利多卡因对高氧暴露早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞SPA、SPB、SPC mRNA表达的影响

目的观察利多卡因（Lido）对高氧所致的早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）功能的影响。方法原代培养的早产大鼠AECⅡ随机分为4组：空气（Air）组、高氧（HO）组、Air＋Lido组、HO＋Lido组。HO、HO＋Lido组在更换培养液后按5 L/min通入95%O2-5%CO2的高纯混合气,10 min后密封。Air＋Lido、HO＋Lido组在更换培养液时加入20μg/ml的Lido,各组均置于37℃、5%CO2培养箱中培养24 h,收集各组细胞,运用Real-Time PCR检测肺表面活性物质蛋白（SP）A、SPB、SPC mRNA的表达。结果 HO组SPA、SPB、SPC mRNA表达低于Air组（P〈0.01）;Air＋Lido组SPA、SPB、SPC mRNA表达高于Air组（P〈0.01）;HO＋Lido组SPA、SPB、SPC mRNA高于HO组（P〈0.01）,但低于Air组（P〈0.01）。结论高氧可导致早产大鼠AECⅡSPA、SPB、SPC mRNA表达下调,Lido能逆转上述改变。Lido对高氧所致早产鼠AECⅡ损伤有一定的保护作用。     

PM2.5处理后的小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞基因表达谱变化及其功能与信号通路分析

目的 应用转录组测序技术分析PM2.5处理后小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的基因表达谱变化及其功能与信号通路.方法 小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12分为对照组(无处理)和PM2.5组(100μg/mL PM2.5处理),分别处理24 h后提取两组细胞RNA进行转录组测序.所得序列经质控后,利用差异分析软件edgeR筛选出差异表达...     

VitD在降低PM2.5对肺泡上皮细胞毒性中的影响分析

目的 分析维生素D(vitamin D, VitD)在降低PM_2.5对肺泡上皮细胞毒性中的影响。方法 采用透射电子显微镜和激光诱导荧光分析对比VitD处理前后,PM_2.5的毒性能力。MMT观察VitD处理前后细胞生存率,分析PM_2.5对A549的毒性影响。结果 VitD作用后的PM_2.5平均粒径减小5.5 nm,颗粒聚结和团聚更为明显,颗粒平均条纹长度增加、弯曲度减小,差异有统计学意义。PM_2.5条纹间距无统计学差异,有明显减小,接近0.06 nm。VitD溶液从PM_2.5解吸3环和4环多环芳香烃(polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs),减少PM_2.5表面附着的致病性PAHs。PM_2.5可引起肺上皮细胞A549生存率明显下降,给予VitD干预后,PM_2.5对A549细胞生存率的抑制改善了54.7%,PM_2.5的生物毒性降低。结论 ...     

细胞因子对人肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549分泌C3和B因子的影响

补体是血浆中的30多种球蛋白,局部补体成分在机体的防御中起重要作用.本研究意在蛋白及转录水平上探讨肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6及其协同作用对A549细胞分泌C3及B因子的影响.     

吉林市采暖期与非采暖期室外PM2.5浓度状况及对社区老年人呼吸系统疾病的影响

目的了解吉林市采暖期与非采暖期细颗粒物(PM2.5)污染水平与老年人呼吸系统健康的关系。方法 2013年采暖期,选择每年连续居住6个月以上(包含整个冬季)共900名老年人观察呼吸系统疾病情况。结果 2013年吉林市采暖期PM2.5浓度明显高于非采暖期,龙潭区(工业区)>昌邑区(生活区)>丰满区(旅游区)差异有统计学意义(P<0.05);2013年吉林市3个区老年人呼吸系统疾病以呼吸道感染、支气管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)为主,采暖期社区老年人呼吸系统疾病患病明显高于非采暖期,龙潭区>昌邑区>丰满区,差异有统计学意义(P<0.05)。结论吉林市采暖期PM2.5污染严重,PM2.5污染水平与老年人呼吸系统健康有直接的关系,应通过多项措施改善空气质量,降低老年人呼吸系统疾病的发生。     

PM2.5致呼吸系统损伤的机制及药物防治进展

正近年来,随着工业化和城市化进程的加快,大气污染问题日益凸显,其对人类健康的危害已成为广泛共识。PM2.5作为大气污染物中重要的组成部分,直接与呼吸系统接触,可深入包括肺泡在内的各级支气管树,损害呼吸系统功能,引发或加重呼吸系统疾病[1-2]。了解PM2.5对呼吸系统损伤的机制及药物防治,对医学工作者更好地预防和诊疗与PM2.5有关的呼吸系统疾病具有重要意义。一、PM2.5简介1. PM2.5的定义及来源:大气颗粒物(particulate matter,PM)是指空气中分散的固体、液体悬浮物或固液颗粒混合物,PM2.5是指空气动力学当量直径≤2.5μm的大气悬浮颗     

PM2.5不同成分致冠脉粥样硬化大鼠ACS的可能机制

目的从炎症反应、氧化应激两方面来探讨PM2.5的水溶性及酸溶性成分致冠脉粥样硬化大鼠ACS的可能机制。方法 48只Wistar大鼠随机分为两组,对照组和冠脉粥样硬化模型组,每组24只。提取PM2.5水溶性成分(WSC)及酸溶性成分(ASC)。将对照组和模型组再各自随机分为3组,正常对照组、WSC对照组、ASC对照组,以及模型对照组、WSC模型组、ASC模型组,每组8只。WSC组通过尾静脉注射的方式给予WSC(40 mg/kg)染毒;ASC组给予ASC(40 mg/kg)染毒。染毒24 h后处死大鼠,测定血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及心肌中的NF-κB活性。结果 WSC组TNF-α水平(2.83±0.97)ng/mL,高于空白组(2.53±0.76)ng/mL;心肌NF-κB的活化程度为(14.56±10.58)%,高于空白组(7.33±3.97)%。ASC组MDA水平(8.27±2.70)nmol/mL,高于空白组(7.24±0.66)nmol/mL;SOD水平(118.56±8.92)U/mL,低于空白组(130.38±5.69)U/mL;心肌NF-κB的活化程度(18.80±17.04)%,高于空白组(7.33±3.97)%。结论 WSC具有升高TNF-α水平,激活心肌NF-κB的作用;ASC具有升高MDA、降低SOD水平,激活心肌NF-κB的作用。PM2.5致冠脉粥样硬化大鼠ACS发生的机制可能与其水溶性成分可加剧模型大鼠体内炎症反应,而酸溶性成分在加剧炎症反应的同时,还表现出氧化应激损伤相关。     

机械力对培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞黏附分子-1表达的影响

目的 探讨机械力对人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549细胞黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响.方法 (1)将接种在加力板上的A549细胞分为张力组、压力组和对照组3组,用四点弯曲加力仪对细胞进行机械力刺激:实验组以1000 μstrain强度的张力、压力分别刺激细胞6 h,通过Western blot和半定量逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)检测ICAM-1蛋白及其mRNA的表达,对照组行伪暴露.(2)用特异性细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的阻断剂PD98059(浓度为25 μmol/L)预处理3组细胞60 min后,再用1000 μstrain强度的张力、压力分别刺激细胞6 h,以Western blot和RT-PCR法榆测ICAM-1蛋白及其mRNA的表达,对照组在阻断剂处理后行伪暴露.采用单因素方差分析(ANOWA)对数据进行分析,组间两两比较用SNK法.结果 (1)张力组、压力组ICAM-1蛋白吸光度值分别为1.16±0.07、1.05±0.02,高于对照组的0.78±0.07(F值为3.31,P<0.05);张力、压力组ICAM-1 mRNA分别表达为1.42±0.05、1.27 4±0.05,亦高于对照组的0.13 4±0.04(F值为23.1,P<0.01).(2)PD98059预处理细胞后张力组和对照组ICAM-1蛋白吸光度值分别为1.62±0.10和0.50±0.08,差异有统计学意义(q=3.75,P<0.05);压力组ICAM-1蛋白表达水平为0.60±0.03,与对照组相比差异无统计学意义(q=0.32,P>0.05);张力组和对照组ICAM-1 mRNA表达为1.57 ±0.03和0.35±0.29.差异有统计学意义(q=3.51,P<0.05);压力组ICAM-1 mRNA表达为0.46±0.03,与对照组相比差异无统计学意义(q=0.32,P>0.05).结论 机械力可增加A549细胞间黏附分子ICAM-1的表达;阻断剂PD98059可部分抑制机械力诱导的ICAM-1的表达,提示ERK1/2通路可能部分参与了机械力诱导A549细胞ICAM-1表达的信号传导.     

香烟烟雾提取物对Ⅱ型肺泡上皮细胞中Derlin-1表达的影响

目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对Ⅱ型肺泡上皮细胞中Derlin-1蛋白及其mRNA表达的影响。方法体外培养Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549),加入10%浓度的CES作用于细胞0、3、6、12、24、48 h,采用免疫蛋白印迹(WB)检测Derlin-1蛋白表达水平的变化,并运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Derlin-1 mRNA含量的变化。结果 10%浓度的CSE作用下,Derlin-1蛋白的表达逐渐提高,并在6 h达最高,随后逐渐下降,Derlin-1 mRNA含量变化与Derlin-1蛋白表达一致。结论香烟烟雾可影响Ⅱ型肺泡上皮细胞中Derlin-1表达的变化,可能与Derlin-1是内质网应激诱导凋亡的抑制剂有关。     

肺泡上皮细胞损伤及修复对急性肺损伤预后的影响

ALI/ARDS是由弥漫性肺损伤,肺泡上皮与微血管内皮屏障的广泛破坏,使肺泡与间质内聚积大量富含蛋白的水肿液.因此有效的肺泡上皮修复至关重要.研究上皮细胞损伤及修复机制对研发ALI的有效治疗策略至关重要.     

肺炎链球菌致坏死性肺炎患儿肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的变化

目的研究致1例9岁患儿肺组织坏死的肺炎链球菌（Sp）对该患儿肺泡Ⅱ型上皮细胞（AEC-Ⅱ）超微结构的影响。方法肺炎链球菌坏死性肺炎患儿因肺空洞较大,且反复感染,4个月后行左下肺叶肺空洞切除时,将坏死和正常的肺组织标本（1 mm^3）置于2.5%的戊二醛中固定。所有标本置于4℃冰箱中待检。用透射电子显微镜观察儿童AEC-Ⅱ超微结构的变化。结果在Sp作用下儿童AEC-Ⅱ的微绒毛减少,脱落。板层小体体积增大,排空加强,密度减低。细胞核染色质浓缩,分布不均,部分肺组织呈纤维化样改变。结论 Sp作用下儿童AEC-Ⅱ的损伤可能导致肺组织坏死和纤维化。     

肺泡Ⅱ型细胞钠通道的生物学特点及调节机制

为了实现有效的气体交换，肺泡必须保持开放和相对干燥。肺泡上皮细胞在维护肺泡的正常功能时起着十分重要的作用。肺泡上皮细胞主要由扁平的Ⅰ型上皮细胞(ATI)和立方型的Ⅱ型细胞(ATⅡ)组成。在成人肺中，占肺泡上皮细胞总数的67％的Ⅱ型细胞，虽然仅仅覆盖肺泡表面积的3％，但是，ATⅡ除了是ATI的前期细胞以及分泌肺泡表面活性物质外，另一个重要功能是主动转运Na ，从而促使肺泡腔内的液体向细胞间隙转运，促进肺水的吸收。     

PM2.5诱导动脉粥样硬化的作用机制及中介素的干预作用研究进展

综述铁死亡途径在PM_2.5诱导动脉粥样硬化中的作用及中介素的调节作用,为动脉粥样硬化的防治提供参考。近年来,环境问题越来越受到了人们的关注,PM_2.5使人体各个器官、系统均受到损伤,尤其增加了动脉粥样硬化的发病率和病死率。铁死亡是一种新型铁依赖性细胞死亡方式,抑制铁自噬-铁死亡可能会对阻断PM_2.5诱导的动脉粥样硬化进展提供新的思路。中介素是一种新型心血管系统调节剂,可以通过减轻铁死亡阻断动脉粥样硬化的发展。     

肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型细胞中细胞因子的表达

目的观察博莱霉素致肺纤维化大鼠肺泡Ｉ型上皮细胞肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）和血小板衍化生长因子（ＰＤＧＦ）表达的变化。方法大鼠气管内灌注博莱霉素Ａ５复制肺纤维化模型，分别于注药后第３、７、１４和２８天处死动物，进行免疫组织化学染色；同时提取肺泡Ⅱ型上皮细胞总ＲＮＡ进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交。结果正常大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞不表达ＴＮＦα和ＰＤＧＦ；而肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞则表达ＴＮＦα和ＰＤＧＦ。其中ＴＮＦα表达高峰在注药后第２８天；ＰＤＧＦ的表达高峰在注药后第７天。结论肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型细胞过度表达ＴＮＦα和ＰＤＧＦ，参与了肺纤维的发病过程。     

2014～2019年中国PM2.5浓度及与老年心脑血管疾病归因死亡的时空分析

目的 结合人口密度分布和老龄化,研究粒径≤2.5μm的细颗粒物(PM_2.5)对城乡老年人心脑血管病归因死亡风险。方法 运用时间序列分析、人口密度加权、地理空间分析、疾病归因方法研究2014～2019年中国PM_2.5浓度长时间序列及变化规律、探讨归因于PM_2.5的城市、农村老年人群心脑血管病死亡率。结果 2015年以来全国PM_2.5浓度不断下降,从空间分布来看,华北地区浓度最高,呈现聚集性。年均PM_2.5浓度具有显著的空间差异性,总体呈现“由北向南先变重再变轻,由东向西先变轻再加重”的空间分布格局。以人口密度分布对PM_2.5加权后的浓度值为44.37μg/m³,增大了5.63%,更加准确地描述了PM_2.5对老年人群的危险程度。农村地区PM_2.5对各年龄段老年人群患心脑血管疾病死亡率的影响比城市严重。结论 人口密度的空间差异影响PM_2.5的危险性,高龄老年人受影响较大。     

PM2.5激活HIF-1α-NF-κB/VEGF通路对肺损伤的影响

目的 分析HIF-1α在PM_2.5暴露致肺损伤中的影响。方法 构建经气管滴注PM_2.5悬液诱导大鼠肺损伤的动物模型,通过蛋白质免疫印迹、病理切片、ROS与TUNEL染色和ELISA等方法,分析不同PM_2.5暴露剂量下HIF-1α表达和肺损伤情况;构建抑制HIF-1α表达的动物模型,通过蛋白质免疫印迹、免疫荧光和ELISA等方法探讨HIF-1α在PM_2.5暴露致肺损伤中的作用机制。结果 PM_2.5暴露造成肺组织病理性损伤,提高肺组织ROS水平、细胞凋亡率和湿干比,促进支气管肺泡灌洗液中各类炎症细胞计数和炎症因子IL-6、TNF-α水平增高,激活肺组织HIF-1α的蛋白表达,且以上效应与PM_2.5暴露浓度相关;抑制HIF-1α可降低NF-κB表达,降低支气管肺泡灌洗液中炎症因子水平,改善肺组织炎症;抑制HIF-1α可降低VEGF表达,降低支气管肺泡灌洗液中白蛋白水平和肺组织湿干比,改善肺组织水肿。结论 PM_2.5通过激活“HIF-1α-N...     

氯喹对脂多糖诱导的Ⅱ型肺泡细胞损伤的影响

目的:探究氯喹(chloroquine,CQ)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致Ⅱ型肺泡(alveolar typeⅡ,AT2)细胞株损伤的影响.方法:用不同浓度LPS和CQ分别单独处理AT2细胞,用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞活力以筛选LP...     

PM2.5不同成分在体染毒对大鼠肾血管环收缩-舒张反应及NOS/NO的影响

目的探究PM2.5水溶成分和脂溶成分对大鼠肾动脉收缩-舒张反应的影响及其作用机制。方法采用蒸馏水或有机溶剂分别提取PM2.5的水溶成分和脂溶成分。将大鼠随机分为3组,分别尾静脉注射PM2.5水溶成分、脂溶成分和混合成分,连续染毒10 d。采用DMT和PowerLab系统记录大鼠肾动脉血管环的张力;血清学检测大鼠NOS/NO系统变化。结果与对照组比较,PM2.5各染毒组加强氯化钾(KCl)和U46619对肾动脉血管环的收缩反应,但无统计学意义(P>0.05),对乙酰胆碱(Ach)的舒张作用减弱(P<0.05),对硝普钠(SNP)的舒张作用无明显影响。与对照组比,PM2.5各染毒组的血清NO含量均显著增高(P<0.05);混合物染毒组血清eNOS含量显著降低(P<0.05),而水溶成分组和脂溶成分组无统计学意义;各染毒组血清iNOS活性均显著性增高(P<0.05)。结论 PM2.5水溶成分、脂溶成分及混合成分在体染毒加强KCl和U46619对肾动脉血管环的收缩反应,无统计学意义;减弱Ach对肾血管环的舒张效应,该作用可能与PM2.5损伤内皮功能有关。     

高氧对大鼠AECⅡ细胞的损伤及hMSC的干预作用观察

原代培养新生大鼠肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)放入Transwell-Clear底层上(预置盖玻片),随机分为A、B、C、D 4组,每组6复孔.A、B组置于95%O2 5%CO2中培养,而C、D组则在95%空气 5%CO2中培养;24 h后留取上清并换液,A、C组在Inserts中加入人骨髓间充质干细胞(hMSC)进行共培养,而B、D组则不加;24 h后再留取上清.采用ELASA法检测培养上清中肿瘤坏死因子α(TNFα)、转化生长因子β1(TGFβ1)的含量;Hoechst染色检测Transwell-Clear底部AECⅡ细胞凋亡情况.免疫组化检测Transwell-Clear Inserts中人骨髓MSC特异性SP-A的表达情况.高氧暴露导致新生大鼠AECⅡ培养液中TNFα、TGFβ1含量增加,细胞凋亡增加.而与hMSC共培养后TNFα、TGFβ1含量降低,细胞凋亡减少.认为高氧暴露导致新生大鼠AECⅡ分泌功能改变,细胞凋亡增加;而与hMSC共培养对AECⅡ的损伤具有保护作用.