LINC00176下调miR-761对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响

目的探讨LINC00176对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及潜在的作用机制。方法 miR-NC组(转染miR-NC)、miR-761组(转染miR-761 mimics)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-LINC00176组(转染pcDNA3.1-LINC00176)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC00176组(转染si-LINC00176)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-761组(转染anti-miR-761)、miR-NC+WT-LINC00176组(共转染miR-NC和WT-LINC00176)、miR-NC+MUT-LINC00176组(共转染miR-NC和MUT-LINC00176)、miR-761+WT-LINC00176组(共转染miR-761和WT-LINC00176)、miR-761+MUT-LINC00176组(共转染miR-761和MUT-LINC00176)、pcDNA3.1-LINC00176+miR-NC组(共转染pcDNA3.1-LINC00176和miR-NC)、pcDNA3.1-LINC00176+miR-761组(共转染pcDNA3.1-LINC00176和miR-761)均用脂质体法转染至SGC-7901细胞;采用qRT-PCR检测LINC00176和miR-761的表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测各组细胞凋亡;Western印迹检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于正常胃黏膜细胞GES-1,胃癌细胞MGC-803、SGC-7901中LINC00176的表达水平显著降低(P0.05);过表达LINC00176、抑制表达miR-761均可抑制SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡;抑制Bcl-2、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MPP)-2蛋白表达,促进Bax蛋、E-钙黏蛋白(cadherin)、P21蛋白表达。LINC00176靶向调控miR-761表达。过表达miR-761能逆转LINC00176对胃癌细胞SGC-7901增殖、迁移、侵袭的抑制和凋亡的促进作用。结论长链非编码RNA LINC00176可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,其机制可能与靶向miR-761基因有关,将可为胃癌的预防和治疗提供新靶点。     

PCa组织Mfn2 mRNA表达及转染Mfn2过表达质粒的人PCa细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡观察

目的 观察前列腺癌（PCa）组织Mfn2 mRNA表达及转染Mfn2过表达质粒的人PCa细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡情况。方法 体外培养人PCa细胞株（PC3细胞和DU145细胞），分别转染Mfn2过表达质粒、空白载体质粒及不转染质粒，PC3细胞分别记为A、B、C组，DU145细胞分别记为D、E、F组。CCK-8实验检测各组细胞OD值，细胞集落形成实验测算各组细胞集落数目，以OD值和细胞集落数目表示细胞增殖能力。细胞划痕实验测算各组细胞迁移率，以细胞迁移率表示细胞迁移能力。Transwell实验测算各组细胞侵袭数目，以细胞侵袭数目数表示细胞侵袭能力。流式细胞术测算各组细胞凋亡率，Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、caspase-3及PI3K/AKT通路相关蛋白（p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT）。结果 PCa、癌旁组织Mfn2 mRNA相对表达量分别为0.36±0.32、0.72±0.35，两者比较，P<0.05。与同组24 h比较，A、B、C组48和72 h的OD值增加（P均<0.05）；与同组48 ...     

干扰ECT2基因表达对结直肠癌SW620细胞侵袭和迁移的影响及机制研究

目的探讨转染小干扰RNA(siRNA)干扰上皮细胞转化序列2(ECT2)基因的表达对人结直肠癌SW620细胞侵袭和迁移的影响及机制。方法采用脂质体Lipofectamine 2000转染试剂将ECT2特异性siRNA或非特异性siRNA转染至SW620细胞,分别记为si-ECT2组和si-NC组,将未行转染的SW620细胞记为Control组。采用实时荧光定量PCR法(real-time qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)分别检测各组SW620细胞中ECT2的mRNA和蛋白表达水平,采用Transwell侵袭实验检测各组SW620细胞的侵袭能力,采用划痕愈合实验检测各组SW620细胞的迁移能力,采用Western blotting法检测各组SW620细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9蛋白表达水平。结果与si-NC组相比,si-ECT2组SW620细胞中ECT2的mRNA和蛋白表达水平均明显降低,穿膜细胞数量明显减少,划痕愈合率明显降低,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(P均0.05)。Control组的上述各项指标与si-NC组之间的差异均无统计学意义(P均0.05)。结论干扰ECT2基因的表达能够抑制结直肠癌SW620细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制可能与下调MMP-2和MMP-9蛋白表达有关。     

甲基转移酶样蛋白14对急性早幼粒白血病细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的调节作用

目的 探讨过表达和敲低甲基转移酶样蛋白14(METTL14)对急性早幼粒白血病细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的调节作用。方法 取人急性早幼粒白血病细胞NB4进行培养,分为过表达对照组、过表达组、干扰对照组、干扰组,过表达对照组及过表达组分别转染空白质粒和METTL14质粒,干扰对照组和干扰组分别转染si-NC和si-METTL14质粒。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,Dot Blotting法检测细胞N-6甲基腺苷（m6A）修饰水平。结果 与过表达对照组相比,过表达组细胞增殖率升高、细胞凋亡率降低、细胞迁移数、细胞侵袭数升高,NB4细胞m6A修饰水平提高（P均<0.05）;与干扰对照组相比,干扰组细胞增殖率降低、细胞凋亡率增加、细胞迁移数、细胞侵袭数降低,NB4细胞m6A修饰水平降低（P均<0.05）。结论 METTL14可促进NB4细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与提高m6A修饰水平有关。     

干扰FTO蛋白对人卵巢癌细胞系SKOV3增殖、迁移、侵袭的影响及其机制

目的 观察干扰脂肪量和肥胖相关蛋白（FTO）对人卵巢癌细胞系SKOV3增殖、迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法 取对数生长期SKOV3细胞,分为siFTO-1组、siFTO-2组、si-NC组,siFTO-1组转染第一条靶向FTO的小干扰RNA(siFTO-1),siFTO-2组转染第二条靶向FTO的小干扰RNA(siFTO-2),si-NC组转染无靶向作用的小干扰RNA(si-NC),CCK-8法检测细胞增殖能力（增殖率）,细胞划痕实验检测细胞迁移能力（相对迁移率）,Transwell实验检测细胞侵袭能力（穿膜细胞数）,Western blotting法检测细胞AKT、p-AKT/AKT、PI3K、p-PI3K/PI3K蛋白相对表达量。结果 与si-NC组比较,siFTO-1组和siFTO-2组细胞增殖率、相对迁移率、穿膜细胞数高（P均<0.05）;与si-NC组比较,siFTO-1组和siFTO-2组p-AKT/AKT和P-PI3K/PI3K蛋白相对表达量升高（P均<0.05）,PI3K、AKT蛋白相对表达量无显著变化（P均>0.05）。结论 干扰FTO可促...     

抑制lncR-HOXA-AS3表达的人前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及EMT相关蛋白表达变化

目的 观察抑制长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncR)HOXA-AS3表达的人前列腺癌（prostate cancer, PCa）细胞系LNCaP增殖、迁移、侵袭能力及上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）相关蛋白的表达变化。方法 本研究受试细胞为人PCa细胞系LNCaP。将对数生长期LNCaP细胞分为2组，分别转染lncRHOXA-AS3沉默质粒si-HOXA-AS3（观察组）和阴性对照质粒si-NC（对照组），转染48 h时采用qRT-PCR法检测lncR-HOXA-AS3，分别于转染24、48、72 h时采用CCK8实验测算细胞增殖活性（光密度OD值），转染48 h时采用细胞划痕实验观察细胞迁移能力，转染48 h时采用Transwell实验观察细胞侵袭能力，转染48 h时采用WESTERN Blotting法检测两组EMT相关蛋白E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、纤维连接蛋白（Fibronectin）。结果与RWPE-1相比，DU-145、LNCaP、C4-2B中l...     

过/降表达miR-92a的食管鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及PTEN/PI3K/Akt通路蛋白表达变化

目的 观察过/降表达miR-92a的食管鳞癌（ESCC）细胞增殖、迁移、侵袭能力及磷酸酯酶与张力蛋白同源物（PTEN）/磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/Akt通路蛋白表达变化。方法 将人ESCC细胞系Eca-109随机分为miR-92a过表达组、miR-92a降表达组、过表达阴性对照组、降表达阴性对照组,分别转染miR-92a mimics、miR-92a inhibitor、mimic-NC、inhibitor-NC 24 h。采用CCK-8法检测各组培养24、48、72、96 h的的吸光度（A）值,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力。采用Westen blotting法检测细胞PTEN/PI3K/Akt通路蛋白PTEN、PI3K、Akt、磷酸化PTEN(p-PTEN)、p-PI3K、p-Akt。结果 各时点细胞A值、细胞迁移距离、穿膜细胞数比较,miR-92a过表达组>过表达阴性对照组、降表达阴性对照组>miR-92a降表达组（P均<0.05）。p-PTEN蛋白miR-92a降表达组>过表达阴性对照组、降表达阴性对照组>...     

CD74基因表达对急性髓系白血病细胞增殖与侵袭的抑制作用

目的:探讨白细胞分化抗原74（CD74）基因表达对急性髓系白血病（AML）细胞增殖、侵袭及巨噬细胞移动抑制因子（MIF）/细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的影响。方法:收集83例AML患者的骨髓样本（AML组）、25例正常供者的骨髓样本（对照组）及人AML细胞系HL60、MOLM-13、THP-1、U-937、人原代正常骨髓单个核细胞（BMMC）为研究对象，Western blot检测AML骨髓样本及各细胞系中CD74蛋白表达；利用LipofectamineTM2000转染试剂盒对MOLM-13细胞进行转染，并分为空白组（细胞不进行转染）、si-NC组（将si-NC转染于细胞）、si-CD74组（将si-CD74转染于细胞）；Western blot检测各组细胞中CD74、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及MIF/ERK信号通路相关蛋白MIF、磷酸化细胞外信号调控蛋白激酶（p-ERK）、ERK表达水平；CCK-8法检测各组MOLM-13细胞在0、24、48、72h的增殖情况；Transwell实验检测各组MOLM-13细胞侵袭情况。结果:与对照组比较，AML组骨髓细胞中CD74蛋白表达水平显著升高（P<0.05），CD74蛋白在HL60、MOLM-13、THP-1、U-937细胞系中均高表达，且在MOLM-13细胞系中表达量最高。与空白组和si-NC组比较，si-CD74组MOLM-13细胞的OD450值（在24、48、72h时）、细胞侵袭数目、CD74、MMP-9、MIF和p-ERK蛋白表达显著降低（P均<0.05），但空白组与si-NC组比较, 差异无统计学意义（P均＞0.05）。结论:干扰AML细胞中CD74表达，可抑制细胞增殖与侵袭，其作用机制可能与抑制MIF/ERK信号通路有关。     

HVEM基因干扰后非小细胞肺癌细胞的迁移、侵袭能力变化及其机制

目的 观察疱疹病毒侵入介体(HVEM)基因干扰对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 通过Western blotting法检测正常肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC`细胞系SKMES-1、H1299、H460、H226、H520中HVEM蛋白表达,筛选出HVEM蛋白表达升高最明显的H1299细胞进行后续实验。将H1299细胞分为si-NC组、si-HVEM-1组和si-HVEM-2组,分别用Lipofectamine 2000瞬时转染si-NC、siHVEM-1和si-HVEM-2干扰序列,转染48 h。采用Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力,采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法检测HVEM、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、β-连环蛋白(β-catenin)mRNA和蛋白相对表达量。结果 与si-NC组比较,si-HVEM-1组和si-HVEM-2组迁移、侵袭细胞数及HVEM mRNA、蛋白相对表达量均减少,且si-HVEM-2...     

桑黄提取物抑制circ＿0012129表达阻碍结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制

目的 研究桑黄提取物对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并探讨其可能的分子机制。方法 体外培养结直肠癌Caco-2细胞，分为低、中、高剂量桑黄提取物组(100、200、400μg/ml桑黄提取物干预Caco-2细胞24 h)、si-NC组(转染si-NC至Caco-2细胞)、si-circ＿0012129组(转染si-circ＿0012129至Caco-2细胞)、高剂量+pcDNA-NC组(400μg/ml桑黄提取物干预转染pcDNA-NC的Caco-2细胞24 h)、高剂量+pcDNA-circ＿0012129组(400μg/ml桑黄提取物干预转染pcDNA-circ＿0012129的Caco-2细胞24 h)和对照组(NC组，细胞常规培养24 h),CCK-8法检测细胞增殖，Transwell检测细胞迁移和侵袭，Western印迹检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin的蛋白表达，RT-qPCR法检测circ＿0012129表达。结果 与NC组比较，桑黄提取物组Caco-2细胞A值、迁移数和侵袭数、MMP2、MM...     

miR-200通过靶向PD-L1抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的探讨miR-200对非小细胞肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其与程序性死亡受体配体-1(Programmed death-ligand 1,PD-L1)的靶向关系。方法选取非小细胞肺癌细胞株A549,正常肺成纤维细胞HLF-1为研究对象,根据A549细胞转染物质的不同,分为NC组(未进行任何处理的A549细胞)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-200组(转染miR-200-mimic)、si-NC组(转染si-NC)、si-PD-L1组(转染si-PD-L1)、miR-200+pEGFP组(转染miR-200-mimic+pEGFP)及miR-200+pEGFP-PD-L1组(转染miR-200-mimic+pEGFP-PD-L1)。采用实时荧光定量PCR法检测细胞中miR-200表达水平;MTT检测细胞增殖能力;Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;Western blot检测细胞PD-L1表达水平;荧光素酶实验验证miR-200与PD-L1的靶向关系。结果与HLF-1相比,A549细胞胞miR-200表达水平降低,PD-L1基因、蛋白表达升高(P0.05)。48和72 h时,miR-200组细胞活力、迁移和侵袭数量明显低于NC组、miR-NC组(P0.05)。48和72 h时,si-PD-L1组细胞活力、迁移和侵袭数量明显低于NC组、si-NC组(P0.05)。miR-200+pcDNA-PD-L1组细胞48、72 h时细胞活力、细胞迁移和侵袭数量高于miR-200+pcDNA组、miR-200组(P0.05)。与对照组相比,A549细胞PD-L1野生型质粒组荧光素酶活性明显降低(P0.05),PD-L1突变型质粒组荧光素酶活性无明显变化(P0.05)。结论 miR-200可负性调控PD-L1抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭。     

马蔺子甲素对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、迁移、侵袭的影响及其机制

目的 观察马蔺子甲素（IQ）对人胰腺导管腺癌（PDAC）细胞株PANC-1增殖、侵袭、迁移的影响，并探讨其作用机制。方法 取对数生长期的PANC-1细胞置于基础培养基中，将细胞分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、对照组，高剂量组、中剂量组、低剂量组分别加入25、20、15μmol/L的IQ，对照组加入等量0.9%NaCl溶液。采用MTT比色法检测细胞增殖能力（细胞OD值），划痕愈合实验检测细胞迁移能力（细胞迁移距离），Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力（穿膜细胞个数），qPCR法检测细胞Rho信号通路关键分子RhoA、Rac1、ROCK1、CDC42、ROCK2。结果 与对照组比较，中剂量组和高剂量组培养24、48、72 h的OD值减小（P均<0.05）；与同组0 h比较，低剂量组及中剂量组和高剂量组培养24、48、72 h的OD值增加（P均<0.05）。与对照组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞迁移距离短，穿膜细胞个数少（P均<0.05）；与低剂量组比较，中剂量组、高剂量组细胞迁移距离短，穿膜细胞个数少（P均<0.05）；与中剂量组比较，高剂量组细胞...     

lncRNA LINC00958靶向调控miR-597-5p对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00958影响乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用与机制。方法 定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC00958和miR-597-5p在乳腺癌组织中的表达。MDA-MB-231细胞转染si-LINC00958或miR-597-5p或共转染si-LINC00958和anti-miR-597-5p。qRT-PCR检测LINC00958和miR-597-5p表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测MDA-MB-231细胞增殖,Transwell检测细胞迁移、侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测Ki-67、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。双荧光素酶报告实验分析LINC00958与miR-597-5p的靶向关系。结果 与癌旁组织比较,41例乳腺癌组织中LINC00958表达显著上调,miR-597-5p表达显著下调(P<0.05)。抑制LINC00958表达显著降低MDA-MB-231细胞增殖、Ki-67表达水平、迁移、侵...     

KAI1基因转染对乏氧培养下胰腺癌MiaPaCa-2细胞增殖、迁移及VEGF表达的影响

目的 观察转染KAI1基因的人胰腺癌MiaPaCa-2细胞在乏氧条件下培养后细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化,探讨其可能机制.方法 应用KAl1基因过表达质粒转染乏氧条件培养后的人胰腺癌MiaPaCa-2细胞,采用蛋白质印迹法检测转染细胞KAI1、VEGF-C、VEGF-A蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测转染细胞的增殖,细胞划痕及Transwell小室实验观察转染细胞的迁移及侵袭能力,酶联免疫吸附测定法检测培养上清液中人VEGF-C、VEGF-A含量.结果 转染KAI1基因后的MiaPaCa-2-K细胞的KAI1蛋白表达量较未转染细胞显著增加[（0.549 ±0.021）比0].乏氧条件培养后转染细胞的增殖无明显变化,但它的迁移距离明显缩短,穿膜细胞数显著减少[（14.0±5.8）比（43.0±14.4）个,P＜0.05];细胞的VEGF-C表达显著降低[（0.218±0.043）比（0.745±0.069）.P＜0.05],但VEGF-A表达变化不显著;细胞培养上清液中VEGF-C含量显著减少[（1236±247）比（2045±221） pg/ml,P＜0.01].结论 转染KAl1基因的MiaPaCa-2细胞在乏氧条件下培养后的细胞迁移、侵袭能力减弱,其机制可能是通过下调VEGF-C的表达来抑制胰腺癌淋巴转移的.     

WSTF过表达的乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移能力变化及其机制

目的 观察威廉姆斯综合征转录因子(WSTF)通过调控白细胞介素6(IL-6)/信号传导子及转录激活子3(STAT3)信号通路对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法 体外培养乳腺癌MCF-7细胞株,分为WSTF高表达组(转染慢病毒表达载体pLVX-PRDX4)、WSTF低表达组(转染慢病毒干扰载体pLVX-shPRDX4)、空载组(转染空载体pLVX-NC)和对照组(不作特殊处理)。各组转染48 h,采用CCK-8法检测细胞存活率,改良Matrigel Boyden小室实验检测侵袭细胞数,划痕实验检测划痕愈合率,流式细胞术检测细胞凋亡率,qRT-PCR法检测WSTF、IL-6和STAT3 mRNA表达,Western blotting法检测WSTF、IL-6和STAT3蛋白表达。结果 与对照组和空载组比较,WSTF低表达组细胞存活率、划痕愈合率和侵袭细胞数均降低,WSTF高表达组均升高(P均<0.05)。与对照组和空载组比较,WSTF低表达组细胞凋亡率升高,WSTF高表达组降低(P均<0.05)。与对照组和空载组比较,WSTF低表达组WSTF、IL-6和STA...     

miR-498过表达对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化的影响及其机制

目的 探讨微小RNA-498(miR-498)过表达对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化（EMT）的影响及其机制。方法 体外传代培养人永生化鼻咽上皮细胞系NP69及人鼻咽癌细胞系CNE-2Z、CNE-1、HNE-1、SUNE-1,采用RT-qPCR法检测各细胞miR-498表达,选择miR-498表达最低的鼻咽癌细胞进行后续实验。取传3代、对数生长期、生长状态良好的鼻咽癌细胞,随机分为miR-498 mimics组和NC mimics组,分别转染miR-498 mimics、NC mimics。转染6 h更换新鲜培养基继续培养24 h,收集细胞。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用平板克隆形成实验检测集落形成能力,采用Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力,采用Western blotting法检测EMT相关上皮型钙黏素（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、纤连蛋白（Fibronectin）以及高迁移率族蛋白A2(HMGA2)表达。结果 CNE-1、HNE-1、CNE-2Z、SUNE-1细胞miR-498相对表达量均低于NP69细胞（P均<0.0...     

茯苓酸对结肠癌细胞增殖凋亡、迁移侵袭及PERK/ATF4信号通路蛋白表达的影响

目的 观察茯苓酸（PA）对人结肠癌细胞SW480增殖、凋亡、迁移、侵袭和蛋白激酶RNA样ER激酶（PERK）/转录激活因子4(ATF4)信号通路表达的影响。方法 将SW480细胞分为四组，PA组加入8μmol/L的PA,PA+PERK抑制剂GSK2656157组加入8μmol/L的PA+2μmol/L的GSK2656157, PERK激活剂组加入8μmol/L的CCT020312，对照组用正常培养基培养。培养24 h时采用MTT法测算各组细胞存活率，培养24 h时采用细胞克隆形成实验测算各组细胞克隆数，培养24 h时采用流式细胞仪术测算各组细胞凋亡率，采用Transwell小室观察各组细胞侵袭、迁移情况，采用WESTERN Blotting法检测各组细胞细胞通路相关蛋白（PERK、ATF4）、内质网应激相关蛋白C/EBP同源蛋白（CHOP）、上皮间质转化（EMT）相关蛋白[E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）]。结果 与PA组比较，PA+GSK组细胞存活率及克隆形成数低、细胞凋亡率低、迁移细胞数及侵袭细胞数多（P均<0.05）；与对照组比较，PA组和...     

下调miR-10a表达对人胰腺癌细胞AsPC-1迁移和侵袭的影响

目的 探讨miR-10a表达对人胰腺癌AsPC-1细胞迁移和侵袭力的影响及其作用机制.方法 构建针对miR-10a的小干扰RNA（miR-10a-siRNA）,转染处理人胰腺癌AsPC-1细胞,同时设阴性对照siRNA（NC-siRNA）组和空白对照组.采用荧光实时定量PCR法检测3组细胞中miR-10a的表达水平,划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室检测细胞侵袭能力,ELISA法检测各组癌细胞培养上清液中基质金属蛋白质酶13（MMP-13）含量.结果 对照组、NC-siRNA组和miR-10a-siRNA组AsPC-1细胞miR-10a表达水平分别为1.05±0.08、1.03 ±0.06、0.02±0.01,穿膜细胞数分别为（150±2.6）、（145±2.2）、（62±1.8）个,培养上清中MMP-13表达量分别为（108.5±2.8）、（107.8±2.5）、（35.8±1.5） pg/ml,miR-10a-siRNA组均显著低于对照组和NC-siRNA组,差异均有统计学意义（P值均＜0.01）.对照组、NC-siRNA组和miR-10a-siRNA组AsPC-1细胞的迁移后间距分别为（385 ±15）、（395±13）、（736±18）μm,miR-10a-siRNA组显著大于对照组和NC-siRNA组,差异有统计学意义（P值均＜0.01）.结论 下调miR-10a表达可抑制胰腺癌AsPC-1细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与MMP-13表达下调有关.     

LINC01224靶向miR-485-5p调节PAK4表达影响结直肠癌术后复发的研究

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)LINC01224靶向miR-485-5p调节p21激活激酶4(PAK4)的表达,继而影响结直肠癌（CRC）患者术后复发的分子机制。方法 选取2019年1月至2022年1月承德市中心医院病理科归档的病历资料完整的96例患者的CRC组织,其中54例未复发患者设为未复发组,42例局部复发、转移患者设为复发组。采用实时荧光定量PCR法检测2组CRC组织中LINC01224、miR-485-5p和PAK4的表达水平。将人CRC细胞CACO-2和HCT116各分为3组,分别制备2种细胞的对照组（为正常培养细胞）、NC组（为转染阴性组,转染NC-siRNA慢病毒质粒）和LINC01224下调组（转染LINC01224-siRNA慢病毒质粒）。采用CCK-8法、细胞划痕实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力,荧光素酶报告实验鉴定LINC01224与miR-485-5p、miR-485-5p与PAK4的靶向关系,蛋白质印迹法检测PAK4蛋白的表达水平。结果 与未复发组患者相比,复发组患者CRC组织中LINC01224和PAK4表达水...     

miRNA-126靶向抑制A549细胞迁移和侵袭能力的研究

目的研究microRNA-126（miR-126）对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞迁移和侵袭能力的影响。方法利用脂质体介导法将十勾建的miR126过表达质粒转染至NSCI．C细胞株A549细胞（A549／miR-126组）,并设空质粒转染组（A549／MOCK组）和空白对照组（A549组）。利用RT-PCR技术检测3组细胞中EGFI。7（miR126的靶标）的表达水平,采川细胞划痕实验观察细胞迁移能力差异,采用Transwell小室法分析3组细胞侵袭能力的差异。结果RT—PCR检测A549／miR-126组、A549／MOCK组和A549组细胞中EGFI。7mRNA分别为2．32±0．088、1．43±0．026和1．00±0．000,差异有统计学意义（P〈0．01）;细胞划痕实验显示A549／miR—126组、A549jM（）CK组和A549组细胞平均迁移距离分别为3．0μm、2．65μm和0．5μm,平均抑制率分别为0、11．25％和83．75％,差异有统计学意义（P〈O．05）;Transwell小室实验显示,A549／miR126组24hr侵袭细胞数为（28．6±2．322）个,36h侵袭细胞数为（29．2±3．7683）个,A549／M（）CK组24h为（49．8±3．7014）个,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-126可上调EGFL7mRNA的表达,并可能通过表达产物EGFI。7蛋白抑制A549细胞的迁移和侵袭能力。