As2O3对淋巴瘤Raji细胞抑制效应及其Id4基因表达的影响

目的:探讨As2O3对恶性淋巴瘤细胞的作用和对DNA结合抑制因子(Id4)基因表达的影响.方法:体外培养人Burkitt's淋巴瘤细胞株Raji细胞,设对照组和用不同浓度的As2O3作用不同时间处理Raji细胞的实验组.MTT比色法检测细胞生长;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡并分析As2O3对细胞周期的影响.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测处理前后Id4 mRNA的表达情况.结果:实验组MTT比色实验结果表明,AsO3各浓度组作用于Raji细胞24、48及72 h后抑制率为12.15%～92.17%,P<0.05;流式细胞术检测细胞凋亡结果显示.实验组As2O3各浓度组作用于Raji细胞48 h后出现明显的凋亡峰,对照组未见凋亡峰或仅有低平的凋亡峰;细胞周期分析结果显示,实验组As2O3各浓度组作用于Raji细胞48 h后,As2O3可阻滞Raji细胞于G0/G1期,且随着As2O3浓度的增加,阻滞作用增强,呈一定剂量依赖关系.随药物浓度增加,Raji细胞中Id4基因mRNA的相对表达量逐渐增加,呈一定剂量依赖关系.结论:As2O3体外对Raji淋巴瘤细胞生长具有明显的抑制作用;As2O3能诱导Raji细胞凋亡,且使G0/G1期细胞比例增加,同时S及G2/M期细胞比例减少.随着As2O3浓度增加Id4基因出现表达.     

As2O3联用IFN-α诱导肾癌细胞株789-0凋亡的实验研究

目的:研究不同浓度As2O3对肾癌细胞株789-0的凋亡影响及联用IFN-α有无协同作用,并探讨其作用机制.方法:采用MTT法检测As2O3单用及联用IFN-α对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期和凋亡的影响.结果:(0.5-4)μmol/L的As2O3对肾癌789-0细胞的增殖均有一定抑制作用,且随浓度增加呈增强趋势.联用1000IU的IFN-α后,肾癌细胞的增殖抑制率明显高于相应浓度的单用As2O3组,具协同作用.2.83μmol/L.(IC50)的As2O3作用于肾癌789-0细胞48h后呈现G2/M期阻滞,凋亡特征明显;联用IFN-α后呈现Go/C1期、G2/M期阻滞,凋亡率显著增高.结论:As2O3能抑制肾癌789-0细胞的增殖并诱导细胞凋亡,联用IFN-α可产生协同作用.其机制可能与干扰细胞周期的不同时相有关.     

白藜芦醇的抗肿瘤效应机制

白藜芦醇是一种天然多酚类化合物,具有多种生物学作用,包括神经保护作用、心血管保护作用、抗炎及抗肿瘤作用等.近年来白藜芦醇抗肿瘤作用日益受到关注,其抗肿瘤机制可能是预防肿瘤的发生、延缓肿瘤的发展、促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤细胞的侵袭等.     

As2O3注射液治疗肝脏恶性肿瘤的临床分析

肝脏恶性肿瘤的恶性程度高,生长迅速,大多数患者确诊时已属中晚期,无法手术治疗,目前主要的治疗手段是介入治疗+肝动脉碘油栓塞术及药物治疗,但常规药物化疗疗效差,患者生存期短。我们收集原发性肝癌及肝转移癌患者32例,单药亚砷酸(As2O3)治疗后疗效较好。总结报道如下。1临床资料1.1一般资料2001年4月26日～2004年4月14日我院收治的经组织学和(或)细胞学确诊的原发肿瘤,经CT、MRI等影像学证实为肝内转移的患者中,符合以下条件的32例作为研究对象:1)对原发性肝癌未取得病理学依据,需符合国内统一规定的临床诊断标准[1];2)年龄在37～71岁;…     

天然抑瘤物抗肿瘤作用机制的研究概况

恶性肿瘤与心血管疾病是目前严重危害人类生命和健康的两大主要疾病,而根据统计推测,预计到2020年全球肿瘤新发病例将达2000万,死亡病例将达1200万,成为全球最大的公共卫生问题。因此关于恶性肿瘤的治疗也成为国内外学者们日益关注的对象。而目前传统治疗肿瘤的方法如化疗、放疗等虽然治疗效果显著,但其在杀灭肿瘤细胞的同时,也使机体的正常细胞受到一定程度的损伤,且带来的副作用也可能对患者的治疗更加举步维艰。     

2-甲氧基雌二醇的抗肿瘤作用研究进展

目的:探讨2-甲氧基雌二醇(2-ME)在抗肿瘤作用中的研究进展。方法:应用Medline及CNKI期刊全文数据库检索系统,以2-ME、肿瘤治疗和细胞周期为关键词,检索2002-2007年2-ME抗肿瘤作用方面的研究相关文献24篇。结果:2-ME为雌二醇在体内的生理代谢产物,但对雌激素受体的亲和力较低,而对多种肿瘤细胞具有抑制作用,其主要机制为抑制细胞增殖、诱导肿瘤细胞和内皮细胞凋亡、抗血管新生、促进细胞周期停滞及增强肿瘤细胞对辐射的敏感性等。2-ME对正常细胞和组织无作用,不良反应较小。结论:2-ME具有广泛的抗肿瘤作用,有望成为一种新的抗肿瘤药物。     

青蒿素及其衍生物的抗肿瘤作用

青蒿素及其衍生物在体外对多种动物和人体肿瘤细胞具有抗瘤作用 ,对移植性动物肿瘤亦有确切的抑瘤效果 ,但其具体的作用机制尚不清楚 ,调控细胞周期的某一关键性的蛋白可能是其作用的靶点 ;青蒿素及其衍生物不仅与传统化疗药不存在交叉耐药 ,而且能逆转肿瘤细胞的多药耐药现象。通过深入研究其构─效关系及抗瘤作用机制 ,可望开发出高效、低毒、价廉、广谱的抗癌新产品。     

α-干扰素与5-FU联合作用对肝癌细胞HepG2.2.15生物学特性的影响

目的:探讨α-干扰素(IFN-α)联合5-FU对肝癌细胞HepG2.2.15生物学特性的影响及其作用机制.方法:采用MTT法观察5-FU和IFN-α对HepG2.2.15细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡变化及细胞表面Fas表达变化;RT-PCR检测凋亡抑制基因Bcl-xL表达变化.结果:IFN-α单独应用对HepG2.2.15细胞增殖抑制作用较弱,与5-FU联合应用时对细胞的增殖抑制作用明显增强,P<0.01;两者联合应用对HepG2.2.15细胞周期的影响表现为与对照组和IFN-α、5-FU单用药组相比,联合用药组G0/G1期细胞比率升高(78.33%vs54.95%、60.08%和72.50%),S期比率降低(10.97% vs 29.04%、18.69%和17.44%),P<0.01;经药物处理48h后,联合用药组的细胞凋亡率为(25.08±2.54)%,与对照组及IFN-α和5-FU单独应用组相比,细胞凋亡率明显增高,P<0.01.IFN-α对HepG2.2.15细胞表面Fas表达没有影响,但可协同5-FU明显提高细胞表面Fas的表达,P<0.01.联合用药组HepG2.2.15细胞Bcl-xL的表达较对照组和单药组明显下降,P<0.05.结论:IFN-α和5-FU联合应用可抑制HepG2.2.15细胞的增殖并诱导凋亡,其机制之一可能是调节凋亡抑制基因Bcl-xL的表达,影响内源性凋亡信号传导通路来发挥作用.     

小剂量As2O3体外诱导HL-60细胞发生非终末分化分子机制的研究

目的探讨增强子结合蛋白C／EBPs在小剂量三氧化二砷（As2O3）诱导HL-60细胞发生非终末分化中的作用。方法采用瑞式染色观察细胞形态，WSTl实验测定细胞增殖变化，测定和分析细胞周期，NBT还原实验测定细胞分化状态，RT-PCR方法检测C／EBPct和C／EBPε的mRNA表达。结果HL-60细胞经全反式维甲酸（ATRA）作用24h后，随着细胞分化的发生，C／EBPε mRNA的表达明显增加，C／EBPα mRNA的表达降低。HL-60细胞经As2O3作用24h后，C／EBPα mRNA的表达降低，C／EBPε mRNA的表达轻微增加。结论经As2O3和ATRA诱导后不同分化状态HL-60细胞，C／EBPα mRNA的表达降低，二者差异无显著意义；C／EBPε的表达差异较大（P〈0．05），二者差异有显著意义。小剂量As2O3诱导HL-60细胞发生非终末分化可能是由于C／EBPε不能持续表达升高引起的。     

As2O3对人卵巢癌顺铂耐药细胞株裸鼠腹腔移植瘤作用及其机制的探讨

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人卵巢癌顺铂耐药细胞株3AO/DDP细胞裸鼠腹腔移植瘤的影响及其作用机制.方法:4×106个3AO/ODP细胞接种于裸鼠腹腔96 h后,随机分为5组,分别腹腔内注射0.2 mL生理盐水、3 mg/kg的DDP及0.8、1.2和2.4 mg/kg的As2O3,观察3AO/DDP细胞在各组裸鼠的致瘤率、裸鼠的死亡率及生存期;采用RT-PCR技术观察As2O3作用停药后1 d、1周、2周裸鼠腹腔移植瘤Fas、N-myc、nm23H1及MTA1基因表达的变化,并与对照组相比较.结果:As2O3组裸鼠的致瘤率分别为87.5%、62.5%和50.0%,死亡率分别为62.5%、12.5%和0,生存期分别为(75.88±14.21)、(88.88±3.18)和(90.00±0.00)d,与DDP组的100%(致瘤率)、100%(死亡率)、(28.25±2.25)d(生存期)相比,差异有统计学意义,P＜0.05;As2O3作用后,裸鼠腹腔移植瘤Fas及nm23H1基因的表达水平升高,于停药第2周达到高峰,分别与对照组相比,差异均有统计学意义,P值均＜0.05;N-myc和MTA1基因的表达在停药第1天和第1周下降,与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05),而第2周反弹升高,与对照组相比,差异无统计学意义,P＞0.05.结论:As2O3对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤具有明显的抑制作用,其机制与Fas和nm23H1基因与N-myc和MTA1基因的正负调节有关.     

香加皮提取物抗肿瘤活性的研究

背景与目的： 研究中药香加皮提取物的抗肿瘤活性,探讨其抗肿瘤机制。 材料与方法： 采用噻唑蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5 diphenyltetrazolium bromide, MTT)法观察香加皮醇提物和水提物对MCF-7、TE-13、QG56、SMMC7721、T24、Hela、K562等肿瘤细胞增殖的抑制作用,应用流式细胞术检测肿瘤细胞的周期变化和对凋亡的影响。 结果： 香加皮醇提物和水提物均能明显抑制多种肿瘤细胞的增殖,呈浓度依赖性;醇提物的抑瘤作用(IC50<10 μg/ml)强于水提物(IC50<40 μg/ml),并且差异具有统计学意义(P<0.05)。香加皮醇提物可将MCF-7细胞阻滞于G0/G1期,并呈时间依赖性地诱导MCF-7细胞发生凋亡。10 μg/ml香加皮醇提物作用MCF-7细胞24 h,与对照组相比,G0/G1期细胞显著增多,作用48 h,凋亡率从对照组的0.70％±0.13％升高到13.54％±2.12％,两者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。 结论： 香加皮提取物对体外肿瘤细胞的增殖具有显著的抑制作用,醇提物强于水提物,其抗瘤机制可能与阻滞肿瘤细胞周期和诱导凋亡有关。     

木鳖子提取物体外抗肿瘤活性的初步研究

目的：观察木鳖子（cochinchina momordica seed,CMS）水提物（water extract of CMS,CMSWE）和醇提物（ethanol extractof CMS,CMSEE）对肿瘤细胞生长的影响,探讨CMSEE的抗肿瘤机制。方法：制备CMSWE和CMSEE。MTT法检测CMSWE和CMSEE对人黑色素瘤B16、肺癌细胞A549、乳腺癌细胞MDA-MB-231、食管癌细胞TE-13,以及正常人外周血淋巴细胞（PBMC）生长的影响,计算细胞生长抑制率;光镜下观察细胞形态变化;瑞氏-吉姆萨染色观察B16细胞凋亡形态学变化。流式细胞技术（FCM）检测B16细胞凋亡率和细胞周期分布。结果：CMSEE（25—300mg／L）对B16、A549、MDA-MB231和TE-13细胞增殖均有明显的抑制作用（P〈0．01）,对PBMC的增殖没有明显影响。CMSWE（25～300mg／L）对A549、TE-13、MDA-MB231、PBMC的生长没有明显影响,仅对B16细胞的增殖有较弱的抑制作用,且各浓度组抑制率均小于相同浓度的CMSEE（P〈0．01）。经CMSEE处理后,B16细胞显示典型的凋亡形态变化,凋亡率明显增高（P〈0．01）,G0／G1期细胞明显增加,S期、G／M期细胞减少（P〈0．01）。结论：CMSEE体外对人肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用,其抗肿瘤机制可能与阻滞肿瘤细胞周期和诱导凋亡有关。     

PML-RARα表达对细胞凋亡诱导剂敏感性差异的分子机制研究

目的 研究PML-RARα表达阴性的HL-60细胞和表达阳性的NB4细胞对三氧化二砷(As2O3)诱导细胞凋亡敏感性差异的分子机制.方法 经As2O3作用人急性早幼粒细胞白血病HL-60和NB4细胞后,MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞术测定细胞凋亡水平的变化,RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Fas等基因在mRNA水平的表达变化.结果 As2O3可诱导NIM细胞出现明显的凋亡现象,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05),Bcl-2基因表达明显下调(P<0.05),但Bax、Fas基因表达没有明显变化(P>0.05),Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05).而对于PML-RARa表达阴性的HL-60细胞,经小剂量As2O3作用后,对细胞的增殖抑制作用不明显(P>0.05),未出现明显凋亡现象,Bcl-2、Bax、Fas或Bcl-2/Bax表达水平及比值变化不明显(P>0.05).结论 Bcl-2/Bax表达比值变化与否,可能是小剂量As2O3诱导PML-RARα表达阴性的HL-60细胞和表达阳性的NB4细胞发生凋亡差异的分子机制.     

抑制细胞外信号调节激酶对As2O3诱导胃癌细胞系MGC-803凋亡的作用

目的探讨细胞外信号调节激酶在三氧化二砷(As2O3)诱导胃癌细胞系MGC-803凋亡的信号转导途径中的作用.方法采用MTT法检测As2O3对胃癌细胞系MGC-803的增殖抑制作用,采用瑞氏-姬姆萨染色和流式细胞仪检测As2O3诱导MGC-803凋亡以及加入选择性ERK抑制剂PD98059后细胞凋亡率的变化.结果5 μmol/L与10 μmol/L的As2O3作用24 h后凋亡率分别为(4.74±0.03)%和(11.93±0.06)%,而与PD98059联合作用24 h后凋亡率分别增加至(11.65±0.09)%和(18.15±0.10)%,P＜0.05.As2O3抑制MGC-803细胞的增殖,并诱导凋亡.结论预先抑制ERK途径增加了As2O3诱导MGC-803细胞的凋亡效应.ERK途径可能参与了As2O3诱导胃癌细胞系MGC-803凋亡的信号转导途径.     

As2O3诱导胰腺癌细胞凋亡的相关研究

目的探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对胰腺癌细胞的生长的影响及其作用机制。方法采用不同浓度的As2O3处理胰腺癌AsPC-1细胞不同时间(1d、2d、3d),在显微镜和电镜下观察细胞的形态,噻唑蓝(MTT)法和流式细胞分析法测定细胞生长抑制情况;不同浓度的As2O3处理细胞2h、5h、8h、12h、24h后,用DCFH-DA标记细胞后检测荧光强度反映细胞内过氧化氢(H2O2)水平。结果1μmol/LAs2O3处理AsPC-1细胞24h即呈现明显的生长抑制和凋亡特征。As2O3对细胞内H2O2水平影响的结果显示As2O3处理AsPC-1细胞2h后,细胞内H2O2的水平即明显升高(10μmol/L组达79%),到5h达到高峰(增高169%),12h后下降,24h水平与对照组接近,且H2O2水平的变化对As2O3有明显的剂量依赖性。结论As2O3能诱导AsPC-1细胞凋亡,其机制可能与细胞内的H2O2水平改变有关,并且H2O2积累是As2O3诱导细胞凋亡途径中的早期事件,H2O2可能在As2O3诱导肿瘤细胞凋亡途径中扮演类似第二信使的角色。     

砷剂抗肿瘤作用机制的体外研究

细胞凋亡已成为当前肿瘤研究的热点之一。砷剂治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)，为促进凋亡，治疗恶性肿瘤提供了成功的范例，但凋亡不是其作用机制的全部。此外，砷剂还可通过原浆毒、改变细胞的氧化水平、引起DNA的损伤等机制发挥抗肿瘤作用[2]。……     

As2S2诱导K562细胞凋亡的分子机制初步研究

目的　探索As2 S2 对K5 6 2细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法　细胞凋亡的检测用流式细胞分析、基因组DNA电泳、细胞形态学观察等方法 ,Westernblot方法用于蛋白表达的检测 ,基因表达的变化用半定量RT PCR方法。结果　 3～ 5 μmol L的As2 S2 作用 4 8～ 72h即可诱导K5 6 2细胞凋亡。 3μmol LAs2 S2 作用 72h时 ,细胞凋亡率达 (34.4± 3.3) % ;5 μmol LAs2 S2 作用 4 8,72h时 ,细胞凋亡率分别为 (2 1.8± 3.6 ) %和 (4 6 .0± 5 .2 ) %。 5 μmol LAs2 S2 作用下 ,As2 S2 可降低Bcr Abl和JAK2的蛋白含量。As2 S2 从基因水平上调bax表达 ,下调c myc表达。As2 S2 作用后 ,Caspase 3被激活。As2 S2 也能诱导慢性粒细胞性白血病 (CML)患者单个核细胞凋亡。结论　As2 S2 可诱导CML细胞凋亡 ,Bcr Abl含量的降低可能起了很重要的作用。bax表达的增加、c myc表达的减少、JAK2蛋白含量的降低以及Caspase 3激活也可能参与了该细胞凋亡机制。     

TSA诱导胰腺癌BxPC-3细胞周期阻滞与凋亡的研究

目的观察曲古抑菌素A(tricho-statin A,TSA)对胰腺癌BxPC-3细胞增殖及凋亡的诱导作用,探讨TSA抗胰腺癌的作用机制。方法BxPC-3细胞应用TSA处理后采用流式细胞技术分析其细胞周期分布和细胞凋亡率,免疫组化方法检测细胞乙酰化组蛋白H4表达,Western blot分析p21 WAF1/CIP1蛋白表达。结果TSA对胰腺癌BxPC-3细胞具有生长抑制作用,且呈时间和剂量依赖性。TSA可将BxPC-3细胞阻滞于G0/G1期,TSA组G0/G1期细胞达(61.8±2.5)%,较空白对照组(42.5±2.2)%和乙醇对照组(47.3±3.4)%明显增多(P=0.004);三组细胞凋亡率分别为25.5%、5.5%和5.1%(P=0.000)。TSA组细胞p21 WAF1/CIP1蛋白表达及其相关染色质乙酰化组蛋白H4表达上调。结论TSA对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和细胞周期具有影响作用并可诱导细胞凋亡,p21 WAF1/CIP1蛋白及其相关染色质乙酰化组蛋白H4表达上调可能是其抗胰腺癌作用机制之一。     

5-Fu和α干扰素抗肿瘤血管形成协同效应的实验研究

肿瘤化疗常用的细胞毒药物对肿瘤细胞选择性较差,对正常组织造成一定损伤,有时损伤严重而不得不停止化疗.近年来研究表明,一些化疗药物,如环磷酰胺、长春碱类等具有抑制肿瘤血管作用,为改变化疗药物的临床使用方法、降低毒副反应提供了理论依据.5-Fu是常用的化疗药,可长期口服给药,其是否有抗血管形成作用目前国内外尚未见报道;α干扰素的抗肿瘤效应及抗血管形成作用已为人们公认.本实验研究这两种药物是否具有抗肿瘤血管形成的协同效应,以期为两者联合应用提供依据.