P物质与Griffonia simplicifolia I—B4结合位点在大鼠初级？…

应用荧光双标组织化学技术观察到，在大鼠腰段脊神经节中，Ｇｒｉｆｆｏｎｉａ ｓｉｍｐｌｉｃｉｆｏｌｉａ Ｉ－Ｂ４（Ｉ－Ｂ４）结合反应物与Ｐ物质样免疫反应物均分布在小细胞中，且３４％￣４３％的Ｉ－Ｂ４结合反应阳性细胞和８７％￣９５％的Ｐ物质阳性细胞为Ｉ－Ｂ４与Ｐ物质双标细胞。切断单侧脊神经后根的大鼠，切断侧脊髓后角内Ｉ－Ｂ４结合反应在术后第３ｄ即明显减弱，至第５ｄ消失。向成年大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素后     

P物质与Grifonias simplicifolia I-B_4结合位点在大鼠一级传入神经元内共存

Ｐ物质与ＧｒｉｆｏｎｉａｓｉｍｐｌｉｃｉｆｏｌｉａＩ－Ｂ４结合位点在大鼠一级传入神经元内共存王小丽李宏莲杨世明张亦农李和（同济医科大学组织学与胚胎学教研室）选用成年健康纯系Ｗｉｓｔａｒ大鼠（雌雄兼有）１０只。其中４只经心脏灌注固定后，取其脊神经节后固...     

大鼠脊髓P物质受体定位分布的免疫细胞化学研究

用免疫细胞化学技术对大鼠脊髓和脊神经节内Ｐ物质受体的定位分布进行了系统的研究。结果证明，Ｐ物质受体阳性胞体和树突主要密集地分布于脊髓全长的Ⅰ层，此外，还发现Ⅱ层的外侧部出现少量阳性胞体和树突，来自Ⅲ层的阳性树突穿过Ⅱ层后进入Ⅰ层；Ⅲ～Ⅳ和Ⅹ层也可见中等密度的阳性胞体和树突；Ⅵ层和Ⅶ层仅见少量阳性胞体和树突，但胸髓中间带外侧核、骶髓副交感运动核、骶髓后连合核内可见大量浓染的阳性胞体和树突；Ⅷ、Ⅸ层、Ｏｎｕｆ氏核、外侧颈核和外侧脊索核也有阳性胞体和树突．灰质内的阳性胞体的树突还伸向前索和外侧索，有时可达脊髓的边缘．此外，脊神经节内也可见少量散在且均匀分布的小型阳性胞体．     

亨廷顿蛋白相关蛋白1在大鼠脊髓中的定位及与初级传入神经元的关系

本文首次通过免疫组织化学技术和免疫印迹方法(Western blotting)观察了亨廷顿蛋白相关蛋白1(huntingtin associated protein 1，HAP1)在大鼠脊髓和背根节中的分布以及HAP1与Gfiffonia simplicifolia Ⅰ-B4结合位点在背根节初级传入神经元的共存，并观察了单侧背根切断和辣椒素(capsaicin)损毁实验对脊髓背角HAP1表达水平的变化。     

大鼠膈神经传出和传入神经成分在脊髓内的分布

采用HRP追踪法,对成年大鼠膈神经运动纤维的起源和初级传入神经元胞体的位置及在其中枢突脊髓的投射进行了观察。结果表明,膈神经运动纤维在脊髓标记(膈核)主要分布在注射侧C_3-C_5脊髓节段的前角。隔神经感觉纤维初级传入标记的神经元见于注射侧C_3-C_6后根节,其中C_4标记的细胞数最多。     

Calbindin－D28k mRNA在大鼠三叉神经节和背根节初级传入神经元中的表达

用原位杂交组织化学技术，用同位素标记的寡核苷酸探针，对Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋｍＲＮＡ在大鼠三叉神经节和背根节初级传入神经元中的表达进行了观察．结果发现：在大鼠三叉神经节中，约１６．１％的神经元为ＣａｌｂｉｎｄｉｎＤ２８ｋ阳性神经元，而在背根神经节中，阳性神经元占节细胞总数的２０．６％．这两个神经节中的阳性神经元主要集中在大型细胞（８．１％和１２．３％）及小型细胞（４．２％和６．８％）．从而提示Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ可作为上述两种神经细胞的标志物，在此类初级传入神经元的某些生理功能中可能有重要作用．     

躯体和内脏SP能初级传入神经元的定位研究

本文在后根节和脊髓两个水平对躯体(胫神经)和内脏(膀胱)初级传入系统进行同时定性、定位的研究。对后根节选用两种较敏感的双标技术(HRP结合PAP,Biotin-WGA结合免疫荧光)。结果表明,在后根节中被标记的胫神经和膀胱的初级传入神经元均有一部分同时显示SP样阳性反应。另外在分别切断盆内脏神经和胫神经的两组动物模型上进行脊髓的SP样免疫反应,通过两侧对比,观察到术侧灰质在相当于被切断神经的传入经路及终末区出现SP样反应的“脱落”现象,从而反证出躯体和内脏初级传入纤维中的SP能成分在中枢内的定位分布。本文首次提供了内脏初级传入在中枢内定位与定性相结合的研究结果。     

大鼠中枢运动核团内P物质受体的定位分布

目的观察大鼠脑干的躯体运动核、副交感运动核和脊髓前角内P物质(SP)受体的定位分布,阐明SP在运动核团的作用部位. 方法免疫组织化学染色技术. 结果在动眼神经核、滑车神经核、三叉神经运动核、展神经核、面神经核、舌下神经核和脊髓前角内均可见SP受体样阳性纤维和呈弱阳性的SP受体样阳性神经元,但疑核内的SP受体样阳性神经元和纤维密集并呈强阳性.在动眼神经副交感核、上涎核和迷走神经背核内也可见SP受体样阳性纤维和弱阳性的SP受体样阳性神经元. 结论 SP通过SP受体的介导在中枢运动核团内对运动神经元发挥调控作用.     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内SP受体阳性神经元、FOS阳性神经元及初级传入C纤维和终末分布的研究

用免疫组织化学和组织化学方法对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）内ＳＰ受体阳性神经元、ＦＯＳ阳性神经元及初级传入Ｃ纤维和终末的分布及相互之间的关系进行了观察。ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突主要分布在此核的Ⅰ、Ⅱ层，Ⅰ层多于Ⅱ层；１０％福尔马林刺激大鼠口周区后诱导的ＦＯＳ阳性神经元分布于此核的Ⅰ～Ⅳ层及其内侧的网状结构，但主要集中在Ⅰ、Ⅱ层，Ⅱ层多于Ⅰ层；ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤维及其终末也密集地分布于此核的Ⅰ、Ⅱ层，且Ⅱ层多于Ⅰ层。多重反应的结果显示：在Ｖｃ的Ⅱ层和Ⅰ层内，ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突和ＦＯＳ阳性神经元胞体的周围可见许多ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维及终末；部分ＳＰ受体阳性神经元也呈ＦＯＳ阳性，少数ＳＰ受体和ＦＯＳ的双重阳性神经元周围也有ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维和终末。以上结果说明：（１）传递面口部痛信号的Ｃ纤维主要终止在尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层，与ＳＰ受体阳性神经元的分布区重叠，提示这些Ｃ纤维可能含ＳＰ；（２）参与西口部痛信息传递的ＦＯＳ阳性神经元主要分布于Ｖｃ的Ⅱ层，它们与初级传入Ｃ纤维终末的分布区重叠，其中的部分ＰＯＳ阳性神经元也呈ＳＰ受体阳性，从而进一步地证明了ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤?     

初级传入纤维在发育阶段小鼠腰髓背角内生长特点的研究(英文)

本研究通过将亲脂性羰花青染料 Di I置入胚胎 12 d(E12 )到生后 3 d(P3 )小鼠背根神经节内进行追踪的方法 ,观察了初级传入纤维在小鼠腰段脊髓背角内生长过程和终止的形态特点。结果显示 ,初级传入纤维在 E13时生长至脊髓后索 ,在此停留 2d,到 E15时开始进入脊髓灰质。 E16和 E17时 ,生长至脊髓灰质内的初级传入纤维的数量增加并向腹角延伸。有相当数量的初级传入纤维进入脊髓背角深层。至 E18,背角深层的传入纤维的密度进一步增加 ,分支的状态变得更为复杂。一些分支延伸到背角浅层。在出生后 ,初级传入纤维在脊髓背角的分布特点无明显变化 ,但是在背角前层的纤维数量进一步增多。另外 ,还观察到初级传入纤维发出侧支向对侧脊髓背角的投射。这种向对侧生长的纤维侧支开始于 E16,来源于同侧背角内侧部的传入纤维。至E18和出生时 ,向对侧背角生长的侧支的来源部位增加到两个。本研究的结果表明 ,小鼠脊髓背角内初级传入纤维的板层分布模式形成于胚胎发育的晚期和出生后的早期 ,此后初级传入纤维在背角内进行进一步的精细调整 ,达到与成年时一致的状态。     

大鼠腰骶髓P物质受体阳性神经元向外侧臂旁核投射

本研究应用四甲基罗达明 (TMR)逆行追踪结合 P物质受体 (SPR)免疫荧光组织化学染色技术 ,观察了大鼠腰骶髓后连合核 (DCN)和中间带外侧核 (IML)内的 SPR阳性神经元向外侧臂旁核 (L PB)的投射。将 TMR注入一侧 L PB后 ,可在腰骶(L6 ～ S2 )节段观察到大量红色的 TMR逆标神经元 ,这些 TMR逆标神经元主要集中于 DCN和 IML内 ,多为中型 (直径 2 0～ 5μm)梭形、三角形或多极形 ;SPR阳性神经元也主要分布于 DCN和 IML内 ,并以 IML 居多 ;部分 TMR逆标神经元同时呈 SPR阳性。上述结果提示腰骶髓 DCN及 IML内的 SPR阳性神经元可能接受由 SP介导的盆腔内脏伤害性信息并将之向 LPB传递。     

大鼠脊髓后角内甲啡肽标记及非标记结构与C纤维间关系的免疫电镜研究

向大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素导致一级传入纤维中的Ｃ纤维变性后，用免疫电镜技术在大鼠脊髓后角浅层内观察到：（１）大量含甲啡肽的轴突终末与未标记树突（或棘）形成对称性（少数为非对称性）突触；（２）含甲啡肽的轴突终未与变性终末共同会聚于同一甲啡肽阴性树突；（３）少量含甲啡肽轴突终末与变性终末间形成轴－轴突触或接触；（４）变性终末与含甲啡肽的树突形成非对称性轴－树突触；（５）甲啡肽阴性轴突终末与变性终末会聚于同一未标记树突并与变性终末间形成轴－轴突触或接触．以上结果表明，在脊髓后角内，脑啡肽除主要以突触后抑制方式调节Ｃ纤维传入外，也可通过轴－轴突触或接触对Ｃ纤维传入进行突触前抑制；非甲啡肽能神经元也能对Ｃ纤维传入进行突出后又突触前抑制．此外，Ｃ纤维在脊髓后角内可通过兴奋性轴－树突触直接影响甲啡肽能中间神经元的活性．     

阿片μ受体与SP、CGRP和SOM在大鼠三叉神经节和背根神经节内的共存研究

本研究应用免疫荧光及免疫荧光双重染色技术，观察了大鼠三叉神经节和背根神经节内阿片μ受体免疫反应阳性神经元的分布及其与SP、CGRP和SOM阳性神经元之间是否存在共存关系。结果显示：（1）三叉神经节和背根神经节内的阿片μ受体免疫反应阳性神经元多为中小到细胞，其免疫反应阳性产物不仅见于胞膜表面也出现于胞浆内。SP和SOM免疫反应阳性神经元亦为中小型细胞，但以小细胞为主，而CGRP免疫反应阳性神经元有一部分为大型神经元。（2）在三叉神经节内，有相当数量的阿片μ受体阳性神经元同时呈SP、CGRP或SOM免疫反应阳性。其中双重免疫反应神经元分别占阿片μ受体阳性细胞总数的34．6％、54．3％和23.9％，而在SP、CGRP和SOM各阳性细胞中分别有49．4％、50．9％和37.5％的神经元同时是阿片μ受体免疫反应阳性．（3）在背根神经节内，也有相当数量的神经元呈阿片μ受体与SP、CGRP和SOM双重免疫反应阳性，其中双标细胞数分别占阿片μ受体免疫反应阳性细胞总数的30．1％、48．4％和26.8％，各占SP、CGRP和SOM阳性细胞总数的51．5％、44．2％和35．9％。本文结果提示吗啡的镇痛作用中有部分可能是通过激活阿片μ受体来影响初级传入纤维中SP、CGRP和SOM的释放而实现的．     

5-HT受体亚型在原代培养大鼠脊髓背角神经元的表达

为探讨脊髓背角内 5 -HT发挥作用的受体类型及其胞内信号转导机制 ,本研究首先利用免疫荧光技术对胎鼠脊髓背角神经元的产率进行了观察 ,再利用反转录 PCR方法观察了 5 -HT受体 14种亚型 m RNAs在原代培养神经元中的表达。原代培养的背角神经元生长状态良好 ,存活时间达到 14～ 2 1d。对培养的背角细胞用神经元特异性标志物—神经细胞核蛋白 (Neu N)进行免疫荧光检测的结果表明 ,神经元的产率超过 90 % ;用 PCR方法在培养的背角神经元中检测到了 5 -HT1 A、5 -HT1 B、5 -HT1 D、5 -HT1 F、5 -HT2 A、5 -HT2 C、5 -HT3、5 -HT4 、5 -HT5A、5 -HT5B、5 -HT6 和 5 -HT7等受体亚型 m RNAs的表达。但上述各受体亚型的表达水平存在差异 ,未检测到 5 -HT1 E和 5 -HT2 B受体亚型 m RNAs的表达。结果表明 ,本研究建立的实验方法可满意地获得原代培养脊髓背角神经元 ;这些神经元不但表达多种受体亚型 ,而且表达类型与以往在成年大鼠脊髓背角观察到的表达状况基本一致。上述结果为进一步开展 5 -HT作用机制的体外研究奠定了基础。     

实验性哮喘豚鼠初级传入系统和中枢内NKB的变化(英文)

本文应用放射免疫分析方法，测定了16只哮喘豚鼠初级传入系统和中枢内神经激肽β（NKB）的水平。结果表明，与正常对照组（结状神经书3228±11．89，C7～C8段脊神经节23．63±13．26，T1～T2段脊神经节24．25±1819，T3～T5段脊神经节25．53±12．34，C7～T5段脊髓后角28．65±16．59，孤束核26．34±18．36Pg／gwettissue）相比较，哮喘豚鼠初级传入系统和中枢内（结状神经节43．26±12．35，C7～C段脊神经节32．53±17．63，T1～T2段神经书32.25±20．65，T3～T5段脊神经节34．36±15．33，C7～T5段脊髓后角39．53±2028，孤束核3662±17．85Pg／gwettissue）NKB的含量明显高于对照组（P＜0．05）。结合NKB在呼吸道的作用，这些结果提示，初级传入系统和中枢内的NKB可能参与哮喘发病的病理生理机制。     

P物质免疫反应纤维在鼠脊髓内的分布

本文应用免疫细胞化学PAP法研究了大鼠脊髓全长的P物质(SP)免疫反应纤维和终末的分布和定位。结果表明:SP免疫反应阳性纤维和终末分布在脊髓全长各节段和各板层内,并只有其分布特点。呈很高密度反应者有后角Ⅰ、Ⅱ层,呈商密度反应有Lissauer氏束,外侧颈核、胸髓侧角、低副交感核和X层;呈中等密度或低密度反应有Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅷ和Ⅸ层。本研究从形态学上进一步证实SP免疫反应纤维和终末广泛存在于脊髓全长内,这提示SP作为递质参与脊髓感觉、躯体运动和植物性等功能,且起着重要作用。     

股神经损伤后脊髓内部P物质和L-脑啡肽的变化

用免疫组织化学PAP技术观察了大白鼠单侧股神经切断以后,脊髓内SP和Enk样免疫产物的变化。一侧股神经切断后,同侧脊髓腰2、3、4节段后角的Ⅰ、Ⅱ板层内SP、Enk样免疫产物的减少开始于术后第10天,SP减少最明显在30天。此后,随着存活时间延长逐渐恢复,两侧差异缩小,一直维持至60—90天,至120天两侧差异已不很明显。术后各时期Enk样免疫产物反应性的两侧自然对比差别没有SP那样明显。本文对SP和Enk样免疫产物的减少和恢复的机制进行了讨论。