体外阻断CD134对LN患者外周血单个核细胞TH1/TH2细胞因子表达的影响

目的 探讨CD134／CD134L共刺激分子对TH1，TH2细胞因子表达的影响及在狼疮性肾炎（LN）发病机制中的可能作用。方法活动期LN患者10例，分别采取外周静脉血，用密度梯度离心法制备新鲜PBMC，分成6组：（1）对照培养组；（2）单纯刺激组；（3）抗CD134组；（4）抗Ⅱ，4组；（5）rhCD134：Fc组；（6）地塞米松（Dex）组。另选取10例健康体检者作为健康对照组。采用ELISA法分别测定培养液上清中IFN-γ、IL-4、IL-10表达水平。结果（1）在抗CD3ε单抗／rIL-2刺激前，活动期LN患者PBMC培养液上清分泌的IFN-γ、IL-4和IL-10水平都明显高于健康对照组；（2）在抗CD3ε单抗／rIL-2刺激下，活动期LN患者PBMC分泌的IFN-γ，4和IL-10又较刺激前明显增加；（3）抗IL-4单抗、抗CDl34单抗均可使经抗CD3ε单抗／rIL-2刺激的LN患者PBMC分泌IL-4、IL-10水平显著下降，导致IFN-γ水平显著增高，免疫应答朝TH1方向偏离；（4）Dex能显著抑制抗CD3ε单抗／rIL-2刺激的原代培养PBMC中IL-4、IFN-γ的分泌水平，但对IL-10的产生并没有明显的抑制或促进作用；（5）rhCD134：Fc能显著降低抗CD3ε单抗／rIL-2刺激的原代培养PBMC中IFN-γ及IL-4、IL-10的分泌水平，对TH1和TH2细胞因子的产生都有显著抑制作用。结论糖皮质激素的抗炎机制具有多重性，对TH1、TH2细胞因子的作用并不均衡；抗CD134单抗对减轻LN患者PBMC的异常活化有一定作用；CD134-IgG融合蛋白与抗CD134单抗相比，抑制作用更明显，对急性期LN有更好的治疗作用。     

脂多糖和金黄色葡萄球菌对IL-23、IL-12表达的调控

目的：检测脂多糖（LPS）和金黄色葡萄球菌（SAC）对人外周血单个核细胞（PBMC）IL-23和IL-12各亚基表达的调节作用并探索其作用机制。方法：用LPS和SAC直接刺激人PBMC，或用CD14抗体或p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）抑制剂Mastoparan预处理PBMC后再予LPS和SAC刺激，半定量RT-PCR方法检测IL-23p19、IL-12p35和IL-12p40亚基的基因表达变化。结果：人PBMC组成性表达p19和p35，不表达p40。LPS和SAC可上调各亚基的表达。LPS诱导的IL-23和IL-12各亚基表达均需通过CDl4；CDl4仅部分参与SAC诱导的IL-12p40和p35表达上调，而与p19上调无关。LPS和SAC诱导的IL-23和IL-12各亚基表达均需要p38MAPK通路。结论：LPS和SAC刺激下IL-23和IL-12亚基表达及信号传导通路既有相似之处又有不同点，为单独或同时调控这两种因子的表达提供线索。     

IL-4、IL-10和抗IL-12受体β1 mAb抑制IL-23诱导正常人记忆T细胞 IFN-γ产生

目的 探讨重组人白介素23（IL-23）是否能够诱导正常人T细胞IFN-γ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法 正常人PBMC在抗CD3（anti-CD3）单克隆抗体或anti-CD3和抗CD28（anti-CD28）单克隆抗体刺激的条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养液中IFN-γ的水平;同时采用流式细胞仪,在单个细胞水平上分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的T细胞亚群。结果 在未经任何刺激的情况下,PBMC产生很低或不产生IFN-γ。IL-23呈剂量依赖方式促进由anti-CD3活化的PBMC IFN-γ产生。细胞亚群分析的结果表明,IL-23诱导记忆CD4^＋和CD8^＋T细胞表达IFN-γ,对活化的CD4^＋T细胞作用较为明显。Th2细胞因子（IL-4、IL-10）和抗IL-12受体β1 mAb（IL-12Rβ1）抑制IL-23诱导T细胞IFN-γ产生。结论 IL-23促进活化的记忆CD4^＋和CD8^＋T细胞IFN-γ的产生。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1 mAb抑制由IL-23诱导IFN-γ产生,提示这些细胞因子和抗体对IL-23引起的自身免疫病具有拮抗作用。     

环磷酰胺冲击疗法对狼疮性肾炎血清IL—6的影响

目的探讨白介素-6(IL-6)在狼疮性肾炎(LN)发病中的作用及大剂量环磷酰胺静脉给药(IV-CTX)对IL-6产生的影响.方法应用ELISA双抗体夹心法对IV-CTX治疗前后LN患者血清IL-6水平进行检测.结果活动期LN血清IL-6水平显著高于非活动期及健康人(P＜0.001),血清IL-6水平与血沉呈显著正相关(n=22,r=0.570,P＜0.01);抗ds-DNA抗体阳性且血清IgG＞16g/L的LN患者有更高的血清IL-6水平(P＜0.05);活动期LN治疗4w后血清IL-6水平显著下降(P＜0.001).结论LN的B细胞过度活化和自身抗体产生可能与IL-6分泌过量有关.IV-CTX可能通过抑制IL-6的产生而减轻免疫损伤,血清IL-6检测有助于监视狼疮活动和免疫抑制剂疗效.     

粘附分子在过敏性紫癜患者血管内皮细胞中的作用探讨

目的：探讨粘附分子在过敏性紫癜血管炎性损伤中的作用及可能的调节机制。方法：建立人脐静脉内皮细胞（human umbilical veins endothelial cell，HUVEC）体外培养模型，ELISA双抗体夹心法检测过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞（PBMC）培养上清液炎性细胞因子IL-6、TNF-α的含量。采用流式细胞仪间接荧光免疫法检测PBMC及其所诱导的HUVEC粘附分子的表达；MTT生物活性检测法测定PBMC与HUVEC间的粘附率。结果：过敏性紫癜患儿PBMC及其培养上清可诱导内皮细胞表面粘附分子表达明显增强，PBMC与内皮细胞间的粘附率明显提高，上述粘附作用可被抗粘附分子抗体明显阻断。同时IL-6、IL-1β、TNF-α等炎性细胞因在过敏性紫癜患儿外周血中异常升高，用抗细胞因子的单克隆抗体可明显阻滞过敏性紫癜患儿外周血免疫活性细胞及其所诱导的局部血管内皮细胞上粘附分子的表达和内皮细胞与PBMC间相互粘附作用。结果：（1）粘附分子通过介导全身循环中的免疫效应细胞粘附于血管内皮细胞，在过敏性紫癜血管损伤的病理生理机制中起重要作用。（2）IL-6、IL-1β、TNF-α等炎性细胞因子可能作为过敏性紫癜血管损伤的重要环节，在诱生免疫活性细胞及血管内皮细胞多种粘附分子的表达、介导免疫活性细胞向血管局部聚集及进一步向血管深层浸润最终导致内皮细胞损伤中起重要作用。     

白细胞介素-15在狼疮性肾炎活动病变中的临床意义

目的：检测狼疮肾炎(LN)患者外周血白细胞介素15（IL-15）水平，并进一步分析其与临床有关指标的关系及治疗前后的变化。方法：用酶联免疫吸附法（ELISA）方法检测外周血IL-15水平；采用梯度密度离心法分离外周血单个核细胞(PBMCs)；并研究地塞米松对体外培养的活动期LN患者PBMCs分泌IL-15、IgG和dsDNA抗体的影响。结果：（1）LN组患者血清IL-15水平显著高于正常对照组(P<0.01)，活动期LN患者血清IL-15水平显著高于缓解期患者(P<0.05)。（2）活动期LN患者血清IL-15水平与SLE活动性指数(SLEDAI)、抗dsDNA抗体、24 h尿蛋白排泄量呈正相关关系，与补体C3呈负相关关系，而与血肌酐无相关关系。（3）激素联合环磷酰胺系统治疗活动期LN患者12周，治疗后随病情缓解血清IL-15水平明显下降。（4）体外培养的活动期LN患者PBMCs分泌IL-15、IgG、dsDNA抗体均显著高于正常对照组，而且IL-15分泌与dsDNA抗体和IgG合成呈正相关关系；地塞米松可明显抑制活动期LN患者PBMCs合成IL-15、IgG、dsDNA抗体。结论：LN患者外周血IL-15水平显著增高,IL-15可能参与LN的病理生理过程；血清IL-15水平检测可作为判断LN是否活动的指标之一。     

狼疮肾炎患者外周血单个核细胞IL-17信号转导途径的初步研究

目的:了解IL-17及其信号转导成分JNK活化状态在狼疮肾炎(LN)发病机制中作用。方法:活动期LN病人15例,分离、培养外周血单个核细胞(PBMC);ELISA法检测上清液IL-6蛋白水平;逆转录多聚酶链反应法检测IL-6mRNA水平;蛋白印迹法检测JNK活性。结果:IL-17刺激下,LN患者PBMC反应性明显增强,各浓度点IL-6蛋白水平明显高于正常对照(均P<0.05)。LN患者PBMCIL-6mRNA表达水平明显高于对照组(无刺激培养:1.80±0.11vs0.36±0.07,P<0.01;刺激培养:3.21±0.24vs1.30±0.14,P<0.05);正常对照或LN患者刺激培养组PBMCIL-6mRNA表达水平均明显高于其无刺激培养组(对照:1.30±0.14vs0.36±0.07,P<0.05;LN患者:3.21±0.24vs1.80±0.11,P<0.01)。LN患者PBMCJNK活性水平明显高于对照组(无刺激培养:3.21±0.32vs1.00,P<0.01;刺激培养:4.82±0.39vs1.21±0.35,P<0.01);LN患者的刺激培养组PBMCJNK活性水平明显高于LN对照培养组(4.82±0.39vs3.21±0.32,P<0.01)。活动性LN病人PBMCJNK活性高低与其SLEDAI和IL-6mRNA水平均呈显著正相关。结论:IL-17介导LN患者PBMC过度表达、分泌IL-6可能是其参与LN的发病机制之一,JNK的活化在IL-17信号转导中具有重要作用。     

体外CDl34L单抗或CTLA4Ig对狼疮样BXSB小鼠脾细胞分泌IL-6、IFN-γ及自身抗体的影响

目的：探讨体外CD134L单抗或CTLA4Ig对狼疮样BXSB小鼠脾细胞分泌IL-6、IFN-γ及自身抗体的影响。方法：采用未经治疗的狼疮样BXSB小鼠模型，应用CDl34L单抗和／或CTLA4Ig体外特异性阻断CDl34-CDl34L或B7-CD28通路后，用MTT法测定分裂原刀豆蛋白A（ConA）诱导的脾淋巴细胞增殖反应和用ELISA方法测定ConA诱导的脾细胞培养上清液中IL-6、IFN-γ和抗ds-DNA抗体的表达水平，并与经中药狼疮方或强的松治疗的狼疮样BXSB小鼠模型进行比较。结果：（1）在单纯培养或经ConA刺激后培养，相比于正常对照鼠，狼疮样小鼠脾淋巴细胞都表现有增殖反应性的显著增高，IFN-γ、IL-6蛋白量的增高和抗ds-DNA抗体的过度分泌。（2）经强的松或中药狼疮方体内治疗后，狼疮样小鼠脾淋巴细胞体外培养的增殖反应性及IFN-γ、IL-6的分泌都受到明显抑制，抗ds-DNA抗体的产生也明显减少。（3）体外单独应用CD134L单抗或CTLA41g特异性阻断CD134-CD134L或B7-CD28共刺激信号通路，同样可以显著抑制体外培养的狼疮样小鼠脾淋巴细胞的增殖反应及IFN-γ、IL-6的分泌，并可明显减少抗ds-DNA抗体的产生，但它们的抑制作用比强的松、中药狼疮方体内治疗狼疮样小鼠时所表现出的类似效应要弱。（4）联合CD134L单抗和CTLA4Ig，则治疗作用显著提高，其抑制脾淋巴细胞的增殖反应及IFN-γ、IL-6的分泌，抗ds-DNA抗体产生的作用都优于中药狼疮方的体内治疗效果，而与强的松的体内治疗效应相当。结论：CD134-CD134L可以提供独立的、非B7-CD28依赖的，另一种驱动抗原特异性T细胞增殖的协同刺激通路。同时阻断B7与CD28、CD134L与CD134间的相互作用，使自身反应性T淋巴细胞的活化和增殖受到快速而最大限度的抑制，对治疗SLE等自身免疫性疾病可能是一种较理想的免疫干预模式。     

P13K信号途径在哮喘患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的：初步了解磷脂酰肌醇3激酶（P13K）在急性发作期哮喘患者外周血单个核细胞（PBMC）中的活化情况，并观察其特异性抑制剂（Wortmannin）对Th1、Th2型细胞因子IFN-γ和IL-4表达的影响，探讨PI3K信号途径在哮喘T细胞免疫紊乱中可能的作用机制。方法：以20例急性发作期哮喘患者作为实验组，15例健康人为对照组。PBMC提取采用Ficoll密度梯度离心法，半定量RT-PCR法测定PBMC中PI3KmRNA的表达，ELISA法测定不同浓度组Wortmannin处理的PBMC培养上清液中IFN-γ、IL-4水平。结果：与对照组相比，急性发作期哮喘患者PI3KmRNA表达增高（P〈0．05）。哮喘患者PBMC培养上清液IFN-γ水平低下、IL-4水平升高，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05和P〈0．01）；同时加入不同浓度Wortmannin共培养后，实验发现均浓度依赖性地抑制了哮喘组及对照组IL-4的产生（P〈0．05或P〈0．01），而同组不同浓度梯度组间比较IFN-γ产生升高，但差异无统计学意义。结论：哮喘患者急性发作时可能存在PI3K信号途径的过度活化，其过度活化对Th1型细胞因子IFN-γ影响不明显，有可能主要通过介导Th2型细胞因子IL-4的产生而参与Th1／Th2的失衡。     

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白抑制狼疮肾炎患者外周血单个核细胞B7分子表达及抗体产生

目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白(CTLA-4Ig)对活动期狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMC)细胞表面B7-1(CD80)和B7-2(CD86)表达的影响及其对抗双链DNA(dsDNA)抗体和免疫球蛋白产生的影响.方法 将18例活动期LN患者的抗凝血标本随机分为LN的CTLA-4Ig处理组(LN-T组9例)和普通培养组(LN-NC组9例).另以14例正常人的抗凝血标本为对照,随机分为正常人的CTLA-4Ig处理组(NC-T组7例)和普通培养组(NC-NC组7例).用密度梯度离心法分离PBMC.处理组加入CTLA-4Ig(10 ng/L)、普通培养组加入等量普通培养基37℃孵育72 h后,采用流式细胞仪技术检测PBMC细胞表面B7-1和B7-2分子的表达;ELISA法检测孵育液中抗dsDNA抗体、IgG及IgM水平.结果 活动期LN患者CTLA-4Ig处理组与普通培养组比较,PBMC表面B7-2分子表达明显下降(P＜0.01);B7-1分子表达无显著变化(P＞0.05);孵育液中抗dsD-NA抗体、IgG及IgM的生成均明显减少(P＜0.01).而正常人的两组间各指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 CTLA-4Ig可抑制活动期LN患者的PBMC表面B7-2分子的表达,并可减少其抗dsDNA抗体、IgG及IgM的分泌.     

Clinical relevance of circulating anti‐ENA and anti‐dsDNA secreting cells from SLE patients and their dependence on STAT‐3 activation

Disturbances of plasma cell homeostasis and auto‐antibody production are hallmarks of systemic lupus erythematosus. The aim of this study was to explore the presence of circulating anti‐ENA and anti‐dsDNA antibody‐secreting cells, to determine their dependence on plasma cell‐niche cytokines and to analyze their clinical value. The study was performed in SLE patients with serum anti‐ENA and/or anti‐dsDNA antibodies (n = 57). Enriched B‐cell fractions and sorted antibody‐secreting cells (CD19^lowCD38^high) were obtained from blood. dsDNA‐ and ENA‐specific antibody‐secreting cells were identified as cells capable of active auto‐antibody production in culture. The addition of a combination of IL‐6, IL‐21, BAFF, APRIL, and CXCL12 to the cultures significantly augmented auto‐antibody production and antibody‐secreting cell proliferation, whereas it diminished apoptosis. The effect on auto‐antibody production was dependent on STAT‐3 activation as it was abrogated in the presence of the JAK/STAT‐3 pathway inhibitors ruxolitinib and stattic. Among patients with serum anti‐dsDNA antibodies, the detection of circulating anti‐dsDNA‐antibody‐secreting cells was associated with higher disease activity markers. In conclusion, auto‐antibody production in response to plasma cell‐niche cytokines that are usually at high levels in SLE patients is dependent on JAK/STAT‐3 activation. Thus, patients with circulating anti‐dsDNA antibody‐secreting cells and active disease could potentially benefit from therapies targeting the JAK/STAT3 pathway.     

IL-12对狼疮肾炎PBMC中信号传递分子STAT_3、STAT_4的作用

目的 :为了探讨IL 12对狼疮肾炎PBMC发挥生物学作用的细胞内信号传递机制。方法 :采用MTT、免疫沉淀、免疫印迹等方法 ,检测IL 12对PBMC增殖及STAT3、STAT4的作用 ,并比较在狼疮肾炎活动期、静止期的差别。结果 :发现与正常人对照及静止期相比 ,IL 12对活动期PBMC不需要IL 2的预诱导 ,可促进PBMC增殖并在短时间内激活STAT3、STAT4,而IL 2对STAT4无作用。结论 :表明IL 12对PBMC的作用可通过STAT3、STAT4途径发挥 ,活动期PBMC存在异常活化 ,这可能是IL 12促进狼疮肾炎PBMC参与发病的细胞内机制之一     

Role of podoplanin in the high interleukin‐17A secretion resulting from interactions between activated lymphocytes and psoriatic skin‐derived mesenchymal cells

In the context of psoriasis, T helper type 17 (Th17) cells infiltrate the inflammatory site and interact with local mesenchymal cells, including skin fibroblasts. The aim of this work was to study the interactions of skin‐derived fibroblasts with peripheral blood mononuclear cells (PBMC) with a focus on the Th17 pathway and to identify a mechanism which leads to a high interleukin (IL)?17 secretion. A co‐culture system between PBMC and skin fibroblasts was developed. Healthy and patient PBMC were added to non‐lesional or lesional skin fibroblasts at a 5:1 ratio for 48 h in the presence or not of activation with phytohaemagglutinin (PHA). Monocytes were removed or not by adherence before the co‐culture. An anti‐podoplanin antibody was also used during the co‐culture. Cytokine production (IL‐8, IL‐6, IL‐1β and IL‐17) was measured by enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) and cell staining (CD3, CD4, IL‐17 and podoplanin) by flow cytometry. Without T cell receptor (TCR) activation, IL‐8, IL‐6 and IL‐1β production increased in PBMC‐fibroblast co‐culture compared to PBMC alone. No additional effect was observed with TCR activation, with no difference in the Th17 cell percentage in activated‐PBMC alone or co‐cultured. Conversely, IL‐17 production was increased highly only in co‐cultures between control and patient activated‐PBMC and skin fibroblasts. Removal of monocytes decreased cytokine production, notably that of IL‐17. Addition of an anti‐podoplanin antibody decreased IL‐17 secretion by 60%. Interactions between resting PBMC and fibroblasts induce the IL‐8, IL‐6 and IL‐1β production. PBMC activation and cell interactions are critical for a high IL‐17 secretion. Podoplanin contributes largely to this massive IL‐17 secretion.     

系统性红斑狼疮患者血清抗dsDNA抗体的表达水平变化及临床意义分析

目的：通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患者血清中抗dsDNA抗体,探讨抗dsDNA抗体在SLE的诊断与治疗中的临床意义。方法：用间接结合的放射性核素检测法（radioisotopic methods）检测SLE患者及疾病对照组（原发性干燥综合征,系统性硬化征,类风湿关节炎,多发性肌炎,混合性结缔组织病,强直性脊柱炎等）血清中的抗dsDNA抗体,同时评估SLE患者的各种临床表现（SLEADI）及实验室指标,并分析其与抗dsDNA抗体的相关性。结果：①60例SLE患者中有39例抗dsDNA抗体为阳性,阳性率为65%,抗dsDNA抗体,在33例对照组中有2例为阳性,阳性率为6.7%,抗dsDNA抗体在SLE的敏感性为65%,特异性为93.3%;②抗dsD-NA抗体与Sm抗体无相关性（P〉0.05）;与抗SSA抗体有相关性（P〈0.05）;③抗dsDNA抗体阳性患者的脱发,皮疹,口腔溃疡,蛋白尿等临床表现的发生率明显高于阴性患者（P〈0.05）;④抗dsDNA抗体阳性患者的白细胞、血小板降低等的发生率明显高于阴性患者,差异有绝对统计学意义（P〈0.05）。结论：抗dsDNA抗体作为SLE的特异性标记的抗体,其表达与疾病的活动性及严重程度密切相关。     

LFA-1与抗CD3 mAb共刺激对狼疮肾炎PBMC增殖和IgG合成的影响

目的 :探讨LFA 1与抗CD3mAb共刺激对狼疮肾炎 (LN)患者外周血单个核细胞 (PBMC)增殖与免疫球蛋白 (IgG)合成的影响。方法 :分离LN患者及健康人 (正常对照 )的PBMC ,采用Ficoll梯度密度离心法。细胞增殖实验采用3 H TdR掺入法。IgG测定采用ELISA法。结果 :在抗CD3mAb诱导下 ,2 9例LN非活动期和活动期PBMC中 ,3 H TdR的掺入量和IgG的合成均增加 ,且活动期的增殖强于非活动期 (P <0 .0 1) ;而单纯用抗CD3mAb对 12例正常对照的PBMC没有影响 (P >0 .0 5 )。抗CD3mAb与抗LFA 1mAb共刺激 ,均可增加LN患者 (活动期和非活动期 )及正常对照PBMC3 H TdR掺入量和IgG合成 ,其中活动期增殖效应强于非活动期 (P <0 .0 1) ,后者又强于正常对照 (P <0 .0 1)。抗LFA 1中和抗体的加入 ,可明显抑制LFA 1诱导的共刺激效应 (P <0 .0 1)。结论 :LFA 1促进LN患者PBMC增殖和IgG合成 ,可能是其参与LN发病的机制之一     

外周血单个核细胞在狼疮性肾炎病人体内高效表达IL-6的观察

为了确定狼疮性肾炎（ＬＮ）病人体内是否存在内源性ＩＬ－６表达增高及其来源，作者应用ＥＬＩＳＡ法检测５８例ＬＮ病人的血清及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内ＩＬ－６蛋白的含量，用原位杂交方法结合ＩＢＡＳ２．０图像分析系统，检测其中２０例ＬＮ病人ＰＢＭＣ在未受任何刺激时ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达强度，并分析三者之间的关系。结果表明该三者水平在ＬＮ病人体内均异常增高，活动期尤其明显，三者之间互呈直线正相关。提示ＬＮ病人ＰＢＭＣ内源性过度表达和合成ＩＬ－６是其外周血ＩＬ－６水平增高的原因之一，异常增高的循环ＩＬ－６对狼疮性全身性病理损害，尤其对肾损害具有重要的作用。此外，血清ＩＬ－６过高还提示ＬＮ处于活动期，对临床指导治疗有一定意义。     

系统性红斑狼疮病人外周血单个核细胞NF-κB活性的研究

目的;研究体外培养的系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＮＦ－κＢ的活化表达情况及其与ＰＢＭＣ分泌免疫球蛋白,自身抗体的关系。方法：ＮＦ－κＢ活性检测采用电泳迁移率改变法（ＥＭＳＡ）,细胞培养上清免疫球蛋白和抗ｄＳＤＮＡ抗体采用微量ＥＬＩＳＡ测定。结果;发现ＳＬＥ病人外周血ＰＢＭＣ ＮＦ－κＢ活性显著高于正常对照组,与其ＰＢＭＣ培养上清及血清ＩｇＧ和抗ｄｓＤＮＡ抗体含量成正相关     

The effects of CD40- and interleukin (IL-4)-activated CD23+ cells on the production of IL-10 by mononuclear cells in Graves' disease: the role of CD8+ cells

The possible roles of CD8+ cells in the abnormal T cell-dependent B-cell activation in Graves' disease were investigated by analysing lymphocyte subsets in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and their production of soluble factors and cytokines such as IL-10 in patients with Graves' disease, Hashimoto's thyroiditis and normal controls. The PBMC were separated into CD8+ and CD8-depleted cells by magnetic separation columns, and cultured for 7 days with or without anti-CD40 monoclonal antibodies and IL-4. The culture supernatant was assayed for sCD23 and IL-10 using EIA, and the remaining cells were analysed by flow cytometry. Stimulation with anti-CD40 antibody together with IL-4 increased sCD23 levels and the number of CD23+ cells. The latter was further augmented by depletion of CD8+ cells. This combination of B cell stimulants increased production of IL-10 by PBMC from patients with Graves' disease. The CD40- and IL-4-activated production of IL-10 was decreased by CD8+ cell depletion. In contrast, constitutive production of IL-10 was increased after CD8+ cell depletion in a group of patients with low basal secretion levels (<35 ng/ml). It was, however, decreased in a group with higher basal production levels, but such a relationship was not found in the normal control group. Thus, T cell-dependent B-cell activation via a CD40 pathway activates CD23+ cells, leading to over-production of IL-10 and a shift of the Th1/Th2 balance to Th2 dominance, while CD8+ cells may suppress this activation to counteract the Th2 deviation in Graves' disease.