IL-6预处理保护H2O2致心肌细胞损伤作用机制初探

目的初步探讨IL-6预处理对H2O2致心肌细胞氧化应激损伤的作用机制。方法采用心肌细胞原代培养方法,以H2O2刺激心肌细胞,建立细胞氧化应激模型;采用MTT法检测细胞活力;AnnexinV-FITC染色法和流式细胞术检测细胞凋亡率;检测心肌细胞内谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的表达情况。结果 H2O2可降低心肌细胞存活率并能增加其凋亡,IL-6预处理后能显著改善细胞活力及凋亡情况,与模型组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。低浓度IL-6能明显增加细胞内GSH与SOD的水平,并降低MDA的含量,随着IL-6浓度的增加,这种效应逐渐消失。结论 IL-6预处理能保护H2O2致心肌细胞损伤作用,这可能与IL-6调节细胞GSH、SOD、MDA表达有关。     

卡维地洛对培养心肌细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨卡维地洛对培养心肌细胞氧化损伤的保护作用和机制。方法:H2O2作用于体外培养的新生SD大鼠心肌细胞,建立心肌细胞氧化损伤模型。用卡维地洛预处理后,镜下观察心肌细胞测定心肌细胞存活率(MTT比色法),丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)等指标水平。结果:卡维地洛干预后提高心肌细胞氧化损伤的细胞存活率(P0.01),减少MDA、GSG生成以及提高GSH的生成(P0.01)。结论:卡维地洛通过抗氧化作用对心肌细胞氧化损伤起保护作用。     

葛根素在心肌细胞氧化应激损伤中的保护作用

<正>目的:探讨葛根素(puerarin,Pue)在心肌细胞氧化应激损伤中的保护作用。方法:利用H2O2处理心肌H9c2细胞,建立氧化应激损伤模型。采用激光扫描共聚焦显微镜成像法测定线粒体膜电位。用MTT法观察Pue对细胞增殖的影响。利用Western blotting法检测Pue对GSK-3β和Akt活性的影响。结果:Pue明显减轻H2O2诱发的心肌细胞线粒体损伤,但是PI3K     

胰岛素样生长因子-1对雪旺细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对雪旺细胞氧化损伤的保护作用。方法:用体外纯化培养的雪旺细胞建立氧化损伤模型,将培养细胞分成氧化损伤组、IGF-1保护组和正常对照组。四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞的活性,生化技术检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的含量,免疫印迹法检测凋亡蛋白Bcl-2的表达水平。结果:与对照组相比,H2O2处理组细胞胞体积缩小、空泡化,细胞活性降低,SOD含量明显减少,Bcl-2表达减弱;而IGF-1保护组细胞存活率明显升高,SOD含量较损伤组高,Bcl-2表达明显上调。结论:IGF-1对氧化损伤的雪旺细胞有保护作用。     

亚硒酸钠对体外培养人甲状腺细胞氧化损伤的影响

目的 研究硒对人甲状腺上皮细胞氧化损伤的影响.方法 取良性甲状腺腺瘤手术中的腺瘤旁正常甲状腺组织进行细胞培养.加硒(10-7mol/L)或不加硒后加入不同质量浓度H2O2(0～800μg/mL)刺激单层培养的甲状腺细胞,测定细胞膜GSH-Px活性和MDA含量变化.结果 经过H2 O2作用24 h的甲状腺细胞,其GSH-Px活力下降、MDA含量升高,并表现为浓度,效应关系.加入10-7mol/L硒预干预后,各组细胞呈GSH-Px活力升高、MDA含量下降.结论 硒对H2 O2引起的甲状腺细胞氧化损伤可能有保护作用.     

复方丹参滴丸对过氧化氢损伤的人脐静脉血管内皮细胞的保护作用

目的： 观察复方丹参滴丸对过氧化氢（H2O2）损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用，探讨其在心脑血管疾病治疗中的机制。 方法： 用0.1 mmol/L H2O2制造HUVEC损伤模型;按分组把不同浓度的丹参滴丸（0.5 g/L、0.25 g/L、0.1 g/L）分别于损伤前、损伤后加入，分别测定细胞活力（MTT法）观察滴丸对H2O2损伤内皮细胞活性的影响；硫代巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量；硝酸酶还原法测定细胞培养液中一氧化氮含量;免疫细胞化学法观察滴丸对H2O2损伤的内皮细胞NOS2、NOS3（一氧化氮合酶2、3）、NF-κB（核因子кB）表达的影响;同时进行形态学观察。 结果: 0.1 mmol/L H2O2对HUVEC有损伤作用。H2O2损伤后,滴丸能显著增加细胞活性; 显著抑制H2O2诱导HUVEC MDA的产生;双向调节NO产生;影响H2O2损伤后细胞NOS3、NF-κB的表达。 结论： 损伤前给滴丸浓度0.5 g/L、0.25 g/L、0.1 g/L对H2O2所致内皮细胞损伤有明显拮抗作用。损伤后给药滴丸浓度0.5 g/L、0.25 g/L、0.1 g/L对H2O2所致人血管内皮细胞损伤有明显拮抗作用，其作用机制与抗氧化作用及调节NOS2、NOS3、NF-κB的表达有关。     

非促分裂型haFGF对H2O2损伤心肌细胞的保护作用研究

目的：了解活性氧自由基对心肌细胞的损伤状况，并在此基础上探讨非促分裂型haFGF(nm-haFGF)对心肌细胞的保护作用。方法： 采用胰蛋白酶消化法，体外分离和培养新生SD乳鼠心肌细胞，建立H2O2损伤心肌细胞的模型，检测细胞存活率、细胞凋亡和观察细胞形态学的变化，以评价H2O2对心肌细胞的损伤状况，并加入一定浓度的nm-haFGF，观察心肌细胞的存活率、SOD活性和MDA含量的改变，以及凋亡的变化。结果： H2O2对心肌细胞的损伤呈浓度依赖地加剧；在H2O2压力作用下，10-80 μg/L nm-haFGF逐步提高H2O2损伤心肌细胞的存活率，其中80 μg/L组的细胞存活力明显大于对照组(P＜0.05)，同时逐步提高SOD活性和降低MDA含量，其中40和80 μg/L组的SOD活性明显大于阳性对照组(P＜0.05)，40和80 μg/L组的MDA含量明显小于阳性对照组(P＜0.05)；此外，在0.01 mmol/L H2O2作用24 h后，10 μg/L和40 μg/L nm-haFGF组的心肌细胞凋亡百分率分别为32.4%和10.7%。结论： 心肌细胞的损伤与H2O2的浓度呈剂量依赖关系；nm-haFGF对由H2O2引起的心肌细胞损伤具有拮抗作用。     

肌肽减轻H_2O_2诱导的N2a细胞损伤

目的探究肌肽对H2O2诱导的N2a细胞损伤的保护作用及其机制。方法将N2a细胞分为对照组、损伤组(给予H2O2)和肌肽保护组(预先加入肌肽)。用相差显微镜观察了细胞形态,用免疫荧光染色和免疫印迹实验检测细胞AKT1和FAS-L的蛋白表达。结果肌肽显著增加了N2a细胞增殖能力(P0.05);与对照组比较,H2O2损伤组细胞形态发生明显改变,细胞皱缩,胞膜变厚并出现发泡现象;而肌肽保护组细胞形态较损伤组明显改善;免疫荧光染色和免疫印迹实验显示,损伤组AKT1的表达显著低于对照组,FAS-L的表达显著高于对照组。而肌肽保护组AKT1的表达显著高于对照组,FAS-L的表达显著低于对照组(P0.05)。结论肌肽能够减轻N2a细胞对H2O2诱导的细胞损伤。     

红参提取物通过抑制凋亡减轻H2O2诱导大鼠心肌细胞氧化损伤作用研究

目的:探讨红参提取物(Red ginseng extract,Rge)对过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)诱导H9c2心肌细胞氧化损伤的保护作用及机制.方法:体外培养H9c2心肌细胞并随机分为5组,即对照组,模型组,Rge低、中、高浓度组.对照组常规培养,模型组以9 mg?kg-1的H2O2处理6 h建立体外细胞氧化损伤模型,而Rge低、中、高浓度组造模前以200、400、800 mg?kg-1Rge预处理细胞24 h.采用MTT法检测细胞活力;化学法检测LDH释放水平;JC-1染色法检测线粒体膜电位;Western blot法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2的相对表达水平.结果:与模型组相比,Rge各浓度组H9c2细胞活力均明显增加(P<0.05),LDH释放水平均明显降低(P<0.001),且膜电位呈现剂量依赖性增高,Caspase-3、Bax表达水平下调且Bcl-2表达水平上调(P<0.001).结论:Rge可能通过降低LDH的释放和抑制凋亡相关蛋白的表达,提高H9c2心肌细胞对抗H2O2氧化损伤的能力.     

人参环氧炔醇对雪旺细胞神经保护作用的影响及机制

目的:研究人参环氧炔醇(PND)对体外培养雪旺细胞(SCs)保护过氧化氢(H2O2)损伤的大鼠皮层神经元的作用并探讨其作用机制.方法:在培养1周的小鼠皮层神经元培养基中加入H2O2,建立神经元氧化损伤模型,与以PND(10μmol/L)预处理体外培养SCs共培养,用CCK-8法检测细胞活力,ELISA检测突触素(synaptophysin,SYN)水平,共聚焦显微镜观察突触及细胞骨架;实时荧光定量-PCR、RT-PCR检测神经元凋亡相关基因bcl-2、bax的表达,进行图像处理及统计分析.结果:与正常组相比,H2O2组细胞存活率降低.与H2O2组相比,PND (10 μmol/L)组、SCs组及PND(10μmol/L)预处理SCs组细胞存活率升高,并且bcl-2 mRNA表达上调、bax mRNA表达下调,各指标差异均有统计学意义,而以PND(10 μmol/L)预处理SCs组作用最显著.结论:PND可促进SCs对H2O2所致皮层神经元损伤的保护作用,其机制可能与PND预处理的SCs调节皮层神经元的细胞凋亡相关蛋白表达从而抑制凋亡有关.     

芳香新塔花总黄酮通过调控miR-874-3p对过氧化氢诱导的神经细胞氧化损伤和凋亡的影响

目的 探讨芳香新塔花总黄酮(Ziziphora clinopodioides flavonoids,ZCF)通过调控miR-874-3p表达影响过氧化氢(H2 O2)诱导的神经细胞氧化损伤和凋亡.方法 采用流式细胞术检测不同浓度ZCF对H2 O2诱导的SK-N-SH细胞凋亡的影响.试剂盒检测LDH、MDA和SOD水平....     

Tpc1808对H2O2诱导的C6细胞氧化应激性损伤的保护作用

目的:研究Tpc1808对H2O2诱导的C6细胞氧化应激性损伤的保护作用。方法:采用细胞培养、基因转染、MTT、LDH、免疫荧光组织化学、Western印迹等技术,以星形胶质瘤C6细胞为研究对象,以H2O2作为氧化应激刺激物,建立细胞损伤模型。结果:当终浓度为100μmol/L的H2O2作用于C6细胞24h后,MTT减小,LDH增加,细胞出现明显凋亡;转染Tpc1808基因的细胞受到保护,grp75表达量增加,与对照组相比有显著差异。结论:Tpc1808基因可以保护H2O2引起的C6细胞氧化应激性损伤,该保护作用可能是通过增加grp75表达实现的。     

麦芽酚可抑制活性氧引起的SH-SY5Y细胞凋亡

近年来研究表明，氧化应激在阿尔茨海默病等神经退行性疾病发生发展中具有重要作用。本文研究了麦芽酚对过氧化氢(H2O2)引起的人神经瘤细胞株(SH-SY5Y)凋亡时细胞形态、磷脂酰丝氨酸(PS)外翻和DNA损伤的保护作用。结果发现麦芽酚浓度为2mmol／L，作用2h后，可以保护细胞免受H2O2引起的氧化损伤。实验结果表明麦芽酚可作为一种抗氧化剂，有效保护H2O2引起的SH-SY5Y的凋亡。     

参麦注射液对60Co照射小鼠血液系统作用的研究

目的：观察参麦注射液(SMI)对于放射性损伤所致的小鼠血虚证的治疗作用。方法：采用^60Co照射小鼠，造成小鼠白细胞减少模型，即产生小鼠血虚证。评价SMI对于^60Co所致的小鼠血虚证的治疗作用。结果：SMI对^60Co照射所致小鼠血虚证症状如虚汗多、寒战、精神萎靡有一定程度的抑制作用，尤其对^60Co照射所致小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞数的减少有明显对抗作用，与模型组比较有显性差异(P＜0．05)。试验还显示，照射后四天SMI大、中剂量组小鼠骨髓有核细胞数与阴性对照组无显性差异，说明其骨髓造血功能比较活跃，提示SMI对放射性损伤所致小鼠血虚证有一定的保护和治疗作用，对于小鼠白细胞减少有较好的治疗效果。结论：SMl对小鼠放射性损伤所致血虚证有一定的保护和治疗作用。     

基质细胞衍生因子-1α预处理对大鼠骨髓间充质干细胞体外存活及旁分泌的影响

目的 探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)预处理对过氧化氢(H2O2)导致的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)损伤的保护作用及对其旁分泌的影响.方法 体外培养MSCs随机分为:正常对照组、H2O2损伤组、0.02及0.2 mg/L SDF-1α预处理损伤组.用MTT法,Hoechst染色,Western blot及ELISA方法分别检测预处理对细胞的增殖、凋亡、细胞因子蛋白表达及旁分泌的影响.结果 H2O2损伤组与正常对照组相比,细胞释放LDH及凋亡率明显增高,细胞增殖明显减少,血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维生长因子(bFGF)在细胞中的蛋白表达及活性明显降低.SDF-1α预处理MSCs后,能明显逆转H2O2对细胞的损伤,并增加VEGF及bFGF的蛋白表达及活性.结论 SDF -1α预处理能有效减轻MSCs的损伤及凋亡,促进细胞的存活并增强细胞的旁分泌效应.     

EGCG对过氧化氢所致神经元过氧化损伤的保护作用

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酚(EGCG)对过氧化氢(H2O2)所致神经元过氧化损伤的保护作用。方法分离胚胎18d大鼠大脑皮质神经元,原代培养2d后分为4组:①正常细胞对照组;②药物对照组(正常细胞内加EGCG);③氧化损伤组(正常细胞内加H2O2);④损伤后药物治疗组(氧化损伤30min后加入EGCG)。各组细胞再培养36h后,进行神经元形态观察、细胞活性MTT分析及细胞中丙二醛(MDA)含量的检测。结果氧化损伤组神经元多崩解成碎片,突起不完整,细胞活性显著降低,MDA含量显著升高。而在损伤后药物治疗组,神经元胞体立体感较强,多数突起完整。细胞活性显著增高,而MDA含量则显著下降。结论EGCG可抑制羟基自由基的产生,从而保护H2O2氧化损害的神经     

硫化氢对抗过氧化氢对PC12细胞的损伤作用

目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对抗过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)对PC12细胞的损伤作用及有关机制。方法应用H2O2在PC12细胞建立氧化应激损伤的实验模型;应用甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,碘化丙啶(PI)染色流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率,罗丹明123(Rhodamine 123,Rh123)染色FCM检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),双氢罗丹明123染色FCM检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量。应用硫化氢钠(sodium hydrosulfide,NaHS)作为H2S的供体。结果200μmol和400μmolH2O2作用PC12细胞24h均使细胞的存活率明显降低及凋亡率显著增加,200μmolH2O2引起PC12细胞的MMP明显降低及ROS生成显著增多。当NaHS与H2O2(200或400μmol/L)共同作用于PC12细胞时,NaHS(100～400μmol/L)浓度依赖性的阻断H2O2引起PC12细胞的存活率降低及细胞凋亡率增加。400μmolNaHS明显地阻断200μmolH2O2引起PC12细胞的MMP降低及ROS增多。结论H2S能明显地保护PC12细胞对抗H2O2引起的损伤,阻断MMP降低及ROS生成可能是H2S的细胞保护机制之一。     

萝卜硫素对H2O2诱导人肝细胞氧化应激损伤模型的保护作用

背景:氧化应激损伤在慢性肝炎发生发展中起着重要的作用,而天然产物萝卜硫素具有较好的抗氧化活性。目的:研究萝卜硫素对H2O2诱导人肝细胞(LO2)氧化应激损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养LO2细胞,采用H2O2诱导LO2细胞造模,并同时将细胞分为对照组、H2O2诱导组、H2O2+低剂量萝卜硫素组(10μmol/L)、H2O2+中剂量萝卜硫素组(20μmol/L)及H2O2+高剂量萝卜硫素组(40μmol/L)。采用100μg/L的H2O2处理人肝细胞24 h,诱导细胞氧化应激损伤;H2O2+萝卜硫素组将H2O2与不同浓度萝卜硫素同时处理细胞24 h。采用CCK8法分析萝卜硫素对细胞存活率的影响,分析细胞匀浆中的氧化应激产物水平,Western Blot法分析Nrf2、GCLC、NQO1及血红素加氧酶1蛋白表达水平。研究方案的实施符合恩施土家族苗族自治州中心医院的相关伦理要求。结果与结论:①H2O2能诱导LO2细胞氧化应激损伤;②相比于H2O2模型组,各浓度萝卜硫素能诱导LO2细胞增殖、抑制丙二醛和一氧化氮的产生及促使超氧化物歧化酶活性升高(P<0.05);③Western Blot结果显示萝卜硫素能诱导Nrf2向细胞核内转移,诱导GCLC、NQO1和血红素加氧酶1蛋白表达(P<0.05);④结果说明,萝卜硫素能改善H2O2诱导的LO2细胞氧化应激损伤,其药理学作用与Nrf2信号传导活化有关。     

六味地黄药物血清对血管内皮细胞凋亡模型的保护作用

目的研究六味地黄方药物血清对血管内皮细胞(VEC)损伤模型的保护作用。方法利用30 %过氧化氢 (H2O2)和大肠杆菌内毒素(LPS)致VEC凋亡模型 ,观察了药物血清对凋亡模型VEC的保护作用,并通过细胞内Ca2 的变化 ,探讨其作用机理。结果六味地黄汤药物血清可减轻H2O2和LPS对VEC的损伤 ,抑制VEC凋亡发生 ,并可明显缓解LPS所致的胞内钙超载。结论六味地黄汤具有保护VEC凋亡模型的作用 ,这种作用与其缓解细胞内钙超载有关     

内质网应激介导蜕皮甾酮对H2 O2 诱导的心肌细胞损伤的保护作用

目的:探讨蜕皮甾酮(EDS)如何通过调节内质网应激对过氧化氢(H2 O2 )诱导的心肌细胞损伤起保护作用。方法:大鼠H9c2 心肌细胞随机分为对照(Control)组,正常心肌细胞;H2 O2 组,不同浓度H2 O2(1*10-3 、1*10-4 、1*10-5 mol/ L)诱导损伤细胞;EDS 组,在H2 O2 组基础上,加入不同浓度的EDS(25、50、100 μmol/ L)处理。MTT 法和流式细胞术分别检测实验各组细胞活力及细胞凋亡率。Western blot 检测各组细胞中Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-3、caspase-4、caspase-7、caspase-12、 GRP78 和CHOP 的蛋白水平,同时检测各组细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与Control 组相比,H2 O2 组的细胞活力减弱,凋亡率升高,MOD 含量升高,SOD 活性降低,GRP78 和CHOP 的表达升高(均P<0.05)。H2 O2 组加入EDS 处理后,细胞活力提升,凋亡率下降,MOD 含量降低,SOD 活性升高,GRP78 和CHOP 的表达降低(均P<0.05)。结论:通过抑制内质网的应激过程,蜕皮甾酮能减轻H2 O2 诱导的心肌细胞损伤。