微小RNA-144对胆管细胞癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的 检测微小RNA-144(miR-144)在胆管细胞癌(CCA)细胞中的表达,探讨miR-144对CCA细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及机制。方法 慢病毒载体和空病毒载体构建成功后感染HCCC-9810和CCLP1细胞,将其分为miR-144 HCCC-9810组、miR-144 CCLP1组、空病毒载体Vector HCCC-9810组和Vector CCLP1组。采用茎环引物法检测稳转株细胞中miRNA的表达水平,CCK-8法检测miR-144对细胞增殖的影响,划痕实验计算细胞迁移面积,Transwell侵袭实验检测miR-144对CCA细胞侵袭能力,Western Blot检测MMP-2、p-AKT、AKT蛋白的表达水平,并分组进行比较。结果 miR-144 HCCC-9810组和miR-144 CCLP1组miR-144的表达水平分别高于Vector HCCC-9810组和Vector CCLP1组;miR-144 HCCC-9810组及miR-144 CCLP1组培养48 h及72 h后细胞相对数均低于同期Vector HCCC-9810组及Vector CCLP1组;3...     

同源异型盒基因在胶质瘤细胞增殖及迁移侵袭中的作用

目的研究同源异型盒基因(HOXA5)在胶质瘤增殖及迁移侵袭中的作用。方法采用shRNA干扰技术构建HOXA5低表达胶质瘤细胞系,通过MTT,Transwell和Matrigel方法研究干扰HOXA5表达后对胶质瘤细胞增殖和侵袭迁移的影响。结果与对照组细胞相比,干扰HOXA5表达后能够显著抑制胶质瘤细胞的增殖和运动侵袭能力(P0.01)。结论 HOXA5可能在胶质瘤的发生发展中具有重要的作用,其机制与促进细胞的增殖和侵袭迁移有关。     

沉默OGFR基因对非小细胞肺癌A549细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的探讨沉默OGFR基因对非小细胞肺癌A549细胞株增殖、迁移和侵袭的影响。方法取A549细胞株,分为对照组、实验组,分别转染si-NC阴性对照、OGFR特异性的小干扰RNA。采用RT-qPCR和Westernblotting法分别检测细胞中的OGFRmRNA和蛋白,采用CCK-8实验检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,平板克隆形成实验检测细胞集落形成能力。结果与对照组相比,实验组OGFRmRNA及蛋白相对表达量低,培养24、48、72 h细胞增殖OD值均低,穿膜细胞数少,细胞迁移率低,克隆形成细胞集落数少(P均<0.05)。结论沉默OGFR基因可降低A549细胞株OGFR基因mRNA和蛋白质的表达,在体外减弱了其增殖、迁移和侵袭能力。     

miR-200a对宫颈癌细胞系HeLa增殖、迁移、侵袭调控作用观察及其靶向mRNA和lncRNA预测分析

目的 观察微小RNA-200a(miR-200a)对宫颈癌细胞系HeLa增殖、迁移和侵袭的调控作用,对miR-200a的靶向mRNA及靶向长链非编码RNA(lncRNA)进行预测分析。方法 取人宫颈癌细胞系HeLa分为1、2、3及4组,分别转染miRNA模拟物miR-200a mimics、miRNA抑制物miR-200a inhibitor、对照物mimics NC及inhibitor NC。培养48 h时采用qRT-PCR法检测各组细胞miR-200a表达;采用CCK8法检测各组细胞增殖能力,采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,采用Transwell迁移实验和细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力。使用miRNA数据库在线预测miR-200a靶向mRNA和靶向lncRNA,采用基因本体论功能注释和京都基因和基因组百科全书富集分析法分析宫颈组织中miR-200a的靶向mRNA和靶向lncRNA的生物学功能。结果 与3组比较,1组细胞miR-200a相对表达量高;与4组比较,2组细胞miR-200a相对表达量低（P均<0.05）。与3组比较,培养72、96 h时1组细胞增殖...     

环状RNA0026344靶向miR-21对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制

目的 探讨环状RNA0026344(circ_0026344)靶向微小RNA-21(miR-21)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制.方法 收集25例肝癌患者术中切除的肝癌组织及其癌旁组织(距离肿瘤边缘>3 cm),用qRT-PCR检测组织中circ_0026344、miR-21表达.常规培养HCC9204细胞,将...     

尼古丁对人A549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的 观察烟草烟雾中的主要有害成分尼古丁对人A549细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响,探讨尼古丁致病的可能机制.方法 以一定浓度尼古丁刺激体外培养的人A549细胞,应用CCK-8法、Transwell法和细胞划痕实验分别检测A549细胞的增殖、侵袭及迁移能力.Western blot检测α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAChR)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白的表达.结果 与空白对照组比较,10-6 mol/L尼古丁处理A549细胞后,促进人A549细胞增殖(t=7.920,P<0.05);使穿过基质胶的细胞数增多,侵袭能力增强(t=5.298,P<0.05);使细胞迁移率增加,迁移能力增强(P<0.05).与空白对照组比较,10-6 M尼古丁处理A549细胞24 h后,α7 nAChR、VEGF和MMP-2蛋白表达上调,差异有统计学意义(t值分别为5.800、4.074、6.851,P值均<0.05).结论 尼古丁通过其特异性受体α7 nAChR可增强人A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与VEGF和MMP-2蛋白表达上调有关.     

miR-144-3p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

目的 探讨微小RNA-144-3p(miR-144-3p)对卵巢癌ES-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法 采用qRT-PCR法检测35例卵巢癌组织和对应癌旁组织中miR-144-3p和骨形态形成拮抗蛋白1(GREM1)mRNA表达.构建miR-144-3p高表达或GREM1敲低的ES-2细胞,采用四甲基噻唑...     

微小RNA-126在食管癌组织中的表达及其对食管癌EC109细胞增殖和迁移的影响

目的探讨微小RNA(mi RNA)-126在食管癌组织中的表达及其对食管癌EC109细胞增殖和迁移的影响。方法收集该院胸外科手术切除且保存完整的食管癌及相应癌旁组织标本30例,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测癌组织和癌旁组织中mi RNA-126 m RNA表达;mi RNA-126 mimi和control转染EC109细胞,设置阴性对照组(转染mi RNA mimic control)、转染组、空白对照组(仅转染试剂),PCR检测转染EC109细胞mi RNA-126表达,转染细胞培养1、3、5 d后MTT检测细胞增殖情况,Transwell小室法检测细胞迁移活力。结果癌组织中mi R-126 m RNA低于癌旁组织(P0.05);转染EC109细胞后mi RNA-126在阴性对照组和空白对照组表达量均低于转染组(P0.05);三组转染EC109细胞随着培养时间延长,细胞OD值均逐渐升高(P0.05),培养第3、5天细胞OD值组间差异显著(P0.05),其中转染组EC109细胞OD值均低于阴性对照组和空白对照组(P0.05);转染EC109细胞迁移活力检测结果显示,转染组OD值低于阴性对照组和空白对照组(P0.05)。结论食管癌组织中mi RNA-126低表达,并且对食管癌EC109细胞增殖和迁移具有一定抑制作用。     

miR-124对人结肠癌SW620细胞生长与侵袭的影响

目的观察miR-124对人结肠癌SW620细胞生物学功能的影响。方法采用MTT实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测miR-124对人结肠癌SW620细胞的生长、侵袭转移能力的影响。结果 MTT检测发现,过表达miR-124可抑制人结肠癌SW620细胞的生长,且具有时间依赖性;细胞划痕实验显示,转染miR-124成熟体12、24 h后伤口愈合率分别为26.5%±0.7%、37.7%±1.5%,其阴性对照分别为40.6%±2.5%、78.2%±1.6%,P<0.05;Transwell侵袭实验显示,转染miR-124成熟体24 h后穿过基底膜的人结肠癌SW620细胞数为(37±2.6)个,其阴性对照为(80±3.6)个,P<0.05。结论 miR-124可抑制人结肠癌细胞生长与侵袭。     

miR-498过表达对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化的影响及其机制

目的 探讨微小RNA-498(miR-498)过表达对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化（EMT）的影响及其机制。方法 体外传代培养人永生化鼻咽上皮细胞系NP69及人鼻咽癌细胞系CNE-2Z、CNE-1、HNE-1、SUNE-1,采用RT-qPCR法检测各细胞miR-498表达,选择miR-498表达最低的鼻咽癌细胞进行后续实验。取传3代、对数生长期、生长状态良好的鼻咽癌细胞,随机分为miR-498 mimics组和NC mimics组,分别转染miR-498 mimics、NC mimics。转染6 h更换新鲜培养基继续培养24 h,收集细胞。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用平板克隆形成实验检测集落形成能力,采用Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力,采用Western blotting法检测EMT相关上皮型钙黏素（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、纤连蛋白（Fibronectin）以及高迁移率族蛋白A2(HMGA2)表达。结果 CNE-1、HNE-1、CNE-2Z、SUNE-1细胞miR-498相对表达量均低于NP69细胞（P均<0.0...     

miR-32-5p和FKBP14基因转染对SPC-A1细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其靶向关系验证

目的观察miR-32-5p和FK506结合蛋白14(FKBP14)基因转染对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系SPC-A1增殖、迁移、侵袭能力的影响,并验证两者之间靶向关系。方法选取SPC-A1细胞,将细胞为A、B、C、D、E、F组,分别转染miR-32-5p+pcDNA-FKBP14、miR-32-5p+pcDNA、miR-32-5p、miR-con、pcDNA-FKBP14、pcDNA-con,采用MTT法检测细胞吸光度值,并计算细胞存活率;Transwell实验检测细胞迁移数、侵袭数,Western blotting法检测细胞CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量。取SPC-A1细胞,将细胞分为G、H、I、J组,分别转染FKBP14-WT+miR-con、FKBP14-WT+miR-32-5p、FKBP14-MUT+miR-con、FKBP14-MUT+miR-32-5p,采用荧光素酶活性检测试剂盒检测细胞荧光素酶活性。取SPC-A1细胞,将细胞分为K、L、M、N组,分别转染miR-32-5p、miR-con、anti-miR-32-5p、anti-miR-con...     

微RNA-29家族降解PTEN mRNA促进非小细胞肺癌细胞存活与淋巴结侵袭

目的:探索微RNA(microRNA,miRNA/miR)-29家族对淋巴结侵袭性非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、侵袭的影响及潜在的分子机制.方法:TCGA数据库分析磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tension homology de...     

miR-1290靶向STK17A对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨微小RNA-1290(miR-1290)靶向调控丝氨酸苏氨酸激酶(STK)17A对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法 采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人宫颈癌细胞SiHa、HeLa、CaSki和人正常宫颈上皮细胞H8中miR-1290和STK17A表达情况,选取同时表达miR-1290和STK17A且miR-1290表达量最高的HeLa细胞进行实验;该细胞随机分为Control组(HeLa细胞未转染)、miR-1290 NC组(HeLa细胞转染miR-1290 NC)、miR-1290 inhibitor组(HeLa细胞转染miR-1290 inhibitor)。qRT-PCR检测miR-1290、STK17A mRNA表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞增殖率、Transwell小室法检测各组细胞迁移和侵袭能力;双荧光素酶法检测miR-1290和STK17A的靶向关系。结果 HeLa、SiHa、CaSki细胞miR-1290相对表达量均明显高于H8细胞(P<0.05),其中HeLa细胞miR-1290相对表达量最高,故选择HeL...     

miR-513b-5p表达变化对结肠癌细胞增殖、迁移的影响及机制探讨

目的观察结肠癌(CC)组织、细胞中微小RNA-513b-5p(miR-513b-5p)的表达变化,以及miR-513b-5p对CC细胞增殖和迁移的影响,并探讨相关机制。方法采用qRT-PCR法检测CC组织、癌旁组织和CC细胞株(HCT116、RKO、SW480、Lo Vo、SW620)、人结肠成纤维细胞(CCD-112CoN)中的miR-513b-5p。将HCT116细胞分为miR-con组(转染miR-con)、miR-513b-5p抑制剂组(转染miR-513b-5p inhibitors);采用CCK-8试剂盒和Transwell实验检测细胞增殖和迁移能力。通过生物信息预测miR-513b-5p在信号传导及转录激活因子3(STAT3)上的结合位点;分别将野生型STAT3(STAT3-WT)质粒、突变型STAT3(STAT3-MUT)质粒和miR-513b-5p mimic、miR-con转染HCT116细胞;用荧光素酶检测试剂盒检测荧光素酶活性,采用Western blotting法检测STAT3蛋白。取部分HCT116细胞,分为miR-con组(转染miR-con)、miR-5...     

LINC01615表达下调对膀胱癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响

目的 探讨下调LINC01615表达对膀胱癌细胞（T24细胞）增殖、侵袭、迁移的影响。方法 常规培养T24细胞,取对数生长期细胞随机分为si-LINC01615组、si-NC组,分别转染si-LINC01615、si-NC,继续培养48 h。用实时荧光定量PCR法检测细胞中LINC01615表达,用MTT实验检测细胞增殖能力（OD值）,用Transwell实验检测细胞侵袭能力,用划痕实验检测细胞迁移能力（24 h愈合度）。结果 转染后si-LINC01615组、si-NC组T24细胞LINC01615相对表达量分别为0.60±0.03、1.08±0.02,比较差异有统计学意义（P<0.05）,表明转染成功。培养0、24 h,两组细胞活力差异均无统计学意义（P均>0.05）;培养48、72 h,si-LINC01615组细胞活力均低于si-NC组（P均<0.05）。si-NC组侵袭细胞数为（148.30±1.76）个,si-LINC01615组为（74.33±3.18）个,比较差异有统计学意义（P<0.05）。si-NC组24 h愈合度为（98.33±0.88）%...