大鼠肝脏癌变过程中肝细胞生长因子及其受体基因表达的研究

了解肝细胞生长因子（ＨＧＦ）及其受体基因在大鼠肝脏癌变过程中的表达变化规律，以及这种变化与肿瘤生物学行为的关系。方法以二乙基亚硝胺（ＤＥＮＡ）诱发的大鼠肝癌模型为对象，采用地高辛标记的ＨＧＦ及其受体ＤＮＡ探针，检测ＨＧＦ及其受体基因在大鼠肝脏癌变过程中的表达。结果ＨＧＦ及其受体基因在大鼠肝组织中均有表达，但在诱癌的不同时期，其表达阳性率差异明显，ＨＧＦ表达阳性率在肝硬变前期达最高，肝硬变期次之，癌变期与正常对照比差异无显著意义。ＨＧＦ受体基因表达阳性率随肝组织逐渐癌变呈逐渐增加趋势，以癌变期为最高，正常肝组织中未见表达。结论ＨＧＦ及其受体基因的过量表达与大鼠肝脏癌变的演化过程关系密切，ＨＧＦ及其受体系统对调节肿瘤生长、转移起重要作用     

大鼠肝脏癌变过程中肝细胞生长因子及其受体基因表达的研究

大鼠肝脏癌变过程中肝细胞生长因子及其受体基因表达的研究［罗运权等．中华医学杂志，１９９６；７６（１１）：８２２］目的：了解肝细胞生长因子（ＨＧＦ）及其受体基因在大鼠肝脏癌变过程中的表达变化规律，以及这种变化与肝瘤生物学行为的关系。方法：以二乙基亚硝胺...     

大鼠肝脏癌变过程中肝细胞生长因子其受体基因表达的研究

了解肝细胞生长因子及其受体基因在大鼠肝脏癌变过程中的表达变化规律，以及这种怀肿瘤生物学行为的关系。以二乙基亚硝胺诱发的大鼠肝癌模型为对象，采用地高辛标记的ＨＧＦ及其受体ＤＮＡ探针，检测ＨＧＦ及其受体基因在大姒肝脏癌变过程中的表达。     

CD90在大鼠肝癌发生过程中的表达及意义

目的研究CD90在大鼠肝癌发生过程中的表达及意义。方法免疫组织化学技术检测二乙基亚硝胺（DEN）诱发的大鼠肝癌发生过程中CD90的动态表达。结果 DEN诱发肝细胞癌诱癌率为100%,大鼠肝癌癌变过程大致分为肝细胞损伤期、增生硬化期和癌变期3个时期。在正常大鼠肝组织,无CD90阳性细胞表达。随着肝癌的发生发展,CD90阳性表达细胞逐渐增多,主要分布于汇管区周围。进入癌变期,CD90阳性细胞数量增多,弥漫分布。结论 CD90在大鼠肝癌发生过程中的表达逐渐增高,认为其与肝癌的发生发展密切有关。     

大鼠肝细胞癌变过程中Survivin与Apollon的动态表达研究

目的：探讨大鼠肝细胞癌变过程中survivin和apollon的动态表达及意义。方法：以改良型间断饮用二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DEN）诱导大鼠原发性肝癌模型,观察大鼠肝脏在不同诱癌阶段的病理变化,采用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测大鼠HCC不同时期survivin和apollon的蛋白及mRNA表达。结果：改良型间断饮用DEN成功诱导了大鼠肝癌模型,诱癌结束时实验组大鼠自然死亡4只,死亡率5.88%（4/68）。实验组存活的16只大鼠15只形成肝癌,诱癌率93.75%（15/16）。免疫组化结果显示：survivin和apollon阳性表达率逐渐升高,各组间阳性率比较差异有统计学意义（P〈0.05）,survivin和apollon在肝癌组中表达呈正相关关系（r=0.515,p=0.003〈0.05）。RT-PCR检测结果显示,survivin mRNA和apollon mRNA表达,随着肝癌程度的加重而增加,与对照组肝组织比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：survivin、apollon在肝癌组织中呈高表达,提示二者在HCC的发生发展中起重要作用,可作为肝癌早期诊断的潜在标志物。     

大鼠肝脏缺血再灌注损伤对COX-2和micorRNA-101的表达

目的探讨大鼠肝脏缺血再关注损伤对COX-2和micorRNA-101表达的影响。方法通过建立大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,并行肝叶切除术,术后通过Quantitative real-time PCR (q RT-PCR)及Western Blot(WB)技术分析COX-2基因在肝脏缺血再灌注过程中的表达情况;通过生物信息学预测可能与COX-2基因相互作用的重要micro RNA,并分析这些micro RNA在肝脏缺血再灌注过程中的表达模式及其对COX-2的表达调控作用。结果在肝脏缺血再灌注后,COX-2基因m RNA及蛋白表达水平显著升高;micro RNA-101在肝脏缺血再灌注过程中表达下调,其表达趋势和COX-2基因表达相反;生物信息预测发现,micro RNA-101可能结合于COX-2m RNA 3’-UTR区域;采用micro RAN-101 mimics处理大鼠永生化肝细胞系BRL-3A细胞可导致COX-2基因表达下调。结论肝脏缺血再灌注可引起micro RNA-101表达下调,进而导致COX-2基因表达上调,并最终影响肝细胞周期改变。     

环氧合酶-2在口腔黏膜下纤维性变癌变过程中作用研究

目的 探讨环氧合酶-2（COX-2）在口腔黏膜下纤维性变（OSF）癌变组织中的表达，观察槟榔碱对人口腔角质形成细胞（KC）COX-2表达的影响。方法 应用免疫组化SP法检测15例OSF癌变组织，30例OSF组织，10例正常口腔黏膜中COX-2蛋白表达，Western-blot法检测不同浓度槟榔碱（30、60、90ug／mL）对KCCOX-2蛋白表达的影响。结果 COX-2在正常黏膜组织中无明显表达，在OSF组织及OSF癌变组织中阳性表达率分别是36．7％（11／30）、80．0％（12／15），且癌变组织中表达强度明显高于OSF组织（P〈0．05）；槟榔碱呈剂量依赖性增加KCCOX-2蛋白表达，不同浓度槟榔碱组均高于空白对照组（P〈0.05）。结论 COX-2在OSF癌变组织中表达异常增高，槟榔碱能增加KCCOX-2表达，COX-2过度表达可能在OSF癌变过程中起一定作用。     

肝细胞癌变过程中血管内皮生长因子的表达变化

目的：观察肝细胞癌变过程中血管内皮生长因子（VEGF）的动态改变及相互关系。方法：以含0.05%2-乙酰氨基芴（2-FAA）颗粒饲料连续喂饲雄性SD大鼠12周诱发肝细胞癌变,在此过程中以免疫组织化学法、Western blot技术及酶联免疫吸附法（ELISA）观察VEGF的表达特征及其相互关系。结果：组织学证实SD大鼠在喂饲2-FAA后,肝细胞出现颗粒样变性、不典型增生及肝细胞癌（HCC）的变化;肝细胞中VEGF呈粽色阳性颗粒,主要存在于细胞浆,偶见于细胞核;癌变过程中VEGF表达率和VEGF/β-actin比率分别为：对照组25%和0.16±0.02、肝细胞变性组88.9%和0.29±0.04、癌前病变组100%和0.52±0.03及癌变组100%和0.84±0.02;VEGF表达在蛋白水平均随着病理组织学的改变呈梯度增加,表现为癌变组明显高于对照组和肝细胞变性组（P〈0.05）;肝癌中VEGF在肝细胞内呈强阳性表达;肝组织与血清VEGF的动态改变呈显著正相关关系（r=0.785,t=8.00,P〈0.01）。结论：VEGF表达异常与肝癌的发生发展有关,其表达增加有助于肝癌早期诊断,也是肝癌治疗的分子靶目标。     

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌过程中肝脏胶原的动态观察

目的 动态观察大鼠肝脏癌变过程中胶原纤维的变化特点,为肝癌发病机制的研究提供参考。 方法 将50只雄性Wistar大鼠（体质量100～120 g）随机分为模型组和对照组,分别腹腔注射二乙基亚硝胺（DEN）50 mg/kg（加生理盐水至0.1 mL）或生理盐水（0.1 mL）,均每周2次,连续4周后改为每周1次,至14周停止。处死大鼠,取肝脏病变组织及周边正常组织,通过H-E染色、Masson染色、网状纤维染色观察其形态学改变;采用荧光定量PCR技术检测大鼠肝组织Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA的动态表达;采用明胶酶谱法检测大鼠肝组织中基质金属蛋白酶（MMP）含量变化。 结果 DEN诱癌开始5周后大鼠肝组织肝硬化形成,14周后诱导出肝癌。相应地,肝组织内胶原沉积持续增加,癌灶内胶原含量则明显少于癌周组织,并呈进行性减少;MMP-2、MMP-9在癌周组织和癌组织中的变化趋势则与胶原含量变化相反。 结论 DEN诱导的大鼠肝脏癌变过程中,胶原纤维在肝组织中沉积增加,在肝癌组织中则减少,随着肝癌的进展,癌组织内胶原进一步减少,提示肝硬化组织癌变过程中胶原纤维可能被降解。     

环氧合酶-2在胃癌组织中的表达及与病理参数的关系

目的：通过研究环氧合酶-2（COX-2）蛋白在胃癌组织中的表达，探讨其在胃癌发生、发展中的作用及与病理参数的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测12例正常胃组织及40例胃癌组织中COX-2的表达。 结果：COX-2在胃癌组织中的表达（87.5%）明显高于正常胃组织（25.0%）（P<0.05)；Ⅲ+Ⅳ期胃癌中COX-2的表达（96.55 %）高于Ⅰ+Ⅱ期胃癌组织63.64%）（P<0.05)；淋巴结转移组COX-2的表达（96.43%）高于无淋巴结转移组（66.67%） （P＜0.05)。结论：COX-2蛋白的阳性表达与胃癌TNM分期及淋巴结转移有关，COX-2的高表达可能参与 了胃癌形成的过程,且与胃癌的侵袭、转移及预后有一定关系。     

选择性COX-2抑制剂对大鼠实验性肝癌早期干预的研究

目的：观察环氧化酶2（cyclooxygenase 2,COX 2）抑制剂对大鼠肝癌的发生及肿瘤血管生成的早期干预效果及作用机制。方法：将实验大鼠分为两组：单纯诱导组（12只）和药物干预组（40只）,均给予二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine, DEN）诱发大鼠实验性肝癌,药物干预组同时给选择性COX 2抑制剂罗非昔布（Rofecoxib）进行治疗,于第6周和第9周分批处死实验大鼠,观察病理变化;采用免疫组化法检测肝脏COX 2、肿瘤微血管密度（MVD）、抗凋亡基因Bcl 2和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）情况。结果：病理切片显示药物干预组大鼠肝脏的病变程度较单纯诱导组减轻;COX 2、Bcl 2在第6周及第9周、PCNA在第9周的表达干预组均低于诱导组(分别为P＜0.01,P＜0.05;P＜0.05, P＜0.01和P＜0.05 );MVD值两组间差异无统计学意义(P＞0.05）。结论：COX 2抑制剂干扰和减缓了大鼠实验性肝癌的进程,其作用机制可能主要是通过诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖而实现,对于肿瘤血管生成的抑制作用在诱癌早期未能显示。     

诱发肝癌肝细胞病理改变与^125I—胰岛素摄取率的动态观察

为探索肝细胞癌变导致摄取＾１２５Ｉ－胰岛素增加的可能机理，用二乙基亚硝胺（ＤＥＮＡ）诱发大鼠原发性肝细胞癌，动态观察癌变过程中大鼠肝脏浓聚＾１２５－Ｉ胰岛素能力增强与肝细胞病理改变之间的关系。将ＳＤ大鼠８０只随机分为实验组（ｎ＝４０）和对照组（ｎ＝４０）。两组均饲以普通饲料，实验组按７０ｍｇ／ｋｇ的剂量每周１次灌胃给予ＤＥＮＡ。实验第６、１１、１５和２０周，由尾静脉注射＾１２５Ｉ－胰岛素溶液后１小     

c—fos蛋白在大鼠肝癌发生中的表达及意义

采用免疫组织化学ＡＢＣ法，对二乙基亚硝胺（ＤＥＮ０诱发大鼠肝癌发生过程中ｃ－ｆｏｓ蛋白在肝组织中的表达进行了系统观察。结果：正常大鼠肝细胞不表达ｃ－ｆｏｓ蛋白，诱癌第４周即可见少量肝细胞呈ｃ－ｆｏｓ蛋白阳性表达。随诱癌发展进程，肝细胞ｃ－ｆｏｓ蛋白表达逐渐增强，至诱癌中期（８－１２周），肝增生结节内部分肝于ｃ－ｆｏｓ蛋白阳性表达。诱癌晚期（１８周），癌结节内大部分肝癌细胞亦呈ｃ－ｆｏｓ蛋白阳性表达     

低锌对未成熟大鼠视网膜锌离子转运体3(ZnT-3)mRNA表达的影响

目的:通过观察视网膜锌离子转运体3(ZnT-3)mRNA表达对低锌饮食的反应,探索低锌是否会引起ZnT-3转录水平的调节.方法:将36只雄性SD大鼠(4周龄)随机分为三大组分别喂养2周(第1组)、4周(第2组)、6周(第3组),每组大鼠又随机分为两个亚组分别给予正常锌含量饮食和低锌饮食,第3组低锌饮食大鼠从第4周开始恢复正常饮食.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测ZnT-3以及碳酸酐酶2(CA2)、碳酸酐酶14(CA14)的mRNA相对表达量.结果:大鼠锌摄入低下2周后,与空白对照组相比视网膜CA2和CA14的mRNA水平有所降低,而ZnT-3 mRNA表达量有所增高;锌摄入低下4周后,视网膜ZnT-3、CA2和CA14 mRNA表达量均明显下降;恢复正常锌饮食后2周,实验组视网膜ZnT-3、CA2和CA14的mRNA的表达回升与对照组无差异.结论:饮食锌的变化将导致大鼠视网膜ZnT-3在转录水平上的调节.含锌酶CA2和CA14mRNA表达也同时发生变化.为保持视网膜组织内锌含量的稳定,ZnT-3mRNA表达量随饮食含锌量降低的时间和程度而改变.     

大鼠肺纤维化形成过程中IGF-Ⅰ和TGF-β1的表达

目的：研究大鼠肺纤维化形成过程中肺组织表达胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）和转化生长因子β₁（TGF-β₁）的变化。方法： 60只雄性Wistar大鼠,随机分为对照组20只及模型组40只,分别用生理盐水和博莱霉素（5 mg•kg^-1）气管内灌注,于第7、14、21和28天处死,取肺组织,采用免疫组织化学方法检测肺组织中IGF-Ⅰ和TGF-β₁的表达情况。结果：实验组经博莱霉素诱导4周后,取肺组织行HE染色,病理符合肺纤维化改变;苦味酸-酸性品红染色可见肺间质胶原纤维生成,证实肺纤维化模型形成。免疫组化显示,模型组肺组织中表达IGF-Ⅰ、TGF-β₁阳性细胞分布于肺间质,阳性细胞百分率和表达强度与对照组比较差异有显著性（P<0.05）;在第1、2和3周IGF-Ⅰ的表达逐渐增强,第4周出现下降,但第1周分别与第3周和第4周比较,差异仍有显著性（P<0.05）;TGF-β₁的表达高峰出现在第2周,第3周开始出现下降,但至第4周时,TGF-β₁的表达水平仍高于第1周,第1周分别与第2、3周比较差异有显著性（P<0.05）。结论：IGF-Ⅰ和TGF-β₁的高水平表达,促进了肺纤维化的形成;IGF-Ⅰ和TGF-β₁共同参与了肺纤维化的形成,并可能存在协同作用。     

白细胞介素-10对实验性肝纤维化大鼠Bax/Bcl-2表达的影响

目的探讨白细胞介素-10（IL-10）对实验性肝纤维化大鼠Bax／Bcl-2表达的影响及外源性IL-10对肝纤维化的治疗及可能机制。方法47只SD大鼠随机分为生理盐水对照组（N组，6只）和CCl4组（Z组，41只）。至造模第9周，Z组随机分为模型组（M组，9只），自然恢复组（R组，9只）和IL-10治疗组（T组，9只）；于12周末处死各组动物。免疫组织化学法和RT—PCR法检测各组大鼠肝脏Bax／Bcl-2的表达。结果成功建立肝纤维化模型。T组肝细胞变性及坏死程度较M组减轻；R组肝脏炎症活动度较M组有所缓解，但肝纤维化程度未见明显改善。免疫组织化学提示，Bax主要表达在肝细胞质内，Bcl-2主要表达在汇管区及纤维间隔区。组织蛋白及mRNA表达检测均显示，M组Bax较N组增高（P〈0．01），Bcl-2表达亦显著增高；R组Bax表达较M组降低（P〈0．01），但Bcl-2表达则较M组显著升高；T组Bax／Bcl-2均较R组显著降低。结论肝纤维化过程肝脏Bax／Bcl-2表达增强．外源性IL-10可以减轻CCl4诱导的肝脏纤维化，IL-10抗纤维化作用可能是通过减少肝细胞表达Bax、抑制肌成纤维细胞样细胞表达Bcl-2实现的。     

肝细胞生长因子在大鼠肾小管间质纤维化中的表达及意义

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)在肾小管间质纤维化过程中的表达及意义。方法雄性3月龄SD大鼠60只,随机分为对照组和模型组各30只,以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型,对照组以等体积的2%淀粉溶液灌胃,分别于实验第7周、12周、17周时随机处死10只大鼠,进行血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN),24 h尿蛋白定量和尿NAG酶检测,光镜下观察肾组织的病理变化及免疫组织化学法检测肾脏HGF、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)的表达情况。结果与对照组比较,模型组各时相点大鼠尿蛋白、尿NAG酶、血Cr及血BUN均升高(P<0.01);7周时模型组即有肾小管间质损害,随着病程进展,肾小管间质损害逐渐加重;肾脏HGF表达7周、12周时增加,17周时降低;与TGF-β1、α-SMA表达呈负相关(r=-0.999,P<0.01;r=-0.980,P<0.01)。结论肾小管间质纤维化过程中,肾脏HGF的表达早期上升是一种有益的防御反应。HGF抑制TGF-β1、α-SMA的表达,发挥其抗纤维化作用。     

实验性单侧前牙反修复体对大鼠髁突软骨中肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:探讨实验性单侧前牙反修复体致大鼠颞下颌关节骨关节病样变过程中髁突软骨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达变化。方法:60只6周龄SD雌性大鼠随机分为3个实验组和3个对照组,每组10只。在实验组大鼠左侧上、下切牙粘接金属不良修复体,使其呈反关系。分别于2、4、8周后取颞下颌关节,苏木精-伊红染色观察其组织形态学变化,免疫组织化学染色及实时定量PCR检测TNF-α的表达情况。结果:8周实验组髁突软骨时出现典型退行性变。TNF-α主要表达于髁突软骨肥大层,4周实验组TNF-α的蛋白(P<0.01)及基因(P<0.05)表达较对照组显著增多,8周实验组TNF-α的蛋白(P<0.01)及基因(P<0.05)表达较对照组显著减少,而2周实验组与同龄对照组之间无差异(均P>0.05)。结论:TNF-α参与了髁突软骨骨关节病样变的病理性改建活动。     

糖尿病大鼠肾脏MCP-1 mRNA的表达及意义

目的 :研究单核细胞趋化蛋白 1(monocytechemoattractantprotein 1,MCP 1)在糖尿病大鼠肾脏的表达。方法 :Wistar大鼠随机分 3组 :正常对照组 (NC组 ) ,糖尿病未干预组 (DM组 ) ,糖尿病大鼠胰岛素干预组 (DI组 )。以链脲佐菌素 (streptozotocin ,STZ)制备糖尿病大鼠模型 ,大鼠饲养 2 ,4周分别取出肾脏检测MCP 1mRNA的表达。收集2 4h尿测定尿白蛋白排泄率 (urinaryalbuminexcretionrate ,UAER)及肌酐 ,并心脏采血检测血肌酐、尿素氮。mRNA的表达采用RT PCR ,以GAPDH作内对照。结果 :2 ,4周肾组织中MCP 1mRNA的表达DM组高于NC组 (P <0 .0 1) ,DI组低于DM组 (P <0 .0 5 )。 2周时DM组、DI组UAER较NC组有升高趋势 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;4周时DM组、DI组UAER较NC组显著增加 (P <0 .0 1) ,DI组UAER较DM组显著降低 (P <0 .0 1) ,其变化趋势与MCP 1mRNA的表达基本相似。结论 :在糖尿病大鼠肾组织MCP 1mRNA表达明显增加 ;经胰岛素治疗后肾组织MCP 1mRNA的表达降低 ,肾功能改善