慢性饮酒大鼠胃粘膜的适应性细胞保护作用

目的：观察胃内灌注钝酒精对慢性饮酒大鼠胃粘膜的损害，并探讨慢性酒精刺激对大鼠胃粘膜细胞更新的影响及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法：以6％（V／V）的酒精作为大鼠饮水的惟一来源，分别在大鼠饮酒的不同时程内胃内灌注100％酒精，观察大鼠胃粘膜的损伤情况。同时用免疫组化和计算机图像处理技术观察饮酒不同时程的大鼠胃粘膜的细胞增殖和凋亡，了解其细胞更新的情况。结果：100％酒精灌胃后大鼠胃粘膜的损伤和对照组相比，饮酒后1天的大鼠胃粘膜改变差异无显著性，饮酒后3－14天大鼠的胃粘膜损伤有显著性降低，饮酒后28天的大鼠差异又无显著性。饮酒3－14天的大鼠有粘膜的细胞增殖和凋亡同步增加，提示在此时期内胃粘膜的细胞更新增强。结论：适当低浓度酒精反复刺激可以促进胃粘膜的细胞更新并引起大鼠胃粘膜的适应性细胞保护作用。     

慢性饮酒对大鼠胃粘膜细胞的凋亡与增殖的影响

目的 :研究大鼠慢性饮酒过程中胃粘膜的细胞凋亡和细胞增殖变化的规律 ,探讨慢性酒精刺激对胃粘膜的自我保护作用的影响。方法 :以 6% (V/V)的酒精作为大鼠饮水的唯一来源 ,利用流式细胞仪定量分析大鼠饮酒的不同时程内胃粘膜细胞的细胞周期和细胞凋亡 ,同时用免疫组化方法定性观察了大鼠胃粘膜的细胞增殖和凋亡情况。结果 :饮酒 3～ 2 8天的大鼠胃粘膜的细胞凋亡较对照组明显增加 ,在饮酒 3～ 14天的大鼠胃粘膜其细胞增殖也明显增加 ,提示在此时期内胃粘膜的细胞更新增强。结论 :长期低浓度酒精反复刺激可以促进胃粘膜的细胞凋亡并引起大鼠胃粘膜的自我保护作用减弱     

不同浓度酒精对慢性饮酒大鼠胃黏膜细胞增殖的影响

目的：探讨不同浓度酒精刺激对慢性饮酒大鼠胃黏膜细胞增殖的影响及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法：分别以l％、3％、6％、12％和24％(V／V)的酒精水溶液作为大鼠饮水的唯一来源，饮用3天后，再向胃内灌注100％酒精，观察大鼠胃黏膜的损伤情况。同时用免疫组化法检测增殖性细胞核抗原(PCNA)的表达，应用计算机图像处理技术观察饮酒不同时程的大鼠胃黏膜的细胞增殖和凋亡以了解其细胞更新的情况。结果:与对照组相比，100％酒精灌胃后大鼠胃黏膜的损伤情况如下，饮用1％和3％酒精的大鼠差异无显著性，而饮用6％和12％酒精的大鼠的胃黏膜损伤显著性降低，但饮用24％酒精的大鼠差异无显著性。饮用6％和12％酒精的大鼠胃黏膜的细胞增殖显著增加，提示胃黏膜的细胞更新增强。结论：慢性饮酒大鼠胃黏膜的细胞更新增强可引起胃黏膜的适应性细胞保护作用，此作用和饮用的酒精浓度有关。     

长期摄入低浓度酒精对大鼠胃黏膜热休克蛋白表达的影响

目的：探讨长期低浓度酒精刺激对大鼠黏膜热休克蛋白70（HSP70）表达的影响。及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法：以6％的酒精水溶液作为大鼠饮水的唯一来源，用免疫组化技术观察饮酒不同时程中大鼠黏膜HSP70阳性细胞的分布情况，并对不同的胃腺细胞通过形态学观察或HSP70与增殖细胞核反应抗原（PCNA）免疫双重染色进行鉴定，结果：正常对照组大鼠的主细胞呈HSP70弱阳性反应。饮用酒精水溶液1天的大鼠，胃腺表面黏液性细胞呈HSP70强阳性反应，主细胞弱阳性反应。饮用3－14天的大鼠，HSP70阳性细胞分布于胃黏膜表面，胃腺颈部和胃基底部，胃腺颈部HSP70阳性细胞经PCNA和HSP70免疫双重染色 实为胃腺干细胞，饮用28天的大鼠HSP70阳性细胞分布区域和饮用1天的大鼠相同。结论：适当低浓度的酒精刺激可引起胃黏膜干细胞HSP70的表达，并可能在大鼠胃黏膜的适应性细胞保护机制中起重要作用。     

硒对氟诱导的大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤的作用

目的 :研究硒对氟中毒诱导的大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤的作用。方法 :选用雄性SD大鼠 ,氟中毒组大鼠饮用含 15 0mg·L-1氟化钠 (NaF)的蒸馏水溶液 ,硒氟联合作用组大鼠饮用含 15 0mg·L-1氟化钠(NaF)和 2mg·L-1亚硒酸钠 (Na2 SeO3 )的蒸馏水溶液 ,染毒 4周 ,用单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤。结果 :氟中毒能明显诱导大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞的DNA损伤 ,总损伤细胞百分率分别为 5 0 .2 0 %和 4 4 .80 % ,而硒对氟造成的口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤具有明显的拮抗作用 ,总损伤细胞百分率分别为 14 .6 0 %和 12 .6 0 %。结论 :硒对氟中毒引起的大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤具有明显的拮抗作用。     

颌下腺摘除对大鼠急性实验性胃粘膜损伤的影响

用高浓度酸酒精在大鼠颌下腺摘除术后第１、２和３周灌胃，所引起的急性胃粘膜损伤较假手术对照组有加重趋势，但无统计学差异；而低浓度酸酒精灌胃在摘除组引起的胃粘膜损伤比假手术组明显加重。颌下腺摘除大鼠经口补充外源性表皮生长因子（ＥＧＦ）后，酸酒精引起的胃粘膜损伤比单纯摘除组及摘除后补充生理盐水对照组均明显减轻，而和假手术组相当。提示颌下腺对维持大鼠胃粘膜的抗损伤能力具有重要意义，而发挥这一作用的因素可能     

慢性酒精刺激对大鼠下丘脑及伏核内β-内啡肽含量的影响

目的：观察在长期代浓度酒精处理后及撤除酒精给药的过程中,大鼠下丘脑及伏核中β－内啡肽含量的变,探讨酒精对β－内啡肽系统的影响及其在酒精依赖过程中的作用,方法：以6%（v/v)的酒精作为大鼠饮水的唯一来源,分别取大鼠在饮酒和撤除酒精不同时程的下丘脑及伏核标本,用放免法测定每克组织中β－内啡肽的含量,同时用顶空气相色谱法测定大鼠在饮酒过程中不同时段血中的酒精浓度,结果：下丘脑及伏核的β－内啡肽含量在生长期（4周）饮用酒精后无明显变化,在撤除酒精后的2－4天明显升高,1周后恢复正常,动物血中酒精浓度在摄入酒精的不同时段无明显差异,结论：酒精影响下丘脑及伏核中β－内肽的含量是低浓度反复多次刺激的结果,撤药的伏核内β－内啡肽的高含量是动物产生依赖的重要原因。     

颌下腺摘除对大鼠急性实验性胃粘膜损伤的影响

用高浓度酸酒精在大鼠颌下腺摘除术后第１、２和３周灌胃，所引起的急性胃粘膜损伤较假手术对照组有加重趋势，但无统计学差异；而低浓度酸酒精灌胃在摘除组引起的胃粘膜损伤比假手术组明显加重。颌下腺摘除大鼠经口补充外源性表皮生长因子（ＥＧＦ）后，酸酒精引起的胃粘膜损伤比单纯摘除组及摘除后补充生理盐水对照组均明显减轻，而和假手术组相当。提示颌下腺对维持大鼠胃粘膜的抗损伤能力具有重要意义，而发挥这一作用的因素可能是颌下腺所分泌的ＥＧＦ．     

氧化应激在酒精性心肌病大鼠中的作用

目的 研究氧化应激在酒精性心肌病中的作用.方法 采用长期大量自由饮用酒精的方式建立酒精性心肌病大鼠自由饮模型,6个月后,观察大鼠心肌组织的形态学改变及超微结构的变化,测定心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肤(GSH)水平.结果 模型组大鼠心肌组织中MDA含量明显升高(P<0.01),SOD活力和GSH含量明显降低(P<0.01).结论 长期摄入大量酒精可使氧自由基代谢失衡,导致心肌损伤.氧化应激在酒精性心肌病发病机制中发挥着重要的作用.     

酒精对大鼠海马兴奋性氨基酸含量的影响

目的 观察酒精对大鼠海马兴奋性氨皋酸类神经递质的影响.方法 本实验采用微透析和高效液相色谱法-电化学技术观察饮用酒精对大鼠海马兴奋性氨基酸谷氨酸(glutamate,Glu)和天冬氨酸(asparcte,Asp)含量的影响.结果 饮用酒精4周大鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)区细胞外液Glu含量与对照组相比明显减少(P<0.01),Asp含量无明显变化.饮用酒精2周大鼠海马DG区细胞外液GIu含量无明显变化.结论 长期饮用酒精可使海马Glu释放减少.     

BMK1和ROS在慢性饮酒大鼠胃黏膜细胞增殖中作用的研究

目的：研究慢性饮酒引起大鼠胃黏膜细胞增殖的增加是否与ROS及ERK1/2和/或BMK1有关.方法：SD大鼠随机分4组：对照组;饮用6%酒精组;100mg/kg槲皮素灌胃组;饮酒加槲皮素灌胃组,均处理7天.用免疫印迹技术检测胃黏膜组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1/2）和大分子MAPK（BMK1）的表达及活性;采用免疫荧光双重染色方法对胃黏膜组织石蜡切片PCNA和磷酸化的BMK1（p-BMK1）蛋白进行定位检测.结果：慢性饮酒组胃黏膜PCNA和CyclinD1表达上调;酒精组PCNA、p-BMK1双阳性细胞主要定位于胃底腺颈部;BMK1的表达、激活与酒精诱导的胃黏膜干细胞增殖呈正相关,ERK1/2的表达、激活与增殖无关;但饮酒加槲皮素灌胃阻止了慢性饮酒所致胃黏膜细胞增殖,而且抑制了酒精诱导的BMK1表达与激活.结论：慢性饮酒刺激胃黏膜底腺干细胞的增殖可能与酒精引起活性氧（ROS）增多有关,同时本研究还第1次发现慢性饮酒诱导胃底腺干细胞增殖是由BMK1所介导.     

大鼠胃粘膜抗再损伤机理的初步研究

观察了胃粘膜大面积损伤愈合后，对第二次损伤产生抵抗或耐受作用的机理，在第一次损伤后不同时间取胃粘膜组织，进行ＤＮＡ合成速率、ＰＧＥ２含量及胃粘膜血流量（ＧＭＢＦ）的测定。损伤后第１７天，胃粘膜完全愈合，粘膜ＤＮＡ合成速率、粘膜ＰＧＥ２的含量及ＧＥＢＦ均增加。结果提示：胃粘膜抗再损伤作用似与粘膜ＤＮＡ、ＰＧＥ２合成和ＧＭＢＦ的增加有关，与ＧＭＢＦ的关系更为密切。     

Proliferation in rat gastric mucosal cells induced by chronic ethanol feeding through the ROS/BMK1 pathway

Objective： To investigate the correlation between the gastric mucosal cell proliferation and low-concentration alcohol intake in a chronic drinking rat model, and to investigate the possible role of ROS/BMK1 pathway in this process. Methods： SD rats were randomly divided into 4 groups： control group, administered with tap water; ethanol group, with 6% ethanol in the drinking water; quercetin group, with quercetin （100 mg/kg） by intragastric gavage twice a day; ethanol＋quercetin group, administered with quercetin combined with 6% ethanol. The cell proliferation in rat gastric mucosa was analyzed by flow cytometery and proliferating cell nuclear antigen （PCNA） immunohistochemical staining. Activation of ERKs and BMK1 was evaluated by the expression and phosphorylation of these kinases using Western Blot analysis. Results： Compared to the controls, the cell proliferation in gastric mucosa of rats exposed to the ethanol for 7 d was enhanced, and the activation of BMK1 was also increased in this period. Otherwise quercetin, as a free radical scavenger, attenuated increased cell proliferation and activation of BMK1 in rat stomach treated with ethanol. However, no changes of ERKs expression and phosphorylation occurred in the rats in all groups. Conclusion： These results suggested that the ROS and BMK1 activation may be a central mechanism, which underlies cell proliferation in rat gastric mucosa stimulus with the chronic low-concentration ethanol.     

小肠三叶因子保护胃黏膜促进溃疡愈合的实验研究

目的:研究基因重组人小肠三叶因子(recombinant human intestinal trefoil factor , rhITF)促进慢性胃溃疡的愈合、保护胃黏膜抵抗多种损伤的作用及其机制.方法:(1) 急性损伤方法:用乙醇,阿司匹林,应激和幽门结扎诱发胃黏膜损伤,用Guth法测定损伤指数.(2)慢性溃疡产生法:用50%(质量分数)乙酸接触胃体部桨膜面.损伤后第2天开始经口灌 rhITF 11 d,第12天麻醉下测定胃黏膜面血流量(GMBF),取胃液测定胃酸排除量,检查溃疡指数、胃黏膜氨基己糖和一氧化氮浓度,检测溃疡底部一氧化氮合酶iNOS mRNA的表达.结果: rhITF有保护胃黏膜抗急性损伤的作用,在应激诱发的损伤中,胃黏膜糖蛋白含量增加.rhITF促进慢性胃溃疡的愈合,治疗组和对照组比较,溃疡指数和胃酸排除量明显减少(P<0.05),GMBF、Hex和NO含量及iNOS mRNA表达增加(P<0.05).结论:rhITF 保护胃黏膜可能和胃黏膜黏液糖蛋白增加有关.rhITF促进慢性胃溃疡愈合,其机制可能增加Hex含量和GMBF,抑制胃酸,刺激 iNOS的表达.     

NAC对大鼠脑缺血再灌注引起胃黏膜损伤的影响

目的研究N-乙酰-L-半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）对大鼠脑缺血再灌注引起应激性胃损伤的影响。方法采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血模型,缺血后静脉注射NAC（150 mg/kg）,取胃后计数胃黏膜损伤指数（gastric mucosal damage index,GMDI）,测定胃黏膜组织中丙二醛（malonaldehyde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性,采用原位检测（TUNEL）法检测胃黏膜细胞凋亡情况。结果 NAC可以降低大鼠脑缺血再灌注引起应激性胃损伤时的胃黏膜损伤指数,使胃黏膜组织中MDA含量减少、SOD活性增强,抑制胃黏膜细胞凋亡。结论 NAC对大鼠脑缺血再灌注引起的应激性胃损伤具有保护作用,这种保护作用是通过抑制氧化应激、减少胃黏膜细胞凋亡而实现的。     

胃舒颗粒对胃粘膜保护作用的实验研究

观察了胃舒颗粒对大鼠胃粘膜的保护作用,并对其作用机理进行探讨。结果表明：胃舒颗粒对消炎痛、酸性乙醇和水浸—束缚应激诱导的大鼠胃粘膜损伤具有明显的保护作用。这种粘膜保护作用与其提高胃粘膜清除氧自由基能力有关,而对胃液成分及胃壁结合粘液含量无明显影响