长期接触低剂量氯化甲基汞对老化模型小鼠脑蛋白激酶C活性的影响

目的探讨氯化甲基汞（Methylmercury chloride，MMC）对12月龄快速老化模型小鼠（Senescence-accelerated mouse，SAM）的快速老化亚系SAMP-prone／8（SAMP8）及抗快速老化亚系SAM-resistance／1（SAMR1）小脑组织蛋白激酶C（Protein kinase C，PKC）活性的影响。方法实验小鼠随机分为3组：MMC各剂量组小鼠6月龄开始连续喂饲含有不同剂量（1．00、2．00和3．00mg／kg）MMC的普通饲料至12月龄建立SAM快速老化亚系SAMP8和抗快速老化亚系SAMR1汞中毒模型，对照组给予普通饲料，提取鼠小脑组织胞浆和胞膜PKC。采用改良Takai法观察MMC对鼠小脑PKC活性的影响。结果MMC各剂量组鼠小脑组织胞浆和胞膜PKC活性明显高于对照组（P〈0．05，P〈0．01），与对照组比较其脑汞含量随接触剂量和时间的延长不同程度地明显高于对照组（P〈0．01，P〈0．001）。结论MMC可能通过影响小鼠小脑PKC活性介导其神经毒性作用，在老化进展中具有重要作用。     

氯化甲基汞对发育阶段大鼠海马组织蛋白激酶C活性的影响

目的:阐明氯化甲基汞(MMC)致脑发育损伤与海马组织蛋白激酶C（PKC）活性变化之间的关系,探讨MMC致脑发育损伤机制。方法:选用Wistar雌性大鼠120只,随机分为3个MMC剂量实验组和1个对照组,每组30只,实验组母鼠从妊娠前90 d 至仔鼠出生后30 d 连续喂饲含有不同剂量MMC (0.75,1.50和3.00 mg/kg ) 的普通饲料,取其生后(PND) 3 、7 、14 、21 和30 d 仔鼠海马组织提取胞浆和胞膜PKC。采用改良Takai 法观察MMC 对发育大鼠海马PKC 活性的影响。结果:随着脑汞含量的增加,仔鼠实验组和对照组海马组织胞膜胞浆PKC的活性随仔鼠生后时间的延长,逐渐增高,生后30 d达峰值。1.50 mg/kg 剂量组生后21和30 d仔鼠以及3.00 mg?kg-1剂量组仔鼠海马组织胞膜和胞浆PKC活性较对照组明显增高（P<0.05）。结论:长期接触低剂量MMC可引起发育阶段大鼠海马组织胞浆及胞膜PKC活性升高。MMC可能通过影响大鼠脑发育过程中PKC 活性介导其神经毒性作用。     

氯化甲基汞对发育阶段大鼠小脑转录因子CREB DNA结合活性的影响

目的 :探讨氯化甲基汞 ( MMC)对发育大鼠小脑组织转录因子 CREB DNA结合活性的影响。方法 :将妊娠大鼠于妊娠 7～ 1 0 d连续 4d每日灌胃给予氯化甲基汞 4mg· kg-1,取生后 1、3、7、1 4d大鼠小脑组织提取核蛋白。采用凝胶移位法观察 MMC对发育阶段大鼠小脑转录因子CREB DNA结合活性的影响。结果 :对照组和实验组各发育阶段小脑组织 CREB在凝胶移位电泳中均呈现两条迟滞带 ;对照组和实验组 P1 - 7大鼠幼仔小脑 CREB DNA结合活性随生后发育时间延长呈下降趋势 ;实验组大鼠幼仔小脑 CREB DNA结合活性均高于相应对照组。结论 :CREB参与大鼠脑发育的调节 ;甲基汞所致发育脑组织损伤可能与其引起 CREB DNA结合活性升高有关。     

氯化甲基汞对发育阶段大鼠小脑转录因子CREB DNA结合活性的影响

目的:探讨氯化甲基汞(MMC)对发育大鼠小脑组织转录因子CREB DNA结合活性的影响.方法:将妊娠大鼠于妊娠7～10 d连续4 d每日灌胃给予氯化甲基汞4 mg*kg-1,取生后1、3、7、14 d大鼠小脑组织提取核蛋白.采用凝胶移位法观察MMC对发育阶段大鼠小脑转录因子CREB DNA结合活性的影响.结果:对照组和实验组各发育阶段小脑组织CREB在凝胶移位电泳中均呈现两条迟滞带;对照组和实验组P1-7大鼠幼仔小脑CREB DNA结合活性随生后发育时间延长呈下降趋势;实验组大鼠幼仔小脑CREB DNA结合活性均高于相应对照组.结论:CREB参与大鼠脑发育的调节;甲基汞所致发育脑组织损伤可能与其引起CREB DNA结合活性升高有关.     

低剂量甲基汞对仔鼠脑远期影响实验研究

本文利用电镜及微机处理等方法,对在宫内接触低剂量甲基汞的小鼠脑经过较长时间后发生的变化进行了研究。主要病变有:脑内的神经细胞明显变性、脱失,包括小脑颗粒细胞及蒲肯野细胞在内。超微结构观察显示线粒体肿大,有空泡及髓鞘样结构形成;内质网断裂成小囊泡;溶酶体显著增多;核膜增厚、不清,细胞突起有明显的变性及坏死;毛细血管基底膜及胶质膜增厚,意味血脑屏障有损伤。上述变化在妊娠晚期染汞小鼠表现尤为突出。     

氯化甲基汞对不同发育阶段大鼠脑组织c-Jun表达的影响

目的 :探讨氯化甲基汞 (MMC)对发育脑组织损伤的机理。方法 :将 Wistar系妊娠大鼠于妊娠 7～ 1 0 d连续灌胃给予 MMC 4mg/kg,取 P1 (postnatal day 1 ) ,3,5,7,1 0 ,1 5仔鼠脑组织制备常规组织切片 ,采用免疫组织化学法检测 c- Jun表达。结果 :对照组发育阶段仔鼠大、小脑有c- Jun表达。随着出生后时间延长 ,大、小脑c- Jun阳性细胞数下降 ,并且 c- Jun阳性细胞具有典型凋亡形态。实验组 c- Jun表达有高于对照组的趋势 ,其中 P7,1 0 ,1 5小脑中 c- Jun表达明显高于对照组 (P<0 .0 5)。结论 :c- Jun参与了脑细胞发育中正常的凋亡过程。MMC诱导大鼠脑发育中神经细胞凋亡 ,可能是通过 c- Jun表达实现的。     

阿魏酸钠对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C活性的影响

目的探讨阿魏酸钠(SF)对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C(PKC)活性的影响.方法链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠灌胃给予SF 110mg·kg-1.·d-1,治疗8周,测定各组大鼠肾皮质超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、PKC活性及丙二醛含量,观察肾脏病理改变.结果与正常对照组相比,糖尿病对照组大鼠肾重体重、肌酐清除率、24h尿蛋白、肾皮质胞膜PKC活性、胞膜PKC活性占总活性的百分比、肾皮质丙二醛显著升高,肾皮质超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性显著降低,肾脏病理学改变明显,SF治疗组上述指标显著改善.结论 SF可通过抑制肾脏PKC的激活对糖尿病大鼠肾脏产生保护作用.     

氯化甲基汞对不同发育阶段大鼠脑组织c—Jun表达的影响

目的：探讨氯化甲基汞（ＭＭＣ）对发育脑组织损伤的机理。方法：将Ｗｉｓｔａｒ系妊娠大鼠于妊娠７￣１０ｄ连续灌胃给予ＭＭＣ ４ｍｇ／ｋｇ,取Ｐ１（ｐｏｓｔｎａｔａｌ ｄａｙ １）,３,５,７,１０,１５仔鼠脑组织制备常规组织切片,采用免疫组织化学法检测ｃ－Ｊｕｎ表达。结果：对照组发育阶段仔鼠大、小脑有ｃ－Ｊｕｎ表达。随着出生后时间延长,大,小脑ｃ－Ｊｕｎ阳性细胞数下降,并且ｃ－Ｊｕｎ阳性细胞上有典型凋     

宫内接触甲基汞对发育阶段大鼠脑神经细胞凋亡和细胞周期影响的研究

目的 :探讨宫内接触甲基汞所致脑发育神经细胞损伤的机理。方法 :对妊娠 7～ 1 0 d的大鼠每天灌胃给予 4mg/ kg氯化甲基汞。对 2 0 d胎鼠和出生 1～ 7d幼鼠的脑组织行流式细胞术定量分析。结果 :1宫内接触甲基汞可诱导初生期大鼠脑神经细胞凋亡。 2宫内接触甲基汞对脑神经细胞周期有一定的影响。结论 :宫内接触低剂量甲基汞是以诱导凋亡的方式致脑神经细胞损伤。     

甲基汞对雄性小鼠的生殖发育毒性及作用机制

目的：研究甲基汞对雄性小鼠的生殖发育毒性。 方法：采用显性致死试验和精子畸变试验的方法研究不同剂量甲基汞对小鼠生殖发育的影响。 结果：不同剂量的甲基汞可使雄性小鼠的交配率及雌鼠受孕率降低,其降低程度与染毒剂量有关,1/10 LD₅₀组受孕率是70.8％,但与阴性对照组比较差异无显著性（P>0.05）。剖检孕鼠所得子代小鼠的数量与亲代雄性小鼠的甲基汞染毒剂量有关,染毒各剂量组子代小鼠的窝平均活胎数、平均着床数明显减少,与阴性对照组比较差异具有显著性 （P<0.05）。甲基汞可致雄性小鼠精子畸变率增加,除1/50 LD₅₀、1/10 LD₅₀ 组之间比较差异无显著性外,各剂量染毒组之间比较差异均具有显著性（P<0.01）。 结论：甲基汞可使雄性小鼠的交配率和雌性小鼠的受孕率降低,窝平均活胎数和平均着床数减少,精子的畸变率增加,对雄性小鼠具有生殖毒性。     

葛根素对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C活性的作用

目的 研究葛根素(Pue)对糖尿病大鼠。肾脏蛋白激酶C(PKC)活性、肾功能及肾脏结构的影响。方法 链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型，随机分为糖尿病组、Pue(500、250、125mg／kg)治疗组、维生素E(VitE)组，同时另设正常对照组，给药12周后，测定肾功能及。肾脏指数，ELISA法测定肾脏PKC活性，放免法测定尿蛋白排泄率，并对肾组织进行光镜及电镜观察。结果 糖尿病大鼠尿白蛋白排泄率、肾脏指数(肾脏质量／体重)、肾小球细胞膜PKC活性明显升高，给予Pue治疗12周后，治疗组糖尿病大鼠尿白蛋白排泄率较糖尿病组显著降低，肾脏肥大也有明显改善，肾小球细胞膜PKC：活性显著下降，光镜及电镜下肾脏病理改变较糖尿病组有较大改善。结论 Pue可以纠正糖尿病大鼠早期肾脏高滤过、高灌注，并对糖尿病大鼠肾脏病变有一定的保护作用，其部分机制可能是通过下调。肾脏PKC活性而实现的。     

慢性炎症性肺动脉高压大鼠肺动脉蛋白激酶C的活性变化

目的 观察慢性炎症性肺动脉高压大鼠在肺动脉高压形成过程中肺动脉蛋白激酶C(PKC)的活性变化.方法 建立野百合碱诱导的慢性炎症性肺动脉高压大鼠模型,采用同位素标记的放射活性测定法检测肺动脉高压形成过程中肺动脉蛋白激酶C的活性.结果 随着慢性炎症性肺动脉高压的进展,大鼠肺动脉PKC总活性和胞浆PKC活性先是逐渐上升,而后逐渐下降(与对照组相比,P＜0.05),但胞膜PKC活性和PKC活性的膜质比持续上升(与对照组相比,P＜0.05).结论 PKC活性的上调和PKC的转位活化可能参与了慢性炎症性肺动脉高压的形成过程.     

醛糖还原酶抑制剂对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响

目的 研究糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的变化及醛糖还原酶抑制剂Sorbinil对它的影响。方法 采用腹腔内注射STZ法制作糖尿病大鼠模型，将大鼠分为模型组、Sorbinil组、糖适平＋洛汀新组和正常对照组。8周后处死大鼠，分离肾小球，分别测定各组肾小球细胞浆和细胞膜PKC活性。结果 糖尿病模型组细胞浆PKC活性显著降低，细胞膜PKC活性显著升高。用两组西药治疗后，洛汀新＋糖适平组无明显改善．而Sorbinil组可显著提高细胞浆PKC活性、降低细胞膜PKC活性。结论 Sorbinil可通过改善多元醇代谢而降低PKC活性，同时，亦或存在其它途径如直接对PKC的抑制作用等等。Sorbinil通过调节多元醇代谢等途径间接或直接降低PKC活性，是其治疗糖尿病肾病的作用机制之一。     

蛋白激酶C抑制剂对脑缺血大鼠突触体游离钙的影响

目的：探讨蛋白激酶Ｃ（Ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｃ,ＰＫＣ）参与神经损伤机制。方法：采用大鼠全脑缺血模型,观察脑缺血／再灌流后突触体游离钙的变化及ＰＫＣ的抑制剂灯盏花对突触体游离钙的影响。结果：脑缺血／再灌流可以导致突触体游钙增加的抑制剂灯盏花可以阻止脑缺血／再灌流导致突触体游离钙增加。结论：ＰＫＣ参与神经元缺血性损伤可能与其促进钙内流有关。     

甲基汞暴露对小鼠胎儿期和成长期神经行为的影响

目的：探讨小鼠胎儿期和成长期甲基汞暴露以及同一个体的重复暴露后神经行为变化特点。方法：近交系C57BL/6Cr鼠44只,分为对照组、胎儿期汞暴露组、成长期汞暴露组和胎儿期及成长期汞暴露组,每组11只,分别在妊娠12～14 d的3 d内连续经口给予3 mg·kg^-1甲基汞进行胎儿期暴露,在13周龄时经口给予12 mg·kg^-1甲基汞进行成 长后染毒,对照组给予等量生理盐水。成长期染毒10 d后进行Open-field 和Morris water-maze的神经行为以及脑病理组织学观察。结果：Open-field 实验中评价神经行为的重要指标移动距离,胎儿期暴露组明显减少,成长期暴露组却有所增加,两组比较差异有显著性（P<005）,重复暴露组未观察到成长后再次暴露的神经行为改变。Morris water-maze实验显示,胎儿期和成长期暴露组之间比较差异有显著性（P<0.05）;重复暴露组与胎儿期暴露结果相近,成长期再次暴露的影响无统计学意义。病理组织学观察可见成长后大脑皮层线粒体、沧白球、视床外侧有 大范围的变性神经细胞。结论：甲基汞在小鼠胎儿期和成长期重复暴露未加重对神经行为的影响,胎儿期受到的脑损伤对成长后的再次损伤可能具有代偿性。     

氯化甲基汞抗大鼠C6胶质瘤细胞的体外研究

目的：通过体外实验探讨氯化甲基汞（MMC）抗大鼠C6胶质瘤细胞的作用。方法：体 外培养C6胶质瘤细胞,分为空白对照组和MMC给药实验组（将0.08～10.00 μmol•L MMC按浓度梯度分为8组）。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测不同浓度MMC对体外养C6胶质瘤细胞的增殖抑制和杀伤作用,采用流式细胞仪测定MMC对C6胶质瘤细胞凋亡和细胞周期的影响。结果：1.25、2.50、5.00和10.00 μmol•L^-1的MMC在体外均可抑制C6胶质瘤细胞的增殖,C6胶质瘤细胞存活率明显低于对照组（P<0.05）,增殖抑制作用随浓度的增加而增强。2.50、5.00和10.00 μmol•L^-1 MMC 作用于C6胶质瘤细胞4、8、16和32 h后细胞存活率明显低于对照组（P<0.05）,细胞杀伤作用随浓度的增加和时间的延长而增强。0.31、0.63、2.50、5.00和10.00 μmol•L^-1 MMC作用于C6胶质瘤细胞24h后细胞凋亡/坏死率明显高于对照组（P<0.05）。1.25、2.50和5.00 μmol•L^-1 MMC 作用于C6胶质瘤细胞72 h后,G₀/G₁期细胞百分率明显高于对照组（P<0.05）,S期细胞百分率明显低于对照组（P<0.05）。结论：MMC能够杀伤大鼠C6胶质瘤细胞,抑制增殖,诱导凋亡,具有应用于胶质瘤治疗 的潜在价值。     

PKC抑制剂与电离辐射对Panc-1凋亡的影响

目的:探讨特异性蛋白激酶C(PKC)抑制剂白屈菜红碱(CH)与小剂量照射联合应用对Panc-1细胞凋亡的作用.方法:采用MTT法检测CH和电离辐射对细胞增殖活性的抑制.用流式细胞仪检测CH与电离辐射对细胞凋亡的诱导.利用免疫细胞化学法检测CH对受照后Panc-1细胞凋亡相关蛋白(p53,Bcl-2,Bax)的影响.应用瑞-吉姆萨染色在光镜下观察细胞的形态学变化.结果:MTT结果显示CH增加了电离辐射对Panc-1增殖活性的抑制,与对照组相比差异有显著性(P＜0.05).流式细胞仪检测显示CH和照射二者具有协同作用,使凋亡指数增加,且呈药物浓度依赖性.免疫细胞化学方法显示CH使受照射后Panc-1细胞的p53和Bax蛋白表达增加,而对Bcl-2蛋白的表达无明显影响.形态学观察可见典型的凋亡小体.结论:CH通过降低Panc-1细胞的凋亡阈值,调节凋亡相关蛋白表达,抑制细胞增殖,提高射线对Panc-1细胞凋亡的诱导,以增加Panc-1细胞对射线的敏感性.     

实验性脊髓空洞前状态蛋白激酶C的活性变化及意义

目的 探讨蛋白激酶C(PKC)在脊髓空洞前状态中活性变化及其作用.方法 用新西兰兔56只制作模型.术后1、3、7、14、21 d用光镜、干湿重法观察上颈髓病理学演变、脊髓含水量,应用底物磷酸化法测定胞膜、胞浆PKC活性.结果 高岭土组动物于术后第1天脊髓含水量即有明显增加[(68.35±0.70)%],第7天达到高峰[(72.92±0.86)%],持续到第14天,至第21天时稍有缓解[(70.03±0.77)%];组织学观察发现术后3 d上颈髓轻度水肿,7～14 d水肿达到高峰期,21d略有缓解;胞膜PKC活性术后1 d出现增加(5.67±0.26 pmol·mg-1·min-1),7～14 d达到最高水平(13.27±3.15 pmol·mg-1·min-1),21 d开始回落(8.85±1.56pmol·mg-1·min-1),胞浆的PKC活性则呈相反趋势.结论 脊髓空洞前状态形成中出现PKC移位激活.参与了缺血、缺氧性脊髓水肿的形成.