大鼠骨髓间充质干细胞定向诱导分化为脂肪细胞的实验研究

骨髓中除了造血干细胞外,还有一类来源于中胚层未分化的骨髓间充质干细胞（marrow mesenchymal stemcells,BMSCs）,其体外培养增殖迅速,不同条件下可以分化为成骨细胞、软骨细胞、肌细胞、成纤维细胞、脂肪细胞等多种组织细胞。近来研究发现骨质疏松,激素性骨坏死等疾病中骨髓脂肪细胞形成增加,脂肪细胞来源于脂肪前体细胞,脂肪前体细胞又是由间充质干细胞分化而来。本研究建立体外诱导BMSCs分化为脂肪细胞方法,旨在为骨质疏松,激素性骨坏死,肥胖症等疾病的发病机制及防治药物研究提供细胞模型。     

组蛋白H3的甲基化修饰与脂肪细胞分化关系的研究进展

超重和肥胖可以引起多种疾病,肥胖的形成与白色脂肪细胞内能量过度蓄积密切相关。人体内的棕色和米色脂肪细胞可以通过适应性产热消耗能量而减轻肥胖,这两类脂肪细胞的分化调控尚在研究中。表观遗传调控机制中的组蛋白H3的第4、9和27位氨基酸残基的甲基化和(或)去甲基化的一部分修饰酶及其催化产物与棕色和米色脂肪细胞分化及相关基因表达密切相关。组蛋白的甲基化修饰可能成为肥胖及其相关疾病的发病机制及治疗研究的新靶点。     

前脂肪细胞因子-1对糖脂代谢的影响

前脂肪细胞因子-1(preadipocyte factor1,Pref-1)是脂肪细胞分化早期具有分化抑制作用的分子标志,而脂肪细胞的分化障碍不仅能够导致脂代谢障碍,还可以使糖尿病的易患性增加,导致肥胖、脂肪营养不良、糖尿病等代谢性疾病。本文就Pref-1的结构、表达、其在脂肪细胞分化中的作用及其对糖、脂代谢的影响进行综述。     

棕色脂肪细胞发育分化及转录调控

棕色脂肪在体温调节和能量代谢方面发挥着重要的生理作用。而脂肪细胞分化及其调控失常与人类许多疾病如肥胖、2型糖尿病、高血压、高血脂及多种癌症等密切相关。本文从脂肪细胞的起源、前脂肪细胞向脂肪细胞的分化过程、脂肪细胞分化及调控等方面的研究进行了综述,以期为上述疾病的预防与治疗提供重要的分子生物学基础。     

SMAF1基因的异位过表达对脂肪细胞3T3-L1增殖和凋亡的影响

目的观察一脂肪细胞特异性表达的新基因小脂肪细胞因子1（SMAF1）在小鼠脂肪前体细胞3T3-L1中的异位表达对脂肪细胞增殖和凋亡的影响。方法构建小鼠SMAF1真核表达载体并稳定转染3T3-L1脂肪前体细胞以获得永久异位表达SMAF1基因的细胞株,使用Westernblot证实SMAFl基因的表达。体外培养SMAF13T3-L1脂肪细胞,以MTT法检测SMAF13T3-L1脂肪细胞的增殖;用流式细胞仪对SMAFl3T3-L1脂肪细胞进行凋亡分析。结果与对照相比,SMAF13T3-L1脂肪细胞增殖明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;而SMAF13T3-L1脂肪细胞凋亡分析结果与对照无显著性差异。结论SMAFl基因在3T3-L1中的异位性表达,对3T3L1前体脂肪细胞生长增殖有显著的抑制作用,而对细胞凋亡无影响,提示SMAF1在脂肪细胞增殖分化中发挥一定的作用。     

皮下脂肪和内脏脂肪分布与胰岛素抵抗关系研究进展

肥胖（obesity）是一种因长期能量摄入过剩而出现脂肪细胞体积增大或数量增多,临床上以体重增加和脂肪异常堆积为主要特点。随着现代人生活方式和饮食模式的改变,肥胖问题已成为威胁人类健康的三大重要慢性流行疾病之一。研究发现肥胖和超重与胰岛素抵抗、心血管疾病发病风险、睡眠呼吸功能紊乱及某些癌症发病密切相关。然而,对于肥胖人群而言,脂肪分布比脂肪总量的危害更大。腰围是评价腹型肥胖主要指标,与BMI相比,腰围对预测2型糖尿病发病具有更重要的意义[1]。通常腹型肥胖预示着内脏脂肪的大量堆积。临床研究[2]。证实与皮下脂肪相比,内脏脂肪才是导致胰岛素抵抗、心血管疾病及血脂异常的重要危险因素。但皮下脂肪尤其是腹部皮下脂肪功能异常同样会导致糖代谢异常[3]。因此,本文通过对该领域相关研究进行归纳总结,以探讨脂肪分布与胰岛素抵抗之间的关系。     

针刺对实验性肥胖大鼠减肥作用及脂肪细胞形态研究

目的观察针刺对肥胖大鼠的减肥作用及其对脂肪细胞形态的影响。方法建立实验性肥胖大鼠模型,分组观察针刺对肥胖大鼠的体质量、附睾脂肪、肾周脂肪、心包周脂肪及肝肾重量的影响,并采用HE染色法观察脂肪细胞形态的变化。结果肥胖大鼠体质量[(512.24±13.56)g]、附睾周脂肪[(5.14±1.57)g]、肾周脂肪[(8.12±2.86)g]、心包周脂肪[(1.04±0.18)g]及白色脂肪细胞的体积[(3.56±2.50)μm3]均显著高于正常大鼠水平;针刺治疗后,针刺组大鼠体质量[(442.10±30.32)g]、附睾周脂肪[(3.57±0.50)g]、肾周脂肪[(5.84±2.47)g]、心包周脂肪[(0.72±0.05)g]及白色脂肪细胞的体积[(1.70±1.25)μm3]均显著下降,大鼠白色脂肪细胞的体积缩小,胞体塌陷,棕色脂肪血管周围的白色脂肪减少。结论针刺对肥胖大鼠白色脂肪细胞形态的影响可能是实现减肥的形态基础。     

人前脂肪细胞的培养及鉴定

目的研究从皮下脂肪组织中分离人前脂肪细胞的可行性。方法从18-,-40岁成人皮下脂肪组织中以酶消化法分离得到前脂肪细胞。对分离的前脂肪细胞进行形态学观察;以免疫细胞化学方法及成脂诱导分化鉴定前脂肪细胞。结果培养的前脂肪细胞,形态与成纤维细胞类似,增殖、传代快;表达脂肪前体细胞的特异标志aP2、S-100蛋白;前脂肪细胞自发成脂率低,成脂诱导分化率〉95％。结论从人皮下脂肪组织中可以分离出纯度高、增殖快、成脂分化率高的前脂肪细胞。     

肥胖及防治

所谓肥胖指人体内的脂肪储存量显著超过正常人平均量.一般认为,体重超过正常值的10%为过重,超过20%即为肥胖.一个人的胖瘦是由其脂肪细胞的数量和脂肪细胞内脂质含量的多少来决定的,也就是说取决于脂肪组织的总量.在人类进化过程中,对于热量的需求改变人体没有建立自身调节食物的摄取、吸收和排泄机制,即人体缺乏快速控制体重的负反馈自稳机制.人体所需要的能量,主要是由糖在体内氧化供给,若食物中糖的含量超过机体对能量的需求,其剩余部分中少部分可转化为糖原,大部分在进食后增高的血浆     

肥胖相关微RNA的研究进展

肥胖与高血压、高脂血症、心脑血管疾病、2型糖尿病以及癌症的发生、发展密切相关,严重威胁着人类的健康和生命,已成为全世界的公共卫生问题。肥胖的确切发病机制目前尚不清楚。最近越来越多的研究证实,微RNA(miRNA)参与代谢性疾病的多种生物过程。该文总结分析了脂肪细胞分化过程中miRNA表达谱的变化,miRNA在脂肪细胞分化以及肥胖相关胰岛素抵抗中所起的作用及其机制。     

人参二醇诱导3T3-L1脂肪前体细胞凋亡及其作用机制

探讨人参二醇（PD）诱导3T3-L1脂肪前体细胞凋亡作用,并阐明其可能的作用机制。     

Effects of fatty acid regulation on visfatin gene expression in adipocytes

Background The levels of long-term elevated serum or intracellular free fatty acid （FFA） induce insulin resistance associated with central obesity. The insulin-mimetic protein visfatin is preferentially produced by visceral adipose tissues and has been implicated in obesity and insulin resistance. To identify that FFA is capable of inducing insulin resistance and to clarify the role of FFA on visfatin, we examined the effect of monounsaturated FFA oleate （C 18： 1） and saturated FFA palmitate （C 16：0） on glucose transport and visfatin gene expression in cultured 3T3-L1 adipocytes or preadipocytes. Methods FFA-free DMEM/F12, 0.125 mmol/L, 0.5 mmol/1 and 1.0 mmol/L oleate or palmitate was added to cultured 3T3-L1 adipocytes or preadipocytes and incubated overnight. Glucose transport was assessed as 3H- 2-deoxy-glucose uptake. Total RNA was extracted and subjected to RT-PCR for the measurement of visfatin mRNA levels. Statistical comparisons between control group and other groups were performed with the two-tailed paired t test, and one-way ANOVA was used to compare the mean values among the groups. Results Insulin increased specific membrane glucose transport in 3T3-L1 preadipocytes. Upregulation was evident from 15 minutes to 1 hour exposure to insulin. However, after 6-hour exposure to insulin, there was a downregulation in the response to insulin. Dose response studies demonstrated that 2-deoxy glucose transport was increased by 336% at 50 nmol/L insulin （P〈0.01）, and reached a maximal effect at 100 nmol/L insulin （P〈0.01）. Oleate and palmitate treatment did not influence basal glucose transport （without insulin stimulation）, whereas insulin-stimulated glucose transport was inhibited after overnight oleate and palmitate treatment in preadipocytes and adipocytes. In 3T3-L1 preadipocytes, insulin resistance could be achieved at 0.125 mmol/L oleate or palmitate （P〈0.05, respectively）, and the inhibition was dose dependent. In adipocytes, the inhibition was noted at 0.5 mmol/L oleate or 1.0 mmol/L palmitate. Visfatin mRNA expression increased during differentiation more than 1.5-fold. Bovine serum albumin （BSA） did not influence visfatin mRNA expression compared with the control group. Dose-response studies demonstrated that addition of 0.125 mmol/L oleate and palmitate to 3T3-L1 adipocytes decreased visfatin mRNA expression significantly （78%, 77%, respectively, relative to untreated control, P〈0.05）, and further to 65% （relative to untreated control, P〈0.05） and 55% （relative to untreated control, P〈0.01） at 1.0 mmol/L FFA. Furthermore, the suppression on preadipocytes was similar to that of adipocytes, which reached a maximal reduction of 44% （oleate, P〈0.05） and 47% （palmitate, P〈0.05） at 1.0 mmol/L FFA. Conclusions Oleic acid and palmitic acid may induce insulin resistance in 3T3-L1 adipocytes and preadipocytes. Downregulation of visfatin mRNA may contribute to impair insulin sensitivity caused by oleate and palmitate.     

维生素D及其受体对3T3-L1前脂肪细胞分化影响的分子机制

前脂肪细胞增殖、分化过度是肥胖的一个重要病理机制。早在20多年前就已发现维生素D可以抑制3T3-L1前脂肪细胞系分化成熟,相关的分子机制近几年有了新的进展。3T3-L1分化是一个受多种基因蛋白调节的具有严格时序性的过程,现已证实维生素D与其受体结合后作用于3T3-L1分化早期的分子事件,如减少PPARγ配体形成,减少CCAAT/增强子结合蛋白βmRNA的表达,抑制C/EBPβ的转录活性,同时也作用于晚期分子事件,如抑制C/EBPα和PPARγ的mRNA表达等,通过影响这些重要分子发挥其抑制作用。     

辛伐他汀对人网膜前脂肪细胞细胞周期及caspase-3表达的影响

目的：观察辛伐他汀对人网膜前脂肪细胞细胞周期和caspase-3表达的影响。方法：分离、培养、鉴定人网膜前脂肪细胞,用不同浓度的辛伐他汀干预人网膜前脂肪细胞,MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期,免疫细胞化学法测定caspase-3的表达。结果：实验分离出的人网膜前脂肪细胞经诱导16d后分化为多脂滴的成熟脂肪细胞,10-4mol/L辛伐他汀对人网膜前脂肪细胞的增殖有显著地抑制作用,细胞周期测定显示细胞被阻滞在G0/G1期,且干预后人网膜前脂肪细胞caspase-3表达阳性率显著增加。结论：辛伐他汀可以通过阻滞细胞周期抑制人网膜前脂肪细胞增殖,可能通过增加caspase-3的表达诱导细胞凋亡。     

脂肪细胞凋亡及调控因素的研究进展

凋亡成为近年来医学领域研究的热点之一,随着现代人们生活水平的提高,肥胖者或体重超重者越来越多。肥胖的发生是否与脂肪细胞的凋产不足或者分化过度有关,目前尚少见报道。本文就近年来脂肪细胞凋亡与细胞因子作用的研究作一综述。     

人眼眶前脂肪细胞的培养和诱导分化及鉴定

目的近来研究显示,人眼眶脂肪组织中的前脂肪细胞可能参与多种疾病的发病过程。文中建立人眼眶前脂肪细胞原代培养模式,对其进行培养、诱导分化及鉴定,以便深入了解人眼眶前脂肪细胞的生物学特性。方法从18～56岁成人眼眶脂肪组织中分别以组织块法及酶消化法分离得到前脂肪细胞,进行形态学观察,成脂诱导分化,并对其进行鉴定。结果 2种方法均可获得前脂肪细胞,细胞为长梭形,呈"S"形生长,可成脂分化,且油红O染色阳性。结论从人眼眶脂肪组织中可分离出纯度高、增殖快、成脂分化率高的前脂肪细胞。     

小檗碱对脂肪细胞分化的影响

目的 探讨小檗碱对脂肪细胞分化的影响和其机制。方法 培养3T3-L1前脂肪细胞。以四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测3T3-L1前脂肪细胞的增殖,以油红O染色检测3T3-L1脂肪细胞分化过程中胞浆脂肪的堆积,同时采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹技术检测小檗碱对过氧化脂质体增殖激活受体γ2(PPARγ2)mRNA和蛋白质表达的影响。结果 10μmol/L小檗碱使3T3-L1前脂肪细胞的MTT值增加36%(P<0.001),小檗碱处理的脂肪细胞胞浆中,脂肪的堆积明显少于对照组,仅10％～20％的细胞出现较大脂滴。RT-PCR结果显示,在3T3-L1脂肪细胞分化过程中,小檗碱组脂肪细胞的PPARγ2 mRNR较对照组低48％(P<0.01),蛋白质免疫印迹结果也显示小檗碱抑制PPARγ2蛋白质的表达。结论 小檗碱促进前脂肪细胞的增殖,小檗碱减少脂肪细胞分化过程中脂质的堆积、抑制脂肪细胞的分化,可能与其降低PPARγ2mRNA和蛋白质的表达有关,这提示小檗碱在临床上可能适合于治疗肥胖的2型糖尿病患者。     

代谢综合征与脂肪细胞因子

代谢综合征(MS)是心血管疾病的多种代谢危险因素在个体内集结的状态,MS的主要组成是肥胖病尤其是腹型肥胖、糖尿病或糖调节受损、以高三酰甘油血症及低密度脂蛋白胆固醇血症为特点的血脂紊乱以及高血压。MS发病基础为胰岛素抵抗,但是因其发病机制十分复杂,涉及多基因、多因素,至今何为关键靶点尚不明确。有学者提出:脂肪细胞向远处的肝脏、骨骼肌和血管等组织发出信号,此信号分子可能是脂肪细胞因子。近年来的研究表明诸多脂肪细胞因子与MS有一定内在联系,对此简要阐述。     

脂肪移植的基础研究与临床应用进展

脂肪移植技术的开展已有100多年的历史,因其手术操作方便、充盈外形好、无排异反应等优点而深受整形外科医师的重视,然而较低的成活率限制了其进一步的广泛应用。为此,众学者在脂肪细胞成活理论、脂肪干细胞的研究基础上,通过改变移植方式、添加血管活性因子等基础和临床方面的研究,较大程度地提高了脂肪移植的成活率,并得出共识:提高脂肪移植成活的关键是加速移植体的血管重建和促进前脂肪细胞的分化。     

青春期学生单纯性肥胖原因分析

目的通过调查阳江市某中学学生青春期肥胖现状,分析导致青春期肥胖的原因,为寻找青春期肥胖的防治措施提供科学依据。方法通过整群抽样的方法,在阳江市某所中学随机抽取4个班级测量学生身高和体重,并采用自行设计的调查表进行问卷调查分析。结果调查结果显示青春期学生的肥胖检出率为9.2%（51人）,男性肥胖检出率略高于女性,但是差异没有统计学意义（P〉0.05）。青春期肥胖的发生与父母肥胖、学生饮食习惯及体育活动等因素有关,且差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论结果显示青春期肥胖问题受父母肥胖、学生饮食习惯及体育活动等多种因素的影响。根据青春期学生的生活特点有针对性地进行行为习惯矫正,并提高学生对于肥胖的认识与了解,可以有效预防肥胖的发生。