冷冻方法和冷冻保护剂对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响

目的：探讨冷冻方法和冷冻保护剂类型对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响。 方法：16例男性不育患者精液分别于冷冻前、加入甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)和甘油两种冷冻液以快速和慢速冷冻6个月后,采用伊红染色分析精子活率和尾部低渗肿胀率。 结果：冷冻后精子活率和尾部低渗肿胀率明显低于冷冻前(P<0.001, P<0.05);GYC和甘油两种冷冻保护剂对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响差异无显著性(P>0.05);速冻和缓慢冷冻对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响差异亦无显著性（P>0.05）。 结论：冷冻后精子活率和尾部低渗肿胀率明显降低,不同冷冻方法和冷冻保护剂类型对精子活率和尾部低渗肿胀率无影响。     

人类稀少精子细管法超快速冷冻的实验研究

目的研究人类稀少精子超快速冻存方法,寻求稀少精子冷冻保存的最优方式。方法选取20份在上海市人类精子库捐精的20名健康志愿者的精液。将精液稀释后密度调至(3～5)×106/mL(每个高倍视野3～5条精子),按照不同冷冻方式分为四组进行冷冻:A组应用0.5 mL麦管和精子冷冻剂,以程序降温方式冷冻;B组应用毛细玻璃管和精子冷冻剂,以程序降温方式冷冻;C组应用毛细玻璃管和改良甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)型冷冻保护剂,以程序降温方式冷冻;D组应用毛细玻璃管和改良GYC型冷冻保护剂,以超快速降温方式冷冻。比较四种方法复苏后精子活率和正常形态率。结果冷冻前精子活率为(68.6±21.3)%;A、B、C、D组复苏后活率分别为(32.2±17.2)%、(41.5±18.4)%、(44.9±18.0)%和(50.2±19.7)%,B、C、D各组复苏后活率高于A组(P<0.05),D组高于其他三组(P<0.05)。冷冻后A、B、C、D组精子正常形态率分别为(14.2±4.1)%、(15.0±4.7)%、(14.5±5.2)%和(15.9±4.9)%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论应用超快速降温冷冻模式冷冻稀少精子,具有较高的冷冻复苏率。改良GYC冷冻保护剂具有与精子冷冻剂相似的冷冻保护效果。     

气相冷冻法和液相冷冻法对人类精子运动能力、形态学及超微结构的影响

目的研究液氮蒸汽熏蒸法(简称气相冷冻法)和直接投入液氮冷冻法(简称液相冷冻法)对人类精子冷冻复苏后运动能力、形态学及超微结构的影响。方法选择25例捐精者的精液标本,按照1∶1的比例添加改良甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)作为冷冻保护剂。每份精液标本等分为2份,分别进行气相法冷冻和液相法冷冻。复苏后,利用IVOS精子分析仪测定精子总活动率、前向运动精子百分率、运动参数,巴氏染色观察精子形态并计算形态正常率,透射电子显微镜观察精子超微结构。结果气相法冷冻从28℃降温到-185℃用时468 s,再经过1 h后降温到-196℃;液相法冷冻从30℃降温到-196℃用时90 s。两种方法冷冻复苏后精子总活动率、前向运动精子百分率、运动参数、形态正常率与冷冻前比较均明显降低(P<0.05)。气相法冷冻复苏后精子的复苏率、总活动率、前向运动精子百分率均高于液相法,差异有统计学意义(P<0.05);两种冷冻方法复苏后精子形态正常率、运动参数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。通过透射电子显微镜观察,使用GYC作为冷冻保护剂,两种方法冷冻复苏后,精子头部质膜和顶体膜超微结构未出现明显的损伤。结论改良GYC保护剂对精子超微结构具有保护作用;气相冷冻法冷冻人类精子的复苏结果优于液相法。     

不同冷冻保护剂对人精子染色体及超微结构影响的研究

目的 旨在了解不同冷冻保护剂（CPM）对人精子染色体畸变率及精子超微结构相对正常精子百分率的影响。方法 应用甘油、甘油－卵黄－柠檬酸钠（GYC）及甘油－卵黄－柠檬酸钠－L－谷氨酰胺（GYCG）三种冷冻保护剂，检测冻贮前后精子染色体畸变率和超微结构相对正常的精子百分率。结果 （1）精子染色体畸变率及精子性染色体的比例在三种冷冻保护剂冷冻前后均无显著改变；（2）在三种冷冻保护剂组冷冻复温后，精子超微结构相对正常的精子百分率显著下降，但GYCG组高于甘油、GYC组。结论 本研究中三种冷冻保护剂不会增加精子染色体畸变率，也不会引起精子性染色体比例失衡，GYCG较其他两种冷冻保护剂具有更显著的保持人精子结构的作用。     

对人精子顶体反应率在优选及冷冻前后变化的实验研究

目的 旨在了解人精子顶体反应率优先及冷冻前后的变化。方法 应用甘油、甘油－卵黄、柠檬酸钠（GYC）及甘油－卵黄－柠檬酸钠－L－谷氨酰胺（GYCG）三种冷冻保护剂及上游法、Percoll密度梯度离心法及双曲管优选法，检测冻贮前后及优选前后人精子顶体反应率。结果 （1）人精子冻融后其顶体反应率在GYCG组无显著改变，而在甘油组、GYC组则明显下降；（2）在上游法、Percoll密度梯度离心法及双曲管优选法优选后顶体反应率均有显著增加。结论 冷冻复温使人类精子顶体反应率下降，GYCG对人类精子的顶体反应率有较好的保护作用；本研究中的三种优选方法均可增加精子顶体反应率。     

供精者冷冻精液参数对精子宫颈黏液穿透功能的影响

目的：通过检测冷冻精液相关参数,探讨影响精子宫颈黏液穿透功能的相关因素。方法选取41例准入合格的志愿供精者冷冻精液标本,按冷冻精子宫颈黏液穿透功能结果好、中、差不同分3组,对每组复苏后的供精者冷冻精液标本进行精液参数综合评估,包括精液常规、精子形态、精子的存活率（伊红Y染色）、精子膜功能、精子DNA完整性、精子顶体酶活性、酶活力指数等。采用方差分析以及3组之间两两比较进行统计分析。结果供精者冷冻精液解冻后前向运动精子百分率、精子膜结构与功能完整性在3组之间差异有统计学意义（P＜0.05）。3组之间精子DNA完整性和精子顶体酶活性差异无统计学意义（P＞0.05）。结论供精者冷冻精液解冻后前向运动精子百分率、精子膜结构与功能完整性是影响精子宫颈黏液穿透功能的主要因素。精子DNA完整性和精子顶体酶活性对精子宫颈黏液穿透功能并不构成影响。     

男性不育症患者精液质量与精子顶体酶活性关系分析

目的:分析男性不育患者精液质量与精子顶体酶活性之间的关系,探讨精子顶体酶活性对男性不育的影响。方法:对467例男性不育症患者精液做精液常规、精子形态、精子存活率试验和精子顶体酶活性检测,以精液中精子顶体酶活性正常的(48.2～218.7μIU/106精子)337例作为正常组,精子顶体酶活性异常的(<48.2μIU/106精子)130例作为异常组,并对两组参数进行比较分析。结果:精子顶体酶活性正常组与异常组之间精子密度、总活力、前向运动率、存活率、正常形态精子比率都存在显著性差异,P<0.05。结论:精子顶体酶活性与精液质量之间关系密切,是影响男性生育的重要因素之一。     

精浆抗精子抗体对男性不育者精液参数和精子顶体酶活性的影响

目的:探讨精浆抗精子抗体(AsAb)对男性不育者精液参数和精子顶体酶活性的影响。方法:用间接血凝法检测2367例男性不育患者精浆AsAb,比色法测定精子顶体酶活性。结果:2367例不育者精浆AsAb阳性率为8.9%,精液AsAb阳性组中精液量,精子密度,精子活率,a、b级活力精子率,畸形精子率与AsAb阴性组相比差异有显著性(P<0.001、P<0.05)。随精子密度、精子活率a、,b级活力精子率、精液量的减少,精液粘度的增高和精液液化时间的延长,精浆AsAb阳性率增高,差异有显著性(P<0.001、P<0.05),精浆AsAb阳性组与阴性组顶体酶活性,顶体酶活性正常组与异常组精浆AsAb阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论:精浆AsAb对男性不育者精液参数有影响,对精子顶体酶活性没有影响。     

男性抗精子自身抗体对精子顶体酶活性的影响

目的为观察男性抗精子自身抗体对精子顶体酶活性的影响.方法选择男性不育者45例(不育组)与男性正常生育者20例(生育组)进行对比研究.两组均测定抗精子抗体和精子顶体酶活性.结果45例不育者抗精子抗体阳性率为51.1%;不育者精子顶体酶活性明显低于生育者;抗精子抗体阳性者顶体酶活性明显低于抗精子抗体阴性者.结论男性抗精子自身抗体可降低精子顶体酶活性.     

不育男性精液中的顶体酶活性分析

目的:探讨精子顶体酶活性测定对男性不育症的实验室诊断价值。方法:按精液常规分析结果将不育男性分为正常精液参数不育组和异常精液参数不育组,同时设立正常对照组,分析比较各组顶体酶活性水平差异。结果:正常对照组顶体酶活性为(93.5±42.7)μIU/106精子,正常精液参数不育组精子顶体酶活性为(29.4±11.5)μIU/106精子,异常精液参数不育组顶体酶活性为(16.9±13.1)μIU/106精子,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:精子顶体酶活性检测对评价男性精液质量有较高的临床应用价值。     

三种冷冻保护剂对人精子活力及生育潜力影响的研究

目的 通过比较甘油、甘油－卵黄－柠檬酸钠（GYG）和甘油－卵黄－柠檬酸钠－L－谷氨酰胺（GYCG）三种冷冻保护剂（CPM）的冷冻保护效果,旨在寻求简单、安全、有效、经济的精子冻贮方法。方法 应用甘油、GYG和GYCG三种冷冻保护剂（CPM）,通过冻贮前后精液常规分析,精尾低渗肿胀率（HOSR）、精子穿卵率（SPR）等精子功能的检测指标评价三种CPM的冷冻保护效果。结果 三种CPM对精子功能的冷冻保护作用各不相同,但GYCG较其他两种CPM具有更显著的保护人精子功能的作用。结论 在三种CPM中,GYCG的冷冻保护效果明显优于GYC和单一甘油,预示应用GYCG作为CPM可使人精子保持较高的生育潜力,具有安全、价廉、简单等优点,适合在我国推广应用。     

精子顶体酶活性检测对诊断男性不育症的价值

目的比较各种质量精液的精子顶体酶活性。方法分光光度比色法检测顶体酶活性。结果各种质量精液的精子顶体酶活性均显著低于对照组P<0.001。结论精子顶体酶可作为了解精子生育力的一项可靠指标。     

男性不育者精子顶体酶活性影响因素分析

目的 :分析某些因素对男性不育者精子顶体酶活性的影响。方法 :分光光度比色法检测3767例男性不育者精子顶体酶活性。结果 :精液液化时间延长组、p H值降低组、白细胞数 >5个 /HP组的精子顶体酶活性均显著低于其相应对照组 ( P<0 .0 0 1 ,P<0 .0 0 1 ,P<0 .0 5 )。顶体酶活性与支原体感染和精浆 As Ab无关 ( P>0 .0 5 ,P>0 .0 5 )。结论 :精液液化时间、p H值和白细胞数影响顶体酶活性 ,精液支原体感染和精浆 As Ab对顶体酶活性无影响     

精液白细胞与男性不育的关系

目的:探讨精液白细胞与男性不育的关系。方法:检测3867例不育者精液白细胞,观察其与精液常规分析参数、UU感染、AsAb和精浆果糖含量、α-糖苷酶活性、酸性磷酸酶活性的关系。结果:3867例不育者精液白细胞>5个/HP为36.93%。白细胞>5个/HP组精液量、精子密度、精子活动率、a,b级活力精子率、顶体酶活性均明显低于精液白细胞≤5个/HP组(P<0.001,P<0.05)。精液白细胞>5个/HP组畸形精子率、精液粘度增高率和精液UU阳性率明显高于白细胞≤5个/HP组(P<0.001)。两组比较果糖含量和α-糖苷酶活性均没有明显差异,两组酸性磷酸酶活性有差异(P<0.05)。结论:精液白细胞可影响精液质量。     

精子顶体酶活性与精液常规参数的相关性

目的 :测定人精子顶体酶活性并了解该酶与精液常规分析有关参数之间的关系 ,寻求一种可靠的衡量精子生育力的参数。方法 :分光光度比色法测定精子顶体酶活性。结果 :顶体酶活性与精子密度、a及 b级活动力精子百分率、精子活动率之间存在明显正相关 ( P<0 .0 0 1 ) ,而与畸形精子率呈显著负相关 ( P<0 .0 0 5 )。以精液常规分析各主要参数正常与否分成的两组间其顶体酶活性差异也均有显著性 ( P<0 .0 0 1 )。结论 :精子顶体酶可作为了解精子生育力的一项可靠指标