骨形成蛋白及其mRNA在成釉细胞瘤中的表达

目的：检测成釉细胞瘤中的ＢＭＰ的表达,探讨成釉细胞瘤的发生及病理机理。方法：采用免疫组化和原位杂交的方法,检测２４例成釉细胞瘤标本中ＢＭＰ蛋白和ＢＭＰ－２、－４ｍＲＮＡ表达。结果：成釉细胞瘤中的柱状上皮层和星网状细胞层中均有ＢＭＰ－２、－４ｍＲＮＡ和ＢＭＰ蛋白的表达,ＢＭＰ－２、－４ｍＲＮＡ的杂交信号强度在柱状上皮层小于星网状细胞。结论：ＢＭＰ的表达为探讨成釉细胞瘤的来源提供了分子基础;ＢＭＰ可能参与了肿瘤病理机理及生物学行为的形成。     

人牙胚BMP2A基因扩增的原位杂交研究

利用地高辛甙元标记的ＤＮＡ探讨进行了人牙胚中ＢＭＰ２Ａ基因扩增的定位研究，结果发现，钟状期以前，杂交信号主要位于原始口腔上皮，蕾状期和帽状期造釉器上皮；钟状和钟状期以后，杂交信号则局限于造釉细胞和造牙本质细胞，造釉器的星网层和缩余釉上皮、牙乳头间充质细胞也有弱阳性信号分布，表明，人牙胚中，ＢＭＰ２Ａ基因扩增与其蛋白质的免疫组化研究结果是一致的，在造釉细胞和造牙本质细胞分化成熟过程中，伴随着ＢＭＰ２     

骨形成蛋白在颌骨骨肉瘤中的表达及临床意义

为研究骨形成蛋白（ＢＭＰ）在颌骨肉瘤中的表达及其与肿瘤预后的关系。作者对２４例颌骨肉瘤患者的组织标本,进行了免疫组化和原位杂交检测等研究,以了解ＢＭＰ与骨肉瘤的关系。１材料和方法：（１）材料来源于我院外科手术切除并经病理诊断为骨肉瘤的２４例标本,其...     

人重组骨形成蛋白—2生物学活性及其载体的实验研究

人重组骨形成蛋白—２（ｒｈＢＭＰ－２）主要生物学作用是诱导新骨形成和促进骨缺损的修复。采用小鼠肌袋模型，观察了大肠杆菌表达的ｒｈＢＭＰ－２在不同剂量下的异位成骨活性。实验结果表明，ｒｈＢＭＰ－２具有较强的骨诱导活性，其生物学作用具有时间依赖性和剂量依赖性。另外还首次报道了将经综合化学处理的小羊骨松质作为ｒｈＢＭＰ－２的载体，使两者有机结合，研制成一种新型复合异种骨，并经小鼠异位诱导实验证实，经综合化学处理的骨松质是ｒｈＢＭＰ－２的良好载体，能够显著提高ｒｈＢＭＰ－２的骨诱导活性。     

成釉细胞瘤基质金属蛋白酶-2表达的初步研究

目的:分析基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在成釉细胞瘤中的表达,比较其在成釉细胞瘤各病理类型间的差异及与侵袭性的关系.方法:收集2005—2009年于北京大学口腔医院手术所得成釉细胞瘤石蜡标本26块,对标本进行免疫组织化学(免疫组化)染色.MMP-2为一抗,在高倍镜...     

正常豚鼠牙齿和牙周组织中BMP的分布及其意义

目的：研究ＢＭＰ在牙齿生长发育和牙周组织改建中的作用；方法：利用牛骨形成蛋白单克隆抗体（ｂＢＭＰ－ＭｃＡｂ）免疫组织化学染色法，观察了正常豚鼠牙齿和牙周组织中ＢＭＰ的分布。结果：ＢＭＰ在豚鼠成熟的牙周组织中主要分布于靠近牙釉质和牙槽骨附近的成纤维细胞胞浆内；而在不断发育中的根尖部位ＢＭＰ染色更深；造釉细胞和成牙本质细胞染色呈强阳性；牙槽骨和已成熟的釉质、牙本质染色较浅。结论：ＢＭＰ与硬组织的形成和改建密切相关，牙周膜成纤维细胞与成牙本质细胞、成骨细胞一样具有成骨特性。     

人重组骨形成蛋白的研究进展

骨形成蛋白（ＢＭＰ）是一种广泛存在于骨基质中的高效骨诱导物质，随着ＢＭＰ提纯方法的改进及分子生物学的研究进展，许多实验室应用基因工程技术合成了人重组ＢＭＰ。本文仅就近几年人重组ＢＭＰ的合成，ｃＤＮＡ基因表达，以及ＢＭＰ的骨诱导活性及其机理，动物实验，临床应用前景作一综述。     

缺氧诱导因子1α在成釉细胞瘤中的表达及意义

目的:检测缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）在成釉细胞瘤中的表达,并探讨其与成釉细胞瘤侵袭和复发的相关性。方法:对5对成釉细胞瘤及对应正常瘤旁组织进行转录组测序,并对60例原发及60例复发患者第1次手术标本行免疫组织化学染色,检测2组患者中HIF-1α蛋白的表达。采用SAS9.3软件包对数据进行统计学分析。结果:5对新鲜标本转录组测序发现,3对标本中HIF-1α及其相关分子转录水平呈明显一致性改变。免疫组织化学染色发现,复发组成釉细胞瘤中,40%的肿瘤HIF-1α染色高于未复发组;复发组中,48.33%的肿瘤slug染色高于未复发组,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:成釉细胞瘤复发与HIF-1α相关,HIF-1α表达高的患者较表达低的患者更容易复发。HIF-1α可能通过调控slug的表达,影响成釉细胞瘤的局部复发。     

大鼠牙乳头与成釉器重组肾被膜下种植的研究

目的：观察大鼠牙乳头对成釉器上皮的诱导作用。方法：出生后7dSD大鼠下颌第一磨牙根部的牙乳头与出生后2d的第二磨牙成釉器分别重组，出生后2d冠部牙乳头与成釉器重组为对照组。体外培养2d后种植于成年大鼠肾被膜下，1周，4周后取材，组织学观察上皮分化情况和硬组织形成情况。结果：1周后实验组重组体生成薄层的牙本质结构，内侧成牙本质细胞排列整齐，牙源性上皮未分化成成釉细胞，而有大量的骨样物质生成，对照组形成较为完整的牙冠结构。4周后，实验组重组体形成类牙根形态但仍无釉质形成。结论：根部牙乳头不具有促进成釉上皮分化的能力。     

miR-200a在成釉细胞瘤中的表达及意义

目的：研究miR-200a的表达与人成釉细胞瘤之间的相关性。方法：应用RNAhybrid和miRanda软件预测β-catenin基因可能的靶向miRNA;选择30例人成釉细胞瘤标本和5例正常牙胚标本,应用实时荧光定量PCR方法检测标本中miR-200a的表达情况。结果：RNAhybrid和miRanda软件分别在β-catenin mRNA第68～96碱基和第69～94碱基位置预测到一个miR-200a结合位点。与正常牙胚组织标本相比,miR-200a在人成釉细胞瘤组织标本中的表达存在明显的下调,差异显著（P〈0.05）。结论：miR-200a的表达改变与人成釉细胞瘤相关,miR-200a可能为β-catenin的靶基因之一。     

人牙齿发育中OSX的表达

目的:通过免疫组织化学方法观察人牙齿发育中OSX的表达规律,探索其功能及意义。方法:取自然流产的人胚胎上下颌骨,分别进行HE染色和免疫组织化学染色,用图像分析仪分析。结果:免疫组化显示,OSX分布于细胞浆中。蕾状期,OSX分布于牙蕾上皮细胞;帽状期,成釉器所有细胞均表达OSX,但在内釉上皮的釉结处表达明显集中;钟状期,成釉细胞、成牙本质细胞及邻近的牙乳头细胞高表达OSX,釉牙本质界、牙本质小管及新形成的釉质有表达。结论:OSX参与成釉细胞、成牙本质细胞的分化、成熟及细胞间信号传导,可能参与调节釉质和牙本质基质的分泌及其生物矿化过程。     

大鼠切牙发育中釉蛋白的免疫荧光定位

目的:观察釉蛋白在大鼠切牙发育不同时期的表达和分布情况.方法:采用免疫荧光法观察釉蛋白在大鼠切牙发育不同时期的表达与分布.结果:在成釉器增殖期、分化早期,未见釉蛋白表达;在分化晚期,前成釉细胞有弱阳性表达;在成熟早期,成釉细胞和成牙本质细胞均阳性表达;在成熟中期,成釉细胞及其基质呈强阳性表达,而成牙本质细胞阳性表达;在成熟晚期,成釉细胞和成牙本质细胞弱阳性表达.在成釉器各期,釉蛋白在外釉细胞、星网状细胞、牙乳头细胞均呈阴性表达.结论:釉蛋白参与釉基质和牙本质基质的形成,可能与牙发育中基质形成的信息传递有关.     

SOD盖髓术后牙髓组织免疫组化染色的观察

目的：探讨ＳＯＤ作为盖髓剂促进牙髓修复的作用机理。方法：应用ＢＭＰ－ＡＢＣ法对盖髓后获得成功的标本进行免疫组化染色。结果：空白组、正常对照组标本ＢＭＰ染色结果为阴性；ＳＯＤ盖髓后有牙本质桥、牙本质瘤形成的标本，ＢＭＰ染色均呈不同程度的阳性反应，显微镜下观察为黄褐色颗粒。主要分布在牙本质桥下成牙本质细胞、牙髓细胞浆中和牙髓组织。结果：ＳＯＤ用于盖髓促进牙髓组织修复、牙本质桥形成与ＢＭＰ作用有关，ＳＯＤ一方面抑制炎症反应，改善局部微环境，为组织自身修复创造条件；另一方面则刺激牙髓组织增生、诱导牙髓细胞合成分泌ＢＭＰ。     

成纤维生长因子受体2在原发及复发成釉细胞瘤中的表达及意义

目的：检测成纤维细胞生长因子受体2（FGFR2）在颌骨原发及复发成釉细胞瘤中的表达,并探讨其与成釉细胞瘤临床特点尤其是侵袭和复发的关系。方法：选择手术切除的多囊型成釉细胞瘤患者64例共96例成釉细胞瘤组织,分为复发组（第1组,32例患者64例组织）和原发组（第2组,32例患者 32例组织）,以10例正常牙囊组织为对照,采用免疫组织化学方法检测96例成釉细胞瘤组织及10例牙囊组织中FGFR2蛋白的表达。应用SAS9.3软件包分析FGFR2与成釉细胞瘤的关系。结果：96例成釉细胞瘤中均检测到FGFR2的表达,复发成釉细胞瘤组织中FGFR2的表达显著高于原发成釉细胞瘤;第1组中原发成釉细胞瘤的平均直径为4.02 cm,第2组中成釉细胞瘤的平均直径为3.1 cm（P<0.05）且最大直径为3.9 cm。上颌骨复发成釉细胞瘤中FGFR2的阳性率显著高于下颌骨复发成釉细胞瘤。结论：肿瘤复发与成釉细胞瘤的大小相关,直径大于3.9 cm的成釉细胞瘤较直径小于3.9 cm者更易复发,且复发成釉细胞瘤中FGFR2的阳性率显著高于原发成釉细胞瘤,表明FGFR2的表达与成釉细胞瘤的复发相关,可能是成釉细胞瘤局部复发的机制之一。     

RANKL、MMP-9和MMP-2在成釉细胞瘤中的表达及意义

目的：探讨RANKL、MMP-9和MMP-2与成釉细胞瘤骨吸收机制之间的关系。方法：应用免疫组化、荧光定量RT—PCR及Western印迹方法，分别在不同分子水平检测RANKL、MMP-2和MMP-9在成釉细胞瘤中的表达，所有实验数据均经SPSS11．0统计软件包进行分析处理，组间比较采用t检验。结果：在所有成釉细胞瘤标本中，3种方法均可检测到RANKL、MMP-2和MMP-9的表达。其中，RANKL各型成釉细胞瘤中均呈恒定的高表达，而荧光定量RT—PCR检测结果显示，MMP-2在基底细胞型成釉细胞瘤中的表达水平显著高于其他两型（P〈0．05）。结论：MMP-2、MMP-9及RANKL可能共同参与成釉细胞瘤引起的骨质吸收过程。与MMP-9相比，MMP-2可能与成釉细胞瘤的侵袭性更为相关。     

文摘

01.成釉细胞瘤中p53,MDM2,p14ARF蛋白的表达和P53的作用眼英演/KumamotoH…∥JOralPatholMed.-2004熏33.-292-299.01.成釉细胞瘤中p53,MDM2,p14ARF蛋白的表达和P53的作用眼英演/KumamotoH…∥JOralPatholMed.-2004熏33.-292-299.为了阐明p53-MDM2-p14ARF细胞周期调节系统在牙源性肿瘤的形成和细胞分化中的作用,分析了成釉细胞瘤和牙胚中的p53、MDM2和p14ARF3种蛋白的表达。材料和方法用免疫组化方法检测16个牙胚、46个良性、5个恶性成釉细胞瘤的石蜡切片标本中p53、MDM2和p14ARF蛋白的表达。用DNA直接测序法检测10个良性…     

骨形成蛋白在正常兔牙周组织中的表达及定量分析

目的 进一步了解骨形成蛋白（ＢＭＰ）在牙齿及牙周组织中的表达，为研究ＢＭＰ在牙周组织的修复再生及骨改建中的作用提供实验数据。方法 用ＢＰＭ单克隆抗体免疫组化染色及计算机图像分析的方法对正常兔牙周组织ＢＭＰ的表达进行了定性、定量分析。结果 在牙周膜中，ＢＭＰ的分布不同，在靠近牙槽骨和牙骨质侧染色较深，成骨细胞、成牙骨质细胞、成纤维细胞染色均呈强阳性，牙槽骨、牙龈染色阴性。近中侧ＢＭＰ表达量明显低于远     

恶性成釉细胞瘤细胞增殖活性和分化的研究

目的：研究恶性成釉细胞瘤细胞增殖活性和分化特点。方法：应用免疫组化SP方法检测17例恶性成釉细胞瘤组织中PCNA、Ki-67、CK19以及CK10和13蛋白的表达。结果：PCNA和Ki-67在恶性成釉细胞瘤中的增殖指数显著高于良性成釉细胞瘤（P＜0．05）。CK10和13在恶性成釉细胞瘤的阳性表达率显著低于良性成釉细胞瘤（P＜0．05）。而CK19在良恶性成釉细胞瘤的阳性表达率无显著性差异。结论：恶性成釉细胞瘤细胞增殖活性高于良性成釉细胞,CK10和13的阳性表达率有助于恶性成釉细胞瘤的诊断。     

突变受体阻断NIH3T3细胞中rhBMP-2诱导的信号转导

在脊椎动物中胚层的发育诱导过程中 ,骨形成蛋白 (ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ＢＭＰ)是重要的背 腹化发育促进因子。ＢＭＰｓ在细胞表面与ＢＭＰ的Ⅰ、Ⅱ型受体相互作用。为研究ＢＭＰｓ信号转导在组织发育和细胞分化中的作用 ,我们以ＢＭＰｓⅡ型突变受体的ｃＤＮＡ为目的基因 ,以ＮＩＨ3Ｔ3细胞为载体细胞 ,构建了稳定表达ＢＭＰｓⅡ型突变受体的细胞株。从而为从信号转导水平探讨ＢＭＰｓ对细胞分化及组织器官发育的调控作用奠定了基础。一、材料和方法1 材料 :ｐＣ 4真核表达载体 (含ＢＭＰｓⅡ型突变受体ｃ…     

PKC-α和BCL-2在成釉细胞瘤中的表达及相关性

目的：观察蛋白激酶C-α（protein kinase C-α,PKC-α）和B细胞淋巴瘤因子-2（B Cell Lymphoma/Leukemia-2,BCL-2）在成釉细胞瘤中的表达及其相关性,探讨其与成釉细胞瘤发生和发展的生物学意义。方法：应用免疫组织化学方法检测42例成釉细胞瘤中PKC-α和BCL-2的表达,10例牙源性角化囊肿和10例口腔正常黏膜为对照。结果：PKC-α和BCL-2在成釉细胞瘤中的阳性率均高于对照组,且PKC-α和BCL-2的表达呈正相关。结论：PKC-α和BCL-2在成釉细胞瘤中高度表达。PKC-α和BCL-2在成釉细胞瘤的发生、发展及细胞分化与增殖中起着重要作用。