雌激素缺乏对大鼠股骨骨髓细胞Fas、FasL表达的影响

目的探讨去势后SD大鼠骨质疏松发生过程中股骨骨髓细胞Fas、FasL的表达情况。方法建立绝经后骨质疏松模型（去势组，切除双侧卵巢）。用免疫组织化学方法（SABC法）检测不同时期去势大鼠与正常大鼠股骨骨髓细胞Fas、FasL的表达情况。结果在SD大鼠去势后骨质疏松发生过程中股骨骨髓细胞Fas、FasL的表达呈现出下降的趋势，并且破骨样前体多核细胞都呈弱阳性表达；而非去势组大鼠股骨骨髓细胞Fas、FasL呈强阳性表达，并且这种强阳性的表达多局限于破骨样前体多核细胞的胞浆中。结论在雌激素缺乏的情况下，骨髓细胞Fas、FasL的表达减弱；雌激素能加强骨髓破骨样前体多核细胞Fas、FasL的表达，从而引起骨髓中破骨样前体多核细胞凋亡的发生。     

翻白草油对RSV感染宿主HeLa细胞Fas/FasL蛋白表达的影响

目的通过检测呼吸道合胞病毒(RSV)感染宿主HeLa细胞Fas蛋白和FasL蛋白的变化,探讨翻白草油的抗RSV作用。方法用RSV感染宿主HeLa细胞,采用Reed-Muench法求出RSV对细胞半数感染量(CCID50);将翻白草油与HeLa细胞共孵育,MTT法检测翻白草油对Hela细胞的毒性作用;选取最大无毒浓度的翻白草油和100CCID50的RSV病毒进行抗病毒试验,在药物4种作用方式下(对RSV病毒的直接灭活作用,在生物合成阶段对RSV病毒的作用,对RSV病毒吸附的作用,药物预处理作用),采用免疫荧光和Western blot方法检测宿主HeLa细胞Fas/FasL蛋白的表达。结果 RSV培养液对HeLa细胞中的毒力为105.8 CCID50/L;翻白草油对HeLa细胞的最小毒性浓度是0.10mg/L。翻白草油(除药物预处理作用方式外)Fas蛋白和FasL蛋白表达的荧光强度分别为1.851±0.022、1.830±0.044、1.801±0.038和1.832±0.034、1.767±0.022、1.816±0.024,RSV病毒对照组荧光强度分别为2.112±0.048和1.904±0.025,翻白草油(除药物预处理作用方式)组与病毒组比较,宿主HeLa细胞Fas蛋白和FasL蛋白的表达显著降低(P<0.05);翻白草预处理组Fas蛋白和FasL蛋白表达的荧光强度分别为2.098±0.075和1.882±0.055,与RSV病毒对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论翻白草油在直接灭活阶段、病毒复制阶段、病毒吸附阶段的抗RSV作用与调节宿主HeLa细胞Fas/FasL蛋白的表达有关。     

肾气丸对衰老大鼠睾丸抗氧化能力和生精细胞凋亡的影响

目的观察肾气丸对衰老大鼠睾丸抗氧化能力和生精细胞凋亡的影响。方法 Wistar大鼠分成4组,制备D-半乳糖亚急性衰老大鼠模型,分别灌胃相应剂量的肾气丸或生理盐水;6 w后,检测血清睾酮和睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及睾丸凋亡曲细精管数和凋亡细胞百分率。结果与正常组比较,模型组比较正常组,大鼠血清睾酮和睾丸组织SOD水平显著下降(P<0.01),睾丸组织MDA水平及凋亡曲细精管数和凋亡细胞百分率均显著升高(P<0.01);肾气丸可明显升高衰老模型大鼠血清睾酮和睾丸组织SOD水平(P<0.05或P<0.01),明显降低睾丸组织MDA水平及凋亡曲细精管数和凋亡细胞百分率(P<0.05,P<0.01)。结论肾气丸可通过提高衰老大鼠血清睾酮水平、增强睾丸组织抗氧化能力及降低其生精细胞的凋亡指数,发挥延缓性腺衰老的作用。     

自身免疫性甲状腺疾病甲状腺组织中凋亡调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达及意义

目的探讨凋亡调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax在Graves病(GD)和桥本氏病(HT)中的表达及意义。方法取外科手术切取的GD及HT病人甲状腺组织标本,颈部手术时取正常甲状腺组织作为对照;采用免疫组织化学方法检测甲状腺标本Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达和分布状况。结果(1)Fas/FasL在GD和HT甲状腺滤泡上皮细胞表达均较正常对照组增高(P<0.01)。(2)在GD甲状腺滤泡上皮细胞Bcl-2及Bax表达明显高于HT组及正常对照组,以Bcl-2表达强度显著高于同组Bax(P<0.01),而在HT,Bcl-2表达强度与正常对照组比较差异无统计学意义。(3)GD与HT相比较,GD甲状腺滤泡细胞及浸润淋巴细胞Fas,Bcl-2抗原表达均强于HT,但其浸润淋巴细胞表达强度明显低于同组甲状腺滤泡细胞(均P<0.05)。结论Fas/FasL高表达和Bcl-2的低表达可能引起HT甲状腺滤泡上皮细胞的凋亡。在GD,Fas、Bax诱导细胞凋亡的作用可能被高表达Bcl-2对抗,从而致甲状腺体积增大、功能亢进。此外,Bcl-2与Bax表达强度的比值对于凋亡的调控有重要影响作用。     

rhEPO对视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜神经细胞凋亡及Fas、FADD表达的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）对视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）所致视网膜神经细胞凋亡的保护作用及机制。方法将52只Wistar大鼠随机分为对照组4只,不行特殊处理;模型组和观察组各24只,均通过前房穿刺加压法制成RIRI模型,并分别于缺血前24h腹腔注射生理盐水和rhEPo,于1～72h应用末端脱氧核酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记（TUNEL）法检测视网膜神经细胞凋亡,采用过氧化物酶标记的sP免疫组化方法检测Fas、Fas相关蛋白（FADD）表达。结果对照组未见细胞凋亡及Fas、FADD表达。观察组与模型组视网膜神经细胞凋亡及Fas、FADD表达均出现于再灌注后6h,24h达到高峰,48h开始下降,其中观察组细胞凋亡在12、24、48h明显低于模型组（P〈0．05）,Fas、FADD表达在6、12、24h明显低于模型组（P〈0．05）。结论rhEPO可明显减轻RIRI所致大鼠视网膜神经细胞凋亡,可能机制为下调Fas、FADD表达。     

中、轻度碘过量对大鼠甲状腺滤泡上皮凋亡及Fas/FasL表达的影响

目的探讨中、轻度碘过量对碘缺乏和非碘缺乏Wistar大鼠甲状腺滤泡上皮细胞凋亡及Fas/FasL表达的影响。方法碘缺乏大鼠以饲过氯酸钾制备饲料,随机分成3个组,补碘量分别为0、840、1680μg/L。非碘缺乏大鼠随机分成补碘量分别为0、280、560、840、1680、2800和5600μg/L组。脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导原位缺口末端标记(TUNEL)确定细胞凋亡数。免疫组化和原位杂交法观察Fas/FasL表达。结果①碘缺乏大鼠:与补碘0μg/L组相比,饮水碘840μg/L组7d和90d时Fas表达明显降低,P分别<0.01和0.001。FasL的表达也下降,但差异无统计学意义。细胞凋亡数在补碘21d和90d有显著降低,P均<0.05。补碘90d时Fas鄄mRNA和FasL鄄mRNA表达明显低于0μg/L组,P<0.001。②非碘缺乏大鼠:补碘90d时,840、1680、2800、5600μg/L组Fas和FasL表达明显高于280和560μg/L组,P<0.001。840、2800和5600μg/L补碘组细胞凋亡数明显高于280和560μg/L组,P<0.001。补碘组Fas鄄mRNA表达明显高于碘0μg/L组,P<0.001,FasL鄄mRNA表达与0μg/L组相比差异无统计学意义。结论过量碘(尿碘中位数>300μg/L)补碘90d,使碘缺乏机体甲状腺滤泡上皮细胞凋亡数和Fas表达明显减少,非碘缺乏机体甲状腺滤泡上皮细胞凋亡数、Fas和FasL的表达均明显增加。     

肾气丸对非酒精性脂肪性肝炎大鼠Bcl-2/Bax、Fas/FasL信号通路的影响

目的:观察Bcl-2/Bax、Fas/Fas L介导的信号转导通路在高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠的作用及肾气丸对其的影响。方法:采用高脂饲料连续喂养12周建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型,同时以肾气丸进行干预12周。HE染色观察大鼠肝组织病理组织学变化,免疫组织化学检测肝组织中Fas、Fas L、Bcl-2、Bax、Caspase-8蛋白的表达;Realtime-PCR法检测肝组织Caspase-8 mRNA表达。结果:模型组大鼠肝组织Bcl-2、Bax、Fas、Fas L蛋白以及Caspase-8 mRNA和蛋白表达均较正常组显著增加(P<0.01),Bcl-2/Bax比值较正常组明显的降低(P<0.05);大鼠肝组织Caspase-8蛋白表达与Fas、Fas L蛋白表达均呈明显正相关(r分别为0.907、0.804,P均<0.01);予以肾气丸干预后,Bax、Fas、Fas L蛋白的表达以及Caspase-8 mRNA和蛋白的表达均较模型组明显的降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值较模型组明显的增加(P<0.05),Bcl-2蛋白的表达与模型组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:肾气丸可能通过影响Bcl-2/Bax、Fas/Fas L信号转导通路,下调Bax、Fas、Fas L、Caspase-8表达,减少肝细胞的脂性凋亡,从而防治大鼠非酒精性脂肪性肝炎的发生发展。     

慢性砷中毒大鼠模型肾小球细胞凋亡及Fas表达的影响分析

<正>慢性砷中毒为砷中毒的一种,主要由砷化合物引起,其中以三氧化二砷即砒霜引起的中毒。该疾病表现为神经衰弱症状,除此之外多表现为多样性皮肤损害,长期接触砷的人其肺癌、胃癌等发病率大大增加。1材料与方法1.1材料冰冻切片机(德国Leica);石蜡切片机(德国Leica)IPWIN图像分析软件,LEICADME计算机图像分析系统(上海徕卡公司)。三氧化二砷,分析纯(北     

愈肾合剂对糖尿病肾病大鼠肾脏细胞凋亡及Fas、Fas-L表达的影响

目的探讨愈肾合剂对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡的影响。方法诱发糖尿病肾病模型大鼠，每日灌喂愈肾合剂。8W后检测肾脏细胞凋亡情况。结果愈肾合剂能够明显干预细胞周期G0／G1期和S期的进程。降低PI，抑制细胞的过度增殖。下调Fas及Fas—L表达。减少肾脏细胞凋亡的数目。结论愈肾合剂能够有效的抑制肾脏细胞的凋亡。     

大鼠胸主动脉球囊损伤对细胞凋亡及凋亡相关基因Fas、Bcl-2表达的影响

目的探讨大鼠胸主动脉球囊损伤后细胞凋亡和凋亡相关基因表达的变化规律。方法将30只400~500 g的雄性SD大鼠随机分为2组,手术组(n=24)行球囊扩张损伤大鼠胸主动脉术;对照组(n=6)不行球囊损伤,作为正常对照。分别于术后2、7、14、28 d取胸主动脉应用HE染色、TUNEL法、免疫组化和计算机图像分析仪进行形态学、细胞凋亡、增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡基因Fas;抗凋亡基因Bcl-2表达水平检测。结果对照组管壁处于非增殖状态;手术组球囊损伤后7 d形成新生内膜,血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活跃;14 d内膜明显增厚,但VSMC增殖已减弱;28 d内膜继续缓慢增厚,管腔明显狭窄。动脉损伤后Fas表达和TUNEL法测定的凋亡规律一致,两周内凋亡较明显,但细胞凋亡高峰时间(中膜7 d、内膜14 d)迟于增殖高峰(中膜2 d、内膜7 d),两周后凋亡与增殖均明显下降。动脉损伤后抗凋亡基因Bcl-2表达下调,在中膜和内膜分别在7 d1、4 d达最低水平,后回升,与凋亡基因Fas表达呈明显负相关(r=-0.878,P<0.001)。结论动脉球囊损伤后,平滑肌细胞的凋亡呈现规律性变化,可能在管腔狭窄的病理过程中具有重要作用。     

松果菊苷对衰老大鼠生精细胞胰岛素通路IRS1、IGF-1、IGFBP3基因表达的影响

目的探讨松果菊苷对衰老大鼠生精细胞胰岛素信号通路胰岛素受体底物(IRS)1、胰岛素样生长因子(IGF)-1、IGF结合蛋白(IGFBP)3基因表达的影响。方法选用原代大鼠生精细胞为研究对象,采用自由基损伤的方法建立细胞衰老模型。运用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western印迹、免疫荧光技术,观察松果菊苷对生精细胞胰岛素信号传导通路关键基因IRS1、IGF-1、IGFBP3 mRNA和蛋白表达变化。结果衰老组IRS1、IGF1的荧光免疫染色的平均光密度明显低于正常组(P0.05),IGFBP3平均光密度明显高于正常组(P0.05),Western印迹半定量分析结果与荧光免疫结果一致。衰老组IRS1、IGF1 mRNA表达水平明显低于正常组(P0.05),IGFBP3 mRNA表达水平明显高于正常组(P0.05)。松果菊苷干预后生精细胞中IRS1,IGF1 mRNA和蛋白表达明显高于衰老组(P0.05),IGFBP3表达明显低于衰老组(P0.05)。结论松果菊苷可通过降低IGFBP3表达,提高IRS1,IGF1表达,延缓生精细胞的衰老状态。     

瘦素、脂肪酸对大鼠胰岛细胞解偶联蛋白2 mRNA表达的影响

以瘦素、脂肪酸作用于体外培养的大鼠胰岛细胞，以甘油三酯含量，解偶联蛋白2 mRNA表达水平为指标，显示瘦素通过外周途径调节产热，脂肪酸可损害胰岛功能。     

三七总皂甙对大鼠脑出血后脑血流及细胞凋亡的影响

目的 探讨大鼠实验性脑出血后脑组织局部脑血流的变化及神经细胞凋亡发生的规律，观察三七总皂甙对出血性脑损伤的保护作用。方法 采用Nath改良法建立大鼠脑出血模型，氢清除法测定其局部脑血流，用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡。结果 出血后1h全脑的血流量均下降，4h恢复至对照组水平，并维持至出血后24h，出血后48h再次出现脑血流下降。而干预组脑血流下降不明显，但较脑出血组有统计学意义（P〈0．05）。大鼠脑出血24h后脑组织TUNEL阳性细胞数表达显著增高，与脑出血模型组比较，干预组TUNEL阳性细胞数显著减少（P〈0．01）。结论 三七总皂甙可减轻脑出血后继发性的缺血性损害，并有抑制细胞凋亡的作用。     

替普瑞酮对烧伤大鼠胃黏膜热休克蛋白和诱生型一氧化氮合酶表达的影响

替普瑞酮是树木浆液中含有的萜烯衍生物，具有组织修复作用，据文献报道替普瑞酮可诱导产生热休克蛋白(HSP)，以往的研究多集中于其对乙醇、束缚水浸应激、幽门螺杆菌等引起的胃黏膜损害。本研究通过建立烧伤大鼠急性胃黏膜损伤模型，观察替普瑞酮对严重烧伤大鼠胃黏膜HSP60、HSP70和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响，探讨其保护作用和机制。     

三七总皂苷对大鼠脑出血后肢体功能和MAP-2及GAP-43表达水平的影响

目的研究注射三七总皂苷能否促进大鼠脑出血后的肢体功能恢复并从神经可塑性角度探讨其机制。方法采用Ⅶ胶原酶注入大鼠右侧尾状核方法复制脑出血模型,随机分为假手术组、模型组、治疗组。治疗组大鼠术后24h腹腔注射三七总皂苷50mg/kg,共7d。采用LongaEZ评分观察大鼠肢体功能恢复情况,免疫组化法观察脑出血周边微管相关蛋白-2(MAP-2)和生长相关蛋白-43(GAP-43)的活性强度。结果术后24h模型组和治疗组大鼠神经缺损评分和假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗组第7天神经缺损评分与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。且治疗组血肿周边MAP-2、GAP-43表达水平高于模型组(P<0.05)。结论大鼠脑出血后注射三七总皂苷能促进肢体功能恢复,其机制可能与血肿周边MAP-2、GAP-43的表达上调有关。     

补阳还五汤提取物灌胃对脑出血大鼠脑组织中PI3K、AKT、Caspase-3表达的影响

目的 观察补阳还五汤提取物对脑出血大鼠脑组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丝/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达的影响,探讨其对脑组织的保护作用机制。方法 将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组各18只,后4组采用Rosenberg法建立脑出血大鼠模型后,分别给予生理盐水、补阳还五汤提取物、银杏叶片连续灌胃35 d。用免疫组化法检测PI3K、AKT、Caspase-3蛋白表达,TUNEL法检测脑组织细胞凋亡情况,干湿重法检测脑组织含水量,甲酰胺法检测血-脑脊液屏障通透性。结果 与模型组比较,补阳还五汤组、银杏叶片组PI3K、AKT蛋白表达水平升高,Caspase-3蛋白表达水平降低,脑组织含水量、凋亡细胞数减少,血-脑脊液屏障通透性降低(P均<0.05)。结论 补阳还五汤提取物可能通过激活PI3K/AKT信号通路,降低血-脑脊液屏障通透性来保护脑出血大鼠脑组织。     

化痰祛瘀止血汤联合西药治疗对混合性中风大鼠核转录因子-κB表达的影响

目的 通过化痰祛瘀止血汤干预混合性中风大鼠急性期实验研究,探明其药理效应及作用机制.方法 采用改良的Longa线栓法制作左侧局灶性脑缺血模型与右侧自体血注入脑出血模型相结合的方法建立混合性中风大鼠模型,检测脑组织含水量及核转录因子κB(NF-κB)水平.结果 中药(化痰祛瘀止血汤)组、西药组及中西药结合组均可降低脑组织含水量及NF-κB 水平,且以中西药结合组作用最优(P<0.05).结论 化痰祛瘀止血汤联合西药对混合性中风大鼠急性期炎症反应、细胞凋亡、脑水肿及神经元损伤均有治疗作用,其机制可能与降低脑内NF-κB 水平有关.     

塞来昔布对大鼠癫痫持续状态海马神经元凋亡及Bcl-2表达的影响

目的探讨塞来昔布对大鼠癫痫持续状态（SE）后海马神经元凋亡的影响及其可能机制。方法采用氯化锂-匹罗卡品制作大鼠癫痫持续状态模型。Wistar大鼠54只，随机分为模型组、塞来昔布组和对照组。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）观察SE后12h、24h、72h和7d海马神经细胞凋亡的动态变化，免疫组化法观察各组海马Bcl-2的表达。结果对照组未见TUNEL阳性细胞；模型组SE后12h可见较多TUNEL阳性细胞，72h达高峰，7d减少；塞来昔布组各时间点凋亡细胞数均明显少于模型组（P〈0．01）。对照组Bcl-2有基础量的表达；模型组SE后12h观察到Bcl-2表达增多，24h减弱，72h后仅有少量表达；塞来昔布组24h后各时间点Bcl-2表达均高于模型组（P〈0．01）。结论塞来昔布可增加海马Bcl-2的表达，对癫痫发作后神经元凋亡具有保护作用。     

芍药苷对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡相关基因的影响

目的 探讨芍药苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注后缺血区神经元凋亡的影响.方法 建立大鼠MCAO模型模拟局灶性脑缺血再灌注损伤,观察芍药苷对脑缺血再灌注损伤后动物的神经行为学评分;TUNNEL法检测神经元凋亡的数量改变;用WESTERBLOT法及免疫组化法检测β-P38、Fas的表达改变.结果 假手术组无神经行为改变,各用药组神经行为学评分明显低于缺血再灌注组(P<0.01),用药组间无统计学意义.与假手术组相比,缺血再灌注组大鼠缺血侧脑组织TUNEL阳性细胞及Fas阳性细胞增多(P<0.01).与模型组相比,各用药组TUNEL阳性神经细胞及Fas阳性细胞表达明显减少(P<0.01).大鼠脑缺血再灌注后脑组织磷酸化P38蛋白表达明显增加,注射药物后蛋白磷酸化被抑制,表达减少.结论 芍药苷可改变大鼠脑缺血后的神经行为,抑制P38蛋白的表达,下调Fas蛋白表达,有抗神经元凋亡作用.     

外源性碱性成纤维细胞生长因子对吸烟大鼠脑细胞凋亡及p53表达的影响

目的研究外源性碱性成纤维细胞生长因子对吸烟大鼠脑细胞凋亡及p53表达的影响。方法将40只大鼠随机平均分为正常对照组、长期大量吸烟组（燃烧香烟10支&#215;2次／d，共90d）、短期大量吸烟组（燃烧香烟10支&#215;2次／d，共45d）、吸烟＋bFGF组（燃烧香烟10支&#215;2次／d，共90d，吸烟最后15d经腹腔内注射bFGF 200μg／m1），每组10只。采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL法）及免疫组化法检测细胞凋亡和p63蛋白表达。结果各吸烟组脑细胞凋亡及p53蛋白表达较对照组明显增加（P〈0．01），凋亡细胞数量和p53蛋白表达强度随吸烟时间和剂量增加而增加。bFGF治疗组大鼠脑细胞凋亡数及p63蛋白表达较单纯吸烟组明显减少（P〈0．01）。结论吸烟可使大鼠脑细胞凋亡及p53蛋白表达增加，细胞凋亡及p53蛋白表达强度与吸烟时间及数量相关，bFGF通过抑制p63表达减少细胞凋亡。