二磷酸盐在抑制聚乙烯微粒刺激破骨细胞骨吸收中的作用

目的:研究帕米磷酸钠对聚乙烯微粒刺激破骨细胞功能的影响,探讨帕米磷酸钠防治人工关节无菌性松动的可能性.方法:分离新生新西兰兔长骨中的破骨细胞与骨片共同培养.观察帕米磷酸钠、聚乙烯微粒对破骨细胞功能的影响.观察不同剂量的聚乙烯微粒对破骨细胞的影响;观察聚乙烯微粒与帕米磷酸钠共同培养对破骨细胞的作用.结果:三种浓度的微粒(103/ml、106/ml和109/ml)与破骨细胞共培养后都能够刺激破骨细胞的骨吸收,10μg/ml的帕米磷酸钠可以抑制聚乙烯微粒对破骨细胞骨吸收的增强作用.结论:帕米磷酸钠可以抑制聚乙烯微粒对破骨细胞的刺激作用,可能用于防治人工关节无菌性松动.     

肺癌骨转移疼痛的综合治疗分析

目的 :本文对 1 996 - 0 1～ 1 998- 0 6收治的有骨痛症状的肺癌骨转移病人作回顾性分析。方法 :本文共 71例 ,治疗分两大组 :综合治疗组 46例 ,分为 3个亚组 ;A组 (化疗 +帕米磷酸钠 ) ,B组 (放疗 +帕米磷酸钠 ) ,C组 (核素 +帕米磷酸钠 ) ;单一疗法组 2 5例 ,分为 2个亚组 :D组 (化疗 ) ,E组 (放疗 )。结果 :综合组镇痛治疗有效率 89 1 % ,单一组 6 4 0 % (P <0 0 5 )。结论 :采用抗癌和破骨细胞抑制剂帕米磷酸钠综合治疗肺癌骨转移引起的疼痛 ,疗效满意 ,不良反应无相加 ,可进一步改善患者的生存质量。     

P物质对大鼠成纤维细胞转化生长因子β-1及其受体基因表达的影响

目的：探讨P物质(substance P，SP)作用于离体培养的大鼠肉芽组织成纤维细胞后，对成纤维细胞转化生长因子β-1(TGFβ-1)及其受体-l／-2(TGFβ-1／R-2)基因表达的影响。方法：采用大鼠肉芽组织成纤维细胞培养和逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)技术，观察SP在不同浓度(10^-9M～10^5M)及不同孵育时间(0h，3h，6h，12h，24h)情况下刺激成纤维细胞后，成纤维细胞TGFβ-1／R-1／R-2mRNA表达的改变情况。结果：SP可上调大鼠肉芽组织成纤维细胞TGFβ-1／R-1／R-2mRNA的表达。其剂量-效应曲线呈双相分布，最大效应浓度为10喵M。在最大效应浓度(10^-8M)时，SP对大鼠成纤维细胞TGFβ-1/R-1/R-2mRNA表达的上调作用分别于刺激细胞后6h／6h／12h达高峰。结论：体外实验结果显示：SP对大鼠肉芽组织成纤维细胞TGFβ-1／R-1／R-2基因表达存在直接影响，其表现形式与SP的刺激浓度及孵育时间有关。这种影响可能是创伤愈合过程中SP影响成纤维细胞增生、分化和瘢痕组织形成的机制之一。     

全反式维甲酸对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察全反式维甲酸对体外培养的眼眶成纤维细胞增殖的影响以及促胞凋亡的作用.方法 体外培养甲状腺相关眼病患者眼眶成纤维细胞;将不同浓度的ATRA(0、10-9 mmol/L、10-8mmol/L、10-7mmol/L、10-6 mmol/L和10-5 mmol/L)作用于成纤维细胞细胞分别达24、48和72 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法观察ATRA对细胞增殖的影响,采用流式细胞仪检测ATRA处理48h后细胞周期的改变及细胞凋亡率;检测ATRA处理48 h后细胞内bcl-2蛋白的表达水平.结果 MTT法显示ATRA能降低成纤维细胞的A值(P＜0.05),细胞生长抑制率随作用时间和药物浓度的增加而增加.流式细胞仪检测细胞周期阻滞在G1期;凋亡率随着浓度的增加而上升;bcl-2蛋白的表达水平较正常对照组细胞明显下调.结论 ATRA能够抑制成纤维细胞的增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性;ATRA通过将细胞阻滞在G1期而起到抑制作用;ATRA可以诱导成纤维细胞凋亡,诱导细胞凋亡作用与下调细胞内bcl-2蛋白的表达有关.     

二磷酸盐对成骨细胞增殖及分化成熟作用的实验研究

目的研究二磷酸盐类药物—阿伦磷酸对成骨细胞增殖及分化成熟的作用。方法将人成骨样MG-63细胞体外培养、传代后分为5组:空白对照组、阳性对照组(加入10-8M地塞米松)、3个实验组(分别加入10-6M、10-8M、10-10M阿伦磷酸)。培养数日后,行细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、骨形态发生蛋白-(2BMP-2)、骨钙素(OC)、I型胶原(Coll.I)基因表达等检测。结果加入阿伦磷酸的3个实验组MG-63细胞数目较对照组显著增加,其峰值出现在浓度为10-8M时;同时,阿伦磷酸使ALP活性增强,而且BMP-2、OC、Coll.I等成骨细胞相关基因的表达增加。结论阿伦磷酸具有促进成骨细胞增殖及分化成熟,诱导骨形成的能力。     

槲皮素对大鼠心脏成纤维细胞纤维连接蛋白和转化生长因子β_1表达的影响

目的研究槲皮素(Que)对培养的乳鼠心脏成纤维细胞的纤维连接蛋白(FN)和转化生长因子β_1(TGF-β_1)表达的影响,探讨其在心肌肥厚中可能的作用机制。方法分离培养SD仔鼠心脏成纤维细胞,再以Que、AngⅡ、Que+AngⅡ等干预,通过WST-1法检测细胞增殖,免疫组化方法测定心肌成纤维细胞FN及TGF-β_1的表达。结果与对照组比较,Que各浓度组(10~(-6)-10~(-4)M)心脏成纤维细胞的吸光度值差异无统计学意义(P0.05),AngⅡ组心脏成纤维细胞的吸光度值增加(P0.05);与AngⅡ组比较,10~(-6)-10~(-4)M Que与10-6M AngⅡ共同干预后吸光度值逐渐降低(P0.05)。结论 Que呈浓度依赖性的抑制AngⅡ介导的心肌成纤维细胞增殖。Que呈浓度依赖性的抑制基础状态及AngⅡ介导的FN、TGF-β_1的表达。     

血管钠肽抑制低氧对大鼠心成纤维细胞内钙浓度升高的作用

为了观察血管钠肽 (vasonatrin peptide,VNP)对低氧作用时心成纤维细胞增殖的影响 ,将分离纯化乳鼠心成纤维细胞 ,随机分为 4组 :对照组、低氧组 (2 %～ 3% ) ,VNP组 (10 - 8～ 10 - 6mol· L- 1 )和 VNP+低氧组 .用 MTT比色法、3 H- Td R掺入法观察细胞增殖情况 ,采用激光共聚焦方法研究 VNP对细胞内钙浓度 ([Ca2 +]i)水平的影响 .旨在探讨 VNP对低氧刺激心成纤维细胞增殖的影响及机制 .我们发现 ,低氧可以使培养的乳鼠心成纤维细胞 MTT光吸收值 (OD值 )较对照组显著增高 (P<0 .0 5 ) .VNP(10 - 6mol·L- 1 )可以显著降低低…     

肾上腺髓质素对大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

目的:研究肾上腺髓质素(ADM)对幼年大鼠心肌成纤维细胞(FBC)增殖的影响,并探讨其可能的作用受体.方法:用差速贴壁分离法获得心肌成纤维细胞为材料,用免疫组化的方法鉴定细胞,并绘制生长曲线.用MTT比色法测定细胞增殖.结果:①ADM对基础状态下的FBC增殖无明显抑制作用,但能呈浓度依赖性地抑制Ang Ⅱ刺激的FBC增殖.②CGKP8-37和ADM22-52均能部分拮抗ADM对Ang Ⅱ的抑制作用,而二者合用几乎能完全拮抗.CGRP8-37对ADM的拮抗作用强于ADM22-52.结论:①M具有浓度(10-8M～10-5M)依赖性地抑制Ang Ⅱ介导的FBC增殖的作用.②心肌成纤维细胞上可能同时存在CGRP受体和ADM特异性受体,但其作用可能更多通过CGRP受体.     

氯化胆碱对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的 探讨氯化胆碱对异丙肾上腺素(Iso)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖和胶原合成的影响.方法 体外培养新生Wistar大鼠心肌成纤维细胞,分为对照组、Iso组和Iso+氯化胆碱组.各组药物分别作用48 h.应用MTF实验方法检测心肌成纤维细胞增殖,羟脯氨酸试剂盒检测胶原合成.结果 10-4 mol/L Iso明显促进CFs增殖(P＜0.05),1 mmol/L氯化胆碱明显抑制10-4 mol/L Iso诱导的成纤维细胞增殖(P＜0.05)与胶原合成(P＜0.05).结论 氯化胆碱抑制异丙肾上腺素诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成.     

琥珀酸盐受体介导Foxm1表达促进肺纤维化

目的:探讨琥珀酸盐受体(succinate receptor,SUCNR1)在肺纤维化发生发展中的作用和机制.方法:用SUCNR1敲除(SUCNR1-/-)小鼠构建博来霉素诱导的肺纤维化模型,观察对肺纤维化的影响.组织生长因子[β1(tissue growth factor β1,TGF-β1)刺激SUCNR1-/-原代肺成纤维细胞,MTT检测细胞增殖、Western blot检测细胞外基质(Collagen Ⅰ和α-SMA)生成.检测各组肺纤维化小鼠肺组织中叉头框蛋白M1(forkhead box protein M1,Foxm1)表达,使用Foxm1抑制剂处理TGF-β.1和琥珀酸盐刺激的原代肺成纤维细胞,观察对细胞增殖和细胞外基质生成的影响.结果:SUCNR1-/-小鼠肺纤维化较SUCNR1wt明显减轻.刺激SUCNR1-/-原代肺成纤维细胞增殖能力、Collagen Ⅰ和α-SMA生成明显降低.Foxm1在博来霉素诱导的肺纤维化模型中明显升高,但在SUCNR1-/-模型中明显减少;抑制Foxm1可减少TGF-β1和琥珀酸盐诱导的肺成纤维细胞增殖、Collagen Ⅰ和α-SMA生成.结论:SUCNR1参与了肺纤维化的发生发展,其可能机制是通过促进Foxm1表达而启动肺成纤维细胞.     

依普拉芬对新生大鼠颅盖骨成骨细胞增殖和分化的影响

目的 研究依普拉芬对体外培养的原代大鼠成骨细胞增殖和分化功能的影响.方法 体外分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞,将不同浓度的依普拉芬加入培养液,测定细胞增殖情况、碱性磷酸酶(ALP)活性及钙化结节.结果 与阴性对照组相比, 各浓度组的依普拉芬均可增加成骨细胞数量(P＜0.01),提高细胞的ALP活性和促进钙化结节形成(P＜0.01),其中10-8～10-5 mol/L作用更为显著.结论 依普拉芬具有促进体外培养成骨细胞增殖、分化的作用.     

成纤维生长因子(FGF) 23基因沉默对甲状旁腺激素(PTH)促成骨细胞分化作用的影响

 目的  研究内源性成纤维生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)对甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)促成骨细胞分化作用的影响。方法  采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,应用小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术(RNAi)沉默成骨细胞FGF23表达,应用MTT法和PNPP法检测细胞增殖和碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)活性,应用real-time RT-PCR法检测其FGF23、ALP和骨钙素(osteocalcin,OCN)等基因mRNA水平,研究PTH对培养成骨细胞和FGF23基因沉默细胞的作用。结果  rhPTH1-34对培养成骨细胞增殖促进作用明显,分化促进作用弱。1×10-10~1×10-8 mol/L rhPTH1-34 作用3天,细胞增殖率增加31.6%~50.5% (P<0.05),而细胞比活性未见明显改变。同时其ALP和OCN转录水平轻度上调,分别较对照组增加35%(P<0.05)和16%(P>0.05)。rhPTH1-34上调成骨细胞FGF23 mRNA水平(4倍),该作用可被针对FGF23特异的shRNA转染所抑制。FGF23基因沉默后PTH促分化作用明显增强,其ALP和OCN mRNA水平分别较对照组增加1.8倍(P<0.05)和5.8倍(P<0.05),显示内源性FGF23对PTH促分化的干扰作用。结论  内源性FGF23可能参与PTH促分化作用的调节,FGF23上调可干扰PTH的促成骨细胞分化作用。     

大黄酸-雌酮对大鼠成骨细胞增殖和分化的作用

【目的】研究大黄酸-雌酮（LC-1）对原代培养大鼠成骨细胞增殖和分化的作用。【方法】酶消化法分离培养SD乳鼠颅盖骨成骨细胞；采取MTT法测定细胞增殖，磷酸苯二钠法（pNPP）测定细胞内外碱性磷酸酶（ALP）活性，研究不同浓度LC-1对成骨细胞增殖和分化能力的影响，并与雌酚酮和大黄酸的作用进行比较。【结果】给药3d后，与空白对照组相比：10^-6mol／L LC-1组、10^-7mol／L LC-1组和10^-7mol／L雌酚酮组明显促进成骨细胞增殖和增加细胞内外ALP活性（P〈0．05）；大黄酸抑制成骨细胞增殖，其中10^-6mol／L组有明显差异（P〈0．05），同时有增加细胞ALP活性的趋势，但无统计学差异。【结论】大黄酸-雌酮在体外可以促进成骨细胞增殖和分化。     

唑来膦酸联合Ghrelin对人成骨细胞增殖及成骨活性影响

目的:研究唑来膦酸联合Ghrelin对人成骨细胞hFOB1.19的作用。方法:以不同浓度唑来膦酸和Ghrelin处理成骨细胞,以MTT法检测其不同浓度和处理时间下细胞增殖情况,研究其最佳作用浓度;并以最佳作用浓度,单独和联合处理成骨细胞,检测成骨细胞在不同时间内碱性磷酸酶活性和骨钙素的表达量,研究成骨细胞的成骨活性。结果:唑来膦酸和Ghrelin对成骨细胞增殖均具有促进作用,其最佳作用浓度分别为10^(-10)mol/L和10(-10)mol/L和10^(-11)mol/L;该浓度下两者均可提高碱性磷酸酶活性和骨钙素表达量,但两者联合应用时碱性磷酸酶活性无明显差异,骨钙素表达量在作用72 h时有明显差异。结论:唑来膦酸和Ghrelin可以促进成骨细胞的增殖,提高碱性磷酸酶活性和骨钙素表达量,两者联合应用可能促进成骨细胞活性。     

锶掺杂改性羟基磷灰石的生物学性能研究

目的：研究不同锶掺杂量的羟基磷灰石Sr-HA的生物相容性及生物学活性。方法：合成0%(A)、1%(B)、5%(C)、10%(D)、20%(E)掺锶含量不同的五组Sr-HA,检测各组试样浸提液中钙、锶离子浓度,通过溶血试验检测了五组材料体外溶血性。L929成纤维细胞材料表面接种培养2、5天,通过倒置相差显微镜观察细胞形态MTT法检测相对增值度测试五组材料体外细胞毒性。将MG63成骨细胞接种到五种材料表面,采用MTT方法检测1、4、12小时成骨细胞在材料表面的附着和1、4、7 d时细胞在材料表面的增殖情况;并对第1、3、5天成骨细胞ALP活性进行检测。结果：100%浸提液五组材料中Ca₂₊浓度5%(C)最高,1%(B)最低;Sr₂₊浓度,20%(E)最高,0%(A)组最低。各组掺锶羟基磷灰石组的溶血率均低于5%。显微镜观察L929细胞的形态与阴性对照组比较相似。MTT检测相对增殖度5组材料总体毒性评级为0级、1级。MG63成骨细胞在材料表面培养4、12小时, 5%(C)、10%(D)、20%(E)三组表面细胞粘附数量明显高于0%(A)、1%(B)组 (P<0.05,P<0.01);12小时：1%(B)细胞粘附数量高于0%(A)组(P<0.05)。MG63成骨细胞在材料表面培养4、7天,5%(C)、10%(D)、20%(E)三组表面细胞增殖数量明显高于0%(A)、1%(B)组 (P<0.05,)。ALP活性检查显示：3天时5%(C)、10%(D)两组ALP活性高于其它三组(P<0.05,)。5天时5%(C)、10%(D)、20%(E)三组ALP活性高于0%(A)、1%(B)两组(P<0.05,)。结论：不同锶含量掺杂的羟基磷灰石具有良好地生物相容性,一定浓度的锶离子掺杂能够有效的提高羟基磷灰石的生物学活性,我们认为5%(C)、10%(D)组掺杂Sr-HA生物学效果最佳。     

他汀类药物对成骨细胞功能的影响

目的验证不同浓度的辛伐他汀对人类成骨细胞(OB)功能表达和体外成骨能力的影响,研究雌激素促进成骨作用的机制及剂量效应关系.方法取成人的髂骨松质骨,采用胶原-胰蛋白酶消化法,获得松质骨中的成骨细胞,进行纯化和培养.在此基础上添加不同浓度的辛伐他汀(1×10-10,1×10-9,1×10-8,1×10-7,1×10-6,1×5-5mol/L)并进行培养.用生化法测定细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,用放射免疫法测定细胞培养液中骨钙素(OC)和细胞间质的钙含量.结果辛伐他汀对成骨细胞ALP活性和骨钙素分泌的影响均呈正相关,即各浓度辛伐他汀对ALP活性、骨钙素的分泌和成骨细胞的成骨能力均有刺激作用,并与辛伐他汀剂量呈正相关.结论辛伐他汀能增加成骨细胞的ALP活性和骨钙素的产生,提高成骨细胞的成骨能力.     

雌激素受体和过氧化物酶体增殖物激活受体γ介导大豆苷原对骨形成的量效作用

目的：研究不同剂量大豆苷原（daidzein,DAI）对成骨细胞骨形成的作用及雌激素受体（estrogen receptor,ER）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ）对DAI促进骨形成的调节作用。方法：以培养的未经处理的人类胎儿成骨细胞（human fetal osteoblast,hFOB）为对照组,用17β-戊酸雌二醇（β-estradiol-17-valerate,E2）和不同浓度DAI分别处理hFOB72h后,噻唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法测定细胞增殖情况,4-硝基苯基磷酸二钠盐（4-nitrophenylphosphate disodiumsalt,PNPP）偶氮法测定成骨细胞碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性。用ER拮抗剂ICI182780、ERα拮抗剂MPP（methyl-piperidino-pyrazole）、PPARγ拮抗剂GW9662分别阻断受体ER、ERα和PPARγ后,再给予E2及不同浓度的DAI处理,MTT法检测成骨细胞增殖情况并计算细胞增殖率,PNPP偶氮法测定ALP水平。结果：随着DAI剂量的增加,成骨细胞增殖率递减,DAI10-9mol/L组较对照组显著升高,DAI10-5mol/L组较对照组显著降低（P〈0.05）。随着DAI剂量的增加,成骨细胞ALP水平递减,但差异无统计学意义（P〉0.05）。ICI182780阻滞ER后,E2组,DAI10-9、10-7及10-5mol/L组的细胞增殖率分别为88.16%、76.30%、81.18%、83.19%,均显著低于阻滞前（P〈0.05）;MPP单纯阻滞ERα后,E2组,DAI10-9、10-7及10-5mol/L组的细胞增殖率分别为69.78%、63.31%、70.71%、78.43%,均显著低于阻滞前（P〈0.05）。MPP阻滞后,DAI10-9mol/L组的ALP水平显著低于阻滞前（P〈0.05）。GW9662阻滞PPARγ后,E2组,DAI10-9、10-7及10-5mol/L组的细胞增殖率分别为103.14%、96.99%、112.88%和122.22%,其中DAI10-7及10-5mol/L组均较阻滞前显著升高（P〈0.05）,DAI10-9mol/L组轻度降低但差异无统计学意义。DAI10-5mol/L组的ALP水平较阻滞前显著升高（P〈0.05）。结论：DAI的骨保护作用具有剂量依赖性的双相作用特点,即低剂量DAI促进成骨细胞增殖,高剂量DAI抑制成骨细胞增殖。低剂量DAI主要通过作用于ER促进成骨细胞增殖和分化,对PPARγ的作用不明显;高剂量DAI主要通过作用于PPARγ抑制成骨细胞增殖和分化,同时也可通过作用于ER产生一定促进成骨细胞增殖的作用。     

丹参对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响

目的：了解丹参对SD大鼠成骨细胞增殖和分化的影响。方法：取新生的SD大鼠头盖骨，胶原酶法培养成骨细胞，用MTT法来测定不同浓度丹参对体外培养成骨细胞在24、48、72h不同时段的促细胞增殖作用；采用碱性磷酸（ALP）活性观察上述药物的促细胞分化作用。结果：0．05％、0．10％、0．15％的丹参可促进成骨细胞增殖率提高（P〈0．05）；不同浓度丹参可使碱性磷酸酶（ALP）活性增强（P〈0．05）。结论：丹参具有促进成骨细胞增殖及分化的作用。     

生物磷酸钙生物相容性的实验研究

目的 研究生物磷酸钙的骨组织生物相容性。方法 将人成骨细胞和生物磷酸钙复合培养,检测细胞增殖指数和碱性磷酸酶活性。结果 生物磷酸钙对人成骨细胞的碱性磷酸酶活性和增殖指数无抑制效应,而对细胞的增殖有一定的促进作用。结论 生物磷酸钙具有良好的骨组织相容性。     

化合物XW630对成骨细胞的作用

为探讨新合成化合物ＸＷ６３０对成骨细胞的作用，采用噻唑蓝蓝比色法法和碱性磷酸酶测定法观察了ＸＷ６３０对体外培养的成熟大鼠头盖骨成骨细胞的增殖和ＡＬＰ的表达，并用抗酒石酸磷酸酶染色法观察ＸＷ６３０对体外培养的破骨细胞形成的影响。