法定量测定孵化液中相应代谢产物的浓度。结果在T47D和MCF-10A细胞中,E1S可明显抑制GEN转化为G-7-S和G-4'-S;E1S还可明显抑制G-7-G的生物转化。此外,E1S可促进MCF-10A细胞中G-4'-S转化为G-7-S。E1S对T47D和MCF-10A细胞中G-4'-G和G-7-S的代谢无显著性影响。结论 E1S影响GEN、G-7-G和G-4'-S在乳腺细胞中的代谢,对G-4'-G和G-7-S的代谢无明显作用。     

液质联用技术在药物体内代谢研究中的应用

目的:探讨液质联用(LC-MS)接口技术研究及其在药物代谢中的应用。方法:查阅文献、综述液质联用接口技术研究及其在药物代谢中的应用。结果:随着各种新型接口技术,特别是电喷雾电离和大气压化学电离的引入,LC-MS技术对高极性化合物的分析具独特优势,在药物体内代谢研究中发挥着日趋重要的作用。结论:LC-MS技术在中药、抗菌药物等多种药物及其代谢物的分析检测中广泛的发挥着重要作用。     

染料木素对去卵巢大鼠骨代谢的影响

目的　探讨染料木素对去卵巢所致骨质疏松模型大鼠的影响。方法　SD大鼠 36 0只 ,随机分为 7组 :正常对照组、模型组、骨疏康组、尼尔雌醇组和染料木素大、中、小剂量组。各组大鼠切除双侧卵巢 (正常对照组行假手术 ) ,术后第 8天开始ig给药 ,并分别于不同时间点从各组取 10只大鼠对体质量、血生化、BMD和生物力学等指标进行测定。结果　染料木素可抑制去卵巢模型大鼠的体质量增加 ,使模型大鼠的血清Ca、Mg、P、CT水平明显升高 ,BGP、ALP水平降低 ,与正常对照组有显著差异 ;在 4 .5、9mg·kg-1时可显著增强模型大鼠的股骨、胫骨和腰椎L2 - 4的BMD ;对模型大鼠的股骨生物力学指标有明显改善(P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论　染料木素可明显改善去卵巢模型大鼠的血生化指标、骨密度和生物力学指标 ,对骨质疏松有较好的疗效。     

染料木黄酮在Beagle犬体内代谢动力学的剂量依赖性研究

目的研究不同剂量染料木黄酮(genistein)在Beagle犬体内的药代动力学特征。方法将染料木黄酮制成混悬液，按2.67，5.34及10.68 mg·kg^-1给Beagle犬灌胃，于灌胃后不同时间在犬前腿部静脉采抗凝血标本，用葡糖醛酸酶溶液处理血浆。采用反相高效液相色谱法测定血浆中母体药物及葡糖醛酸结合型药物浓度，血浆药物浓度-时间数据用3P97药代动力学软件分析。结果染料木黄酮在Beagle犬体内过程符合二室开放模型，当剂量为2.67 mg·kg^-1时，母体药物MRT为52.9 min，AUC为6.7 mg·min·L^-1，葡糖醛酸结合型药物AUC为33.9 mg·min·L^-1；当剂量为5.34 mg·kg^-1时，母体药物MRT为224.8 min，AUC为26.1 mg·min·L^-1，葡糖醛酸结合型药物AUC为70.1 mg·min·L^-1；当剂量为10.68 mg·kg^-1时，母体药物MRT为267.7 min，AUC为33.2 mg·min·L^-1，葡糖醛酸结合型药物AUC为140.5 mg·min·L^-1。结论染料木黄酮首过代谢突出，血浆中药物主要以葡糖醛酸结合形式存在。在一定范围内随给药剂量增加，母体药物的吸收量趋于饱和，药物的血浆消除半衰期延长。     

染料木素对小鼠抗氧化作用的研究

目的：研究染料木素对小鼠抗氧化作用的影响。方法：将80只小鼠随机均分为对照组、染料木素低剂量组、染料木素中剂量组和染料木素高剂量组,观察不同剂量组的染料木素对小鼠心肌组织、脑组织和肝组织中SOD活性和MDA含量的影响。结果：染料木素低剂量组、中剂量组和高剂量组均能提高小鼠心肌组织、脑组织和肝组织中SOD活性,降低心肌组织、脑组织和肝组织中MDA含量;与对照组两两比较,其差异有统计学意义（P〈0.05）,其剂量呈现依赖性。结论：染料木素对小鼠具有良好的抗氧化作用,能够明显提高小鼠心肌组织、脑组织和肝组织中SOD活性,降低MDA含量。     

染料木素的药代动力学研究

总结了国内外近5年有关染料木素的药代动力学研究资料,从吸收、分布、代谢、排泄四个方面进行归纳分析,以指导临床合理用药。     

染料木素的研究进展

染料木素是从大豆、三叶草、葛根等植物中提取出来的异黄酮化合物,水溶性和脂溶性都较差,它有多种生理学功能。近年来,国内外学者对其提取分离方法、分析方法、药理作用、结构修饰等方面进行了研究。本文简要综述了这一领域近年来的研究进展,以促使对其的研究和应用。     

超高效液相色谱-质谱联用法快速测定生脉饮中7种木脂素的含量

目的：建立生脉饮（红参、五味子、麦冬）中五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酚的含量测定方法。方法：采用超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS）法进行定量分析,色谱柱ACQUITY UPLC BEH C₁₈（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）,以乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相梯度洗脱：1~5 min,A-B（40：60）;5~7 min A-B（40：60~70：30）;7~10 min A-B（70：30）;10~11 min 100% A;11~12 min A-B（40：60）,流速为0.3 mL·min^-1,进样量2 μL,柱温30℃,采用ESI离子源在正离子模式下选择离子扫描模式进行定量分析。结果： 7种木脂素在一定范围内线性良好,相关系数均大于0.999,加样回收率在95.15%~100.84%之间。结论：该方法快速、灵敏度高、选择性好,适合测定生脉饮中木脂素的含量。     

2种重组人源化葡糖醛酸化转移酶对染料木素代谢的作用研究

目的:比较研究2种重组人源化葡糖醛酸化转移酶UGT1A9和UGT1A10(分别主要存在于肝脏和肠道)对异黄酮类化合物染料木素的代谢作用,预测染料木素的主要代谢途径和机制。方法:采用体外微粒体药物代谢酶孵育法,高效液相色谱法检测染料木素在3个不同浓度(2.5、10、35μmol.L-1)下被2种代谢酶转化为葡糖醛酸结合物的代谢速率。结果:UGT1A9和UGT1A10都对染料木素有显著代谢作用,且随着浓度的增加,代谢速率加快,呈较好的浓度依赖关系,但以UGT1A9代谢速率更快。结论:UGT1A9对染料木素的代谢作用大于UGT1A10,提示染料木素的主要代谢部位在肝脏,但肠道也有部分代谢。     

肺癌患者血浆中安罗替尼浓度与不良反应的相关性研究

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定安罗替尼血药浓度的方法,探讨安罗替尼血药浓度与不良反应的相关性。方法:血浆样品采用乙腈沉淀蛋白进行前处理,以[D5]-氘代安罗替尼为内标;色谱柱:ACQUITY UPLC BEH C₁₈(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);流动相:0.01%氨水-甲醇;梯度洗脱,流速0.5 mL·min^-1;柱温40 ℃;进样量0.5 μL;电喷雾离子源,正离子方式,多反应监测模式。对UPLC-MS/MS进行方法学考察,将其用于测定肺癌患者血浆中安罗替尼浓度,收集相关病例的不良反应信息,分析两者之间的相关性。结果:血浆中安罗替尼在5~250 ng·mL^-1内线性关系良好,定量下限为5 ng·mL^-1,标准曲线为y=0.007 2x+0.004 9(r=0.999);批内和批间精密度、提取回收率及稳定性考察均符合要求。共测定了51例患者血浆中安罗替尼的稳态谷浓度,其中8 mg组27例患者的平均质量浓度为(29.08±8.35)ng·mL^-1;12 mg组24例患者的平均质量浓度为(40.79±23.91)ng·mL^-1。发生高血压、蛋白尿、手足综合征或促甲状腺激素升高的患者平均血药浓度均高于未发生相关不良反应患者的平均血药浓度(P＜0.05),相关风险的阈值浓度分别为31.22,23.13,43.15 ng·mL^-1和45.59 ng·mL^-1。结论:该方法准确简便、快速灵敏、重现性好,可用于测定肺癌患者体内安罗替尼的血药浓度。较高的安罗替尼稳态谷浓度会增加患者高血压、蛋白尿、手足综合征和促甲状腺激素升高的发生风险。     

超高效液相色谱串联质谱法快速测定尼扎替丁在人体血浆中的含量

目的: 建立超高效液相色谱串联质谱法测定人体血浆中尼扎替丁的含量。方法: 血浆以甲醇直接沉淀蛋白, 上清液用于目标物的检测;色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈;流动相为5 mmol·L^-1醋酸铵水溶液-甲醇 (65:35, V/V);流速:0.20 mL·min^-1;进样量:3 μL;柱温:35 ℃;样品室温度:6 ℃;采用电喷雾正离子模式电离, 尼扎替丁和内标雷尼替丁的监测离子分别为(m/z)332.2→155.0, (m/z)315.2→130.0。结果: 尼扎替丁的线性范围为10~3 000 ng·mL^-1, 平均回收率为93.2%~101.1%, 批内、批间RSD均小于15%。结论: 本研究建立的分析方法快速、准确、灵敏、简便, 适用于尼扎替丁人体药动学方面的研究。     

超高效液相串联质谱法同时测定保健食品中10种水溶性维生素

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱检测方法同时测定保健食品中10种水溶性维生素。方法：样品经过前处理后,采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3（2.1×100 mm,1.8μm）色谱柱分离;以0.1%甲酸的甲醇溶液和0.1%甲酸的水溶液为流动相进行梯度洗脱,通过电喷雾离子源多反应监测（MRM）模式进行检测。结果：10种水溶性维生素在6 min内完成分离,线性关系良好（r≥0.997）,方法检出限在5~250μg·kg^-1之间。3个添加水平的回收率和相对标准偏差RSD（n=6）分别为85.9%~109.5%和1.09%~0.79%。结论：该方法简便、快速、准确、灵敏,适用于保健食品中水溶性维生素的测定。     

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中伏立康唑和卡泊芬净及其药动学初步研究

目的 建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法同时测定大鼠血浆中伏立康唑和卡泊芬净的浓度,并用于伏立康唑和卡泊芬净单独给药和联合给药后SD大鼠体内的药动学初步研究。方法 伏立康唑、卡泊芬净分别以氘代伏立康唑和氘代卡泊芬净为内标,血浆样品经乙腈提取,以0.1%甲酸-乙腈和0.1%甲酸-水为流动相,用Phenomenex SynergiHydro-RP 80A柱进行梯度分离,0.5 mL/min体积流量,柱温为常温,10 μL进样量,多级反应监测（MRM）ESI正离子模式;12只SD大鼠随机分成3组,即伏立康唑（ig,40 mg/kg）组、卡泊芬净（iv,5 mg/kg）组、伏立康唑（ig,40 mg/kg）与卡泊芬净（iv 5 mg/kg）联合给药组,分别于给药后不同时间点颈静脉采血进行浓度测定,并计算药动学参数。结果 伏立康唑在0.5~500.0 ng/mL、卡泊芬净在4~4 000 ng/mL线性关系均良好,批内精密度（RSD%）和准确度（RE%）均小于10%,伏立康唑和卡泊芬净提取回收率均大于90%;SD大鼠单剂量联合给予伏立康唑和卡泊芬净后,伏立康唑消除变快,卡泊芬净的消除变慢;伏立康唑、卡泊芬净的C_max、AUC均高于单独用药。结论 HPLC-MS/MS法的专属性强、灵敏、准确、可靠,可用于测定SD大鼠血浆中伏立康唑和卡泊芬净的浓度及药动学研究。伏立康唑延缓了卡泊芬净在动物体内的消除速度,卡泊芬净通过促进伏立康唑的吸收,增加了其在动物体内的血药浓度,联用后二者生物利用度均提高。     

QuEChERS-UPLC-MS/MS法快速测定香茅草中33种农药残留量

目的:建立分散固相萃取(QuEChERS)快速样品前处理技术结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定香茅草中33种农药残留的方法.方法:以乙腈为溶剂,高速匀浆提取,经C18/PSA小柱及改良的QuEChERs填料净化.方法:采用Penomenex Kinetex XB-C18色谱柱(100 mm×2...     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中格列本脲

目的:建立测定人血浆中格列本脲的液相色谱-串联质谱法,并用于临床药代动力学研究。方法:血浆样品经液-液萃取后,以乙腈-水-甲酸(90:10:0.2)为流动相,采用 Zorbax SB-C_8 柱(150mm×4.6mm,5μm)分离,通过大气压化学电离源四极杆串联质谱,以选择反应监测(SRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为 m/z494→369(格列本脲)和m/z 324→127(内标格列齐特)。结果:LC-MS/MS 法测定人血浆中格列本脲的线性范围为0.50～500 ng·mL~(-1),定量下限为0.50 ng·mL~(-1)。以3个浓度水平的质量控制样品求得各浓度水平日内、日间精密度(RSD)均小于5.4%,相对偏差(RE)在±2.3%以内。在临床药代动力学研究中,应用此法测试了20名受试者口服盐酸二甲双胍格列本脲胶囊后血浆中格列本脲的浓度。结论:该法灵敏、快速、准确,操作简便,线性范围宽,适用于临床药代动力学研究。     

翡翠贻贝多糖抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的实验研究

目的观察翡翠贻贝多糖（PVPS）对体外培养人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用。方法体外培养的乳腺癌MCF-7细胞经不同浓度翡翠贻贝多糖处理48h后,经CCK-8试剂盒检测分析细胞存活率、用流式细胞术分析各组细胞凋亡率;光镜下观察40mg/L翡翠贻贝多糖处理细胞不同时间后的细胞形态变化。结果翡翠贻贝多糖40mg/L组和80mg/L组的乳腺癌细胞存活率明显低于对照组,而细胞凋亡率则明显高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）。光镜下可见肿瘤细胞脱落随作用时间延长而明显。结论翡翠贻贝多糖可抑制体外培养乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡。     

UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯浓度

目的 建立超高效液相串联质谱法快速测定大鼠体内8-O-乙酰山栀苷甲酯的浓度。方法 用乙腈沉淀蛋白方法处理血浆,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1;用正离子多离子反应监测(MRM)扫描,内标为槲皮素。结果 血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯的线性范围为2.5~500 ng·mL^-1(r=0.997 9),最低定量限为0.5 ng·mL^-1。低、中、高3个浓度(3, 45和450 ng·mL^-1)的质控样品的日内、日间精密度RSD均<10%,3个浓度的相对回收率分别为(103.59±4.75)%, (98.68±4.62)%和(97.06±5.64)%。结论 该方法操作简便、快捷,灵敏度高,适于大鼠血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯浓度的测定及其药代动力学研究。     

乳腺癌MCF-7细胞系中侧群细胞分选及其生物学特性

目的 分离乳腺癌MCF-7细胞系中的侧群细胞(SP)并观察其生物学特性.方法 利用流式细胞荧光分选法将乳腺癌MCF-7细胞系分成SP和非SP细胞两个亚群.对两个亚群细胞采用软琼脂克隆形成实验观察其增殖能力.结果 MCF-7细胞株中分选出SP细胞占(6.5±0.4)％;SP细胞的体外克隆形成率为(38.5±9.4)％,高于非SP细胞的(8.4±2,6)％(t=5.34,P＜0.05).结论 乳腺癌MCF-7细胞中的SP细胞富集了乳腺癌于细胞,其增殖能力强于非SP细胞,表明SP表型的肿瘤细胞在乳腺癌的生长中具有重要的地位.     

纳米雄黄对MCF-7乳腺癌干细胞的体外抑制作用

目的 研究纳米雄黄对乳腺癌干细胞的体外抑制作用.方法 以人乳腺癌MCF-7亲本细胞为对象,采用无血清培养法培养获得乳腺癌干细胞.以阿霉素(1 mg/L)为阳性对照,以相同质量浓度的水飞雄黄为参照,采用CCK-8法检测纳米雄黄对MCF-7亲本细胞及干细胞增殖的影响;借助悬浮球形成及分化实验、划痕实验、Transwell侵...