上海正常人群中谷胱甘肽S-转移酶T1基因纯合缺损

人类谷胱甘肽Ｓ－转移酶是一类重要的Ⅱ相反应代谢酶，它不仅与环境有害物质的减毒代谢有关，有时也与活化代谢过程有关，在胞浆谷胱甘肽Ｓ－转移酶中ＧＳＴＴ１表现的遗传多态性主要是由相关编码基因的缺失造成的。本文通过由人β－珠蛋白基因片段作内标控制对人血有核细胞ＤＮＡ进行ＧＳＴＴ１等位基因专一（Ａｌｅｌｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ）ＰＣＲ扩增的方法，对２２６名上海市健康常住居民进行ＧＳＴＴ１基因型检测，结果表明５０３％（１１４／２２６）的检测对象为ＧＳＴＴ１基因纯合子缺损（ＧＳＴＴ１０／０基因型），上述结果显著高于世界各地高加索人种集团的报道值（１１－１７％）以及美国黑人人群的相应数值（２４％）。     

肝细胞癌P53基因突变和蛋白表达的研究

为了阐明Ｐ５３肿瘤抑制基因突变在人肝细胞癌发生和发展中的作用。应用聚合酶链反应－单链构象多态性银染技术和ＤＮＡ直接测序法研究了肝细胞Ｐ５３基因的分子结构改变，结果表明：３１％的病例显示有Ｐ５３基因突变，低分化癌的突变率显著高于高／中分化癌的突变率，突变主要集中于外显子７和１上显子８。免疫组织化学染色表明：４２例肝细胞癌中２２例有Ｐ５３蛋白的核内堆积，低分化癌，ＨＢｓＡｇ阳性病例和伴有肝硬化患者的Ｐ     

人原发性肝癌及癌周肝组织内C－myc表达研究

应用免疫组化方法检测了５８例原发性肝癌组织石蜡切片中Ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。结果显示，Ｃ－ｍｙｃ蛋白在肝癌组织及其癌周肝组织中表达的阳性率分别为６８．９７％（４０／５８）及６５．５２％（３８／５８）。Ｃ－ｍｙｃ蛋白表达的增加与ＨＢｓＡｇ阳性、肝硬化及具有明显肝细胞不典型增生、癌周肝内转移、肿瘤无纤维包膜密切相关。值得注意的是，肝癌手术切除患者中，Ｃ－ｍｙｃ蛋白表达增加则肿瘤复发机率亦增高。文中还讨论了Ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达与原发性肝癌发生的可能作用。     

Study of the deletion mutation of glutathione transferase M1 gene and its role in susceptibility to hepatocellular carcinoma

Objection: To investigate the glutathione S transferase Ml (GSTM1) gene inherent deletion and its relation to prevalence of hepatocellular carcinoma (HCC) in Guangxi, China. Methods: The GSTM1 gene polymorphism of 120 HCC patients and 100 healthy subjects both from the same high aflatoxin B₁ (AFB₁) contaminated area were detected using PCR technique with special primers. Another 40 patients from AFB₁ low risk area were also tested. Results: In HCC high risk area, it was found that the frequencies of GSTM1 null genotype in HCC patients and healthy subjects were 59% and 51% respectively, with no significant difference. However, the frequency of GSTMl-null genotype in control group from AFB₁ low risk area was lower than those from high risk area (P<0.01). Conclusion: Populations in this HCC endemic region show a higher rate of GSTMl-null genotype, which may be partially responsible for the susceptibility to AFB₁ induced HCC. But the detoxification effect of GSTM1 alone is not sufficient to resist the genetic toxicity of AFB₁, especially in those people who expose to excess AFB₁. The GSTM1 gene deletion would not be suitable as an independent predictor of susceptibility to HCC. Foundation item: This work was supported by the National Science Foundation of China (No. 39860032) and a grant from the Department of Education of Guangxi Province (98-2-8). Biography: MA Yun (1963-), professor of pathology, physician in charge, Guangxi Medical University, majors in cancer etiology and fungi pathology.     

肝细胞癌nm23—HImRNA表达水平及其临床意义

探讨肝细胞癌ｎｍ２３┐ＨＩｍＲＮＡ表达水平与临床病理特征的联系。方法通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交技术检测５６个外科手术切除的肝细胞癌及癌旁肝组织中ｎｍ２３┐ＨＩｍＲＮＡ水平，并分析其表达与肿瘤大小、血清ＡＦＰ值、肝内转移或门静脉癌栓、包膜侵犯、ＴＮＭ分期等的关系。结果肝癌组织ｎｍ２３┐ＨＩｍＲＮＡ表达水平与肝内转移和／或门静脉形成癌栓，以及ＴＮＭ分期呈负相关，在ｍＲＮＡ低表达组，６６．７％的肝癌伴肝内转移和／或门静脉癌栓，７３．３％为ＴＮＭⅢ、Ⅳ期肝癌。结论ｎｍ２３┐ＨＩ基因低表达在肝癌浸润过程中具有一定作用，ｎｍ２３┐ＨＩｍＲＮＡ表达水平下降可作为肝内转移的标志。     

肝癌组织中bcl—2和bax蛋白表达及与PCNA表达的关系

目的探讨ｂｃｌ－２和ｂａｘ与肝癌发生的关系。方法用免疫组化方法研究３４例肝癌组织中ｂｃｌ－２和ｂａｘ的表达及与ＰＣＮＡ的关系。结果显示３４例肝细胞癌中５例ｂｃｌ－２阳性,阳性率为１４．７％,８例癌旁组织阳性,阳性率为２３．５％。７例ｂａｘ阳性,阳性率为２０．６％,癌旁组织２２例阳性,阳性率为６４．７％。ｂｃｌ－２和ｂａｘ表达与ＰＣ－ＮＡ增殖指数间无明显关系（Ｐ＞０．０５）。结论ｂｃｌ－２和ｂａｘ的变化可能影响肝细胞的凋亡状态,在肝癌发生中可能起一定作用,而并不引起细胞的增殖。     

肝癌相关新基因HC6的全长cDNA克隆及分析

目的：染色体17p13.3区域内多态性位点D17S926是肝细胞肝癌（HCC）杂合性缺失热点,PAC579克隆含有D17S926位点,本实验目的在于从PAC579克隆中寻找与肝癌相关的表达序列（ESTs),对有意义的EST片段克隆其全长cDNA。方法：根据PAC579克隆中现有的9个代表新基因的 EST序列设计引物,对正常人肝cDNA文库作多聚酶链式反应（PCR）扩增检测,确定在肝组织中表达的EST,然后采用Southern杂交检测肝组织中表达的EST在27对肝癌和癌旁标本中杂合性生缺失（LOH）频率,选择缺失频率最高的EST克隆其全长cDNA,Nothern杂交验证后测序并作进一步分析。结果：PAC579现有9个代表新基因的EST中有3个在肝组织中表达,其中EST6有肝癌中LOH频率高达54．6％（6／11）,通过PACE－PCR方法,得到约1．8kb全长cDNA克隆,与Northern杂交结果一致,结构及同源性分析显示该基因是一新基因,编码一个包含134个氨基酸,分子量约为14．7kD的蛋白质,另外发现碱基序列313－592属于ALu同源序列,重新命名为肝癌相关基因6（HC6）。结论：通过定位克隆方法从肝癌杂合性缺失热点得到一个新基因HC6,该基因与肝癌的关系有待进一步研究。     

人肝癌细胞内HBV DNA和HBsAg的分布及意义

用原位分子杂交和免疫组化技术双标记方法,在31例人肝细胞癌(HCC)的石蜡切片中检测HBV DNA和HBsAg。在31例HCC中,20例(64.5％)HBV DNA阳性,14例(45.2％)HBsAg阳性,8例(25.8％)HBV DNA和HBsAg两者同时阳性。HBV DNA主要分布于癌细胞的胞浆内(20例),也见于胞核内(16例)及核浆内(16例)。此结果表明,HCC的发生与HBV感染有密切关系。     

肝细胞癌患者的谷胱甘肽转移酶M1基因型分析

目的 研究广西黄曲霉毒素（AFB1）高危区肝细胞癌（HCC）患者谷胱甘肽转移酶（GST）M1的基因型。方法 用GSTM1特异引物和PCR方法检测末稍血白细胞中的GSTM1基因,研究对象为：病理确诊为HCC患者162例（HCC组）、当地无癌成年人177例（对照I组）和HCC低发区北京、河北青年40例（对照Ⅱ组）。结果 GSTM1基因缺失（GSTM1－null)型在HCC组为102例,占63％;对照I组为92例,占52％;对照Ⅱ组为13例,占33％。各组相比,差异有显著性。结论 GSTM1为AFB1Ⅱ期代谢解毒酶,遗传性缺失这种酶的个体对HCC的遗传易感性增高。广西HCC高发的因素,既有遗传易感性,又有AFB1高污染的环境因素,还有致癌病毒HBV和HCV等的协同致癌作用。     

大肠癌组织中RB基因的点突变现象

为了进一步了解大肠癌中ＲＢ基因呈过度表达状态的机制，本文作者研究了ＲＢ基因存在点突变的可能性。利用ＲＮａｓｅ保护试验，在一例结肠癌中首次证实了其ＲＢ基因存在着点突变现象，同时也针对同大肠癌中ＲＢ基因过度表达相关的机制进行了讨论。     

肝细胞癌患者的谷胱甘肽硫转移酶基因缺失的研究

目的　研究广西黄曲霉毒素B1(AFB1)高污染区人群谷胱甘肽硫转移酶GSTM 1和GSTT1基因缺失多态性与肝细胞癌高发的相关性。方法　采用聚合酶链反应 (PCR)方法检测 110例高污染区肝细胞癌患者和 135例无癌健康对照者的GSTM1和GSTT1基因型分布。结果　正常对照组GSTM 1和GSTT1基因缺失率分别为 4 7.4 %和 4 0 .7% ,肝细胞癌组GSTM 1和GSTT1基因缺失率分别为 6 3.6 %和 6 0 .0 % ;GSTM 1基因缺失在肝细胞癌组和正常对照组之间 ,差异具有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;GSTT1基因缺失在肝细胞癌组和正常对照组之间差异具有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。结论　肝细胞癌患者GSTM1和GSTT1基因缺失水平偏高可能是易感的原因之一。     

HCV感染对肝癌一些癌相关基因产物表达的影响

目的 研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的致癌机理。方法 以免疫组化ＡＢＣ法对４６例肝细胞癌（ＨＣＣ）及其癌旁肝组织的ＨＣＶＣＰ１０、ＮＳ３及ＮＳ５抗原和rasp２１、c-myc、c-erbB-2、突变型p５３及p１６蛋白进行染色,并将ＨＣＣ分为ＨＣＶ抗原阳性组和ＨＣＶ抗原阴性组,对比分析ＨＣＶ感染对上述癌相关基因蛋白产物表达的影响。结果 ４６例ＨＣＣ患者中,１～３种ＨＣＶ抗原性２０例（４３．５％）,２～３种ＨＣＶ抗原阳性     

基因HC56对人肝癌细胞（SMMC7721）基因表达水平的影响

目的：观测新发现的HC56基因对培养的人肝癌细胞SMMC－7721基因表达的影响。方法：用含HC56cDNA的重组表达载体转染SMMC－7721细胞后,由细胞总RNA反转录为cDNA,与Atlas人类cDNA表达方阵膜片杂交,通过molecular image system分析软件对暴光强度进行密度扫描定量（以看家基因β-actin对照校正）。结果：HC56转染的肝癌7721细胞有3个基因（C-myc,CAMP dependent protein kinasetypel bata regulatory subunit ,β,thymosin β-10)表达上调,3个基因（Glutathione perotidase,fos-related antigen-2,zinc finger protein 1)表达下调。结论;HC56基因转染对体外培养的肝癌细胞的基因表达有着不同的影响。本文为进一步研究HC56基因的功能提供了线索。     

广西地区肝细胞癌中c-myc和N-ras癌基因的原位表达与HBV感染关系的研究

目的：分析广西地区肝细胞癌中c-myc、N-ras癌基因的表达及乙型肝炎病毒（HBV）感染的关系及其在肝癌发生中的作用。方法：应用原位cDNA－RNA杂交方法和免疫组化方法检测40例广西地区肝癌和相应的癌旁组织中的c-myc mRNA、N-ras mRNA和HBsAg、HBxAg。结果：肝癌及癌旁组织均有较高的c-myc、N-ras癌基因的表达,其在不同分化程度肝癌中的表达差异无显著性意义：HBsAg和HBxAg的检出率分别为87．09％和79．31％。癌基因的表达与HBsAg和HBxAg的检出率呈平行状态。结论：c-myc、N-ras在广西地区肝癌的形成和保持恶性表型中有协同作用。HBxAg可能有激活c-myc、N-ras癌基因的作用。     

HBsAg阳性的肝细胞癌患者血清乙肝标志物的分析

目的观察HBsAg阳性的肝细胞癌(HCC)患者的血清乙肝标志物,并探讨不同标志物在评价慢性乙肝患者转归方面的意义.方法应用ELISA法分别检测HBsAg+的300例HCC和1000例慢性乙肝患者的血清HBV的5项标志物.结果HCC组的抗-HBe阳性率明显高于慢性乙肝组,而HBeAg阳性率明显低于慢性乙肝组,经统计学U检验,结果均具有显著性差异(P均＜0.01).结论HBeAg阳性的成年慢性乙肝患者血清HBeAg减弱、消失及向抗HBe的慢性转化在理论上虽有预示病情好转的可能,但实际上往往是肝细胞癌发生的一个前期危险信号.     

大肠癌患者P53基因的突变研究

本研究应用聚合酶链反应－－单链构象多态ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术对２８例大肠癌患者的癌组织Ｐ５３基因第５，６，７和８外显子进行检测，发现有１５例存在基因突变，突变率为５４％。这一结果表明Ｐ５３基因突变在大肠癌中的普遍存在，并在大肠癌的发生过程中起着重要作用；同时表明本研究所采用的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术具有简便，快速，灵敏和安全的特点，可应用于肿瘤的临床基因诊断。     

LEVELS OF GLUTATHIONES TRANSFERASE π mRNA IN HUMAN LUNG CANCER CELL LINES CORRELATE WITH THE RESISTANCE TO CISPLATIN AND CARBOPLATIN

The amounts of mRNA for glutathione S transferase π (GST π) were significantly lower in 3 human small cell lung cancer (SCLC) cell lines than in 3 non small cell lung cancer (NSCLC) cell lines. The sensitivities of the 3 SCLC cell lines to cisplatin and carboplatin were much higher than those of the 3 NSCLC cell lines. These results indicate that low levels of GST π mRNA expression in SCLC cell lines inversely correlate to high sensitivity to cisplatin and carboplatin, and further suggest that GST π may play an important role in intracellular inactivation of these drugs.     

谷胱甘肽S-转移酶Pi同功酶对消化道肿瘤诊断意义的再探讨

采用双抗夹心ELISA检测了113例正常人、485例消化道恶性肿瘤、80例消化系外肿瘤和368例相应器管的非癌疾病患血清谷胱甘肽S-转移酶Pi同功酶(GSTPi)含量。结果恶性肿瘤患血清GSTPi较正常人非癌疾病组显增高(P<0．001)，GSTPi作为肿瘤标志物不具有器官特异性，但对鉴别同一器官疾病的良、恶性具有辅助诊断价值。肝癌患癌细胞分化程度愈高,病程愈晚,血清GSTPi升高愈显。从胃粘膜癌前病变到早期胃癌、晚期胃癌，血清GSTPi逐步增高，说明血清GSTPi测定对癌前病变的监测可能有用。