基于NLRP3/IL-1β/TGF-β1通路探讨萝卜硫素对脂多糖诱导的小鼠肺炎的改善作用

目的 探讨萝卜硫素对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺炎的改善作用及核苷酸结合域样受体蛋白(NLRP)3/白细胞介素(IL)-1β/转化生长因子(TGF)-β1信号通路的影响。方法 ICR小鼠随机分为对照组、模型组、萝卜硫素组(腹腔注射20 mg/kg的萝卜硫素)、抑制剂组(腹腔注射50 mg/kg的NLRP3通路抑制剂)、萝卜硫素+激活剂组(腹腔注射20 mg/kg萝卜硫素、1.5 mg/kg的NLRP3通路激活剂),每组10只，除对照组滴入相同体积的生理盐水，其余各组均滴鼻LPS(2 mg/kg)构建肺炎模型，造模成功后24 h开始药物干预，对照组、模型组腹腔注射等量生理盐水，每天干预1次，连续干预1 w。血气分析仪测定各组动脉血氧分压(PaO₂)、二氧化碳分压(PaCO₂)值，酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清、肺泡灌洗液中炎症因子水平，计数肺泡灌洗液中炎症细胞数量，计算肺湿/干比，苏木素-伊红(HE)染色检测各组肺组织病理变化，以Western印迹检测肺组织中NLRP3/IL-1β/TGF-β1通路蛋白的表达。结果 与对照组相比，...     

NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴在AngⅡ诱导高血压心肌纤维化小鼠中的作用研究

目的 探讨NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导高血压心肌纤维化小鼠中的作用。方法 30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和福辛普利组。建立高血压心肌纤维化模型后,福辛普利组予以福辛普利钠1.2 mg/kg·d灌胃。造模后每周检测收缩压1次;采用超声心动图检测各组小鼠心脏功能指标,包括左室舒张末期内径（LVEDd）、左室收缩末期内径（LVESd）、左心室射血分数（LVEF）和左心室缩短分数（LVFS）;采用HE染色和马松染色检测小鼠心肌组织病变情况;采用RT-PCR法测定小鼠心脏NLRP3、IL-1β及TGF-β1 mRNA的表达情况;Western blot法测定小鼠心脏NLRP3、Caspase-1、IL-1β及TGF-β1蛋白的表达情况。结果 模型组较对照组收缩压明显升高（P<0.05）,与模型组比较,福辛普利组收缩压明显降低（P<0.05）;HE及马松染色显示,对照组小鼠心肌间心肌细胞结构形态正常,排列整齐,心肌间质间几乎无蓝色胶原纤维分布,心血管形态正常;模型组小鼠心肌细胞肥大、排列紊乱,部分细胞肿胀变形、溶解,心肌...     

磷酸化Smad3对糖尿病大鼠肾组织SnoN表达的影响

目的 探讨磷酸化Smad3(p-Smad3)在糖尿病(DM)大鼠肾组织SnoN蛋白表达的影响.方法 链脲佐菌素诱发大鼠DM模型,分为DM2、4、8、12、16和24 w组(n=6),每组均设鼠龄匹配的正常对照组(n=6).生化方法测血糖和24 h尿蛋白;PAS染色观察肾组织病理学改变;免疫组化检测肾组织SnoN、Smad2/3和E3泛素连接酶APC10蛋白的表达;Western印迹方法动态观察肾皮质SnoN、p-Smad3、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad2/3蛋白的表达;RT-PCR检测SnoN mRNA.结果 DM各组大鼠血糖和24 h尿蛋白较正常对照组均显著升高; SnoN和Smad2/3阳性染色主要见于肾小管上皮细胞,DM 2 w起 Smad2/3和 p-Smad3蛋白表达多于正常对照组,DM 4 w起 SnoN蛋白少于正常对照组;各DM组肾组织TGF-β1、Smad2/3和APC10 蛋白表达均多于正常对照组;DM各组SnoN mRNA与正常组相比差异无统计学意义.结论 糖尿病肾病发病过程中p-Smad3可能与APC一起介导了SnoN蛋白的泛素化降解过程.     

Aβ1~42对阿尔茨海默病小鼠PI3K/PKB信号通路的影响

目的探讨Aβ_1~42对阿尔茨海默病(AD)小鼠磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号通路的影响。方法雄性小鼠侧脑室注射链脲佐菌素制备AD模型,随机分为:假手术组、模型组、Aβ_1~42低剂量(0.015 mg/kg)组、Aβ_1~42中剂量(0.050 mg/kg)组、Aβ_1~42高剂量(0.150 mg/kg)组、胰岛素组。跳台实验检测小鼠认知功能;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠海马胰岛素受体(InR)的含量;Western印迹法检测小鼠磷酸化蛋白激酶B(p-PKB)、磷酸化糖原合成酶激酶(p-GSK)-3β和磷酸化Tau蛋白(p-Tau)的表达量。结果与假手术组比较,模型组练习错误和记忆错误次数增多、潜伏期缩短(P<0.05);与模型组比较,Aβ_1~42不同剂量组练习和记忆错误次数增加、潜伏期缩短(P<0.05),胰岛素组练习和记忆错误次数减少、潜伏期增加(P<0.05)。与假手术组比较,模型组InR表达量降低(P<0.05)。与模型组比较,Aβ_1~42不同剂量组InR表达量降低(P<0.05);胰岛素组InR表达量升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组p-PKB、p-GSK-3β蛋白表达量降低,p-Tau表达量升高(P<0.05)。与模型组比较,Aβ_1~42不同剂量组p-PKB、p-GSK-3β蛋白表达量降低,p-Tau表达量升高(P<0.05);胰岛素组p-PKB、p-GSK-3β的表达量升高,p-Tau表达水平降低(P<0.05)。结论Aβ_1~42能够产生神经毒性,诱导小鼠认知功能障碍,其机制可能为干扰PI3K/PKB信号通路传导,下调InR表达,抑制PKB和GSK-3β磷酸化,使AD小鼠Tau蛋白磷酸化水平增加,导致认知功能障碍。     

瓜蒌提取物治疗链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠心肌纤维化的实验研究

目的观察瓜蒌提取物对链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠心肌纤维化的治疗作用。方法采用链脲佐菌素诱导C57BL/6J小鼠糖尿病模型,瓜蒌提取物选取瓜蒌皮注射液作为研究药物,观察正常对照组、链脲佐菌素(STZ)组、STZ+低剂量瓜蒌组和STZ+高剂量瓜蒌组小鼠体重、随机血糖、心功能、左室心肌胶原容积分数、左室心肌肥大细胞数目、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达变化。结果 STZ组小鼠体重下降、血糖升高、左室肥大细胞浸润数目增加、左室胶原容积分数增加,免疫组织化学染色显示α-SMA和TGF-β1表达增加。治疗组左室肥大细胞浸润数目降低、左室胶原容积分数减少,免疫组织化学染色显示α-SMA和TGF-β1表达减少,瓜蒌高剂量组优于低剂量组。结论瓜蒌皮注射液可以改善STZ诱导糖尿病小鼠的心肌纤维化,可能机制为抑制肥大细胞在心肌组织中的浸润和激活。     

1,25-二羟基维生素D3对糖尿病小鼠周围神经功能影响的研究

目的 探讨1,25-二羟基维生素D₃[1,25(OH)₂D₃]对DM小鼠周围神经功能的影响。方法C57BL/6J小鼠腹腔注射STZ构建DM小鼠模型,随机分为DM组(DM)、DM第1周1,25(OH)₂D₃治疗组(1w-DM)、DM第2周1,25(OH)₂D₃治疗组(2w-DM)、DM周围神经病变1,25(OH)₂D₃治疗组(DPN)以及DM第1周溶剂对照组(1w-DMC)、DM第2周溶剂对照组(2w-DMC)、DPN溶剂对照组(DPNC),每组各15只,并设置正常对照组(NC)10只。建模后第1、2、4周分别对1w-DM、2w-DM、DPN组予1,25(OH)₂D₃腹腔注射,连续5 d;监测各组血糖、体重、触觉、热痛觉及协调能力,8周后收集血清检测25(OH)D₃水平。结果 与DM组比较,1w-DM、2w-DM组第8周体重升高...     

缬沙坦对2 型糖尿病大鼠肾脏骨桥蛋白和骨形态发生蛋白-7 表达的影响

目的探讨缬沙坦对2型糖尿病大鼠（T2DM）肾脏骨桥蛋白（OPN）和骨形态发生蛋白-7（BMP-7）表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分为3组:对照组、DM模型组和缬沙坦治疗组[25mg/（kg·d）]。高脂、高糖喂养联合小剂量链脲佐菌素建立T2DM模型。缬沙坦治疗12周末,测定血压、血糖、尿白蛋白（UAL）排泄量;应用光镜观察肾脏病理变化;采用免疫组化、实时定量PCR技术测定肾组织BMP-7、OPN、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）蛋白及mRNA的表达。结果与对照组比较,DM组大鼠UAL及肾组织ED-1阳性细胞数明显升高（P<0.01）;肾组织BMP-7mRNA及蛋白的表达下调（P<0.01）,而OPN、纤连蛋白及TGF-β-1的表达显著上调（P<0.01）。缬沙坦干预后明显减少UAL的排泄（P<0.01）,并显著抑制肾组织巨噬细胞浸润及TGF-β₁、OPN和纤连蛋白过度表达（P<0.05）,同时上调BMP-7的表达（P<0.01）。结论缬沙坦减少肾组织巨噬细胞浸润及细胞外基质,对糖尿病性肾病有保护作用,其机制可能与下调TGF-β₁和OPN及恢复BMP-7的表达有关。     

贝那普利下调TGF-β1及Bax表达对糖尿病大鼠心肌的保护作用

目的 探讨贝那普利(BZ)对糖尿病(DM)大鼠心肌转化生长因子β1(TGF-β1)和Bax的表达及心肌肥厚指标的影响.方法 SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备DM模型.实验分为正常对照组(CON)、DM组和BZ治疗组(BZ).治疗组每日灌胃给予贝那普利(10 mg·kg-1·d-1).8 w后测定心脏质量指数(HMI)、左心室质量指数(LVMI),并取左心室心肌免疫组化法检测TGF-β1和 Bax在心肌组织中的表达,透射电镜观察心肌组织超微结构变化.结果 与CON组相比,DM组大鼠HMI、LVMI明显升高;心肌TGF-β1和 Bax蛋白表达显著增强(P＜0.05,P＜0.01);电镜发现DM心肌细胞肿胀、肌丝稀疏,线粒体变性肿胀,间质胶原增生及微血管基底膜增厚.与DM组相比,BZ干预后,HMI、LVMI明显降低(P＜0.01);心肌TGF-β1和 Bax蛋白表达减弱(P＜0.01);心肌超微结构改变减轻.结论 TGF-β1 可能通过刺激促凋亡因子Bax表达诱导心肌细胞凋亡,促进DM心肌肥厚.BZ能在一定程度上抑制TGF-β1和Bax的表达从而延缓DM心肌病理进程.     

脂联素对2型糖尿病大鼠心肌组织TGF-β_1/Smads信号通路的影响

目的观察球形脂联素(gAd)对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌组织转化生长因子-β_1(TGF-β_1)/Smads信号通路的影响,探讨2型糖尿病心肌病心肌纤维化的机制。方法将80只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组,n=24)、造模组(n=56)。将成模大鼠再随机分为糖尿病心肌病组(DCM组,n=26)、gAd干预组(DA组,n=26)。DA组大鼠每日腹腔注射gAd 10μg/kg,DCM组和NC组注射同等剂量生理盐水。药物干预4周末、8周末、12周末,随机取8只大鼠,心脏超声评价心功能,腹主动脉采血测相关生化指标,HE染色观察心肌组织形态,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法、蛋白免疫印迹(Western blot)法分别测定心肌组织Smad3、Smad7、TGF-β_1 mRNA和蛋白表达。结果在各时间段中,与NC组比较,DCM组大鼠心重指数增加,心功能减退,DA组心功能好转(P<0.05);与NC组比较,DCM组心肌组织TGF-β_1、Smad3表达增加,Smad7表达减少;应用gAd干预后,TGF-β_1、Smad3表达较DCM组减少,Smad7表达较DCM组增加,且呈时间依赖性(P<0.05)。结论 gAd通过抑制TGF-β_1/Smads信号通路,改善心功能,延缓糖尿病心肌病的进展。     

NLRP3炎症小体在大鼠严重烫伤早期心肌内的表达及意义

目的 探讨严重烫伤大鼠早期心肌组织内NLRP3炎症小体信号通路的表达及意义。方法 采用大鼠95℃热水浴18 s,制成40%总体表面积Ⅲ度烫伤模型,将24只健康雄性SD大鼠按随机数表法分为对照组、烫伤组、干预组。烫伤组大鼠立即腹腔注射10 ml生理盐水补液;干预组大鼠注射10 ml生理盐水+(BAY11-7082) 10 μl(0.2 mg/ml,10 mg/kg);对照组动物背部置于25℃温水浴18 s模拟烫伤过程。伤后8 h分别取各组大鼠心肌组织及血清,采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量RT-PCR法检测心肌组织中NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-1蛋白表达水平和NLRP3、caspase-1、IL-1β、TNF-α mRNA表达水平,同时观察HE染色组织大体形态,酶联免疫吸附试验法检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）含量。结果 ①烫伤组大鼠心肌组织内NLRP3、caspase-1蛋白表达量显著高于对照组（P<0.01）;与烫伤组比较,干预组大鼠心肌组织内NLRP3、caspase-1明显降低（P<0.01）;②烫伤组大鼠心肌组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β和TNF-α的mRNA表达量分别为3.15±0.46,2.47±0.24,3.26±0.22和2.17±0.32,显著高于对照组的1.00±0.09,1.00±0.06,1.00±0.08和1.00±0.07（均P<0.01）;干预组大鼠心肌组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β和TNF-α的mRNA表达量分别为1.68±0.37,1.55±0.17,1.21±0.15和1.38±0.23,显著低于烫伤组（均P<0.01）;③对照组大鼠心肌组织呈不规则圆柱形、排列整齐、横纹清晰,结构完整。烫伤组大鼠部分心肌纤维排列紊乱,细胞和间质可见水肿,见点片状溶解灶及炎性细胞浸润。BAY11-7082干预组部分心肌纤维排列紊乱,心肌细胞和间质水肿、心肌纤维溶解及炎细胞浸润程度均较烫伤组减轻;④烫伤组大鼠血清CK-MB、LDH含量分别为(2753±825)U/L,(2618±238)U/L,显著高于对照组的(247±76)U/L,(721±59)U/L（均P<0.01）;干预组大鼠血清CK-MB、LDH含量分别为(1267±248)U/L,(1982±183)U/L,显著低于单纯烫伤组（均P<0.01）。结论 NLRP3炎症小体在严重烫伤大鼠早期心肌组织内活性增高,使用BAY11-7082干预后,可抑制NLRP3炎症小体的活化,减轻心肌组织损伤,降低心肌炎症反应。     

NLRP3基于IL-1β/TGF-β信号通路对心力衰竭小鼠室性心律失常易感性的调控机制研究

目的分析核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)基于白细胞介素1β(IL-1β)/转化生长因子β(TGF-β)信号通路对心衰小鼠室性心律失常易感性的调控机制。方法 39只SD小鼠随机分为对照组、模型组、干预组,每组各13只。模型组、干预组腹腔注射异丙肾上腺素制作心衰小鼠模型,对照组腹腔注射等量生理盐水。造模成功后,干预组腹腔注射1μl NLRP3 shRNA慢病毒载体,模型组腹腔注射1μl生理盐水。比较各组小鼠一般情况、心肌病理变化、心功能指标、室性心律失常诱发率及及心肌组织中NLRP3、IL-1β、TGF-β蛋白表达量。结果模型组小鼠出现明显心衰体征,心肌细胞肥大,心肌间质可见大量炎性细胞浸润,结缔组织及胶原纤维明显增加;干预组小鼠心衰体征及心肌病理变化较模型组有所改善。模型组小鼠左室收缩末压(LVESP)、左室舒张末压(LVEDP)、血清脑钠肽(BNP)水平、室性心律失常诱发率及心肌组织中NLRP3、IL-1β、TGF-β蛋白表达量较对照组高(P均0.05);干预组小鼠LVESP、LVEDP、血清BNP水平、室性心律失常诱发率及心肌组织中NLRP3、IL-1β、TGF-β蛋白表达量较模型组低(P均0.05);干预组小鼠LVESP、LVEDP、血清BNP水平及心肌组织中NLRP3、IL-1β、TGF-β蛋白表达量较对照组高(P均0.05),但干预组小鼠室性心律失常诱发率较对照组无显著差异(P0.05)。结论 NLRP3可能通过激活IL-1β/TGF-β信号通路而增加心衰小鼠室性心律失常易感性,这可为临床用药提供提供新的方向。     

恩格列净保护2型糖尿病小鼠心肌损伤机制研究

目的：基于调控转化生长因子β(TGF-β)/Smad通路和核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应序列元件(Nrf2/ARE)信号通路分析恩格列净(EM)对2型糖尿病(DM)小鼠心肌损伤的保护作用。方法：将KK-Ay小鼠随机分为DM组和EM组(10mg·kg^-1·d^-1EM)，每组30只，另取30只C57BL/6J小鼠为对照组。采用彩色多普勒测量心脏参数，半自动分析仪检测糖脂水平，分光光度计检测氧化应激指标水平，蛋白印迹法检测TGF-β/Smad通路和Nrf2/ARE信号通路相关蛋白。结果：与DM组比较，EM组心脏质量、FBG、非空腹血糖、空腹胰岛素、舒张末期室间隔厚度(IVSd)、心肌组织脂质氢过氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、TGF-β1(1.21±0.17)vs.(1.43±0.26)、I型胶原蛋白(CollagenⅠ)(0.93±0.18) vs.(1.71±0.23)、CollagenⅢ(1.37±0.0.21) vs.(1.96±0.34)、α-肌动蛋白(αSMA)(0.88±0.0.20) vs.(1.42±0.33)、磷酸化(...     

NF-κB、TGF-β1在糖尿病大鼠心肌及主动脉中的表达

目的:探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)大鼠心肌及主动脉核转录因子-κB(NF-κB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。方法:用HE及MASSON染色观察DM大鼠心肌及主动脉的病理改变,用免疫组化的方法检测上述免疫因子的表达。结果:DM大鼠心肌、主动脉NF-κB、TGF-β1表达均明显高于正常对照组(CON),差异有统计学意义(P0.01)。结论:NF-κB和TGF-β1在DM心血管并发症的发生发展机制中起重要作用。     

结直肠癌组织Tregs占比和Foxp3、IL-10、TGF-β1 mRNA表达变化及其意义

目的 观察结直肠癌(CRC)组织中调节性T细胞(Tregs)占比及叉头转录因子(Foxp3)、白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β₁)表达情况，并分析Tregs占比与CRC临床病理参数的关系。方法 选取手术切除的CRC组织及正常结肠组织各24例份，采用流式细胞术测算两组织中Tregs占比，实时定量PCR法检测两组织中Foxp3、IL-10、TGF-β₁ mRNA相对表达量，Spearman相关分析法分析Tregs占比与CRC临床病理参数的关系。结果与正常结肠组织比较，CRC组织Tregs占比增加(P<0.05)；与正常结肠组织比较，CRC组织Foxp3、IL-10、TGF-β₁ mRNA相对表达量增加(P均<0.05);Tregs占比与CRC肿瘤分期相关(P<0.05)。结论 CRC组织中Tregs占比增加，Foxp3、IL-10、TGF-β₁表达升高，Tregs占比与患者肿瘤分期有关，Tregs可能通过调节Foxp3、IL-10、TGF-β₁     

安罗替尼对人胃癌细胞迁移、侵袭的影响及机制

目的 探究安罗替尼对人胃癌细胞迁移、侵袭的影响及机制。方法 体外培养人胃癌AGS细胞，取第3代对数生长期AGS细胞，分为对照组(不做干预)、实验组(2μmol/L安罗替尼组、4μmol/L安罗替尼组、8μmol/L安罗替尼组)和抑制剂组[4μmol/L安罗替尼+10μmol/L转化生长因子-β₁(TGF-β₁)/Smads信号通路抑制剂LY2109761]，干预24 h。为避免细胞死亡太多干扰实验，抑制剂组选取4μmol/L安罗替尼作为最适浓度加入10μmol/L TGF-β₁/Smads通路抑制剂LY2109761进行后续实验。用CCK-8法、倒置显微镜、Transwell小室及Western blotting法对细胞活力、细胞形态、迁移、侵袭能力及上皮间质转化(EMT)、TGF-β₁/Smads信号通路相关蛋白表达进行检测。结果 与对照组相比，4、8μmol/L安罗替尼组细胞活力降低(P均<0.05)。实验组人胃癌AGS细胞生长受到抑制，迁移、侵袭能力及TGF-β₁、...     

Apelin-13对2型糖尿病大鼠心肌纤维化防治的作用机制

目的　通过建立2型糖尿病大鼠模型诱导心肌纤维化的发生,探究血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白的内源性配体亚型之一Apelin-13对糖尿病大鼠心肌纤维化防治作用的可能机制。方法　高脂高糖喂养联合尾静脉注射小剂量链脲佐菌素构建2型糖尿病大鼠模型。48只Wistar大鼠随机分为四组：正常对照组、模型组、Apelin-13组、阻断剂组（SB431542组）。各组大鼠给予相应干预措施12周,取材后行Masson染色,光镜下观察心肌细胞形态学改变及间质胶原纤维沉积情况,测算胶原容积分数（CVF）,ELISA检测心肌组织内Ⅰ型、Ⅲ型胶原纤维含量,免疫组织化学染色分析心肌内信号蛋白转化生长因子β1（TGF-β1）和转化生长因子β1Ⅰ型受体（TβRⅠ）的表达水平,Western　blot检测下游信号蛋白smad2、p-smad2、smad3、p-smad3的表达水平。结果　与正常对照组相比,模型组大鼠心肌组织CVF值、Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量明显升高,伴随信号通路蛋白TGF-β1、TβRⅠ、smad2、p-smad2、smad3、p-smad3表达增强（P<0.01）;而与模型组相比,Apelin-13或SB431542干预的糖尿病大鼠心肌组织CVF值、Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维含量则明显下降（P<0.01）,Apelin-13组各通路蛋白的表达均显著下调（P<0.01）,而SB431542组TGF-β1、TβRⅠ的表达与模型组相比差异无统计学意义（P＞0.05）,其余信号蛋白的表达亦明显减弱（P<0.01）。结论　外源性Apelin-13可抑制糖尿病大鼠心肌纤维化的发生,此作用是通过减弱TGF-β1/TβR/smads信号转导通路的过度激活得以实现的。     

银杏总黄酮对糖尿病大鼠心肌转化生长因子-β1表达的影响

目的探讨银杏总黄酮对糖尿病大鼠的抗氧化作用及对心肌转化生长因子(TGF)-β1表达的影响。方法 SD大鼠随机分为:正常对照组、糖尿病模型组、银杏总黄酮组,采用腹腔注射链脲佐菌素(STE)法建立糖尿病大鼠模型,生化方法检测血糖,血及心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量;ELISA法检测各组心肌TGF-β1水平;光镜观察心肌组织形态改变。结果与糖尿病模型组相比,银杏总黄酮组大鼠血糖水平明显降低,血清及心肌组织SOD活性升高,MDA含量显著降低,心肌组织TGF-β1蛋白水平与糖尿病模型组相比明显下降。结论银杏总黄酮能够减轻STZ诱导的糖尿病大鼠心肌氧化应激程度,降低心肌TGF-β1蛋白表达水平,对糖尿病心肌具有一定的保护作用。     

人脐带间充质干细胞对2型糖尿病小鼠胰岛功能的影响及其对NLRP3炎性体的调节作用

目的观察人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对2型糖尿病(T2DM)小鼠胰岛功能的影响及其对NOD样受体家族核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性体和自噬过程的调节作用。方法实验研究。选取20只8周龄雄性C57BL/6J小鼠, 分为正常对照组(n=5)和高脂喂养建模组(n=15);T2DM建模成功的小鼠进一步分为糖尿病组(n=7)和UC-MSCs治疗组(n=7)。UC-MSCs治疗组每周给予1次UC-MSCs(1×106/0.2 ml磷酸盐缓冲液)尾静脉输注治疗, 共治疗4周;糖尿病组注射等量生理盐水, 正常对照组不予处理。治疗结束后1周各组小鼠行腹腔糖耐量和胰岛素耐量试验检测糖耐量和胰岛素敏感性变化;采用免疫荧光染色法观察胰岛结构改变并检测胰岛中白细胞介素1β(IL-1β)和胰十二指肠同源框因子1(PDX-1)的表达。体外用脂多糖和三磷酸腺苷对小鼠骨髓诱导的原代巨噬细胞进行刺激(处理组)后, 与UC-MSCs进行Transwell共培养实验24 h(治疗组), 采用酶联免疫吸附法检测各组上清液中IL-1β的分泌水平, 采用免疫荧光染色检测NLRP3炎性体和自噬相关蛋白的表达...     

阻断核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体减轻非酒精性脂肪性肝炎和肝纤维化

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)中的作用。方法选取在福建医科大学附属第二医院接受治疗的24例患者的肝组织样本,其中12份为肝穿刺活体组织检查的NASH样本,12份为肝血管瘤边缘的正常肝组织样本,分别检测NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶(caspase)-1和白细胞介素(IL)-1β的表达和甘油三酯水平。将野生型和NLRP3-/-C57BL/6小鼠分别饲喂正常饲料或蛋氨酸胆碱缺乏饲料(MCD),持续8周。将野生型C57BL/6小鼠分为MCC950 NASH组、0.9%氯化钠NASH组、MCC950组和0.9%氯化钠组共4组,每组8只,分别饲喂MCD饲料并给予MCC950、饲喂MCD饲料并给予0.9%氯化钠溶液、饲喂正常饲料并给予MCC950、饲喂正常饲料并给予0.9%氯化钠溶液,持续8周。通过苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色观察小鼠肝组织的病理变化,酶联免疫吸附试验检测血清中的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、游离脂肪酸(FFA)、IL-1β和甘油三酯水平,采用蛋白质印迹法和实时荧光...     

激活乙醛脱氢酶2抑制糖尿病小鼠心肌羰基应激和缺血/再灌注损伤

目的:观察乙醛脱氢酶2(ALDH2)激动剂Alda-1对Ⅰ型糖尿病(DM)小鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的影响,探讨羰基应激在DM心脏缺血性损伤易感性增高中的作用。方法:以C57BL/6雄性小鼠为实验对象,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备Ⅰ型DM小鼠模型。将正常C57BL/6小鼠(20只)和DM小鼠(20只)随机分为I/R组和I/R+Alda-1治疗组,每组10只。采用冠状动脉左前降支结扎缺血30 min再灌注4 h建立在体小鼠急性心肌I/R模型,于再灌注前5 min经静脉以2 ml/(kg·h)速度分别输注生理盐水(NS)或Alda-1(16 mg/kg)并持续到再灌注结束。再灌注结束后取血检测血清乳酸脱氢酶(LDH)水平,取心肌组织检测ALDH2活性、心肌内活性氧簇(ROS)水平,蛋白羰基化程度和心肌梗死(MI)面积。结果:检测心肌ALDH2活性显示,DM小鼠心肌ALDH2活性较对照组显著降低。与对照组相比,DM小鼠心肌I/R损伤显著加重,表现为MI面积增大,血清LDH水平显著增加(均P0.05)。再灌注期Alda-1治疗可有效提高DM小鼠I/R心肌ALDH2活性(P0.05),并显著抑制DM小鼠的上述心肌I/R损伤(均P0.05)。DM组I/R心肌中蛋白质羰基化程度和ROS生成较对照组I/R心肌显著增加(均P0.05)。Alda-1治疗可有效改善DM小鼠I/R心肌中的蛋白质羰基化和ROS水平。结论:激活心肌ALDH2可显著改善DM小鼠心肌抗I/R损伤能力,其机制可能与减轻DM小鼠在I/R过程中导致的蛋白质氧化损伤有关。