牛磺酸对染铅大鼠海马一氧化氮合酶活力的影响

目的　探讨牛磺酸拮抗铅损害学习记忆能力的作用。方法　采用NADPH d组织化学法 ,研究饮用含不同剂量铅 (0 .0 11、0 .110g L)的水和含不同剂量牛磺酸 (5、10g kg)的饲料喂养的大鼠海马一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元数量的变化。结果　 10g kg的牛磺酸饲料能明显增加染铅大鼠海马CA1区和齿状回NOS阳性神经元的数量。低铅水高牛磺酸饲料组NADPH d阳性神经数量在CA1区为 5 1.80± 4 .6 8,在齿状回为 4 7.4 0± 4 .2 0 ,较低铅水普通饲料组的CA1区 (4 1.2 0± 5 .32 )和齿状回 (39.87± 3.81)明显增多 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　牛磺酸对铅损害学习记忆能力有较明显的拮抗作用。     

锌对慢性染铅大鼠海马一氧化氮合酶活力和神经元型一氧化氮合酶蛋白及基因表达的影响

微量元素锌 (Zn)在作为学习记忆功能的主要中枢结构海马中具有重要的生物学功能 ,能增强一氧化氮合酶 (NOS)活力[1] 。铅 (Pb)是环境中广泛存在的强神经毒物 ,可引起接触者学习记忆能力的缺陷。铅和锌都是二价金属离子 ,在机体的各部位都是相互影响、相互作用的 ,铅可能在海马中与锌竞争或替换锌或干扰锌的神经生理作用而干扰海马功能 ,引起认知功能障碍[2 ] 。我们在前期实验[3 ] 的基础上 ,通过观测补充ZnSO4对染铅 (PbAc)大鼠海马NOS活力、神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)蛋白和基因表达的影响 ,进一步研究大鼠慢性染铅时铅对学习记…     

锂对染铅大鼠海马胆囊收缩素和神经元型一氧化氮合酶神经元的保护作用

目的 探讨锂对染铅大鼠海马胆囊收缩素（CCK）和神经元型一氧化氮合酶（nNOS）神经元的保护作用及其与动物学习记忆功能变化的关系.方法 通过测量体重,利用反映学习记忆功能的Y迷宫法和ABC免疫组化法,研究饮用含0.2 g/L醋酸铅（PbAc）水和含不同剂量（3、30、300、3 000mg/kg）氯化锂（LiCl）饲料喂养的大鼠体格发育情况、学习记忆能力以及海马不同亚区CCK和nNOS阳性神经元数目的变化.结果铅染毒组大鼠体重增加少于对照组大鼠,差异有统计学意义（P＜0.05）,Y-迷宫学会次数多于对照组大鼠,差异有统计学意义（P＜0.05）;其海马各区CCK和nNOS阳性神经元数明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）.铅＋LiCl（3、30、300mg/kg）组体重增加多于对照组大鼠,差异有统计学意义（P＜0.05）;Y-迷宫学会次数少于对照组大鼠,差异有统计学意义（P＜0.05）,海马各区CCK阳性神经元数明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）.铅＋3 000mg/kg LiCl组大鼠Y-迷宫学会次数多于对照组大鼠,差异有统计学意义（P＜0.05）;海马各区CCK阳性神经元数明显少于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）;与铅染毒组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 铅可损伤大鼠学习记忆能力,影响大脑海马CCK和nNOS阳性神经元的数目.较低剂量的锂对铅引起的学习记忆损伤和海马CCK阳性神经元的变化有一定保护作用.     

铅对大鼠海马一氧化氮合酶和一氧化氮的影响

目的 探讨慢性染铅过程中，大鼠海马一氧化氮合酶（NOS）、一氧化氮（NO）的变化。方法 Wistar大鼠经饮水加0，18．4，184．0mg/L醋酸铅（PbAc)方法染毒。海马NOS活性测定采用NOS催化L－Arg和氧分子生成NO法，海马NO（NO3^- NO2^-)浓度采用硝酸还原酶法。结果 与对照组相比，高剂量染铅组海马NOS活性在早期（7d）显著升高（P＜0．05），30d后显著低于对照组（P＜0．05）。低剂量组大鼠海马NOS活性第7天开始有增高趋势，但差异无显著性，直到60d后显著低于对照组（P＜0．05）。低剂量染铅组大鼠海马NO含量90d时明显低于对照组（P＜0．05）。高剂量组大鼠海马NO含量在60d后显著低于对照组（P＜0．05）。结论 铅可导致海马NOS活性降低，NO含量降低。NOS活性降低及NO含量减少，可能是铅对海马产生神经毒作用的机制。     

牛磺酸锌对染铅大鼠海马NOS活性和nNOS蛋白及基因表达的影响

目的:探讨不同剂量牛磺酸锌(TZC)拮抗铅对大鼠海马一氧化氮合酶(NOS)活性和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白及基因表达的损害。方法:用NADPH-黄递酶(NADPH-d)组化、ABC免疫组化和半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法,研究饮用含0.2 g/L醋酸铅(PbAc)饮水和含不同剂量(5.9、17.7g/kg)TZC饲料喂养的大鼠海马NOS活性、nNOS阳性神经元数目以及nNOS基因表达的变化。结果:与对照组大鼠海马CA1区NOS、nNOS阳性神经元数(56.80±6.69,60.67±13.48)和海马nNOS mRNA相对含量(0.454±0.045)相比,染铅组大鼠海马CA1区NOS、nNOS阳性神经元数(42.60±6.1 7,46.67±9.04)和海马nNOS mRNA相对含量(0.071±0.025)明显减少(P<0.05)。而铅加5.9 g/kg TZC 组大鼠海马CA1区NOS、nNOS阳性神经元数(61.60±7.30,56.87±6.64)和海马nNOSmRNA相对含量(0.412±0.061)均较染铅组明显增加(P<0.05)。铅加牛磺酸(Tau)组和铅加17.7 g/kgTZC组海马nNOS mRNA相对含量(0.138±0.026和0.137±0.019)较染铅组明显增加(P<0.05)。各组大鼠海马齿状回NOS和nNOS阳性细胞数的变化与CA1区变化基本一致,而CA3区无明显差别。结论:5.9 g/kg TZC能明显增强慢性染铅大鼠海马NOS活性和nNOS蛋白及基因表达。     

铅对大鼠海马一氧化氮合酶基因表达的影响

目的　探讨铅对海马一氧化氮合酶 (nNOS)基因的mRNA和蛋白表达的影响。方法　 1 2只大鼠饮用含 0 2 %醋酸铅 (PbAc)水 3个月后 ,作为铅染毒组进行实验。用ABC免疫组织化学和半定量逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)方法测定大鼠海马nNOS阳性神经元数量和nNOSmRNA含量的变化。结果　铅染毒组大鼠海马CA1 区、齿状回nNOS阳性神经元数目分别为 4 6 6 7± 9 0 4和 30 5 3± 7 0 8,较对照组的6 0 6 7± 1 3 4 8和 5 7 0 7± 1 1 1 4明显减少 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;铅染毒组大鼠海马CA3 区nNOS阳性神经元数目与对照组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;铅染毒组大鼠海马nNOSmRNA含量 (0 0 71± 0 0 2 5 )比对照组 (0 4 5 4± 0 0 4 5 )显著减少 (P <0 0 1 )。结论　铅对大鼠海马各区nNOS阳性神经元数和mRNA表达降低 ,可能是铅干扰学习记忆功能的机制之一     

两种含锌化合物对染铅大鼠海马神经元型NOS的影响

目的探讨硫酸锌 (ZnSO4 )和牛磺酸锌 (TZC)拮抗铅对学习记忆损害的作用 ,为补锌防治铅中毒提供实验依据。方法采用免疫组织化学方法 ,观察饮用含 0 .2g·L- 1醋酸铅 (PbAc)饮水和每公斤含锌 2 0 0mg、6 0 0mg(5、15g·kg- 1ZnSO4 ,5 .9、17.7g·kg- 1TZC)的饲料喂养 3个月后大鼠海马神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)阳性神经元数目的变化。结果与正常对照组大鼠海马CA1区nNOS阳性神经元数 (6 0 .6 7± 13.4 8)相比 ,染铅组海马CA1区nNOS阳性神经元数 (4 6 .6 7± 9.0 4 )明显减少 ,差别有显著性 (P <0 .0 5 )。而铅加 5g·kg- 1和 15g·kg- 1ZnSO4组以及铅加 5 .9g·kg- 1TZC组海马CA1区nNOS阳性神经元数 (5 3.6 0± 8.4 3、5 4.0 0± 6 .4 4和 5 6 .87± 6 .6 4)均较染铅组显著增加 (P <0 .0 5 ) ,以铅加 5 .9g·kg- 1TZC组的数目增加最多 ;而铅加 17.7g·kg- 1TZC组海马CA1区nNOS阳性神经元数 (5 1.6 7± 7.74 )与染铅组的差别无显著性 (P >0 .0 5 )。各组大鼠海马齿状回nNOS阳性细胞数的变化与CA1区变化基本一致 ,而CA3区与正常对照组无明显差别。结论锌对抗铅的毒性作用与锌的化学结合形式、锌的剂量有关     

锌对染铅大鼠海马一氧化氮合酶的保护作用

目的 :　探讨铅对海马长时程增强 (LTP)的影响与海马不同亚区一氧化氮合酶(NOS)变化的关系以及锌的拮抗作用。方法 :　采用反映学习记忆功能的 Y迷宫法测试大鼠神经行为的改变 ;用 NADPH-黄递酶 (NADPH- d)组化法和神经元型 NOS(n NOS)的免疫组化法研究大鼠海马不同亚区 NOS的活性及表达情况。结果 :　染铅组大鼠的学习记忆能力比铅锌组和对照组明显下降 (P<0 .0 5 ) ,铅锌组与对照组之间无差别 ;组化及免疫组化显示 :染铅组大鼠海马CA1区和齿状回的 NOS和 n NOS阳性神经元明显少于铅锌组和对照组 (P<0 .0 5 ) ,在 CA3区无差别 ,铅锌组与对照组各亚区均无差别。结论 :　铅可损伤大鼠学习记忆能力 ,鉴于 NOS参与LTP这一代表学习记忆的电生理指标的形成和维持 ,推测铅对学习记忆和海马 LTP的影响可能与染铅后海马各区 NOS的不同变化有关。锌对铅引起的学习记忆损伤和 NOS的影响有拮抗作用。     

当归多糖对染铅大鼠海马一氧化氮合酶阳性神经细胞的保护作用

目的探讨当归多糖(angelica polysaccharides,APS)对染铅大鼠海马不同亚区一氧化氮合酶(NOS)阳性神经细胞变化的拮抗作用。方法采用反映学习记忆功能的Y-迷宫法测试大鼠神经行为的改变;用NADPH-黄递酶(NADPH-d)组织化学法研究大鼠海马不同亚区NOS的活性神经细胞变化。结果染铅组大鼠的学习记忆能力(58.37±12.49)比APS组(37.82±10.61)和对照组(34.26士9.53)明显降低(P<0.05),APS组与对照组之间无差异;组织化学实验结果显示,染铅组大鼠海马CA1区和齿状回的NOS阳性神经细胞数目(38.35±10.22和37.36±12.84)明显少于APS组(56.83±14.26和56.43±10.59)和对照组(59.42士11.48和58.29士9.55)的神经细胞数目(P<0.05),在CA3区无差别,APS组与对照组各亚区均无差异。结论铅可损伤大鼠学习记忆能力,其机制与染铅后海马各区NOS活力的不同变化有关,APS对铅引起的学习记忆损伤和NOS活力的变化有拮抗作用。     

牛磺酸对铅染毒大鼠大脑皮层NOS和nNOS神经元数量的影响

目的 探讨牛磺酸拮抗铅损害中枢神经系统的作用,研究牛磺酸拮抗铅的剂量-效应关系。方法 采用黄递酶（NADPH-d）组织化学和神经元型一氧化氮合酶（nNOS）免疫组织化学方法,研究饮用含不同剂量醋酸铅（0．02,0．2g／L）饮水和饲喂含不同剂量牛磺酸（5,10g／kg）饲料的大鼠大脑皮层NOS和nNOS阳性神经元数量的变化。结果 牛磺酸能明显增加铅染毒大鼠大脑皮层NOS和nNOS阳性神经元的数量。结论 牛磺酸对铅损害中枢神经系统有较明显的拮抗作用,并且存在一定的剂量-效应关系。     

牛磺酸拮抗铅对原代培养皮层神经元的影响

目的:研究牛磺酸拮抗铅对原代培养的皮层神经元生长及存活的影响。方法:通过建立新生大鼠皮层神经元原代培养,用不同浓度醋酸铅染毒和给予牛磺酸干预,观察神经细胞的生长和存活情况。结果:终浓度为10-8mol/L的醋酸铅即可抑制神经元突起生长,导致细胞生长活力下降,终浓度为1.6×10-3mol/L的牛磺酸能够抑制这种损害作用,促进神经元生长。结论:牛磺酸能够拮抗铅抑制神经元生长和存活的毒性。     

母鼠牛磺酸耗竭与补充对仔代脑发育的影响

方法：Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成三组：１．牛磺酸耗竭组（ＧＥＳ组），母鼠孕１５日至哺乳第１７日向饮水中加入ＧＥＳ（浓度为１％），并给予牛磺酸缺乏膳（饲料牛磺酸含量为０）；２．对照组（Ｃｏｎ组）饲料牛磺酸含量为０．０６％，饮水中不含添加物；３．牛磺酸补充组（ＴＳ组），饲料牛磺酸含量为０．６％，饮水中亦不含添加物。对仔代出生及断乳时的脑重、脑牛磺酸与游离氨基酸含量、脑微量元素Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ含量及学习记忆能力进行测定。牛磺酸测定采用离子交换层析法；氨基酸测定采用ＨＰＬＣ法；微量元素Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ测定采用原子吸收火焰法；乳鼠学习记忆能力测定采用Ｙ迷宫进行。结果：ＧＥＳ组仔鼠出生及断乳时的脑重、脑牛磺酸与微量元素Ｚｎ含量均低于对照组；在Ｙ迷宫中的学习记忆能力低于母鼠牛磺酸补充组。母鼠牛磺酸补充对仔鼠出生时的脑重、脑牛磺酸含量及与微量元素Ｚｎ含量均无影响；但至断乳时，仔鼠大脑牛磺酸含量、微量元素Ｚｎ、Ｆｅ含量高于正常对照组。     

牛磺酸降低高原低氧时视网膜谷氨酸兴奋性及其机制

目的观察牛磺酸对高原低氧时视网膜中谷氨酸兴奋性的影响并探讨其作用的机制。方法大鼠随机分为对照组(Con)、牛磺酸组(Tau)、4500m低氧组(45H)、4500m低氧+牛磺酸组(45HT)、5500m低氧组(55H)和5500m低氧+牛磺酸组(55HT),分别以基础饲料和添加了牛磺酸的饲料喂养1w后,模拟4500m和5500m的高原低氧条件。免疫组化检测谷氨酸的分布,RT-PCR检测谷氨酸转运蛋白(GLAST)和谷氨酰胺合成酶(GS)表达。结果谷氨酸的染色随低氧程度增加而加深,牛磺酸干预后各层染色明显变浅。低氧初期GLASTmRNA表达较高,12h后表达降低,时间延长,降低幅度增大,牛磺酸干预组的表达基本恢复正常。4500m组在低氧初期GSmRNA表达反应性增强,之后逐渐降低,5500m组的表达则随低氧时间延长逐渐降低,牛磺酸干预使其表达提高。结论预防性地给予牛磺酸能降低高原低氧所致的谷氨酸高兴奋性,作用的机制可能是牛磺酸通过增加GLAST和GS的表达提高Müller细胞对谷氨酸的摄取和代谢。     

牛磺酸对大鼠视网膜光化学损伤的防护作用

目的:观察饲料中添加牛磺酸对持续高强度光照条件下大鼠视网膜的影响。方法:70只SD大鼠随机分为对照组,2%牛磺酸组(TauI),4%牛磺酸组(TauⅡ),饲料干预15d后光照(3000±200lx),持续24h,光照前后测定视网膜牛磺酸含量([Tau]r)和血清牛磺酸含量([Tau]s),并通过视网膜电图(scotopicelectroretinograph,Scot-ERG)、视网膜组织病理和超微结构变化判定牛磺酸的防护效应。结果:光照前TauⅡ组[Tau]s最高,光照后下降,TauⅡ组显著高于对照组和TauI组;光照前[Tau]r各组无显著差异,光照后TauⅡ组维持较高含量。Scot-ERG结果:光照后对照组波型不典型,a波、b波幅值显著降低,潜伏时间延长,TauI和TauⅡ组波型典型,其中TauⅡ组仅a波幅值下降;光照后对照组视网膜内外节段(retinaouter/innersegment,ROS/RIS)排列紊乱,外核层(outernuclearlayer,ONL)变薄,线粒体肿胀,而TauI和TauⅡ组视网膜结构保持良好,线粒体轻微肿胀。结论:喂饲牛磺酸尤其4%剂量对光化学损伤条件下视网膜有较强的保护作用。     

牛磺酸对大鼠酒精性肝损伤保护作用的研究

目的 :　通过观察牛磺酸对大鼠酒精性肝损伤的保护效果 ,为预防及治疗酒精性肝损伤提供理论及实验依据。方法 :　通过白酒灌胃建立大鼠酒精性肝损伤模型 ,治疗组分别给予高低两种剂量的牛磺酸 ,对照组 0 .9%生理盐水 ,实验末测血压、血清甘油三酯 (TG) ,并对大鼠肝脏进行病理及量化分析。结果 :　与模型组相比 ,高低两种浓度的 (2 %和 5 %)牛磺酸均可以显著降低酒精性肝损伤大鼠血清甘油三酯 (P<0 .0 5 ) ;高剂量组牛磺酸还能降低酒精性肝损伤大鼠血压(P<0 .0 5 ) ;肝脏病理切片量化分析显示 ,高低两种剂量牛磺酸均可显著降低酒精对肝脏的损伤 (P<0 .0 5 ) ,且高低剂量组的保护效果无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 :　牛磺酸能够有效保护酒精对大鼠肝脏的损伤。     

牛磺酸对低水平铅暴露大鼠神经行为与功能的影响

目的　探讨牛磺酸对低水平铅暴露大鼠神经行为与功能的影响。方法　将成年Wistar大鼠随机分为对照 (Cont)组、铅 (Lead)对照组、Lead+0 .5 %牛磺酸 (Tau)组、Lead+1 .0 %Tau组和 Lead+1 .5 % Tau组 ,自孕 9d起 ,各 Tau补充组母鼠饲料中添加不同水平牛磺酸 ,于孕1 6 d至产后 2 5 d,染铅各组饮 0 .1 4%的醋酸铅蒸馏水。仔鼠于生后 2 5 d与母鼠分笼喂养 ,饮食同母鼠。自生后开始观察生长发育及行为发育情况 ,3 0 d开始做辨别学习能力试验。试验结束后 ,处死动物 ,测血铅 ,脑铅 ,单胺类神经递质 ,乙酰胆碱。结果　 1 .各 Tau补充组脑铅含量 (ng/g)低于Lead组 ,高于 Cont组 (P<0 .0 0 1 )。 2 .负向趋地、听觉惊愕、触须定位达标时间 (d)各 Tau补充组短于 Lead组 (P<0 .0 1 ) ,3 .辨别学习能力试验 ,达到学会标准所用时间 (d) ,各 Tau补充组短于 Lead组 (P<0 .0 0 1 )。4.各脑区去甲肾上腺素含量 Lead+1 .0 % Tau组高于 Lead组而与 Cont组无差别 ,各脑区多巴胺含量 Lead组低于 cont组 ,其中小脑、皮层含量低于 Lead+1 .0 % Tau组 (P<0 .0 5或0 .0 1 )。结论　补充适量牛磺酸对低剂量铅暴露大鼠神经系统发育具有保护作用。     

电磁脉冲对大鼠海马突触可塑性相关蛋白表达的影响

目的研究电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)照射后大鼠海马组织中突触可塑性相关蛋白的表达情况。方法以EMP 6×104V.m-1照射Wistar大鼠,用Western blot蛋白印迹法检测海马组织中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和神经细胞黏附分子(neural celladhesion molecule,NCAM)的表达。结果EMP照射后6 h,海马BDNF的表达与对照组相比增长了25.8%(P<0.05),之后呈缓慢回降趋势;照射后7 d再度升高,与对照组相比增长了32.2%,(P<0.05)。EMP照射后6~12 h,海马NCAM的表达与对照组相比增长了8.1%(P<0.05),3 d后回降,与对照组相比减少了10.8%(P<0.05),照射后7 d再度升高,与对照组相比增长了14.1%,(P<0.05)。结论EMP照射后早期,海马BDNF和NCAM的上调,可能介导了突触可塑性的正向改变。     

牛磺酸改善染锰大鼠学习记忆能力的海马蛋白质组学研究

目的通过双向电泳实验(2-dimensional gel electrophoresis,2-DE)研究牛磺酸减轻急性染锰诱导大鼠学习记忆损伤的分子机制。方法 60只SPF雄性SD大鼠随机分3组:生理盐水(NS)对照组,连续腹膜内注射(ip)0.9%NS;染锰组,每日ip MnCl2.4H2O(15mg/kg.d);牛磺酸预防组,染锰的同时ip牛磺酸(200 mg/kg.d),各组大鼠连续注射4w。最后一次干预结束后进行水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力变化,分离大鼠海马组织并制备总蛋白,2-DE分离差异蛋白质并经辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)分析和Mascot数据库检索鉴定差异蛋白。结果水迷宫实验显示:平均逃避潜伏时间(s)染锰组大鼠39.8±2.3,较对照组29.5±2.5及牛磺酸预防组29.4±2.3显著延长(P<0.05),平台搜索次数各组间无显著差异,染锰组与对照组、预防组比对共有10个差异表达的蛋白质斑点,鉴定出4个表达下调的蛋白质,分别是NADH dehydrogenase(ubiquinone)Fe-S protein 1、Galactokinase I、whaq protein、beta-centractin。结论牛磺酸对急性染锰诱导的大鼠空间学习能力损伤有明显改善作用,蛋白质组学研究初步鉴定出4个在三组中共存的表达下调蛋白质点。[营养学报,2012,34(6):553-557]