穿心莲有效成分对巨噬细胞MMP-2、MMP-9表达和活性的影响

目的 探讨穿心莲有效成分(API0134)是否具有抑制小鼠腹腔巨噬细胞基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(MMP-2,MMP-9)活性及其mRNA表达的作用.方法 用腹腔冲洗的方法收集小鼠腹腔巨噬细胞,使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激巨噬细胞,同时分别以不同浓度的API0134对巨噬细胞进行干预.采用免疫荧光方法、明胶酶谱法和RT-PCR的方法检测ox-LDL和API0134对巨噬细胞MMP-2、MMP-9活性和表达的影响.结果 与对照组相比,ox-LDL组MMP-2及MMP-9活性和mRNA表达显著升高(均P＜0.01).与ox-LDL组相比,加入50 μg/mL API0134组MMP-2及MMP-9的活性和mRNA表达变化不明显(均P＞0.05),而加入100、200 μg/mL API0134组的MMP-2及MMP-9的活性和mRNA表达均有不同程度的下降(均P＜0.05).结论 穿心莲有效成分能够抑制ox-LDL对巨噬细胞MMP-2及MMP-9活性和mRNA表达的上调作用,因此可能具有维护粥样斑块稳定,减少斑块破裂危险的作用.     

二氧化硅对人肺泡巨噬细胞基质金属蛋白-9表达的影响

①目的　探讨二氧化矽 (SiO2 )对人肺泡巨噬细胞基质金属蛋白 (MMP - 9)表达的影响。②方法　收集矽肺患者肺泡巨噬细胞 (AM) ,在体外以 50 μg/mlSiO2 刺激、LPS或无血清培养基培养 2、6、1 2、1 8、2 4、36h ,用免疫细胞化学的方法检测AM中MMP - 9的表达。③结果　经SiO2 刺激的AM中MMP - 9表达明显上调 ,且随刺激时间不同表达量也不同 ,于 1 8h达高峰。不同时间的表达量与同期对照组AM相比差异显著 (P <0 .0 1 )。④结论　SiO2 可诱导AM高表达MMP - 9,提示AM在损伤早期通过产生MMP - 9而降解基底膜 ,可能与包括成纤维细胞在内的各种细胞的迁移有关。     

辛伐他汀含药血清对U937单核巨噬细胞MMP-9及TIMP-1表达与分泌的影响

【目的】探讨辛伐他汀含药血清对U937单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达与分泌的影响。【方法】15只新西兰大白兔随机分为正常对照组（NL,n=5）、粥样硬化模型组（AS,n=5）和辛伐他汀含药血清组（SIM,n=5）。通过喂养高脂饲料,建立兔动脉粥样硬化模型后,予辛伐他汀药液灌胃,获得含药血清。分别予不同浓度含药血清（5%、10%、20%）培养U937单核细胞源巨噬细胞24 h,应用逆转录聚合酶链反应检测MMP-9 mRNA及TIMP-1 mRNA的表达,以及应用酶联免疫吸附试验检测MMP-9及TIMP-1蛋白的分泌。【结果】与相同浓度AS组比较,5%、10%、20%SIM组U937单核细胞源巨噬细胞MMP-9 mRNA表达均显著性降低（P值为0.005、0.041和0.013）;5%、10%、20%SIM组TIMP-1 mRNA表达无显著性差异（P值均〉0.05）。而与相同浓度AS组比较,不仅10%、20%SIM组MMP-9分泌显著性减少（P值分别为0.009和0.001）,而且10%、20%SIM组TIMP-1分泌均显著性增加（P值分别为0.017和0.001）。【结论】辛伐他汀可抑制单核巨噬细胞MMP-9的表达和分泌,以及促进TIMP-1的分泌。     

鼻息肉中MMP-2、MMP-9的表达及意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在观察组织、正常组织中表达程度的差异性.方法 选取45例为观察组、15例为对照鼻甲组,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测标本中MMP-2、MMP-9的表达情况并行相关分析.结果 与对照组比较,观察组MMP-2、MMP-9的表达量明显增加(P＜0.05).结论 MMP-2、MMP-9在观察组织中表达增高,可能与鼻息肉发生、发展相关.     

血管活性肠肽对LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞表达MMP-9的影响

目的：探讨血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide，VIP)对经脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞分泌和表达基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响。方法：采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）及明胶酶谱法（gelatin zymography），观察经LPS诱导的大鼠肺泡巨噬细胞给予不同浓度的VIP（10-10～10-6mol/L）作用24h后MMP-9基因表达量和活性的变化。结果：(1)正常肺泡巨噬细胞仅分泌和表达少量的MMP-9，经不同浓度LPS（0.1～10mg/L）诱导后MMP-9活性和表达均明显高于未经LPS诱导的对照组（P<0.01）；(2)不同浓度VIP (10-10～10-6mol/L）的干预，均可下调LPS诱导的MMP-9的活性和表达（P<0.01）；(3)该作用可被蛋白激酶C和钙调蛋白的相应阻断剂H-7,W-7部分逆转（P<0.01）。结论：VIP能降低LPS诱导的大鼠肺泡巨噬细胞MMP-9的表达及活性，其细胞内信号途径可能与蛋白激酶C和钙调蛋白有关，提示VIP在肺内炎症时可能具有保护性作用。     

PF4通过NF-κB上调巨噬细胞MMP-9表达

目的观察血小板因子4(PF4)是否通过核因子κB(NF-κB)上调THP-1单核源性巨噬细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达。方法佛玻酯诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞。巨噬细胞分别在NF-κB抑制剂(PDTC)缺乏或存在情况下与溶媒或PF4(100μg/L)孵育一定时间,RT-PCR检测MMP-9 mRNA水平;同时,巨噬细胞与PF4(25~200μg/L)单独或结合Toll样受体4(TLR4)阻断剂(抗体HTA125,anti-TLR4)孵育,ELISA法检测NF-κB含量。结果 PF4较对照组上调巨噬细胞MMP-9 mRNA水平。而NF-κB抑制剂抑制PF4诱导的巨噬细胞MMP-9表达上调。PF4呈浓度依赖性增加巨噬细胞的NF-κB含量,最大效应浓度为100μg/L。TLR4阻断剂逆转PF4诱导的巨噬细胞NF-κB含量增加。结论 PF4可能通过NF-κB上调巨噬细胞MMP-9的表达。TLR4可能是PF4-NF-κB通路中NF-κB的上游信号分子。     

辛伐他汀含药血清对U937单核巨噬细胞MMP-9及TIMP-1表达与分泌的影响

 【目的】探讨辛伐他汀含药血清对U937单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达与分泌的影响。【方法】15只新西兰大白兔随机分为正常对照组（NL,n=5）、粥样硬化模型组（AS,n=5）和辛伐他汀含药血清组（SIM,n=5）。通过喂养高脂饲料,建立兔动脉粥样硬化模型后,予辛伐他汀药液灌胃,获得含药血清。分别予不同浓度含药血清（5%、10%、20%）培养U937单核细胞源巨噬细胞24 h,应用逆转录聚合酶链反应检测MMP-9 mRNA及TIMP-1 mRNA的表达,以及应用酶联免疫吸附试验检测MMP-9及TIMP-1蛋白的分泌。【结果】与相同浓度AS组比较,5%、10%、20%SIM组U937单核细胞源巨噬细胞MMP-9 mRNA表达均显著性降低（P值为0.005、0.041和0.013）;5%、10%、20%SIM组TIMP-1 mRNA表达无显著性差异（P值均〉0.05）。而与相同浓度AS组比较,不仅10%、20%SIM组MMP-9分泌显著性减少（P值分别为0.009和0.001）,而且10%、20%SIM组TIMP-1分泌均显著性增加（P值分别为0.017和0.001）。【结论】辛伐他汀可抑制单核巨噬细胞MMP-9的表达和分泌,以及促进TIMP-1的分泌。     

通心络血清对U937单核巨噬细胞MMP-9及TIMP-1表达与分泌的影响

目的 探讨通心络含药血清对U937单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶-9及金属蛋白酶组织抑制因子-1表达与分泌的影响.方法 通过喂养高脂饲料,建立兔动脉粥样硬化模型后,予通心络药液及辛伐他汀药液灌胃,获得含药血清.分别予不同浓度含药血清培养U937单核细胞源巨噬细胞24h,应用逆转录聚合酶链式反应检测基质金属蛋白酶-9及金属蛋白酶组织抑制因子-1 mRNA的表达,以及应用酶联免疫吸附试验检测基质金属蛋白酶-9及金属蛋白酶组织抑制因子-1蛋白的分泌.结果 通心络含药血清呈剂量依赖性抑制U937单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶-9mRNA的表达与分泌,而对金属蛋白酶组织抑制因子-1 mRNA的表达与分泌未见影响.结论 通心络可能通过抑制单核巨噬细胞基质金属蛋白酶-9的表达与分泌,而起到稳定斑块的作用.     

MMP-2 MMP-9及TIMP-1在人睾丸精原细胞瘤组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)在人睾丸精原细胞瘤组织中的表达及其与临床分期、预后的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测33例人睾丸精原细胞瘤和11例正常睾丸组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达,并与肿瘤的临床分期及预后进行比较。结果33例睾丸精原细胞瘤组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达率分别为69.7%、75.8%、57.6%,表达率随肿瘤的临床分期升高而增加。MMPs/TIMPs比值大者死亡率高。结论MMP-2、MMP-9、TIMP-1在人睾丸精原细胞瘤的浸润转移过程中起重要作用,有可能成为估计预后的指标之一。     

抵抗素调节人冠状动脉内皮细胞MMP-9表达机制探讨

目的：探讨抵抗素调节冠状动脉内皮细胞中基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinases,MMP）－9的表达及其机制。方法：用含1%胎牛血清（fetal bovine serum,FBS）的DMEM/F12培养基培养人冠状动脉内皮细胞（human coronary artery endothelial cells,HCAECs）16 h（血清饥饿培养）,之后随机分为6组：（1）空白对照（Con）组：无抵抗素干预;（2）Res20组：抵抗素20 ng/ml干预;（3）Res40组：抵抗素40 ng/ml干预;（4）Res100组：抵抗素100 ng/ml干预;（5）Res40+U0126组：细胞中加入细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）抑制剂U0126（20 mmol/L）预处理1 h,再加入抵抗素40 ng/ml干预;（6）U0126组：细胞中仅加入ERK抑制剂U0126（20 mmol/L）,细胞各组干预24 h后,用RT-PCR法检测MMP-9和蛋白酶抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP）－1 mRNA表达,ELISA法检测MMP-9和TIMP-1蛋白水平,Western blot检测HCAECs p-ERK1/2及ERK1/2的蛋白表达。结果：3种浓度抵抗素干预HCAECs 24 h后,MMP-9 mRNA与蛋白水平均较空白组明显升高（P＜0.05）;TIMP-1 mRNA与蛋白水平均较空白组明显降低（P＜0.05）。40 ng/ml抵抗素干预组加入ERK抑制剂U0126后,MMP-9 mRNA与蛋白水平明显下降（P＜0.05）,TIMP-1 mRNA与蛋白无明显变化。与Con组、U0126组及Res40+U0126组相比,Res40组p-ERK1/2蛋白表达明显增高（P＜0.05）。结论：抵抗素可诱导HCAECs MMP-9的生成,可能通过下调TIMP-1的表达及激活ERK通路参与这一过程。     

基质金属蛋白酶9在胶质瘤中的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在原发和复发胶质瘤中的表达及改变特点。方法:采用免疫组化法对19例原发、复发脑胶质瘤病人及10例非胶质瘤病人术后的脑组织进行MMP-9检测和比较。结果:胶质瘤复发后,病理级别有增加趋势;MMP-9在脑胶质瘤原发和复发的表达有显著性差异(P<0.01),并与病理分级正相关;胶质瘤复发时间与病理分级相关(P<0.01),而与MMP-9的表达强度之间无统计学意义(P>0.05)。结论:MMP-9在胶质瘤发生、发展过程中起到重要作用,但对于胶质瘤复发速度影响甚小。     

肺癌MMP-9表达与血管生成的关系及其意义

目的 探讨肺癌组织中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达与肺癌血管生成的关系及其意义.方法 采用免疫组织化学S-P法检测84例肺癌组织中MMP-9和CD34的表达.结果 肺癌组织MMP-9表达显著高于癌旁正常肺组织(P<0.01).小细胞肺癌和腺癌MMP-9表达高于鳞癌(P<0.01).肺癌MMP-9表达有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者(P<0,01),Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05).肺癌MMP-9表达阳性者微血管密度高于肺癌MMP-9表达阴性者(P<0.01).结论 MMP-9促进肺癌血管生成,与肺癌侵袭转移密切相关.     

基质金属蛋白酶2和9在子宫内膜样腺癌组织中的表达及临床意义

目的：研究基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）在子宫内膜样腺癌组织中的表达及临床意义,探讨其与子宫内膜样腺癌发展及生物学行为的相关性。方法：收集本院102例子宫切除标本,其中60例子宫内膜腺癌按临床分期分为Ⅰ期（26例）、Ⅱ期（19例）和Ⅲ期（15例）;按组织学分级分为1级（29例）、2级（19例）和3级（12例）;按肌层浸润分为无肌层浸润（8例）、肌层浸润<1/2（11例）和肌层浸润>1/2（41例）;按有无淋巴转移分为无淋巴结转移组（54例）及有淋巴结转移组（6例）,采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶（SP）免疫组织化学方法检测组织MMP-2和MMP-9的表达情况。结果：MMP-2和 MMP-9在子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为76.7%和80.0%,与正常子宫内膜组织（13.60%）及内膜单纯增生组织（20.00%）比较,差异有显著性（P<0.05）;临床Ⅲ期及组织学3级子宫内膜癌组织MMP-2和MMP-9的强阳性表达率高于临床Ⅰ期及1级子宫内膜癌（P<0.05）;有肌层浸润及淋巴转移的子宫内膜癌组织中MMP-2和 MMP-9的强阳性表达率高于无肌层浸润及淋巴转移的子宫内膜癌（P<0.05）。结论：MMP-2和 MMP-9在子宫内膜样腺癌中呈高表达;MMP-2和 MMP-9的强阳性表达率与子宫内膜样腺癌临床分期、组织学分级及有无肌层浸润、淋巴转移有关联。     

脑星形细胞瘤组织中基质金属蛋白酶-9与微血管密度测定

目的:探讨脑星形细胞瘤组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达与肿瘤血管形成的关系.方法:采用免疫组织化学(S-P)法检测40例脑星形细胞瘤(Ⅰ～Ⅱ级22例,Ⅲ～Ⅳ级18例)组织中MMP-9和微血管密度(MVD)的表达.结果:Ⅲ～Ⅳ级脑星形细胞瘤组织中MVD为63.96±18.29,MMP-9的表达为65.34±7.76;Ⅰ～Ⅱ级MVD为34.73±12.56,MMP-9为48.13±9.74.Ⅲ～Ⅳ级中MVD和MMP-9的表达均明显高于Ⅰ～Ⅱ级(P＜0.01);脑星形细胞瘤中MVD和MMP-9呈正相关关系.结论:MVD和MMP-9的表达与脑星形细胞瘤的恶性程度相关,MMP-9在脑星形细胞瘤血管形成中起重要作用.     

吲哚美辛抑制大鼠腹主动脉瘤基质金属蛋白酶9表达的研究

目的:研究吲哚美辛对大鼠腹主动脉瘤基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的抑制作用.方法:将腹主动脉瘤弹力蛋白酶灌注模型大鼠随机分为实验组和对照组,各8只.实验组皮下注射吲哚美辛(1.6 mg/d),对照组皮下注射生理盐水.观察两组动脉瘤的形成率和动脉壁的组织学改变,并应用免疫组织化学技术检测MMP-9在动脉壁中的表达.结果:灌注1周后实验组大鼠腹主动脉瘤形成率为0,对照组大鼠动脉瘤形成率为100%,两组差异有显著意义(P<0.05).2组大鼠弹力纤维染色均可见弹力纤维不连续,结构模糊不清,但对照组大鼠动脉中层弹力纤维层数明显减少,胶原纤维溶解现象较严重,实验组弹力纤维层的损伤较轻;实验组大鼠动脉壁组织MMP-9蛋白表达为弱阳性或阴性,对照组动脉瘤组织中MMP-9蛋白表达则明显增强.结论:吲哚美辛能降低MMP-9的表达,直接影响大鼠腹主动脉中膜弹力蛋白层的降解和退变过程,抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成.     

基质金属蛋白酶-9活性在胃癌组织中的表达

目的研究基质金属蛋白酶-9在胃癌组织中的活性,探讨其活性形式与胃癌侵袭转移的关系。方法用明胶酶谱法检测46例胃癌组织中基质金属蛋白酶-9活性,比较胃癌组织与癌旁正常组织、转移胃癌与未转移胃癌组织、侵及浆膜层与黏膜内的胃癌组织中其活性形式与相对表达程度。结果基质金属蛋白酶-9的酶原形式（92kD）和活性形式（84kD）在胃癌组织中均高于癌旁正常组织,在伴有淋巴结转移的胃癌组织中均明显高于未发生转移的胃癌组织。84kD活性形式在浸及浆膜层的胃癌组织中高于浸及黏膜层的胃癌组织,但92kD的酶原形式与胃癌浸润深度无明显相关性。结论基质金属蛋白酶-9活性形式可能促进肿瘤的浸润、转移;检测84kD活性形式MMP-9可以成为临床判断胃癌的恶性程度和转移的参考指标。     

骨桥蛋白和基质金属蛋白酶-9在结直肠癌中的表达及其意义

目的研究骨桥蛋白(OPN)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学PV-9000二步法检测30例结直肠癌患者、20例腺瘤性息肉患者、20例健康人肠黏膜组织中OPN和MMP-9的表达水平,探讨二者在结直肠癌组织中的表达与临床病理特征的关系,并进行相关分析。结果结直肠癌组织中OPN和MMP-9的表达水平明显高于腺瘤性息肉患者和健康人(P<0.05),OPN和MMP-9的表达水平与肿瘤的浸润深度、分化程度以及有无淋巴结转移有关(P<0.05),与患者的性别、年龄及肿瘤的大小无关(P>0.05),二者的表达呈正相关(r=0.562,P=0.001)。结论 OPN和MMP-9表达与结直肠癌侵袭转移的发生有密切关系,在结直肠癌的发生、发展过程中可能具有协同作用。     

脑星形细胞瘤组织MMP-9表达与瘤周水肿及病理分级的关系

目的：探讨星形细胞瘤组织基质金属蛋白酶9(matrix metallopmteinase，MMP-9)表达与瘤周水肿及病理分级的关系。方法：采用免疫组织化学(S—P)法，用抗MMP-9对40例星形细胞瘤组织标本(病理Ⅰ～Ⅱ级22例，Ⅲ～Ⅳ级18例)进行标记分析，并测定MRI图像上肿瘤瘤周水肿范围。结果：星形细胞瘤的瘤周水肿范围越大，其MMP—9的表达也越高；病理分级Ⅲ～Ⅳ级星形细胞瘤组织中MMP-9的表达明显高于Ⅰ～Ⅱ级。结论：星形细胞瘤组织MMP—9与瘤周水肿及恶性程度密切相关。