榄香烯诱导HeLa细胞凋亡的实验研究

目的 从8种抗病毒、抗肿瘤药物中筛选出诱导HeLa细胞凋亡的药物,并对其抗肿瘤机理进行探讨。方法 应用相差显微镜、电镜和流式细胞仪等检测手段,证实HeLa细胞凋亡,并对凋亡的Hda细胞周期变化进行分析。结果 榄香烯阻滞HeLa细胞在G2／M期,降低HeLa细胞分裂能力,抑制其增殖;榄香烯抗肿瘤作用存在明显的阈值,即达到某一有效剂量,就可发挥强烈的抗肿瘤作用。结论榄香烯是一种有效的诱导细胞凋亡的药物,对指导临床药物治疗宫颈癌具有重要意义。     

榄香烯诱导喉癌细胞凋亡的实验观察

目的：研究榄香烯对喉癌细胞的作用及机制。方法：用MTT法测定榄香榄香烯对喉癌细胞的抑制作用，在透射电镜下观察其形态学变化，用流式细胞仪研究不同浓度、不同时间细胞凋亡的发生和对细胞周期的影响。结果：榄香烯明显抑制Hep-2细胞的生长，对Hep-2细胞的半数生长的抑制剂量（IC50）值24h为61．3μg/ml。透射电镜观察发现染色质浓缩，沿着核膜排列，形成不同形状和大小的块状。流式细胞术证实，凋亡细胞具有时间和药物浓度双相依赖性。榄香烯阻滞Hep-2细胞从S期进入G2M期。结论：在实际室条件下，榄香烯能够抑制喉癌细胞的生长，其抑制作用与细胞凋亡有关。     

榄香烯体外诱导急性白血病细胞凋亡的研究

目的 探讨榄香烯诱导白血病细胞凋亡的作用及其机制。方法 采用MTT法、荧光显微镜、透射电镜、流式细胞术（FCM）、DNA电泳方法观察榄香烯对HL．60白血病细胞株的促凋亡作用，并进行细胞周期分析和采用RT-PCR、FCM检测bcl-2基因表达的变化。结果 榄香烯在体外诱导HL-60细胞凋亡，呈细胞凋亡典型的形态和生化特征，可见凋亡小体和梯形条带，并具有时间剂量依赖性，凋亡率最高达51．8％，在凋亡过程中细胞阻滞于S期，并检测到bcl-2基因表达下调。结论 榄香烯具有诱导细胞凋亡的作用，其机制可能与bcl-2基因表达下调有关。     

榄香烯诱导喉癌细胞凋亡的实验观察

目的研究榄香烯对喉癌细胞的作用及机制. 方法用MTT法测定榄香烯对喉癌细胞的抑制作用,在透射电镜下观察其形态学变化,用流式细胞仪研究不同浓度、不同时间细胞凋亡的发生和对细胞周期的影响. 结果榄香烯明显抑制Hep_2细胞的生长,对Hep_2细胞的半数生长的抑制剂量(IC50)值24h为61.3μg/ml.透射电镜观察发现染色质浓缩,沿着核膜排列,形成不同形状和大小的块状.流式细胞术证实,凋亡细胞具有时间和药物浓度双相依赖性.榄香烯阻滞Hep-2细胞从S期进入G2M期. 结论在实验室条件下,榄香烯能够抑制喉癌细胞的生长,其抑制作用与细胞凋亡有关.     

紫杉醇诱导HeLa细胞凋亡的研究

目的：探讨紫杉醇抑制ＨｅＬａ细胞生长的机制。方法；经荧光染色，电镜观察细胞形态，ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ及流式细胞仪检测凋亡细胞。结果：紫杉醇作用２４ｈ经荧光染色细胞呈不均一亮蓝色，作用４８ｈ细胞被染色红色，电镜观察可见细胞变小，染色质浓缩并产生凋亡小体，ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ未见明显的梯形条带，流式细胞仪检测紫杉醇作用２４ｈ细胞凋亡。结论；紫杉醇可诱导细胞凋亡，也可直接杀伤ＨｅＬａ细胞，而且以后者为主     

β-榄香烯诱导结肠癌Lovo细胞凋亡的作用

目的　研究 β 榄香烯诱导结肠癌细胞的凋亡作用 ,探讨其治疗结肠癌的作用机制。 方法　选择 β 榄香烯诱导结肠癌细胞凋亡 ,采用光镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡及细胞周期。Fura 2荧光复合技术测结肠癌细胞内 [Ca2 +]i浓度。结果　β 榄香烯对结肠癌细胞增殖具有很强的抑制作用。β 榄香烯能够诱导结肠癌凋亡。在结肠癌细胞凋亡过程中 ,胞内 [Ca2 +]i明显升高 ,以凋亡早期更为明显。 1h时为 ( 2 5 6.18± 8.85 )nmol/L ,明显高于对照组 ( 12 7.81± 5 .18)nmol/L(P <0 .0 1)。结论　β 榄香烯对结肠癌细胞生长具有很强的抑制作用 ,与诱导凋亡有关。Ca2 +在 β 榄香烯诱导结肠癌细胞凋亡过程中有一定的作用     

β—榄香烯吗素对K562细胞凋亡的诱导作用

研究榄香烯吗素对Ｋ５６２细胞凋亡的诱导。采用人工红白血病细胞株Ｋ５６２细胞常规培养，给不同浓度的榄香烯吗素，在不同的时间取细胞，用台盼蓝排染法，ＤＮＡ荧光染料Ｈｏｐｅｃｈｓｔ３３３４２荧光染色法，及碘化丙与Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２共染计数坏互细胞的ＰＩ阳性率测定法，检测其对Ｋ５６２细胞的影响。     

榄香烯抗肝癌作用的实验研究

目的研究榄香烯对小鼠移植性肝癌(H22)的抗肿瘤作用及其机制。方法建立小鼠移植性肿瘤模型(H22肝癌),腹腔注射不同剂量的榄香烯,观察其抗肿瘤作用(抑瘤率),以免疫学方法检测小鼠治疗后的细胞免疫功能的改变(IL2、T淋巴细胞转化能力),并通过免疫组化的方法检测肿瘤组织癌基因(p53和Bcl-2)的表达。结果榄香烯具有明显的抑瘤作用,抑瘤作用的主要机制是增强小鼠的细胞免疫功能,促进肿瘤细胞凋亡和调节癌基因的表达。结论榄香烯具有显著的抑瘤作用,其作用机制是通过提高荷瘤小鼠机体免疫功能和诱导肿瘤细胞凋亡两条途径来抑制肿瘤的生长。     

β-榄香烯诱导人脑胶质瘤U251细胞凋亡的机制研究

[目的]探讨β-榄香烯（β-elemene,β-ELE）对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的诱导作用及对c-myc、hTERT、microRNA分子表达的影响。[方法]用β-榄香烯处理U251细胞株24小时,流式细胞术检测细胞凋亡;RT-PCR法检测c-myc、hTERT基因的表达;Western-blot检测cmyc、hTERT蛋白的表达;基因芯片检测β-榄香烯处理对细胞表达microRNA的影响,并以Real time-PCR法验证其中miR-654-3p、miR-431、miR-150和miR-1976的表达水平。[结果]β-榄香烯明显诱导U251细胞的凋亡,与对照组（0μg·ml-1β-ELE）相比,实验组（100,200,300μg·ml-1β-ELE）的细胞凋亡有所增加,凋亡程度随着β-ELE的浓度增大而增加,具有统计学差异;β-榄香烯抑制了c-myc、hTERT基因mRNA和蛋白的表达,与对照组（0μg·ml-1β-ELE）相比,实验组（50,100,150μg·ml-1β-ELE）的c-myc、hTERT基因mRNA和蛋白的表达水平都有所下降,下降程度随着β-ELE的浓度增大而增加,具有统计学差异;基因芯片和Real time-PCR[结果]显示,与对照组（0μg·ml-1β-ELE）相比,实验组（150μg·ml-1β-ELE）miR-654-3p、miR-431、miR-150和miR-1976的表达有所上调,具有统计学差异。[结论]β-榄香烯诱导了U251细胞凋亡抑制了c-myc、hTERT基因mRNA与蛋白的表达,显著上调了miR-654-3p、miR-431、miR-150和miR-1976的表达水平。因此,β-榄香烯诱导U251细胞凋亡的作用可能是通过其抑制c-myc、hTERT基因mRNA和蛋白的表达及上调microRNA来实现的。此机制为抗肿瘤药物的发展提供了一定的理论基础,值得进一步深入探讨。     

榄香烯对人肝癌细胞7402、宫颈癌细胞Hela的凋亡诱导作用及下调Bcl—2蛋白表达

目的 研究中药榄香烯对人肝癌细胞7402、宫颈癌细胞Hela的体外抑瘤效应及其作用机制。方法 应用MTT比色法观察榄香烯对细胞的生长抑制作用;荧光显微镜和透射电镜观察细胞结构的改变;DNA凝胶电泳和流式细胞术等分析细胞凋亡、周期变化及Bcl-2蛋白表达情况。结果 榄香烯对7402和Hela细胞有较强的体外增殖抑制作用。榄香烯能诱导7402和Hela细胞凋亡,同时伴随有Bcl-2蛋白表达下调。结论 榄香烯对7402、Hela细胞有较强的抗瘤效应,其可能与Bcl-2蛋白下调引起的细胞凋亡有关。     

β-榄香烯诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的研究

目的:探索榄香烯对体外培养人肝细胞株的作用及其机制.方法:应用MTT方法分析榄香烯对肝癌细胞株SMMC-7721生长的影响.结果:榄香烯能明显抑制肝癌细胞生长,其半数生长抑制剂量为37.4 μg/ml;流式细胞术证实榄香烯能阻滞肝癌细胞从G0/G1期进入S期,并诱发细胞凋亡;透射电镜超微结构证实榄香烯能诱发肿瘤细胞凋亡的典型形态变化;免疫组化SP法及流式细胞术定量分析榄香烯能使肝癌细胞癌基因bcl-2、c-myc表达降低,抑癌基因p53表达增强.结论:榄香烯能诱导肝癌细胞凋亡,其作用机制可能与癌基因bcl-2、c-myc表达减少、p53表达增加有关.     

榄香烯注射液对人胰腺癌细胞的增殖抑制和诱导凋亡的研究

目的探讨榄香烯注射液对人胰腺癌细胞的增殖和凋亡的影响。方法将人胰腺癌细胞株设不同浓度的榄香烯注射液处理组,并设立空白对照组。采用MTT法观察榄香烯对胰腺癌细胞体外生长的抑制作用;采用透射电镜、流式细胞术观察榄香烯对胰腺癌细胞凋亡的影响。结果榄香烯对人胰腺癌细胞的抑制作用呈时间-剂量依赖性（P〈0.05）;荧光显微镜下可见榄香烯作用下的胰腺癌细胞凋亡,电镜下可见明显的细胞凋亡特征;流式细胞术测定榄香烯诱导细胞凋亡作用与剂量相关。结论榄香烯可以抑制胰腺癌细胞的生长,促进其凋亡,其作用与剂量及时间呈正相关。     

β-榄香烯诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的研究

引言β－榄香烯（β－Ｅｌｅｍｅｎｅ,β－Ｅ）是从中药温莪术中提取的一种有效抗癌成分,是我国自行研制的国家二类抗癌新药。既往的研究资料表明,该药对多种动物及人类肿瘤具有明显的抑制作用［１,２］。为进一步探讨β－Ｅ的作用机制,本研究采用透射电镜和ＴｄＴ介...     

β—榄香烯诱导人肝癌细胞株SMMC—7721凋亡的研究

目的：探索榄香烯对体外培养人肝细胞株的作用及其机制。方法：应用ＭＴＴ方法分析榄香烯对肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１生长的影响。结果：榄香烯能明显抑制肝癌细胞生长,其半数生长抑制剂量为３７．４μｇ／ｍｌ;流式细胞术证实榄蚝烯能阻滞肝癌细胞从Ｇ０／Ｇ１期进入Ｓ期,并诱发细胞凋亡,透射电镜超微结构证实榄香烯能诱发肿瘤细胞凋亡的典型形态变化;免疫组化ＳＰ法及流式细胞术定量分析榄香烯能使肝癌细胞癌基因ｂｃｌ－     

榄香烯诱导人肺癌细胞株A549凋亡研究

目的:探索榄香烯对体外培养人肺癌细胞株的作用及其原因.方法:设不同浓度(0.5、1、2、8、16μmoi/L)的榄香烯实验组和一个空白阴性对照组,应用MTT方法分析榄香烯对肺癌细胞株A549生长的影响.免疫细胞化学及流式细胞仪检测bcl-2、p53表达.结果:榄香烯能明显抑制肺癌细胞生长.透射电镜超微结构证实榄香烯能诱发肿瘤细胞凋亡的典型形态变化;流式细胞仪检测到Bcl-2蛋白表达降低,p53蛋白表达增多;RT-PCR检测bcl-2 mRNA水平下降.结论:榄香烯能诱导肺癌细胞凋亡,其作用机制可能与癌基因bcl-2表达减少、抑癌基因p53表达增多有关.     

β-榄香烯诱导肿瘤细胞凋亡作用机制研究的探讨

β-榄香烯是近年来我国首先从活血化瘀中药莪术挥发油中筛选出的一种抗癌有效成分。因其具有抗瘤谱广、毒副作用小的特点而有着广阔的临床应用前景。大量药理实验表明β-榄香烯的抗瘤作用机理涉及多个方面，主要包括：(1)抑制肿瘤细胞DNA和RNA的合成；(2)诱导细胞调亡与分化；(3)抗瘤免疫保护作用；(4)消除自由基；(5)逆转肿瘤多药耐药作用等。     

热诱导人肺腺癌细胞凋亡的实验研究

我们以体外人肺腺癌细胞系SPC．AI为研究对象,观察温热对肺癌细胞的杀伤效应,并从细胞形态学和生化学两方面,着重探讨细胞凋亡在热杀伤体外Spe－AI细胞过程中的作用,期望进一步丰富和发展肺癌热疗的生物学机制,为肺癌热疗的临床应用提供新的理论依据。一、材料与方法1细胞培养：人肺腺癌细胞系Spe．AI引自中国科学院上海细胞库。常规用含质量分数为10％的灭活小牛血清的RPMI－lop培养液（pH7．2－74,Gibeo,USA）,单层培养于对℃、含体积分数为0．历的C02的培养箱中。以质量分数为0．石坑胰蛋白酶（D矗。。,1：250）和质量…     

榄香烯和姜黄素诱导晶状体上皮细胞凋亡的体外研究

目的 探讨榄香烯(Ele)和姜黄素(Cur)对体外培养的牛晶状体上皮细胞(LEC)凋亡的诱导效应及其机制.方法 将培养的牛LEC分别与160 μg/mL Ele和20 μg/mL Cur在CO2培养箱中共同孵育8,16,24,48,72 h,通过透射电子显微镜观察LEC超微结构;采用流式细胞术(FCM)测定LEC的DNA含量及线粒体跨膜电位(ΔΨm).结果 LEC分别与Ele和Cur共同孵育后,电子显微镜下可观察到细胞核染色质凝集、固缩、边集、核碎裂等,均呈现典型的细胞凋亡的形态学改变.FCM分析可见典型的凋亡亚G1峰,提示细胞核内DNA含量下降,并随药物作用时间的延长而加强.FCM检测发现细胞质出现线粒体ΔΨm下降,且在药物作用早期已发生变化.结论 Ele和Cur能显著诱导LEC凋亡;细胞核内DNA含量下降、细胞质内线粒体ΔΨm降低,分别是Ele和Cur诱导LEC凋亡的细胞核和细胞质途径.线粒体ΔΨm下降是Ele和Cur诱导LEC凋亡的早期事件.     

细胞凋亡相关基因APG诱导肝癌细胞凋亡实验研究

ＰＧ基因是Ｂｃｌ 2家族中一员 ,与Ｂｃｌ 2家族的广泛氨基酸同源性主要表现在高度保守的ＢＨ1和ＢＨ2 结构域。ＡＰＧ过表达能够对抗Ｂｃｌ 2抑制细胞凋亡的活性 ,在促凋亡因素的刺激下Ｂｃｌ 2 /ＡＰＧ的比值将决定细胞的生与死。本研究旨在研究ＡＰＧ基因转染ＨＣＣ 92 0 4细胞能否诱导该细胞发生凋亡 ,从而探讨ＡＰＧ基因成为肿瘤基因治疗靶基因的潜在可能性。1　材料与方法1 1　细胞系和细胞培养 :人肝癌细胞系ＨＣＣ 92 0 4为启东肝癌研究所建立。在 5 0ｍｌ/Ｌ胎牛血清的Ｅａｇｌｅ’ｓ培养液中培养 ,ＨＣＣ 92 0 4细胞系的ｐ5 3基因…     

康莱特诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨康莱特(KLT)对人胰腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 采用MTT法观察KLT对人胰腺癌细胞株8988细胞增殖的抑制作用。采用TUNEL染色、DNA梯度电泳法和流式细胞术检测细胞凋亡改变，并以RT-PCR和Western blot检测凋亡调节基因p53和bcl-2的表达。结果 KLT能明显抑制人胰腺癌8988细胞的生长，且呈时间和浓度依赖性。KLT作用后8988细胞呈现凋亡特征，TUNEL染色可见发黄绿色荧光的凋亡细胞，DNA电泳可见典型梯形条带，流式细胞术显示凋亡细胞比例升高。RT-PCR和Western blot检测可见p53基因表达显著增加，而bcl-2基因表达减少。结论 KLT能诱导人胰腺癌细胞凋亡，其作用可能与凋亡调节基因p53的上调和bcl-2的下调有关。