毛囊混合细胞植入胶原/壳聚糖多孔支架诱导裸鼠毛发生长及支架内形成血管样结构

目的 探讨利用毛囊混合细胞植入胶原,壳聚糖多孔支架内重建毛囊的可行性与支架内血管形成状态.方法 用注射法将体外培养的C57BL/6J近交系乳鼠背部皮肤毛囊混合细胞接种至胶原,壳聚糖多孔支架,培养2周后,将含毛囊混合细胞胶原/壳聚糖多孔支架植入裸鼠皮下,肉眼观察裸鼠背部毛发形成情况.6周后取移植区皮肤组织经10%甲醛固定后行组织学观察(HE染色).结果 移植至裸鼠皮下5周后,裸鼠背部在含毛囊混合细胞的胶原,壳聚糖多孔支架移植区皮肤出现毛发,丰长,6周后取皮肤组织作HE染色发现有分化成熟的毛囊形成,且支架内有血管样结构形成.而空白胶原/壳聚糖多孔支架移植区皮肤未发现毛生长,组织检杳也未发现有毛囊形成,且只有在支架表浅部位有少黑血管样结构形成.结论 毛囊混合细胞植入胶原/壳聚糖多孔支架内可诱导裸鼠毛发的形成,促进支架血管样结构的形成.     

毛囊混合细胞在海藻酸钠支架上诱导毛囊重建

目的 探讨原代培养的毛囊外根鞘细胞、毛乳头细胞和成纤维细胞,采用不同接种顺序在体外和体内诱导毛囊形成.方法 将培养的毛囊外根鞘细胞(ORSC)、毛乳头细胞(DPC)和丝裂霉素干预后的成纤维细胞按一定比例制成细胞悬液,并按不同的接种顺序接种于海藻酸钠3D细胞支架上,构建毛囊的体外三维模型并培养8周,行HE染色光镜观察毛囊形成的情况;同时将该三维模型移植入bal/bcl裸鼠皮下体内培养8周,移植部位取材后分别行HE染色、免疫组化和电镜观察毛囊形成的情况.结果 体外构建的毛囊三维模型未见到角化物质及毛囊样结构;裸鼠皮下移植物HE染色可见细胞聚集成团,有呈环状排列的毛囊样结构,CK14,CK15、β1整合素和波形蛋白染色阳性;电镜下模型中可见贴附在支架上的毛囊细胞和红细胞.先接种用丝裂霉素干预的成纤维细胞于海藻酸钠3D细胞支架上培养1周后再接种DPC∶ORSC (1∶5)细胞悬液,裸鼠体内移植物HE染色不仅可见明显的毛囊样结构形成,而且形成毛囊样结构的数目较多.结论 模型中DPC保持了诱导毛囊形成的能力,ORSC保持了毛囊干细胞的特点.并明确了诱导毛囊形成的最佳细胞组合、接种顺序和比例,为体外构建含有毛囊的人工皮肤奠定了一定基础.     

基底细胞样毛囊错构瘤一例

正临床资料患者,女,51岁。主因右面部丘疹渐增大2年,于2015年9月16日就诊。患者于2013年夏季发现右侧面部出现一粟粒大小黑色丘疹,表面光滑,无明显自觉症状;皮损缓慢增大,中央呈淡黑色,边缘近肤色,无痒痛及破溃。患者否认有局部外伤史及特殊外用药史,家族中无类似疾病患者。体格检查:全身系统检查无明显异常。皮肤科情况:右侧面部可见一直径约1 cm的肤色斑块,斑块中央可见一约绿豆大     

基底细胞样毛囊错构瘤并发粟丘疹

报告1例基底细胞样毛囊错构瘤.患者男,18岁.出生时即发现左侧颈部有一斑片,形态不规则,不痛不痒,境界清楚,较周围肤色浅,其上有丘疹和结节.皮损组织病理检查:真皮内基底样细胞呈条索状吻合,嵌于疏松基质内,其间有鳞状上皮细胞,细胞无异形性,未见有丝分裂象;免疫组化染色示Bcl-2(-),Ki-67(-),基质CD34(+).诊断:先天性局限型基底细胞样毛囊错构瘤.     

线状痣样型基底细胞样毛囊错构瘤

报告1 例线状痣样型基底细胞样毛囊错构瘤.患者女,41 岁.左侧颈、背部丘疹20 余年,无自觉症状.皮损表现为数百个粟粒至黄豆大肤色或浅褐色丘疹,聚集成片,呈线状痣样排列,分布于左侧颈部及腰背部.皮损组织病理检查符合基底细胞样毛囊错构瘤.免疫组化:基质细胞波形蛋白(vimentin)、CD10、CD34 均阳性,基底样细胞S-100蛋白(-)、Bcl-2(-)、Ki-67 蛋白表达< 5%.     

基底细胞样毛囊错构瘤1例

患儿男,5岁。左上臂外侧泛发棕色丘疹3年。皮肤科情况:左上臂外侧不规则分布棕色丘疹,中等硬度。皮损组织病理示:真皮内基底样小细胞呈条索状交互吻合,嵌于疏松的纤维性基质内,团块细胞周边呈明显的栅栏状。诊断:基底细胞样毛囊错构瘤。     

毛囊混合细胞诱导毛囊重建的研究

目的分离培养人毛囊外根鞘细胞株(ORSC)和人毛囊毛乳头(DPC),在体内和体外诱导毛囊形成。方法利用酶消化法和组织块法获得第三代DPC和ORSC,将上述两种细胞混合后接种于海藻酸钠3D细胞支架,构建毛囊的体外三维模型,同时将该三维模型移植入SD大鼠皮下,8周后移植部位取材,行HE染色、免疫组化和电镜观察毛囊形成情况。结果 SD大鼠移植部位取材,HE染色可见细胞聚集成团状的毛囊样结构,CK14,CK15和波形蛋白染色阳性,电镜下可见支架中有散在细胞分布。结论 SD大鼠体内三维模型培养,证明在该模型中诱导出了具有向毛囊分化倾向的毛囊样结构,为以后成功重建毛囊做出了有益探索。     

先天性限局型基底细胞样毛囊错构瘤

报告1例先天性局限型基底细胞样毛囊错构瘤.患儿于2个月龄时就诊,出生时发现右侧面部有淡红褐色、淡红色或肤色斑块、结节和皮赘样损害,无自觉症状.皮损直径数毫米至数厘米,分布于右侧颞部、外眦及颊部.患儿系统检查未见其他异常.家族中无类似病史.皮损组织病理检查符合基底细胞样毛囊错构瘤.     

培养毛乳头细胞生物学特性和毛囊重建的研究

目的 观察毛乳头细胞在体内外诱导毛囊再生和支持毛囊生长情况。方法 采用免疫组化、原位杂交、毛囊器官型培养和裸鼠移植技术，观察不同传代培养的毛乳头细胞碱性成纤维细胞生长因子，内皮素和干细胞因子的表达变化情况。结果 低传代培养的毛乳头细胞的内皮素和干细胞因子表达较强，传代6代后减弱。用低传代培养的毛乳头细胞与毛囊上皮细胞在毛囊器官型培养模型中可见毛囊样结构形成，移植到裸鼠后可见较为完整的毛囊形成。用低传代培养的毛乳头细胞与毛囊上皮细胞按一定比例混合后直接注射到裸鼠皮下，也可见毛囊样结构形成。发现毛乳头细胞诱导毛囊再生的能力与其表达内皮素和干细胞因子的强弱相关。结论 低传代培养的毛乳头细胞在体内外均具有诱导毛囊再生的能力，并且与其表达内皮素和干细胞因子的强弱相关。     

嗜毛囊性蕈样肉芽肿的最新分类与治疗进展

嗜毛囊性蕈样肉芽肿(folliculotropic mycosis fungoides, FMF)是蕈样肉芽肿(mycosis fungoides, MF)的一种独特变异型,临床少见,组织学改变以毛囊为中心的非典型淋巴细胞浸润为特征。过去认为FMF预后普遍较经典型MF差,但近年研究发现FMF是一组异质性疾病,根据预后不同至少可以分为两类,一类为早期病变,以斑片、毛囊性丘疹、痤疮样皮疹为主要表现,预后良好;另一类为晚期病变,以结节、肿瘤为主要表现,或者出现皮肤外其他器官受累,预后差。故FMF治疗方式的选择应同经典型MF一样根据分类分期而定。本综述重点阐述了FMF的最新分类,预后因素及其治疗选择。     

正常皮肤毛囊中朗格汉斯细胞的定位,定量观察

运用抗ＣＤ１ａ单克隆抗体免疫组化方法检测了１０例正常皮肤毛囊皮脂腺单位中朗格汉斯细胞（ＬＣ）的定位和定量情况,结果显示ＬＣ主要集中于毛囊上中部;如漏斗部平均１９．８７个／毛囊（范围８￣５４个）、皮脂腺导管和腺上皮中平均１６．３５个（范围７￣３４个）,其分布密度类似于表皮,相反,在毛囊下部ＬＣ数量明显减少,平均４．１６个／毛囊,且主要见于其上段的隆突部附近,毛囊部几乎见不到ＣＤ１ａ阳性ＬＣ。这种分布     

人毛囊干细胞的定位及增殖特性

目的 探讨人毛囊干细胞定位和增殖特性.方法 取人枕部头皮毛囊进行角蛋白19(K19)免疫组化染色,并测量阳性段距毛囊下端的距离;将包含毛球部上方阳性段的毛囊上皮组织分别置于含有和不含有间质细胞的凝胶表面气液界面培养,当出现增殖灶时,测量其距毛囊下端的距离,分析K19阳性部位与培养出现的增殖灶之间的关系,并通过透射电镜观察增殖灶的超微结构.结果 人枕部头皮毛囊有两个K19阳性区域,即隆突部和毛球部上方一段外根鞘,毛囊下段上皮组织只在含有间质细胞的凝胶表面培养时毛球部上方出现一增殖灶,统计学分析支持毛球部上方的K19阳性部位和毛囊下段上皮组织培养出现的增殖灶为同一部位.透射电镜显示增殖灶含有幼稚细胞、成熟角质形成细胞和凋亡细胞.结论 人头皮毛囊可能有两个干细胞库,即隆突部和球部上方外根鞘的一个局限区域,干细胞的增殖需要间质细胞(如毛乳头细胞)的存在,增殖的干细胞可能向形成新的干细胞、成熟角质形成细胞和凋亡细胞三个方向演变.     

真皮干细胞在毛囊周期中的作用

毛囊由表皮(上皮)及真皮(间充质)组成,它们之间的相互作用在毛囊的形态发生及生长中发挥重要作用,二者之间相互作用是毛囊成功重建的关键因素.在毛发形成过程中,真皮细胞是诱导者,上皮细胞是应答者.真皮鞘和毛乳头内存在毛囊真皮干细胞,属于成体干细胞,具有慢周期、未分化、自我更新和体外增殖能力强的特点.真皮鞘中的真皮干细胞较长寿,可以历经几个毛囊周期,重建真皮鞘.在毛囊周期的生长期,真皮鞘中的干细胞产生新细胞提供给毛乳头;在退行期,真皮干细胞子代移出毛乳头或死亡.毛囊真皮细胞对于损伤和疾病之后的毛囊重建及修复具有重要意义.     

毛囊干细胞研究进展

毛囊是一个周期性自我更新的皮肤附属器，干细胞周期性的增殖和分化决定毛囊的生长特性。毛囊有两个干细胞群，一个位于毛囊的隆突部，另一个位于毛囊的下三分之一近毛球部。它们有不同的命运和功能．分化形成毛囊的不同部分。就毛囊周期主要细胞的增殖、分化、迁移等过程进行综述，分析毛囊周期的形成机制。     

毛囊隆突区干细胞壁龛的研究进展

组织中干细胞的微环境壁龛的作用受到关注。毛囊的精细结构为研究干细胞的生物学特性提供了极好的体系,毛囊隆突区内包含许多干细胞,它们各有自己的壁龛,其中研究最多的是表皮干细胞壁龛和黑素干细胞壁龛。毛囊干细胞的功能受其内在因子调节,而后者受到周围细胞产生的外在信号分子调控。探索干细胞及其壁龛在皮肤肿瘤的作用,可能为临床治疗皮肤肿瘤提供新思路。     

毛乳头诱导毛囊形成和毛发生长信号通路的研究进展

毛乳头是位于毛囊底部的特殊成纤维细胞团块,在毛囊的周期性生长中,毛乳头细胞与周围细胞相互作用而发挥重要功能,被认为是控制毛囊形成和毛发生长信号传导的中心.近年来的研究表明,许多信号通路,包括Wnt、骨形成蛋白、Shh、Notch、成纤维细胞生长因子等信号通路,在毛乳头控制毛囊形成和毛发生长的机制中起作用.可以通过这些信号通路,促进体外培养毛乳头细胞的增殖、加强体外培养毛乳头细胞诱导毛发生长的能力,从而建立一种毛发重构技术用于临床治疗.     

毛囊干细胞向黑素细胞系定向分化调控机制的研究进展

毛囊干细胞包含神经嵴来源的成体干细胞,具有多向分化潜能.利用毛囊干细胞模型,可以深入研究从神经嵴干细胞到成熟黑素细胞的定向分化过程和掌握黑素细胞前体阶段发育分化的调控机制,从而为理解色素性疾病的发生发展和恢复提供新的理论依据.概述近年来调控毛囊干细胞向黑素细胞系定向分化的相关细胞因子和信号通路的进展,以期为色素性皮肤病的发病和治疗发展提供新的方向和突破口.

Abstract：

Hair follicle stem cells contains pluripotent adult stem cells derived from the neural crest.With the experimental model of hair follicle stem cells,further studies could be carried out on the directed differentiation process of neural crest-derived stem cells into mature melanocytes,and on the regulatory mechanisms of melanocyte precursor differentiation,which will provide theoretical evidence for the understanding of development and recovery of pigmentary skin diseases.This article focuses on the recent advances in cytokines and signaling pathways regulating the differentiation from hair follicle stem cells into melanocyte lineage,which may provide directions for studies on the pathogenesis and treatment of pigmentary skin disorders.     

Human hair growth ex vivo is correlated with in vivo hair growth: selective categorization of hair follicles for more reliable hair follicle organ culture

Of the numerous assays used to assess hair growth, hair follicle organ culture model is one of the most popular and powerful in vitro systems. Changes in hair growth are commonly employed as a measurement of follicular activity. Hair cycle stage of mouse vibrissa follicles in vivo is known to determine subsequent hair growth and follicle behavior in vitro and it is recommended that follicles be taken at precisely the same cyclic stage. This study was performed to evaluate whether categorization of human hair follicles by the growth in vivo could be used to select follicles of the defined anagen stage for more consistent culture. Occipital scalp samples were obtained from three subjects, 2 weeks later after hair bleaching. Hair growth and follicle length of isolated anagen VI follicles were measured under a videomicroscope. Follicles were categorized into four groups according to hair growth and some were cultured ex vivo for 6 days. Follicles showed considerable variations with respect to hair growth and follicle length; however, these two variables were relatively well correlated. Hair growth in culture was closely related with hair growth rate in vivo. Moreover, minoxidil uniquely demonstrated a significant increase of hair growth in categorized hair follicles assumed at a similar early anagen VI stage of hair cycle. Selection of follicles at a defined stage based on hair-growth rate would permit a more reliable outcome in human hair follicle organ culture.Oh Sang Kwon and Jun Kyu Oh contributed equally.