细胞信号转导信使磷脂酰肌醇3—激酶和卵巢癌的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是一种与细胞信号转导有关的脂类第二信使。在人类肿瘤中，已发现PI3K级联信号途径的各成员具有基因结构，蛋白质表达和激酶活性等的异常改变。PI3K在卵巢癌中有异常表达，为肿瘤早期诊断、开发新的抗肿瘤药物和寻找新的基因治疗靶点提供了新的思路。     

细胞信号转导信使磷脂酰肌醇3-激酶和卵巢癌的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是一种与细胞信号转导有关的脂类第二信使.在人类肿瘤中,已发现PI3K级联信号途径的各成员具有基因结构,蛋白质表达和激酶活性等的异常改变.PI3K在卵巢癌中有异常表达,为肿瘤早期诊断、开发新的抗肿瘤药物和寻找新的基因治疗靶点提供了新的思路.     

磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B信号传导与卵巢癌

研究发现磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B信号传导通路异常活化在卵巢癌的发生、发展、凋亡、血管生成、转移及耐药等方面起着重要的作用，机制包括调节细胞周期促进细胞增殖，作用于凋亡相关因子抑制肿瘤细胞凋亡并导致化学耐药发生，影响血管生长因子及基质金属蛋白酶生成促进肿瘤侵袭转移等。已证明以该通路为靶点的抑制剂如LY294002、雷帕霉素等，抑制卵巢癌细胞增殖并增强其对化疗药物敏感性，在卵巢癌治疗中具有广阔的应用前景。     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导与卵巢癌

研究发现磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导通路异常活化在卵巢癌的发生、发展、凋亡、血管生成、转移及耐药等方面起着重要的作用,机制包括调节细胞周期促进细胞增殖,作用于凋亡相关因子抑制肿瘤细胞凋亡并导致化学耐药发生,影响血管生长因子及基质金属蛋白酶生成促进肿瘤侵袭转移等.已证明以该通路为靶点的抑制剂如LY294002、雷帕霉素等,抑制卵巢癌细胞增殖并增强其对化疗药物敏感性,在卵巢癌治疗中具有广阔的应用前景.     

卵巢癌组织芯片中磷脂酰肌醇3激酶调节亚基p85α,AKT2及Ki-67表达

目的:应用高通量组织芯片技术分析卵巢癌和正常卵巢组织中磷脂酰肌醇3激酶调节亚基p85α(phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit p85 alpha,PI3Kp85α)、AKT2和Ki-67蛋白的表达,探讨其相关性及临床意义。方法:利用组织芯片技术结合免疫组化法检测177例卵巢癌和10例正常卵巢组织中PI3Kp85α,AKT2及Ki-67的表达。结果:PI3Kp85α,AKT2及Ki-67的总阳性表达率在卵巢癌组织中分别为70.6%,76.3%和74.5%,正常卵巢组织中分别为30.0%,10.0%和10.0%,蛋白阳性表达率的差异有统计学意义(P<0.05);在高分化卵巢癌组织中分别为43.5%,47.8%和47.8%,中分化卵巢癌组织中分别为69.4%,75.8%和74.2%,低分化卵巢癌组织中分别为78.3%,83.7%和84.8%,蛋白阳性表达率有统计学差异(P<0.01),其阳性表达率及强度随癌症恶性程度增高而增高;PI3Kp85α,AKT2与Ki-67蛋白的表达均存在相关性(P<0.01)。结论:联合分析PI3Kp85α,AKT2和Ki-67的表达对预测卵巢癌的发生和发展有重要意义。     

多囊卵巢综合征患者脂肪组织磷脂酰肌醇-3激酶的表达与活性研究

目的:研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者脂肪组织磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)的表达及酶活性的改变,探讨PCOS胰岛素抵抗(IR)的分子机制。方法:采用Western blot检测PCOS IR 组(19例)、PCOS非IR组(17例)及对照组(20例)PI-3K亚单位P85蛋白在三组脂肪组织中的表达,RT-PCR方法检测各组脂肪组织PI-3K亚单位P85 mRNA的表达;采用免疫沉淀、薄层层析及γ液闪计数方法检测PI-3K的活性,并进行分析比较。结果:①PCOS IR组PI-3K亚单位P85蛋白质及mRNA的表达与PCOS非IR组和对照组相比差异无显著性意义(P>0.05)。②PCOS 组PI-3K的活性显著下降,而PCOS IR组激酶活性的下降尤为明显(P<0.01),与HOMA-IR呈显著负相关(P<0.01)。结论:PCOS IR患者PI-3K亚基的P85转录及翻译水平均无改变,该激酶活性的降低,影响胰岛素信号通路中信号分子的生物学作用,是导致IR形成的重要机制。     

抑制磷脂酰肌醇-3-羟基激酶/蛋白激酶B信号传导通路对宫颈癌放疗增敏的作用

目的:探讨抑制磷脂酰肌醇-3-羟基激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号传导通路对宫颈癌的放疗增敏作用。方法:选用LY294002为PI3K阻滞剂。培养PI3K功能活性和AKT磷酸化水平稳定的人宫颈癌HeLa细胞株,皮下注射于BALB/C裸鼠体内,建立裸鼠宫颈癌移植瘤模型。随机将荷瘤裸鼠分为空白对照组、单纯放疗组、单纯药物组(LY294002)和联合治疗组(放疗+LY294002)。应用Western blotting检测各组AKT磷酸化(phospho-Ser473AKT)水平。通过克隆形成实验检测LY294002在体内的放射增敏作用。长期观察肿瘤体积的变化并绘制肿瘤生长曲线。结果:Western blotting显示,联合治疗组的AKT去磷酸化现象最显著。克隆形成实验显示,LY294002与放射治疗对肿瘤细胞生长的抑制在各剂量水平均表现出协同作用(P0.05)。肿瘤生长曲线表明联合治疗组的肿瘤体积增长最缓慢。结论:PI3K阻滞剂显著增强宫颈癌对放射治疗的敏感性。     

卵巢癌组织芯片中磷脂酰肌醇3激酶调节亚基p85α,AKT2及Ki-67表达

目的:应用高通量组织芯片技术分析卵巢癌和正常卵巢组织中磷脂酰肌醇3激酶调节亚基p85α(ohosphoinositide 3-kinase regulatory subunit p85 alpha,P13Kp85α)、AKT2和Ki-67蛋白的表达,探讨其相关性及临床意义.方法:利用组织芯片技术结合免疫组化法检测177例卵巢癌和10例正常卵巢组织中P13Kp85α,AKT2及Ki-67的表达.结果:P13Kp85α,AKT2及Ki-67的总阳性表达率在卵巢癌组织中分别为70.6%,76-3%和74.5%,正常卵巢组织中分别为30.0%,10.0%和10.0%,蛋白阳性表达率的差异有统计学意义(P<0.05);在高分化卵巢癌组织中分别为43.5%,47.8%和47.8%,中分化卵巢癌组织中分别为69.4%,75.8%和74.2%,低分化卵巢癌组织中分别为78.3%,83.7%和84.8%,蛋白阳性表达率有统计学差异(P<0.01),其阳性表达率及强度随癌症恶性程度增高而增高;P13Kp85α,AKT2与Ki-67蛋白的表达均存在相关性(P<0.01).结论:联合分析P13Kp85α,AKT2和Ki-67的表达对预测卵巢癌的发生和发展有重要意义.     

磷脂酰肌醇3激酶通路在胰岛素调节子宫内膜癌细胞增殖凋亡中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路在胰岛素调节子宫内膜癌细胞生长中的作用.方法 2006年5月至2006年10月于中国医学科学院血液病学研究所临床药物室完成试验,即将子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞进行无血清饥饿培养,分成不同处理组,即空白对照组、胰岛素刺激组(Ins组)、PI3K抑制剂--LY294002预处理后再以胰岛素刺激组(LY Ins组).以四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验和流式细胞仪观察细胞增殖和凋亡情况.不同处理组分别培养24h、48h和72h,观察各组570nm波长吸光度(OD570nm).结果 Ins组细胞OD570nm值高于空白对照组(P＜0.01);LY Ins组细胞OD570nm低于Ins组(P＜0.01),LY294002拮抗了胰岛素对内膜癌细胞的增殖促进作用.流式细胞仪检测凋亡发现Ins组细胞凋亡率低于空白对照组[(2.02±0.39)%对(14.45±2.70)%,P＜0.01];LY Ins组细胞凋亡率高于Ins组[(18.73±2.11)%对(2.02±0.39)%,P＜0.01].结论 PI3K信号通路在胰岛素引起的促内膜癌细胞增殖、抑制凋亡中起重要作用,胰岛素对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的调节作用是PI3K依赖性的.     

骨骼肌组织磷脂酰肌醇3-激酶表达与妊娠期糖尿病胰岛素抵抗关系的研究

目的 探讨骨骼肌组织中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI-3K)表达与妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)孕妇胰岛素抵抗的关系. 方法 采用RT-PCR及免疫印迹法测定30例GDM孕妇(GDM组)、30例糖耐量正常孕妇(正常组)及20例糖耐量正常的非孕妇女(对照组)骨骼肌组织PI-3K调节亚单位P85α mRNA及蛋白表达水平.采用葡萄糖氧化酶法及放射免疫法测定空腹葡萄糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR). 结果 GDM组FPG[-(5.61±0.78)mmol/L]、FINS[(15.12±5.31)mU/L]、HOMA-IR(1.21±0.52)分别高于正常组[(4.43±0.46)mmol/L、(10.56±3.07)mU/L和(0.80±0.31),P<0.01];正常组FINS、HOMA-IR均明显高于对照组[(7.56±2.31)mU/L和(0.47±0.26),P<0.01].GDM组P85α mRNA表达水平(1.08±0.23)明显高于正常组(0.88±0.29)及对照组(0.63士0.26)(P<0.01);正常组高于对照组(P<0.01).骨骼肌组织中的P85α蛋白表达:GDM组(0.81±0.32)高于正常组(0.55±0.27)和对照组(0.28±0.20)(P<0.01);正常组高于对照组(P<0.01).P85αmRNA及蛋白表达水平与HOMA-IR在GDM组和正常组呈正相关(r=0.625、0.759,P<0.01;r=0.514、0.603,P<0.01),而在对照组无明显相关性(r=0.426、0.395,P>0.05). 结论 骨骼肌组织P85α基因上调导致P85α蛋白表达水平增高,可能是GDM患者发生胰岛素抵抗的分子机制之一.     

磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B信号通路与宫颈癌

人乳头状瘤病毒（HPV）是宫颈癌最主要的危险因素，但不是独立致癌因子。人乳头状瘤病毒（HPV）感染后可能引起信号转导途径异常而促使宫颈癌发生。磷脂酰肌醇3激酶／蛋白激酶B（PI3K／PKB）信号通路转导促增殖与抗凋亡信号，通过多方面的作用机制参与肿瘤发生发展。该通路各组分表达水平及活性的异常改变也见于宫颈癌，可能和HPV致瘤机理及宫颈癌发生机制有关。PI3K抑制剂在体内外都可阻断PI3K／PKB通路，抑制增殖诱导凋亡，与传统抗肿瘤方案联合有增效作用。     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路与宫颈癌

人乳头状瘤病毒(HPV)是宫颈癌最主要的危险因素,但不是独立致癌因子.人乳头状瘤病毒(HPV)感染后可能引起信号转导途径异常而促使宫颈癌发生.磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号通路转导促增殖与抗凋亡信号,通过多方面的作用机制参与肿瘤发生发展.该通路各组分表达水平及活性的异常改变也见于宫颈癌,可能和HPV致瘤机理及宫颈癌发生机制有关.PI3K抑制剂在体内外都可阻断PI3K/PKB通路,抑制增殖诱导凋亡,与传统抗肿瘤方案联合有增效作用.     

磷脂酰肌醇-3激酶的表达及其活性变化与妊娠期糖尿病胰岛素抵抗的关系

目的 研究磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidyl inositol-3 kinase,PI-3K)在妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者脂肪组织中的表达及其活性变化,分析其与GDM胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的关系.方法 采用Western印迹法、RT-PCR法分别检测20例GDM孕妇(GDM组)和20例正常妊娠晚期孕妇(正常妊娠组)脂肪组织中PI-3K p85α蛋白质和mRNA的表达,采用ELISA法检测两组孕妇脂肪组织中PI-3K的活性,葡萄糖氧化酶法和放射免疫法检测两组孕妇空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)及空腹胰岛素(fasting insulin,FIN)水平,并采用稳态模型(homeostasis model assessment,HOMA)计算IR指数.结果 (1)PI-3K p85a蛋白的表达GDM组高于正常妊娠组(0.93±0.04和0.71±0.06,P＜0.01).(2)GDM组PI-3K p85emRNA表达高于正常妊娠组(0.83±0.03和0.53±0.07,P＜0.01).(3)GDM组PI-3K的活性为正常妊娠组的30%,明显降低(1.7±0.6和5.2±0.5,P＜0.01)(4)GDM组FPG、FINS、HOMA-IR分别为(5.8±0.2)mmol/L、(14.8±0.2)mmol/L和1.3±0.4,正常晚孕组分别为(4.7±0.3)mmol/L、(11.2±0.3)mmol/L和0.9±0.3,两组间各指标比较均有统计学意义(P＜0.01).PI-3K活性与HOMA-IR呈负相关(r=-0.68,P＜0.01).结论 GDM患者脂肪组织中PI-3K活性降低是其发生胰岛素抵抗的分子机制之一.     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导通路与妇科恶性肿瘤关系的研究进展

信号传导通路在肿瘤发生过程中的异常改变及其导致细胞生长失控的机制是近几年来研究的热点。磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase，PI-3K)／蛋白激酶B(protein kinase B，PKB)信号传导通路的异常改变，常出现在人类的一些恶性肿瘤组织中，且与肿瘤的进展密切相关。本就PKB的结构特征、PKB的活化以及PI-3K／PKB信号传导通路与妇科恶性肿瘤的关系作一综述。     

磷脂酰肌醇-3激酶活性在妊娠期糖尿病患者脂肪组织中的检测

目的检测妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者脂肪组织磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI-3K)活性的改变,探讨GDM产生胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的分子机制。方法采用放射免疫法测定35例正常妊娠妇女及35例GDM患者血清空腹胰岛素(fasting insu-lin,FIN)的浓度,葡萄糖氧化酶法测定血浆空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG);免疫沉淀、薄层层析及γ液闪计数方法检测PI-3激酶的活性,并进行分析比较。结果 GDM组患者FPG[(7.85±3.51)mmol/L]、FIN[(25.17±3.76)mU/L]及HOMA-IR(1.75±0.12)均显著高于对照组,差异有统计学意义(P均0.01);与对照组比较,GDM组PI-3K活性(85.75%)下降(P0.01);GDM组PI-3K与孕晚期体重、孕晚期体重指数及HOMA-IR呈负相关(r=-0.59、r=-0.63、r=-0.74,P均0.01)。结论 GDM患者PI-3K参与了胰岛素信号通路中信号分子的生物学作用,导致IR的形成。     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路与肿瘤化疗

化疗在肿瘤治疗中占据着不可替代的重要地位,如何预防或克服耐药已成为临床研究的热点和难点问题。随着对信号转导与肿瘤关系的深入研究,从信号转导角度探索肿瘤耐药机制,认识到针对信号转导异常环节进行干预是探索逆转耐药的新思路等,对提高肿瘤化疗敏感性有重要意义。以肿瘤分子生物学为基础,综述磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路在肿瘤化疗中可能的调节作用,有利于寻求新的治疗模式和提高治疗增益比。     

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路与肿瘤化疗

化疗在肿瘤治疗中占据着不可替代的重要地位,如何预防或克服耐药已成为临床研究的热点和难点问题.随着对信号转导与肿瘤关系的深入研究,从信号转导角度探索肿瘤耐药机制,认识到针对信号转导异常环节进行干预是探索逆转耐药的新思路等,对提高肿瘤化疗敏感性有重要意义.以肿瘤分子生物学为基础,综述磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路在肿瘤化疗中可能的调节作用,有利于寻求新的治疗模式和提高治疗增益比.     

基因芯片在卵巢癌相关研究中的应用

基因芯片是新兴的分子生物学检测技术,可对标记的生物样品进行快速、高效检测及医学诊断.就基因芯片的技术工作原理和近年在卵巢癌新基因筛选、功能基因学研究及化疗药物筛选等相关研究方面的应用情况和进展综述.     

基因芯片在卵巢癌相关研究中的应用

基因芯片是新兴的分子生物学检测技术，可对标记的生物样品进行快速、高效检测及医学诊断。就基因芯片的技术工作原理和近年在卵巢癌新基因筛选、功能基因学研究及化疗药物筛选等相关研究方面的应用情况和进展综述。