黄连解毒汤有效成分对缺氧/复氧时脑微血管内皮细胞的保护作用

目的:研究栀子苷、黄芩苷和小檗碱对大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用。方法:建立离体大鼠脑微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤模型,用1.024,0.512,0.256,0.128,0.064,0.032,0.016,0.008μmol.mL^-1栀子苷,0.224,0.112,0.056,0.028,0.014,0.007,0.003μmol.mL^-1黄芩苷和0.192,0.096,0.048,0.024,0.012,0.006,0.003μmol.mL-1小檗碱分别作用于正常组和模型组细胞。细胞活性用MTT比色法检测。结果:0.128,0.064,0.032μmol.mL^-1栀子苷,0.028,0.014,0.007μmol.mL-1黄芩苷和0.024,0.012,0.006μmol.mL^-1小檗碱能够比较理想的保护缺氧4 h复氧12 h损伤的大鼠脑微血管内皮细胞。结论:适当浓度的栀子苷、黄芩苷和小檗碱等黄连解毒汤主要成分可以保护脑微血管内皮细胞。     

HPLC法比较不同工艺制备的黄连解毒汤及日本汉方黄连解毒汤中黄芩苷含量

用ＨＰＬＣ方法测定４种不同工艺制备的黄连银毒汤提了粉末及２种日本汉方制剂黄连解毒汤中的黄芩苷含量,结果表明方法简便,快速,精密度及回收率好,适合于制剂生产中多批量产品的质量控制,采用此法比较了不同工艺制备的贡连解毒汤及日本汉方制剂东洋黄连解毒汤,津村黄连解毒汤的黄芩苷的含量。     

组合药物及黄连解毒汤对小檗碱在大鼠脑组织中药动学的影响

目的研究组合药物(小檗碱+黄芩苷+栀子苷)及黄连解毒汤复方对小檗碱在大鼠脑组织药动学的影响。方法 SD大鼠,分为小檗碱(247.39 mg/kg)组、组合药物(小檗碱、黄芩苷、栀子苷,247.39、130.11、113.01 mg/kg)组、黄连解毒汤(3.92 g/kg,小檗碱247.39 mg/kg)组,各组分别ig相应剂量的药物,分别于给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12、24 h各取6只大鼠,处死取脑组织,UPLC-MS法测定小檗碱在脑组织中的质量浓度。计算各组中小檗碱药动学参数。结果与小檗碱组达峰浓度(Cmax 108.01 ng/g)相比,组合药物组小檗碱的Cmax(368.59 ng/g)显著增加,明显高于黄连解毒汤原方给药中小檗碱的Cmax(31.97 ng/g);组合药物组的AUC0~∞(3 236.60 min·ng/g)远大于小檗碱组的AUC_(0~∞)(2 701.37min·ng/g)和黄连解毒汤组的AUC_(0~∞)(420.34 min·ng/g)。结论与小檗碱组相比,组合药物能促进小檗碱进入脑组织,而黄连解毒汤复方抑制小檗碱进入脑组织。     

黄连解毒汤对大鼠脑脂质过氧化物影响的实验研究

通过黄连解毒汤全方及组成药物对大鼠脑匀浆(体外)生成脂质过氧化物影响的实验发现,5%的本方及各单味药使大鼠脑匀浆丙二醛(MDA)的生成量极其明显少于对照组(P<0.001),其中以黄连作用最强达108%,全方抑制作用稍弱为94.22%。提示本方及各单味药有抗自由基的作用。     

黄连解毒汤对大鼠慢性脑灌注不足损伤的保护作用

高浓度氧对于新生儿有一定的伤害,本文探讨中药热毒宁注射液对新生大鼠高氧肺损伤的防治,以期为临床新生儿高氧肺损伤治疗提供参考.     

黄连解毒汤对大鼠慢性脑灌注不足损伤的保护作用

目的：观察黄连解毒汤对大鼠慢性脑灌注不足损伤的保护作用。方法：将24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组及黄连解毒汤治疗组（治疗组）（均n=8）。采用双侧颈总动脉永久性阻断法制备模型,术后灌胃给予黄连解毒汤（4．0g生药／kg体重）。连续治疗60d后,用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力;用HE染色法检查脑白质病理改变并定量检测胼胝体神经纤维脱失变化。结果：与假手术组比较,模型组大鼠隐匿逃避潜伏期（escapelatency,EL）显著延长（P〈0．01）,穿越平台次数明显减少（P〈0．01）;与模型组比较,治疗组大鼠EL明显缩短（P〈0．01）,穿越平台次数显著增加（P〈0．05）。模型组大鼠可见脑白质损伤改变,胼胝体白质囊泡面积占测量总面积的百分比值显著高于假手术组（p〈0．01）。与模型组比较,治疗组脑白质损伤明显减轻,胼胝体白质囊泡面积占测量总面积的百分比值显著降低（p〈0．01）。结论：黄连解毒汤能够改善慢性脑灌注不足大鼠的脑白质损伤与学习记忆能力。     

黄连解毒汤的药动学-药效学相关性研究

目的研究大鼠给予黄连解毒汤(HJD)、黄芩提取物及黄芩苷后,血清中黄芩苷和汉黄芩苷的经时变化及抗氧化作用的药动学-药效学(PK-PD)相关性。方法以HPLC法同步监测血清黄芩苷、汉黄芩苷的水平,求算其血药浓度-时间曲线下面积(AUC),并将含药血清抗氧化作用的效应-时间曲线下面积(AUE)与对应的AUC进行相关性分析。结果 HJD、黄芩提取物及黄芩苷的lgAUC-AUE均呈近似"S"形曲线。结论 HJD、黄芩提取物及黄芩苷的抗氧化作用与血清黄芩苷、汉黄芩苷水平呈正相关,黄芩苷可能是HJD及黄芩抗氧化作用的活性成分,汉黄芩苷也有一定的抗氧化作用。     

黄连解毒汤对慢性期脑血管障碍的临床症状与脑血流量的效果

给１０名慢性期脑血管患者（脑出血３例，脑梗塞７例）服用黄连解毒汤，对临床症状，平均动脉血压（ＭＡＢＰ），脑血流量（ＣＢＦ）的变化进行了探讨，尽管全部脑出血病例及３例脑梗塞梗塞患者精神障碍，自觉症状改善，但神经症状未见改善。ＭＡＢＰ显著降低，３例脑梗塞患者两则半球的ＣＢＦ增加，但这种增加与临床症状改善无关。结果表明，黄连解毒汤可改善脑代谢障碍以及非局部的神经病学症状。     

间接竞争ELISA法检测黄连解毒汤中黄芩苷在大鼠脑脊液中的分布

目的检测黄连解毒汤灌胃给药后黄芩苷在大鼠脑脊液中的分布。方法通过考察线性关系、精密度、回收率等方法学考察指标,建立基于黄芩苷单克隆抗体的间接竞争ELISA(icELISA)法;通过建立的icELISA法,检测大鼠灌胃给药后1小时、2小时、3小时和4小时脑脊液中黄芩苷的含量。结果在大鼠脑脊液中建立的黄芩苷标准曲线为y=0.1069ln(x)+1.0144(R 2=0.9885),浓度范围为3.2~2000 ng/mL,在400、80、3.2 ng/mL三个浓度的精密度分别为13.14%、6.65%和6.04%(RSD≤15%),回收率分别为91.35%、87.04%和117.67%(SD≤15%)。给药后1小时、2小时、3小时和4小时脑脊液中黄芩苷的平均含量分别为(60.53±18.05)、(223.32±29.72)、(121.35±31.93)、(4.46±2.54)ng/mL。结论在脑脊液中建立的黄芩苷icELISA检测法灵敏度高、精密度和回收率能够满足生物样品的检测要求,可以作为黄芩苷的检测方法。在脑脊液中可以检出黄芩苷,给药后2小时黄芩苷在脑脊液中的浓度最高,然后随时间逐渐降低,说明黄芩苷可以透过血脑屏障从而分布到脑脊液中,为黄芩苷治疗脑部疾病提供了直接的实验依据。     

黄连解毒汤对高脂血症大鼠血脂及氧自由基代谢的影响

目的:探讨黄连解毒汤(Huanglian Jiedu Decoction,HJD)对实验性高脂血症大鼠血脂及氧自由基代谢的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,立普妥组(0.2 mg·kg-1),HJD低、高剂量组(6,12 g·kg-1)。除正常对照组外,其他组大鼠喂饲高脂饲料建立高脂血症模型。连续ig 8周后,测定血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TAG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high-densitylipoprotein cholesterol,HDL-C)水平,以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,并观察肝组织病理学改变。结果:与模型组比较,HJD各组能明显降低实验大鼠血清TC,TG,LDL-C,MDA含量,显著提高HDL-C含量和SOD,GSH-Px活性,并能减轻肝细胞脂肪变性。结论:HJD能有效调节高脂血症大鼠血脂代谢,提高机体抗氧化能力,改善肝组织病理损害。     

黄连解毒汤及其各部位群抗炎物质基础

目的:研究黄连解毒汤(HLJDT)全方及其各部位群抗炎活性,讨论HLJDT抗炎活性的物质基础。方法:通过鼠毛细管通透性和二甲苯致炎实验,建立动物模型以及确定黄连解毒汤的有效剂量,并依据全方的有效剂量计算出各组分群的给药剂量。将动物随机分为空白组,模型组,地塞米松组,HLJDT全方组,HLJDT上清液50%醇,HLJDT沉淀水洗,沉淀50%醇洗组,按传统给药方式连续3 d ig给药。末次给药60 min后尾静脉注射伊文思蓝(EB),然后立即进行小鼠二甲苯致炎实验,结合高效液相色谱(HPLC)研究HLJDT全方及其各部位群抗炎作用,比较各组间差异。结果:地塞米松,HLJDT全方,上清液50%醇洗和沉淀50%醇洗均能有效降低模型组的肿胀度,与模型组比较有显著性差异(P0.01)。HLJDT全方,上清液50%醇洗和沉淀50%醇洗部位群均能有效降低耳片中EB含量,抑制肿胀度,EB含量分别为(11.8±1.8),(23.4±3.8),(25.2±3.2)ng·g-1;肿胀度抑制率分别为26.44%,29.89%,19.54%;HLJDT上清液50%醇洗抗炎作用比沉淀50%醇洗作用显著。结论:HLJDT,上清液50%醇洗和沉淀50%醇洗均能有效降低模型组的肿胀度,结合HPLC结果可推断,黄酮与生物碱相互作用后,可以降低生物碱副作用,增加环烯醚萜类成分后,抗炎效果更显著,为抗炎有效部位。     

黄连解毒汤对AD大鼠的治疗作用及对细胞因子含量的影响

目的 :探讨黄连解毒汤对老年性痴呆 (AD)的治疗作用及对细胞因子含量的影响。方法 :以 β 淀粉蛋白(Aβ)注射形成AD大鼠模型 ,以水迷宫实验进行学习记忆能力测试 ;以ELISA法测定细胞因子 :肿瘤坏死因子 (TNF α) ,干扰素-γ(INF-γ) ,白介素-2 (IL-2 )变化。结果 :模型组学习记忆能力下降 ,逃避的平均潜伏期延长 ,进入盲端的错误次数增多 ;黄连解毒汤治疗后 ,学习记忆能力改善 ,P <0.01;模型组TNF-α ,INF-γ ,IL-2含量水平较正常组增高 ,P <0 .0 1,黄连解毒汤治疗Ⅰ ,Ⅱ组则明显降低 ,P <0 .0 1。结论 :黄连解毒汤可能通过调整AD大鼠的免疫功能和增加抗炎而提高其学习记忆能力。     

黄连解毒汤的化学及药理学研究进展

黄连解毒汤为清热解毒剂的代表方,由黄连、黄芩、黄柏、栀子4味药组成,具有清热、泻火、解毒之功效,主治实热火毒、三焦热盛之证.概括并归纳了该复方近年来的研究状况,包括复方相关药理学、药动学研究状况,化学研究及药效物质的探讨.     

基于代谢组学技术的黄连解毒汤配伍规律研究

目的:研究黄连解毒汤组方中君、臣、佐、使药的配伍规律.方法:取雄性Wistar大鼠54只,分为空白组、模型组、黄连组、黄连-黄芩组、黄连-黄芩-黄柏组、黄连解毒汤组;模型组和各给药组于大鼠背部皮下注射2,4-二硝基苯酚( 25 mg·kg-1大鼠体质量)造模;各给药组干造模前30 min ig给予黄连、黄连-黄芩、黄连-黄芩-黄柏、黄连解毒汤1次(分别为7.2,12,16.8,24 g生药/kg大鼠体质量);收集造模后1,3,5,7,13,22 h各时间点的尿液,尿液样品进UPLC-TOF/MS检测分析,质谱数据采用MarkerLynx XS软件统计分析,并采用主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘-判别分析法(OPLS-DA)对获得的数据进行处理.结果:在得分图中,黄连组与模型组混为一组,黄连-黄芩组与模型组较接近,离空白组较远,黄连-黄芩-黄柏组与模型和空白组显著聚类区组,并且与空白组较接近,黄连解毒汤组与模型组和空白组显著聚类区组,与它们的距离相当;同时黄连、黄连-黄芩、黄连-黄芩-黄柏和黄连解毒汤各给药组分别对33,15,36,40个生物标志物具有干预作用,综合评价各实验组对热病证候的整体代谢和生物标志物的干预作用,结果黄连解毒汤全方作用最好,黄连-黄芩-黄柏次之,黄连作用第三,黄连-黄芩的干预作用最弱.结论:黄连作为方中君药发挥主要的药理作用,黄柏和栀子作为佐使药也发挥了其各自的作用,但黄芩作为臣药的地位有待商榷.     

黄连解毒汤提取物对脑缺血小鼠学习记忆的促进作用

采用避暗法和水迷宫法研究了黄连解毒汤提取物对实验性慢性脑缺血小鼠的作用。结果表明，黄连解毒汤提取物０５ｇ／ｋｇ、１０ｇ／ｋｇ能显著减少脑缺血小鼠避暗错误次数，并延长其钻洞潜伏期；提取物０５ｇ／ｋｇ、１０ｇ／ｋｇ和２０ｇ／ｋｇ均能显著增加脑缺血小鼠在水迷宫中的正确反应次数；且对脑缺血小鼠脑内丙二醛的生成有显著抑制作用。     

黄连解毒汤有效部位对神经细胞内钙超载的作用及机制分析

目的:研究黄连解毒汤有效部位(HLJDTAF)对神经细胞内钙超载的影响及相关机制。方法:低糖低氧损伤胎鼠皮层神经细胞模拟脑缺血,双波长荧光分光光度法测定神经细胞内钙含量,观察HLJDTAF对细胞内钙超载的抑制作用。并分别采用谷氨酸(Glu),KCl,A23187,乙酰甲胆碱(MCh)和咖啡因(CAF)处理神经细胞,以分析药物的作用环节。结果:HLJD-TAF对低糖低氧处理所致神经细胞钙超载有明显的抑制作用(P0.05);对200μmol.L-1谷氨酸,50 mmol.L-1剂量的K+,0.05μmol.L-1钙离子载体A23187处理细胞引起神经细胞内钙超载有明显的抑制作用(P0.05,P0.01);正常外钙情况下和零外钙情况下,HLJDTAF对5 mmol.L-1CAF和Mch诱导神经细胞内钙超载有明显的抑制作用(P0.01,P0.05)。结论:HLJDTAF可显著抑制神经细胞拟缺血损伤后的钙超载,其机制可能是通过多途径抑制缺血缺氧后神经细胞内钙超载,从而拮抗脑缺血损伤。     

黄连解毒汤对自发性高血压大鼠血压及其内皮祖细胞NO分泌功能的影响

目的:观察黄连解毒汤(HLJDT)对自发性高血压大鼠(SHR)血压及其内皮祖细胞(EPCs)一氧化氮(NO)分泌功能的影响,并探讨其作用机制。方法:60只雄性12周龄SHR随机分为5组,分别为模型组,卡托普利阳性药组,HLJDT低、中、高剂量组,每组12只,12只同周龄雄性WKY大鼠作为正常组。正常组和模型组予生理盐水ig(20 m L·kg~(-1)),其余各组分别给予卡托普利ig(1.35 mg·kg~(-1)),HLJDT低剂量ig(13.5 mg·kg~(-1)),HLJDT中剂量ig(27 mg·kg~(-1)),HLJDT高剂量ig(54mg·kg~(-1)),均1次/d,连续2周。用药前及预处理结束后当天采用BP-6大鼠无创血压测试仪测定各组大鼠尾动脉收缩压,采用密度梯度离心法分离培养骨髓来源的EPCs,经Dil-ac-LDL和FITC-UEA-I双染色鉴定后,分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测法、迁移小室(Transwell)小室、黏附实验及NO检测分析各组EPCs增殖、迁移、黏附能力及NO分泌功能。结果:与正常组比较,模型组SHR血压明显升高,SHR内皮祖细胞数量,增殖能力,迁移能力,黏附能力及NO分泌功能明显降低(P0.01);与模型组比较,HLJDT可以降低SHR血压,HLJDT低、中、高剂量组SHR内皮祖细胞数量,增殖能力,迁移能力,黏附能力及NO分泌功能均有增加(P0.05,P0.01)。结论:HLJDT能降低SHR血压,并且能增加EPCs的数量,提高EPCs的增殖、迁移、黏附能力及NO分泌功能。     

黄连解毒丸质量标准的研究

采用薄层层析和显微鉴别对黄连解毒丸进行定性研究,并测定其盐酸小檗碱和黄芩甙的含量。建议本法用于黄连解毒丸的质量控制。     

黄连解毒汤的组合树脂精制物在脑缺血模型大鼠体内的整合药动学研究

目的: 研究黄连解毒汤有效部位（Huanglian Jiedu Tang active fraction,HLJDTAF）在脑缺血模型大鼠体内的整合药动学。 方法: 采用电凝法阻断大鼠大脑中动脉（MCA）,建立脑缺血模型（MCAO）,假手术组及模型组灌胃给予黄连解毒汤有效部位（HLJDTAF）后按不同时间点采血,用高效液相色谱法测定小檗碱、巴马汀、黄芩苷、栀子苷在大鼠体内的血药浓度,绘制药-时曲线,建立整合药动学模型。比较单一成分的药动学参数与整合药动学参数的差异。 结果: 假手术组血浆药物浓度-时间曲线下面积（AUC）_（0-t）,C_max分别为（17.95±3.18）mg·L^-1·h,（1.37±0.51） mg·L^-1,平均驻留时间（MRT）_（0-t）,t_1/2z分别为（11.19±0.59） h,（68.28±44.56） h;模型组AUC_（0-t）,C_max分别为（18.65±1.00） mg·L^-1·h,（1.61±0.12） mg·L^-1,MRT_（0-t）;t_1/2z分别为（9.61±0.39）h,（15.04±3.73）h。可知,相对于假手术组,模型组AUC_（0-t）,C_max较高,MRT_（0-t）,t_1/2z较小。说明黄连解毒汤有效部位在脑缺血模型大鼠体内吸收较好,达峰浓度更高;同时代谢加快,在体内停留时间较短。 结论: 黄连解毒汤有效部位（HLJDTAF）的整合药动学特征与单个成分的药动学特征基本一致。所获参数能够最大程度上表征中药复方多效应成分整体的体内处置规律,为建立中药复方药代动力学研究提供了一种研究方法。