皮瓣移植及免疫调节

背景:皮肤损伤非常常见,皮瓣移植是治疗皮肤损伤的方法之一,而且已被广泛应用.设计合理的皮瓣移植,抑制移植后排斥反应,可以改善移植皮瓣的存活状态.目的:研究皮瓣移植后的免疫调节机制及抑制调节因素,为皮瓣移植的免疫调节研究提供参考信息.方法:检索万方数据库2002至2011年收录皮瓣移植后免疫调节相关研究文献,并进行深入分析,对皮瓣移植动物模型建立可行性的实验研究和一氧化氮、成纤维细胞生长因子、表皮生长因子对皮瓣移植的影响以及皮瓣移植后的微循环保护研究和感觉神经末梢再生研究进行实验数据分析,以明确影响移植皮瓣存活的因素,并进行调控,延长移植皮瓣的存活期,改善皮瓣移植后的存活状态.结果与结论:皮瓣移植的大鼠实验模型是一种很好的皮瓣移植动物模型,可以进行各种移植皮瓣的模型建立,并且可以用于皮瓣移植免疫以及微循环等各方面的实验研究.在皮瓣移植后的免疫调节中,一氧化氮和成纤维细胞生长因子以及表皮生长因子均可以对免疫反应进行调控影响,而异丙酚以及盐酸罂粟碱等物质可以对皮瓣移植后的微循环保护起到一定的作用.     

皮瓣移植过程中表皮生长因子的变化及促进组织修复的机制

目的：研究皮瓣移植前后表皮生长因子(EGF)受体分布特点及外源性EGF对受体分布的影响。方法：选择健康Wistar大鼠背部两侧随意皮瓣(2．5cm&;#215;1．5cm)模型，于原位缝合后即刻在皮下注入EGF，应用SABC法免疫组化染色。结果：免疫组化阳性着色主要存在于皮肤的表皮、皮下组织和深筋膜中的上皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞和毛囊汗腺的上皮细胞。EGF受体免疫反应阳性细胞数在皮瓣移植术后1～9d逐渐增加，第9天达高峰(95&;#177;6)个，第13天恢复到术前水平(38&;#177;4)个。加入外源性EGF后与对照组相比实验组EGF受体免疫反应阳性细胞数在术后1～6d都有明显增加，术后第6天达高峰(128&;#177;5)个，高峰期比对照组提前3d。结论：大鼠皮瓣免疫反应阳性细胞主要存在于表皮、皮下组织和深筋膜中的上皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞和毛囊汗腺的上皮细胞。     

皮瓣移植过程中表皮生长因子的变化及促进组织修复的机制

目的 研究皮瓣移植前后表皮生长因子( EGF)受体分布特点及外源性 EGF对受体分布的影响. 方法选择健康 Wistar大鼠背部两侧随意皮瓣( 2.5 cm× 1.5 cm)模型,于原位缝合后即刻在皮下注入 EGF, 应用 SABC法免疫组化染色. 结果免疫组化阳性着色主要存在于皮肤的表皮、皮下组织和深筋膜中的上皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞和毛囊汗腺的上皮细胞. EGF受体免疫反应阳性细胞数在皮瓣移植术后 1～ 9 d 逐渐增加,第 9天达高峰( 95± 6)个,第 13天恢复到术前水平( 38± 4)个.加入外源性 EGF后与对照组相比实验组 EGF受体免疫反应阳性细胞数在术后 1～ 6 d都有明显增加,术后第 6天达高峰( 128± 5)个,高峰期比对照组提前 3 d. 结论大鼠皮瓣免疫反应阳性细胞主要存在于表皮、皮下组织和深筋膜中的上皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞和毛囊汗腺的上皮细胞.     

碱性成纤维细胞生长因子对人晶体上皮细胞增殖及一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶的影响

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对人晶体上皮细胞内一氧化氮（NO）含量和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性、基因及蛋白表达的影响。 方法：以含10％胎牛血清（FBS）与100mg／L青霉素和100mg／L链霉素的DMEM培养液培养及传代人晶体上皮细胞。用0．001，0．01，0．1，1，10和100μg/L浓度的bFGF作用于晶体上皮细胞，用MTT法检测晶体上皮细胞的增殖情况；用Griess法测定NO含量；分别用RT—PCR方法及western blot法检测iNOS基因及蛋白的表达。 结果：①bFGF对细胞增殖的影响：与对照组比较，除100μg/L以组外，其余浓度为0．001～10μg／L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应均大于对照组，其中0．01～10μg/L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应差异显著（P〈0．05）。②bFGF对晶体细胞NO水平、NOS活性及iNOS的基因和蛋白表达的影响：对照组和0．001，0．01，0．1μg/L bFGF组NO水平较低，而在1μg/L以和10μg/L以的bFGF使人晶体上皮细胞的NO含量增高，0．1～10μg/L的bFGF使人晶体上皮细胞的NOS活性增高、使iNOS的基因和蛋白表达增强。 结论：可以促进人晶体上皮细胞的增殖，使NO含量和iNOS的活性和蛋白表达增高。     

自体表皮移植加（bFGF）治疗非平整部位白癜风疗效观察

国内自80年代末至90年代初陆续采用自体表皮移植治疗白癜风取得肯定疗效。但对发生在非平整部位的白癜风，由于皮肤活动度大，使移植表皮不易固定，皮片难以成活，手术成功率较低。本科自2005年1月至2006年10月采用自体表皮移植加碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）治疗33例白癜风取得满意疗效，现报道如下。     

碱性成纤维细胞生长因子对颗粒状脂肪移植存活率及器官功能恢复的影响

目的:探讨解决脂肪移植存活率低的有效途径。方法:在颗粒状脂肪移植的实验研究与临床应用中加入碱性成纤维细胞生长因子。观察不同时期实验侧和对照侧移植体剩余体积的变化及临床效果。结果:脂肪组织移植后存活良好,实验侧脂肪块剩余体积明显大于对照侧,未见明显液化吸收。结论:碱性成纤维细胞生长因子可以改善颗粒状脂肪移植的存活效果。     

糖尿病足部溃疡创面皮瓣移植方式选择及效果对比

目的 观察糖尿病足部溃疡(DFU)创面皮瓣移植方式选择和效果.方法 河北省唐山市第二医院DFU患者195例,根据皮瓣移植方式分为三组各65例.A组予小腿部位带蒂皮瓣治疗;B组予局部转移皮瓣合并或未合并手术治疗;C组予游离股前外侧皮瓣治疗.比较三组疗效、足部溃疡愈合基本情况、治疗前后创面生长细胞因子[血管内皮生长因子(V...     

碱性成纤维细胞生长因子在人体脂肪移植中的应用

目的:碱性成纤维细胞生长因子可促进再血管化过程,有利于脂肪细胞的成活。观察碱性成纤维细胞生长因子在自体脂肪移植治疗面部凹陷畸形中的作用效果。方法:选择2001-11/2006-03于南昌大学第二附属医院整形美容科采用自体脂肪移植治疗面部凹陷畸形的患者60例,共73个部位,所有患者均排除器质性病变且知情同意。按随机数字表法分为2组,每组30例。取出的脂肪经过清洗、过滤备用。①碱性成纤维细胞生长因子组在要移植的脂肪中加入10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子和庆大霉素液,每100mL脂肪颗粒中加入庆大霉素8万单位及碱性成纤维细胞生长因子2万单位。②对照组只加入庆大霉素液不加碱性成纤维细胞生长因子。术后半年随访,观察一次注射后的治疗效果。评估标准:凹陷充填后丰满平坦,双侧对称满意者为优;凹陷充填后较丰满平坦,双侧基本对称较满意者为良。结果:①术后半年随访,本组60例患者均使凹陷部位得到不同改善,无一例发生感染、液化及干酪样坏死等并发症。②术后半年碱性成纤维细胞生长因子组优良率为87%,对照组优良率为57%,两组相比差异具有显著性意义(P<0.05)。结论:碱性成纤维细胞生长因子可以促进人体移植脂肪的存活,改善面部凹陷畸形脂肪移植的术后效果。     

碱性成纤维细胞生长因子对人晶体上皮细胞增殖及一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人晶体上皮细胞内一氧化氮(NO)含量和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性、基因及蛋白表达的影响。方法:以含10%胎牛血清(FBS)与100mg/L青霉素和100mg/L链霉素的DMEM培养液培养及传代人晶体上皮细胞。用0.001,0.01,0.1,1,10和100μg/L浓度的bFGF作用于晶体上皮细胞,用MTT法检测晶体上皮细胞的增殖情况;用Griess法测定NO含量;分别用RT-PCR方法及westernblot法检测iNOS基因及蛋白的表达。结果:①bFGF对细胞增殖的影响:与对照组比较,除100μg/L组外,其余浓度为0.001～10μg/L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应均大于对照组,其中0.01～10μg/L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应差异显著(P<0.05)。②bFGF对晶体细胞NO水平、NOS活性及iNOS的基因和蛋白表达的影响:对照组和0.001,0.01,0.1μg/LbFGF组NO水平较低,而在1μg/L和10μg/L的bFGF使人晶体上皮细胞的NO含量增高,0.1～10μg/L的bFGF使人晶体上皮细胞的NOS活性增高、使iNOS的基因和蛋白表达增强。结论:可以促进人晶体上皮细胞的增殖,使NO含量和iNOS的活性和蛋白表达增高。     

碱性成纤维细胞生长因子复合降解膜对自体神经移植的影响

目的:用碱性成纤维细胞生长因子复合降解膜包裹自体神经移植部位观察其对神经再生的影响。方法:实验于2002-05/2003-08在沈阳医学院奉天医院手外科研究所完成。取健康成年新西兰大耳白兔30只,将兔左、右肢正中神经切除3cm,并用左、右肢切下来的神经互换移植。其中,左肢神经移植处包裹碱性成纤维细胞生长因子复降解膜为实验侧,30例;右肢神经移植处包裹不含碱性成纤维细胞生长因子复合剂的降解膜为对照侧,30例。术后3,12,24周切取神经移植部,制成光、电镜标本和血-神经屏障HRP示踪标本,镜下观察组织学变化,显微图像分析测定有髓神经再生情况。结果:实验大白兔30只均进入结果分析。①实验侧的再生有髓神经纤维在数量和直径上较对照侧差异有显著性[数量:实验侧近端为(648±144)条,远端为(504±82)条;对照侧近端为(614±178)条,远端为(224±59)条,P<0.001。直径:实验侧近端为(4.5033±0.5461)μm,远端为(3.8000±0.7329)μm,对照侧近端为(4.4783±1.2689)μm,远端为(2.5416±0.7214)μm,P<0.01]。②实验侧神经缝合段组织增生明显较对照侧的少,粘连程度明显较对照侧的轻(实验侧:无粘连0,轻度粘连85.7%,中度粘连14.3%,重度粘连0;对照侧:无粘连0,轻度粘连14.3,中度粘连14.3%,重度粘连71.4%)。③实验侧肌电反应强度明显优于对照侧[潜伏期:实验侧(4.94±0.897)ms,对照侧(7.30±1.620)ms,P<0.01]。④实验侧神经移植段的血-神经屏障功能较对照侧恢复快。结论:包裹成纤维细胞生长因子复合降解膜有减轻移植神经局部结缔组织增生、加速血-神经屏障功能恢复和促进神经再生的作用。增强神经自身再生能力结合抑制结缔组织增生可能是提高神经再生效果的新思路。     

Antibody-specific immunoregulation

In recent years, much evidence has accumulated which demonstrates that an animal's immune system has the capacity to recognize its own antibody idiotypes. These findings suggest that self-idiotypic recognition may potentially play a role in the regulation of B-cell responses. The experiments presented in this report were carried out to determine if an animal develops the ability to specifically regulate the synthesis of antibodies specific for an antigen, subsequent to primary immunization to the particular antigen and concomitant with an initial antibody response. Employing the splenic fragment culture system we have compared the response of primary donor B cells in irradiated recipients which have been previously immunized to hemocyanin (Hy) alone or dinitrophenyl (DNP)-Hy plus Hy. The results indicated that only 25-30 percent of DNP- specific B cells stimulated by DNP-Hy in Hy immunized recipients could bestimulated by DNP-Hy in recipients immunized with Hy as well as DNP-Hy. B-cell responses to other haptens, such as fluoresceinated-Hy, and secondary DNP-specific B-cell responses were unaffected in DNP-Hy immunized animals. The nontrivial and specific nature of the observed decrease in primary DNP-specific B-cell responses was verified by the finding that the response of CB20 donor cells, which differ from BALB/c mice only in the immunoglobulin heavy chain allotype-linked locus, was unaffected in BALB/c recipient mice which had been immunized with DNP-Hy. Thus, it appeared that during a primary humoral immune response to a T- dependent antigen, an antibody-specific regulatory mechanism is induced which specifically limits the stimulation of hapten-specific primary, but not secondary, B cells. The important implications that these findings have for the understanding of the control of primary B-cell responses and the generation of secondary B cells is discussed.     

皮瓣移植及静脉吻合修复手部严重皮肤撕脱伤

目的:总结手部严重皮肤撕脱伤的修复方法并观察其治疗效果。方法:选择2000-09/2005-09中南大学湘雅医院整形烧伤整形外科收治的手部严重皮肤撕脱伤患者9例,患者均知情同意。其中多指皮肤撕脱4例,手指、手掌、手背联合皮肤撕脱5例。应用同侧共蒂髂腰部、下腹部皮瓣联合移植4例,双侧髂腰皮瓣联合移植2例,同侧髂腰皮瓣移植加手掌、手背中厚植皮修复1例,撕断手背静脉吻合后撕脱手掌、手背皮瓣原位缝合2例。术后定时随访,观察患者手部外形、抓握、对掌功能和手指关节屈伸度等,进行术后手部功能评估,手部功能损害<25%为功能良好。结果:9例手部严重皮肤撕脱伤患者全部进入结果分析,无脱落。9例患者术后随访3个月~1年,其中3~6个月2例,6~9个月3例,9个月~1年4例。①除1例静脉吻合逆行手掌皮瓣边缘少许坏死外,其余皮瓣和皮片全部成活。②手部功能评定:恢复良好者8例。除1例全手皮肤撕脱术后掌指关节和指间关节僵硬、手部功能恢复较差外,其余8例术后手部具有较好的屈伸、抓握、对掌等功能,效果基本满意。③应用共蒂髂腰、下腹部皮瓣修复手指、手掌、手背联合皮肤撕脱伤,血运可靠,有效保留了伤指,且能恢复患指大部分功能。具有手部制动限制少、能早期进行功能锻炼、功能恢复好等优点。应用静脉吻合法修复手掌、手背联合皮肤撕脱伤,解决了逆行撕脱瓣静脉回流问题,效果良好。结论:皮瓣移植及静脉吻合均能有效修复手部严重皮肤撕脱伤患者的手部功能,其中共蒂髂腰、下腹皮瓣联合修复多指皮肤撕脱有利于手部早期功能锻炼;手背静脉吻合能改善逆行撕脱手背皮肤静脉回流障碍。     

Null cell immunoregulation in SLE

Fresh normal T cells do not lyse MDA-157 target cells. Normal null cells, cultured for 4 days with MDA-157 stimulators, and then mixed overnight with fresh normal T cells, induce cytotoxicity on MDA-157 targets and suppressor activity in the T-cell acceptor population. With the same normal acceptor T cells, MDA-157 activated null cells from 13/18 patients with Systemic Lupus Erythematosus (SLE), unlike activated cells from a disease control population, induce little or no T-cell cytotoxicity or suppression. These results provide further evidence for abnormal null cell function in SLE.     

间充质干细胞对H-2半相合骨髓移植小鼠免疫功能的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSC）对半相合骨髓移植小鼠免疫功能的影响及机制。方法经8Gy^60Coγ射线照射后，BALB／c（H-2^d）雌性小鼠分为两组：MSC组，尾静脉输注经cm—DiI膜染剂标记的CB6F1（H-2^bd）雌性小鼠的MSC和CB6F1雄性小鼠的骨髓及脾的单个核细胞；对照组，单独输注CB6F1骨髓及脾的单个核细胞。观察两组移植后不同时间外周血中的淋巴细胞亚群，ConA和LPs刺激的T、B淋巴细胞增殖，供受者及第三者混合淋巴细胞反应（MLR），供者骨髓及脾细胞在受者胸腺、骨髓和脾脏的植入率，供者MSC在受者体内分布，急、慢性GVHD的发生率和生存分析。结果移植后90天（＋90天）内，MSC组CD3阳性细胞高于对照组（P〈0．05），＋30天MSC组CD3CD4双阳性细胞百分比和CD4／CD8值高于对照组（P〈0．05）。两组T细胞增殖活性差异无统计学意义。MSC组＋14天后B细胞增殖功能开始恢复，＋30天达到正常值，而对照组＋60天才恢复到正常值。供受者的MLR中MSC组的RR值始终低于对照组；第三者MLR中MSC组与对照组差异无统计学意义。＋30天MSC组受者骨髓和脾中的sry基因多于对照组。移植后MSC主要集中在胸腺、骨髓、肝、小肠，并且大量扩增。对照组急性GVHD发生率高于MSC组（P〈0．05），＋90天对照组出现不同程度的慢性GVHD，MSC组＋120天后出现慢性GVHD，程度轻于对照组。MSC组存活率高于对照组（P〈0.05）。结论MSC促进骨髓干细胞植入，加快C1M淋巴细胞恢复，促进体液免疫恢复，减少GVHD发生率，并且在受者胸腺、骨髓、肝、肠和心内膜下大量扩增，起到修复损伤作用，提高半相合骨髓移植动物生存率。     

细胞因子信号转导抑制因子（SOCS）与免疫调节

细胞因子信号转导抑制因子（suppressor of cytokine signaling,SOCS）是一类可由多种细胞因子诱导产生,又能通过多种途径对细胞因子的信号转导进行负向调节的蛋白质分子。众多研究发现SOCS蛋白家族是一个非常重要的可以负向调节 JAK／STAT信号通路的分子家族。本文将着重阐述介绍SOCS家族在炎症和自身免疫性疾病中的作用。     

Antibody-specific immunoregulation and the immunodeficiency of aging

Experiments were carried out to assess the role of naturally acquired antibody-specific immunoregulation in the immunodeficiency of aged individuals. It was found that greater than 50% of the primary dinitrophenyl-specific BALB/c B cells did not respond in carrier-primed 2-yr-old BALB/c adoptive hosts as compared with similarly primed younger recipients. Similar suppression was observed in carrier-primed younger BALB/c mice that had received 4 x 10(7) spleen cells from 2-yr- old BALB/c mice, as opposed to those that had received 4 x 10(7) spleen cells from younger mice. This diminution in responsiveness was noted only for syngeneic BALB/c B cells because B cells of strains differing from BALB/c in the heavy chain allotype-idiotype locus were not suppressed. These findings indicate that old, but not young, mice had developed the capacity to suppress primary B cells bearing receptors expressing much of the syngeneic antibody repertoire. This suppression may play an important causative role in the relatively poor humoral immune responsiveness of aged individuals.     

皮瓣移植结合封闭式负压引流修复下肢皮肤及软组织缺损

背景：各种创伤引起的下肢皮肤及软组织缺损十分常见,常伴有严重的血运破坏和创面感染,患肢感染率高,不易愈合。目的：系统回顾关于下肢皮肤及软组织感染性缺损治疗的相关文献,结合华中科技大学同济医学院附属普爱医院治疗的下肢皮肤及软组织感染性缺损23例患者治疗效果,探讨皮瓣移植结合封闭式负压引流治疗感染性下肢皮肤及软组织缺损的适应症、方法及临床应用价值。方法：文章选取2004年8月至2011年11月在华中科技大学同济医学院附属普爱医院治疗的下肢皮肤及软组织感染性缺损患者共23例,男15例,女8例;年龄17-56岁,平均31.4岁。对23例下肢皮肤及软组织感染性缺损患者采用皮瓣移植结合负压封闭引流治疗,随访时间为4-15个月,平均7.3个月,观察临床效果。同时检索下肢皮肤及软组织感染性缺损治疗的相关文献,找出治疗对象相似、疗效评价标准相同的病例进行比较。结果与结论：23例下肢皮肤及软组织感染性缺损患者伤口感染菌中革兰阳性菌占52.2%,革兰阴性菌占47.8%,多重耐药菌占43.5%,应用封闭式负压吸引技术处理后,创面感染得到有效的控制,创面肉芽组织生长良好,通过皮瓣移植修复创面均痊愈。结果显示,皮瓣移植结合封闭式负压引流治疗感染性下肢皮肤及软组织缺损,可缩短创面愈合时间。     

间充质干细胞与免疫调控关系的研究进展

间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)是一种中胚层起源的具有自我更新和多向分化潜能的异质性细胞群体.在体外培养时贴壁生长,具有成纤维细胞样形态和克隆形成能力,并能够典型地分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞[1].最初的MSC主要是从骨髓中分离获得,然而目前已证明从脂肪组织、真皮、肌肉、肌腱、胎盘、脐带、外周血和脐血等几乎所有结缔组织中都可分离得到[2].近年来,间充质干细胞正越来越受到人们的关注.这不单是因为其具有分化和转分化的潜能,更重要的是因为其抑制免疫细胞增殖和抗炎症的免疫调节作用.     

小腿中下1／3骨及皮肤软组织缺损的组织皮瓣移植

文章阐述了研究小腿组织缺损修复的重要意义,介绍了皮瓣修复的类型及方法.其中,重点介绍了皮神经营养血管复合瓣,特别足皮神经营养血管复合瓣修复小腿中下1/3骨及皮肤缺损的重要作用.同时详细介绍了目前国内外非主干营养血管皮瓣,复合瓣的移植修复研究情况,分析了目前在小腿骨及皮肤软组织缺损组织皮瓣移植修复研究方面存在的问题,并提出了今后在小腿中下1/3骨及皮肤软组织缺损组织皮瓣移植修复中的研究发展方向.