缺血预处理对移植肝缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响

目的 探讨细胞凋亡在移植肝缺血再灌注损伤中的作用及缺血预处理对其影响。方法 通过对移植肝进行 因预处理,用全自动生化分析仪检测肝功能、比色法测定移植肝组织的ＭＤＡ、用流式细胞仪结合原位标记技术检测细胞调７亡。结果 移植肝再灌注后血中ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＬＤＨ和肝组织中ＭＤＡ均明显升亮,肝细胞调亡明显增加,经缺血预处理后,血中ＡＳＴ,ＡＬＴ,ＬＤＨ和肝组织中ＭＤＡ均降低,肝细胞调亡亦明显减少,结论 缺血     

苦参碱对大鼠原位肝移植冷缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨苦参碱对大鼠原位肝移植中供肝冷缺血再灌注损伤的保护作用及其机制方法:应用延长保存的大鼠原位肝移植模型, 大鼠224只随机分为对照组、低剂量(40 mg／ kg)、高剂量苦参碱治疗组(80 mg／kg)和假手术组,将供肝在4℃林格液中保存5 h后植入受体,分别观察移植术后1 wk生存率,并且检测移植术后1,2,4,24 h血ALL TNF-α,内毒素 (ET),透明质酸(HA),一氧化氮(NO)及肝组织丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的含量,并观察移植肝脏病理形态学的改变．结果:与对照组比较,苦参碱低剂量、高剂量治疗组术后1 wk生存率显著增加(75％,75％ vs 0,P<0．01),肝功能改善,血清HA(277．62 ±29．06,406．84±95．04 μg／L vs 1109．42± 110．28 μg／L,P<0．01)和肝组织ICAM-1表达均显著减少,血清NO含量增加(53．1±5．1,54．2 ±4．9 μmol/L vs 30．2±2.3 μmol／L,P<0．01), TNF-α(1．69±0．22,1．29±0．33 U／L vs 5．96 ±0．59 U／L,P<0．01)、ET(0．343±0．111, 0_302±0．059 kEU／L vs 0．643±0．110 kEU／L． P<0．01)以及肝组织MDA(0．87±0．41,0．69± 0．22 μmol／g vs 2．35±0．54 μmol／g,P<0．01) 水平均明显降低,肝组织SOD(19．89±1．84, 21．04±1．86 kU／g vs 13．39±0．85 kU／g,P<0．01) 水平均明显升高,肝细胞和肝窦内皮细胞形态也发生改善．结论:苦参碱可以通过减轻再灌注后内毒素血症,抑制库氏细胞激活及释放TNF-α, ICAM-1等炎症性细胞因子,清除氧自由基,促进NO合成等途径,减轻肝细胞及肝窦内皮细胞的损伤．     

抗氧化剂和内质网钙释放阻滞剂对老年大鼠肾脏缺血/再灌注损伤中凋亡的影响

目的 探讨联合应用抗氧化剂BHA（Butylated Hydroxyanisole,叔丁基羟基茴香醚）和内质网钙释放阻滞剂TMB-8[8-（N,N-diethylamino）-noctyl-3,4,5-trimethoxybenzoate）]对老年大鼠肾脏缺血/再灌注（I/R）损伤时肾组织中细胞凋亡蛋白酶-3（caspase-3）表达及活性的影响.方法 27月龄Wistar大鼠分别随机分为假手术组、I/R模型组、I/R＋BHA＋TMB-8组,双侧肾动脉夹闭30 min/再灌注18 h制作模型.观察肾功能改变,原位末端标记（TUNEL）法检测肾小管上皮细胞凋亡情况,Northern blot检测肾组织中caspase-3 mRNA表达,比色法测定肾组织中caspase-3活性.结果 肾脏I/R损伤时,老年大鼠肾功能明显减退,大量肾小管上皮细胞凋亡,肾组织caspase-3 mRNA表达及活性增加;BHA＋TMB-8能显著改善老年大鼠肾功能,减轻肾小管上皮细胞凋亡,降低肾组织caspase-3表达及活性.结论 BHA＋TMB-8联合治疗能明显抑制老年大鼠肾脏I/R损伤时肾组织caspase-3表达及活性,从而减轻肾小管上皮细胞凋亡,保护肾功能.     

肝移植缺血再灌注损伤与细胞粘附分子

自本世纪80年代以来,伴随着手术技巧的提高、新型免疫抑制剂和UW保存液的相继问世,临床肝移植取得了长足的进步。然而,缺血再灌注损伤依然是困扰着肝移植的研究难点,它是引发术后原发性移植物无功能(primary graftnonfunction)的重要原因。而随着近年来对细胞粘附分子研究的不断深入,表明细胞粘附分子恰恰参与并介导了缺血再灌注损伤过程中的各个步骤。本文综述近年来在此领域的研究进展。 一、细胞粘附分子的种类、结构与功能 细胞粘附分子分布极其广泛,涉及生命活动的许多现象,包括细胞分裂、分化以及细胞凋亡的调控等等。根据结构与功能,粘附分子可初步分为5类,即整合素家族、免疫球蛋白超家族、选择素家族、钙粘附蛋白家族和其它粘附分子。前三者是参与肝移植过程中缺血再灌注等炎症反应和免疫应答的重要家族。     

逆灌注对移植肝缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨原位肝移植中经下腔静脉逆行灌注对移植肝缺血再灌注损伤的影响.方法:36例大鼠肝移植随机分为3组,每组12例.门静脉组即经门静脉顺行灌注,肝动脉+门静脉组即同时开放肝动脉及门静脉顺行灌注,下腔静脉组即先吻合下腔静脉后开放逆行灌注,然后吻合门静脉及肝动脉.分别检测术后1、6及24 h的血清转氨酶、移植肝病理变化及...     

不同温度对小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨不同温度对小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤(IRI)的影响及其机制.方法 雄性C57BL/6N小鼠随机分为假手术组(sham组)、轻度低温IRI组(LTI)、常温IRI组(NTI)和高温IRI组(HTI).采用夹闭双侧肾蒂35 min再灌注48 h制成IRI模型.观察IRI小鼠肾脏组织病理学改变,检测肾功能、肾组织丙二醛(MDA)含量和肾小管上皮细胞凋亡数目.结果 与Sham组相比,常温IRI组小鼠发生中等程度肾损伤,其Scr升高[(237.0±41.2)μmol/L],肾组织形态学改变,肾组织中MDA含量升高[(1.54±0.37)μmol·L-1·mg-1],肾小管上皮细胞凋亡数目增加.高温明显加重小鼠的IRI损伤(P＜0.05),轻度低温对小鼠IRI具有保护作用.结论 缺血阶段体温的高低明显影响小鼠肾IRI的程度,轻度低温可能通过抑制脂质过氧化反应和细胞凋亡对小鼠发挥保护作用;高温则可能通过促进脂质过氧化反应和细胞凋亡加重肾IRI.     

心肌细胞凋亡与缺血/再灌注损伤

细胞凋亡（apoptosis）是细胞死亡的一种重要形式，即程序性细胞死亡，一般认为它是由基因控制的、有序化的主动死亡过程。自1972年Kerr等首次以形态学概念提出细胞凋亡这一术语以来，凋亡一直是医学界的研究热点。近年来，随着分子生物学技术的不断丰富及分子心血管病学的研究发展，已证实细胞凋亡现象存在于心血管系统的许多生理和病理变化中，与许多心血管疾病的发生发展密切相关。本文就心肌细胞凋亡与缺血再灌注损伤的关系综述如下。     

牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的观察牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法实验大鼠40只,随机分为5组：假手术组（8只）,再灌注模型组（8只）,牛磺酸低、中、高剂量（30mg／kg、100mg／kg、300mg／kg）组（各8只）。再灌注后观察各组血清SOD、LDH、MDA含量,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果①牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注后血清SOD、LDH、MDA含量的影响：与假手术组比较,其余各组大鼠血清SOD活性明显降低,LDH、MDA含量明显增高（P〈0．05,P〈0．01）;与模型组比较,牛磺酸中、高剂量组大鼠血清SOD活性明显升高（P〈0．01）,LDH、MDA含量明显降低（P〈0．05,P〈0．01）。②牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注（I／R）损伤后细胞凋亡的影响：I／R后心肌细胞凋亡指数（AI）为（45．6±4．6）,明显高于假手术组的（8．50±1．13）（P〈0．01）,牛磺酸低、中、高组分别为（37．03±3．52）、（30．32±8．23）和（25．62±6．12）,均明显低于I／R（P〈0．01）。结论牛磺酸可降低再灌注损伤大鼠氧自由基值,抑制心肌细胞凋亡。     

缺血预处理抑制减体积肝移植大鼠早期肝细胞凋亡的研究

目的探讨缺血预处理（IPC）对减体积肝移植大鼠再灌注损伤早期细胞凋亡的影响。方法建立50%减体积大鼠肝移植模型,将72只成年雄性SD大鼠随机分为两组：对照组和IPC组,检测术后2、6、24 h血清丙氨酸转氨酶（ALT）水平变化及组织病理学变化;TUNEL法检测术后24 h肝细胞凋亡指数;免疫组织化学检测bcl-2和caspase-3蛋白表达。结果与对照组比较,IPC组术后6、24 h ALT水平下降,术后24 h肝损伤减轻,肝细胞凋亡指数、caspase-3表达均下降,而抗凋亡蛋白bcl-2表达增加（P均〈0.01）。结论 IPC明显减轻减体积肝移植术后再灌注损伤,其机制与通过上调bcl-2、下调caspase-3蛋白表达,从而抑制肝脏细胞凋亡相关。     

叔丁基羟基茴香醚对衰老大鼠肾脏缺血/再灌注损伤的保护作用

目的观察老年大鼠肾脏缺血／再灌注（I／R）模型中肾小管上皮细胞的损伤变化，探讨ROS清除剂对I／R损伤的保护作用。方法27月龄大鼠分别随机分为假手术组、I／R模型组、活性氧清除剂——叔丁基羟基茴香醚（BHA）干预组。夹闭双侧肾动脉30min再灌注18h制成I／R模型。观察肾功能、肾脏病理改变、肾小管上皮细胞凋亡情况，检测肾组织caspase-3，测定肾组织脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果（1）肾脏I／R损伤时，老年大鼠肾功能明显减退，肾组织病理改变比较明显，大量肾小管上皮细胞凋亡，肾组织caspase-3、肾组织中MDA含量增加、SOD活性下降（P〈0．05）。（2）BHA能明显的改善肾功能、组织病理改变和凋亡相关指标（P〈0、05）；BHA能减少组织中MDA含量，部分恢复组织中SOD含量。结论老年大鼠肾脏I／R损伤时肾小管上皮细胞凋亡增加，肾功能减退。ROS堆积后，线粒体损伤导致肾小管上皮细胞凋亡。清除ROS可以抑制肾小管上皮细胞凋亡，减轻I／R损伤。     

高选择性肾血管阻断对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响

目的观察不同血管阻断以及不同阻断时间对肾脏组织学、肾功能及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和Ca2+-ATP酶含量以及血清高敏C反应蛋白的影响。方法健康雄性(SD)大鼠120只,随机分组为空白对照组(N)、肾蒂阻断组(C)、肾动脉分支阻断组(B)(上支U和下支D,采取随机抽签方式选择上、下支)、肾动脉阻断组(A),每组再分别分为15、30、45 min组,每组10只。A、B、C组夹闭肾血管建立不同阻断时间缺血再灌注模型,N组只暴露肾动脉但不予夹闭。各组于再灌注24 h经下腔静脉取血测定SOD和MDA。处死大鼠,切取肾脏,一部分制作病理标本,光镜下观察肾脏组织结构的改变;另一部分制备相应组织匀浆,考马斯亮蓝法测定组织蛋白含量,硫代巴比妥法测定MDA含量,黄嘌呤氧化法测定SOD活性,无机磷显色光电比色法测定Ca2+-ATP酶活性。结果 120只大鼠均进入实验结果分析,对肾脏缺血再灌注损伤的程度B组最小,A组次之,C组最大。结论肾动脉分支阻断相对于肾动脉阻断和肾蒂阻断及肾动脉阻断相对于肾蒂阻断,相对提高Ca2+-ATP酶及SOD活性,减少MDA的形成,可减轻肾脏缺血-再灌注损伤;同时,尽量减少肾脏的缺血时间可以有效地保护肾脏功能。     

中叶素对糖尿病大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的观察中叶素(IMD)对糖尿病大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法健康雄性SD大鼠74只,给予适应性饲养一周后,随机分为糖尿病组(50只)和非糖尿病组(24只),非糖尿病组给予枸橼酸缓冲液腹腔注射,糖尿病组通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。阻断大鼠左冠状动脉前降支制备心肌缺血再灌注损伤模型。非糖尿病组24只大鼠随机分为对照组和缺血再灌注组(NIR组),糖尿病组50只大鼠成功建立糖尿病模型为36只,随后随机分为糖尿病对照组、糖尿病缺血再灌注组(DIR组)、IMD组,每组12只。光镜观察心肌细胞的形态变化,电镜观察心脏超微结构,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2和Bax的蛋白表达量。结果光镜下可观察到NIR组、DIR组心肌细胞损伤变化比相应对照组更趋于严重,IMD组心肌细胞变性坏死的程度较糖尿病缺血再灌注组明显减轻。电镜下NIR组和DIR组心肌细胞损伤较相应对照组严重,IMD组心肌组织的超微结构特别是线粒体损伤与DIR组比较明显减轻。NIR组和DIR组心肌细胞凋亡率明显高于相应的对照组(P0.05),IMD组心肌细胞凋亡率则较NIR组明显减少(P0.05)。NIR组和DIR组Caspase-3、Bax和Bcl-2的蛋白表达量均与相应对照组比较差异有统计学意义(P0.05),IMD组心肌组织Caspase-3、Bax和Bcl-2的蛋白表达量与DIR组相比差异也具有统计学意义(P0.05)。结论IMD对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其保护作用可能与IMD减少心肌细胞凋亡有关。     

氯化锂对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响

目的:研究大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌凋亡以及氯化锂的干预作用.方法:健康SD大鼠随机分4组:①正常对照组(A组,5只), ②心肌缺血再灌注组(B组,15只),③心肌缺血再灌注+0.9%氯化钠组(C组,15只), ④心肌缺血再灌注+氯化锂组(D组,15只),B,C,D组又分为1 h、3 h、6 h 3个亚组,每个亚组5只大鼠.流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,RT-PCR和Western Blot分别检测凋亡相关基因蛋白Bcl-2和Caspase-3的表达.结果:与A组比较,B、C组3 h心肌细胞凋亡率增高、Bcl-2减少、Casepase-3增多,差异有统计学意义;D组心肌细胞凋亡率下降、Bcl-2和Casepase-3表达与A组差异无统计学意义.结论:心肌再灌注损伤引起心肌细胞凋亡增多, Bcl-2降低以及Caspase-3增高,氯化锂能够减轻以上变化.     

大鼠移植肝热缺血再灌注损伤的研究

建立大鼠动脉化肝移植胆管外引流模型,术后24 h测胆汁酶学及血清肝功能指标、内皮素-1(ET-1)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和移植肝细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA.结果显示,随着供肝热缺血时间的延长,肝移植后大鼠血清ALT、AST、乳酸脱氢酶(LDH)、GGT、直接胆红素(DBil)、MDA、NO及肝细胞ICAM-1 mRNA显著升高.认为肝移植中供肝热缺血主要损伤肝细胞,SOD、ET-1、NO、ICAM-1参与供肝热缺血造成的移植肝损伤,ICAM-1可能是导致移植肝缺血再灌注时肝细胞损伤的主要因素.     

金香丹对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的研究金香丹对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法采用在体结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血再灌注模型,采用细胞凋亡测试盒(TUNEL)法观察心肌细胞凋亡情况,免疫组化法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2和Caspsase-3表达的变化。结果模型组细胞凋亡指数、Bax、Bcl-2及Caspsase-3的蛋白表达显著高于假手术组,金香丹组细胞凋亡指数、Bax及Caspsase-3的蛋白表达均显著低于模型组,Bcl-2的蛋白表达显著高于模型组。结论金香丹可以抑制缺血再灌注心肌细胞的凋亡,其作用可能与上调Bcl-2蛋白的表达同时下调Bax、Casperse-3蛋白的表达有关。     

急性肾缺血再灌注损伤氧化侵袭与细胞凋亡

目的探讨急性肾缺血再灌注损伤过程氧化侵袭与肾细胞凋亡在肾损伤发生机制中的作用。方法采用摘除大鼠左肾,钳夹右侧肾蒂的方法,制成急性缺血再灌注肾损伤模型,测定GSHPx、SOD活性和MDA含量及检测肾细胞凋亡率。结果缺血再灌注不同时期肾组织SOD活力水平降低,与对照组相比差异显著(P<0.05,P<0.01),MDA含量高于对照组(P<0.05),GSHPx在再灌注早期活力减弱,明显低于对照组(P<0.01),晚期活力基本恢复;肾细胞凋亡率与对照组相比差异显著(P<0.05、P<0.01);抗氧化酶SOD活力与细胞凋亡率负相关,MDA含量与细胞凋亡率正相关。结论缺血再灌注不同时期肾组织氧化侵袭在肾损伤病理过程中起重要作用;再灌注损伤与氧化侵袭和细胞凋亡有关。     

大鼠肝缺血再灌注损伤致心肌细胞凋亡的研究

肝移植术中病肝切除和供肝血流恢复有时存在着缺血再灌注损伤。肝脏缺血再灌注损伤过程中肝脏及肝外器官会出现一系列功能、代谢和结构的损伤,肝脏缺血后再恢复血流,血液从肝静脉回到右心房,心脏为接受肝缺血再通后血液的第一站。因此探索肝缺血再灌注损伤是否并发心脏的损伤及其可能的机制,以寻找减少损伤、增加机体抗损伤的方法是一项亟待解决的课题。本研究旨在观察肝缺血再灌注损伤时iNOs、c-fos在心肌组织中的表达和心肌细胞凋亡的关系以及可能的机制。     

葛根素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响及作用机制

目的探讨葛根素(Pue)对大鼠肝脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其对细胞凋亡的影响及可能机制。方法健康雄性SD大鼠72只,随机分为假手术组、IR组、缺血预处理(IP)组和Pue预处理组(Pue组),每组按再灌注(1、6、24 h)三个时间点分3个亚组。建立动物模型;测Bcl-2、Bax蛋白的表达情况及肝组织凋亡指数(AI);透射电镜下观察大鼠肝细胞的变化。结果与假手术组相比,IR组、IP组、Pue组肝组织Bcl-2、Bax蛋白表达以及AI均增加(P<0.05);与IR组比较,IP组、Pue组肝组织Bax蛋白的表达及AI减少,而Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05);与IP组比较,Pue组肝组织Bax蛋白的表达及凋亡指数减少,而Bcl-2蛋白的表达增加(P<0.05)。通过透射电镜下对肝细胞学观察,可见假手术组肝细胞形态基本正常,IR组损伤最重,IP组及Pue组损伤较IR组轻,Pue组要更轻。结论 IP及Pue都可通过上调Bcl-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达,来减轻肝细胞凋亡,相比之下后者效果要更好。     

螺内酯对缺血再灌注损伤时心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨螺内酯对心肌缺血再灌注损伤(I/R)时细胞凋亡的影响。方法:30只新西兰家兔随机分为3组:假手术(SHAM)组、缺血再灌注(I/R)组和制备I/R模型前应用螺内酯组(SPI)。测量左心室功能、光镜及电镜观察标本病理形态改变,免疫组化观察Bcl-2和Bax表达,缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡程度。结果:1.I/R组心功能较SHAM组明显下降,SPI组较I/R组改善;2.SHAM组心肌结构完整,I/R组心肌结构损害严重,SPI组心肌结构损害较轻;3.SPI组Bcl-2表达阳性率高于SHAM组与I/R组,I/R组Bax阳性表达率高于SHAM与SPI组;4.TUNEL结果显示,I/R组细胞凋亡程度高于SHAM与SPI组。结论:螺内酯减轻I/R中心肌细胞凋亡程度。     

褪黑素在急性肾缺血再灌注损伤中的防治作用及其对细胞凋亡的影响

目的：探讨急性肾缺血再灌注损伤（ ＡＲⅠ） 的机制及其与细胞凋亡的关系以及褪黑素（ ＭＥＬ） 对ＡＲⅠ的保护作用。　方法：用动脉夹夹闭大鼠双侧肾蒂４５ ｍｉｎ 再灌注２４ｈ 的手术方法制成ＡＲ Ⅰ动物模型,将动物分为假手术对照组、手术组、维生素Ｃ 预防组、ＭＥＬ 不同剂量预防组,动态检测血尿素氮（ＢＵＮ） 、肌酐（Ｃｒ） 、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ） 、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ） 、丙二醛（ ＭＤＡ） 、肾组织光镜、电镜形态学观察及ＤＮＡ 电泳分析。结果：手术组ＢＵＮ、Ｃｒ 升高、ＳＯＤ、ＧＳＨＰｘ 下降,ＭＤＡ 上升,形态学显示肾小管细胞发生凋亡。ＭＥＬ 预防用药能不同程度地逆转上述改变,防止凋亡的发生,效应呈剂量依赖性,且较已知的抗氧化剂作用更明显。　结论：氧自由基（ＯＦＲ） 是ＡＲⅠ的主要机制之一,ＡＲⅠ确实存在着细胞凋亡的病理改变。ＭＥＬ 预防用药能减轻ＡＲⅠ,减少细胞凋亡的发生,效应呈剂量依赖性。