血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶2在肝细胞癌中过表达并介导肝癌细胞中糖原合成酶激酶-3β/β-连环蛋白信号传导

目的探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(SGK2)在肝癌组织与正常肝脏组织中的表达差异以及介导肝细胞癌(HCC)细胞中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)/β-连环蛋白(β-catenin)信号传导的相关机制。方法收集配对的HCC及正常组织20对,采用实时荧光定量PCR技术检测SGK2 mRNA表达情况。应用蛋白质印迹法检测人肝癌细胞系Huh-7、SMMC-7721以及正常人肝细胞系L02中SGK2蛋白水平。应用SGK2 siRNA转染人肝癌细胞系SMMC-7721、Huh-7,然后使用蛋白质印迹方法检测上述转染成功细胞系中GSK-3β、β-catenin的蛋白质表达水平。计量资料以均值±标准差(±s)表示,统计学方法采用Student t检验。结果与配对正常肝组织中的表达水平相比,所有20个HCC样品中SGK2 mRNA表达上调。在两种人肝癌细胞系(Huh-7和SMMC-7721)中SGK2蛋白水平显著高于正常人肝细胞系(P<0.01)。在人HCC细胞系SMMC-7721和Huh-7中,SGK2表达下调抑制了未磷酸化GSK-3β表达。另外,在HCC细胞系中SGK2表达下调通过阻止β-catenin蛋白酶体降解来降低β-catenin的去磷酸化。结论SGK2在HCC中过表达并介导HCC细胞中GSK-3β/β-catenin信号传导。     

TRB3对人肝癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响

目的:探讨假性蛋白激酶毛球族同源蛋白3（TRB3）在肝癌（HCC）细胞增殖、凋亡和迁移中的调控作用及机制。方法:免疫组织化学及蛋白质印迹法（Western blot）检测HCC患者癌组织及癌旁组织TRB3的表达;体外检测肝癌细胞系HepG2和Huh7细胞中TRB3的表达,同时设计小干扰RNA靶向抑制TRB3后：CCK8...     

Shh信号通路在肝癌中的表达及与β-catenin的关系

目的探讨原发性肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）中Sonic Hedgehog（Shh）信号通路基因和15-catenin的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法对49例HCC和相应癌旁肝组织中Glil和β-catenin蛋白表达。荧光定量PCR检测2个肝癌细胞系和正常肝细胞中相应基因mRNA的表达情况。结果免疫组化染色与RT-PCR示Glil在HCC组织中的阳性表达率为77．56％,而癌旁肝组织为40．82％,两者差异具有显著意义（P〈0．05）。β-catenin蛋白在HCC中的表达显著高于癌旁肝组织（P〈0．05）,且与Glil的表达呈正相关（r=0．594,P=0．000）。Glil和β-cateninmRNA在肝癌细胞株中高表达,在正常肝细胞中低表达（P〈0．05）。结论Glil和β-catenin在肝癌细胞中均过度表达,可能协同作用促进肝癌细胞异常增殖,参与HCC的发生和发展。     

沉默促癌基因Yap1联合丹参酮ⅡA对肝癌细胞Huh-7的影响

目的研究基因Yap1与丹参酮ⅡA对肝癌细胞Huh-7增殖、迁移侵袭的影响。方法选用武汉大学中南医院10对人肝细胞癌及癌旁组织标本,收集时间2019年6月1日—2019年12月1日。实时荧光定量法和蛋白质印迹法用于检测基因Yap1的表达以及表型相关分子的变化。采用MTT细胞增殖检测试剂检测不同浓度丹参酮ⅡA处理后细胞的增殖抑制率。蛋白质印迹实验检测不同干预下细胞凋亡、迁移相关标志物表达变化。流式细胞检测和Transwell实验分别检测细胞凋亡和细胞迁移以及侵袭。计量资料两组间比较采用t检验;计数资料两组间比较采用χ^2检验。结果10对人肝癌组织标本中有8对Yap1的表达明显高于癌旁组织。相对于人正常肝上皮细胞L02,Yap1在肝癌细胞株Huh-7和HCCL-M3中表达增高。si-Yap1-3转染细胞蛋白水平沉默效率达87.004%。MTT结果显示丹参酮ⅡA能够有效抑制Huh-7细胞增殖,其半数抑制浓度为8.683μmol/L。si-Yap1-3与丹参酮ⅡA联合处理Huh-7肝癌细胞,下游增殖迁移标志物E-钙粘蛋白表达增加,波形蛋白表达降低。Transwell实验结果示,相较于si-NC组,丹参酮ⅡA联合si-Yap1-3处理组细胞迁移、侵袭能力明显降低(43.19±2.88 vs 132.20±10.03,t=8.527,P=0.001;53.95±4.20 vs 179.10±11.11,t=4.484,P=0.011)。si-Yap1-3与丹参酮ⅡA联合处理组细胞凋亡相关标志物Bax表达增加,Bcl-2蛋白表达降低,且联合处理组细胞早期凋亡率为25.98%,高于si-NC组的9.21%(χ^2=4.078,P<0.05)。结论沉默促癌基因Yap1联合丹参酮ⅡA能够促进肝癌细胞Huh-7凋亡,并抑制其迁移侵袭,为临床用药提供一定的指导意义。     

原发性肝癌中FADD蛋白表达及其与细胞凋亡关系研究

研究Fas相关死区蛋白在肝癌中的表达 ,并探讨其与HCC中细胞凋亡的关系。免疫组织化学方法检测FADD蛋白表达 ,原位末端标记检测HCC细胞凋亡。 2 0例 (2 5 6 % )HCC表达FADD蛋白。与癌旁非癌肝组织相比(10 / 16 ,6 2 5 % ) ,HCC中FADD阳性率显著降低 (P <0 0 5 )。 36例分化中等良好的HCC中 ,12例 (33 3% )表达FADD ,略高于分化差的HCC中的阳性率 (8/ 4 2 ,19 0 % ) ,但差别没有显著性意义。Ⅰ /Ⅱ级HCC中 ,16例为FADD阳性 (16 / 4 2 ,38 1% ) ,而Ⅲ /Ⅳ级HCC中的阳性率仅为 11 1% ,差别有显著性意义 (P <0 0 5 )。所有标本中均可检测到凋亡的细胞 ,FADD蛋白中等至强阳性的HCC中 ,细胞凋亡程度较高 ,与FADD表达弱阳性或阴性的HCC相比 ,差别有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,而癌旁非癌肝组织中 ,FADD蛋白表达细胞凋亡程度无关 (P >0 0 5 )。FADD蛋白表达减少在HCC的发生中起重要作用 ,FADD蛋白表达强度与HCC细胞凋亡密切相关     

抑制HSP70—2基因表达诱导肝癌细胞G2／M期阻滞的机制研究

目的探讨HSP70—2在肝癌组织中的表达，以及抑制HSP70—2表达对肝癌细胞生长和周期影响的详细作用机制。方法免疫组织化学检测HSP70—2在45例肝癌组织和癌旁组织中的表达，Westernblot检测HSP70—2在5种肝癌细胞株中的表达。设计合成针对HSP70—2基因的特异性shRNA，构建真核表达载体HSP70-2shRNA1和HSP70—2shRNA2。转染肝癌细胞后，MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期，Westernblot检测HSP70—2表达及细胞周期相关蛋白p-Cdc2（Tyr15）、Cdc25C、Cdc2和cyclinB1的表达变化。结果免疫组织化学检测显示，45例肝癌组织中有33例（73．3％）HSP70—2蛋白表达阳性，45例癌旁组织中仅4例（8．9％）表达阳性，表达差异有显著性（P〈0．05）。HSP70—2蛋白在HepG2、Bel-402、Huh-7、Hep3B、SMMC-7721肝癌细胞中的表达明显高于其在L02细胞中的表达。HSP70—2shRNA1和shRNA2均能有效抑制肝癌细胞HepG2和Bel-7402中HSP70-2的表达。与controlshRNA组相比，转染HSP70-2shRNA1和shRNA2组HepG2和Bel-7402细胞生长增殖速度均明显减慢，细胞周期表现为处于G1／M期的细胞比例显著增加。Westernblot检测发现，转染HSP70-2shRNA1和shRNA2后肝癌细胞中磷酸化的p-Cdc2（Tyr15）表达增加，Cdc25C、Cdc2和cyclinB1表达显著减少。结论HSPT0-2在肝癌中过表达，抑制HSP70．2表达可以显著抑制肝癌细胞的增殖，诱导细胞周期阻滞，其诱导G，／M期阻滞的机制是通过影响Cdc25C-Cdc2／cyclinB1通路来实现的。     

乙型肝炎病毒相关肝癌发生过程中生长抑素受体与环氧合酶-2表达规律研究

目的 探讨乙型肝炎病毒相关原发性肝细胞癌(HCC)患者、肝癌及癌旁组织中生长抑素受体(SSTR)与环氧合酶-2(COX-2)表达规律,为生长抑素类似物(SSTA)与选择性COX-2抑制剂的使用提供依据.方法 逆转录-聚合酶链反应及免疫绀化法检测40例HCC患者肝癌、癌旁及硬化组织中SSTR 1～5亚型mRNA及蛋白表达;Western印迹法检测3种组织中COX-2蛋白表达.结果 肝癌、癌旁及硬化组织中SSTR 1～5 mRNA表达阳性率分别为62.5%～87.5%、90.0%～97.5%和60.0%～92.5%,SSTR 1～5蛋白表达量(吸光度值)分别为5.93～10.13、23.57～32.56和1.93～5.15;COX-2蛋白表达量分别为0.138±0.014、0.199士0.032和0.256±0.038.从硬化组织到癌旁组织,SSTR1～5与COX-2表达量呈直线负相关(P＜0.05);从癌旁组织到肝癌组织,SSTR 1～5与COX-2表达量呈直线正相关(P＜0.05).结论 癌前病变期及HCC早期可能是接受SSTA及COX-2抑制剂协同治疗的最佳时机.     

抑癌基因在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

应用免疫组化SP法检测35例肝细胞肝癌（HCC）患者癌组织及癌旁组织中抑癌基因PTEN蛋白的表达水平。结果显示，HCC组织中PTEN蛋白阳性率和阳性强度均明显低于癌旁组织（P〈0．01）；PTEN蛋白表达与HCC的分化程度密切相关（P〈0．05）．与癌栓形成有关（P〈0．01）。提示PTEN异常表达在HCC发生、发展过程中可能起重要作用．其表达水平可作为反映HCC进展和预后的生物学指标。     

PGC-1α调控SIRT3通路对肝细胞癌的影响

目的探讨抑癌基因第Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶成员3(SIRT3)在过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α(PGC-1α)的调控下对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的影响。方法回顾性分析22例HCC手术标本的病理学资料,用免疫组化法检测SIRT3在22例HCC组织和癌旁组织中的表达。培养肝癌细胞系HepG2细胞,利用siRNA干扰敲低PGC-1α的表达,之后采用qRT-PCR、Western blotting验证PGC-1α的表达水平,Western blotting检测SIRT3的表达水平。结果 SIRT3在HCC组织中的表达量明显低于癌旁组织(P0.05)。敲低HepG2细胞PGC-1α蛋白的表达后,SIRT3蛋白的表达下调。结论 SIRT3在HCC中发挥抑制肿瘤生长的作用,在肝癌细胞系HepG2中PGC-1α表达下调可降低SIRT3的表达水平,从而影响SIRT3的抑癌功能。     

VEGF与MMP-2在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的　研究肝细胞肝癌 (HCC)血管内皮生长因子 (VEGF)和基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )表达的相关性和临床意义。方法　应用免疫组化方法检测 6 7例 HCC组织、41例癌旁组织以及正常肝组织 VEGF和MMP- 2的蛋白表达。结果　 6 7例肿瘤组织 41例 VEGF呈阳性表达 ;41例癌旁组织 11例 VEGF呈表达阳性 (P<0 .0 1)。VEGF的表达与 HCC癌灶大小、镜下门静脉癌栓发生以及肿瘤 TNM分期密切相关 (P<0 .0 5 )。 6 7例肿瘤组织 36例 MMP- 2呈阳性表达 ;癌旁组织仅有 13例阳性表达 (P<0 .0 5 )。MMP- 2的表达与 HCC癌灶大小、肿瘤 TNM分期密切相关 (P<0 .0 5 )。 VEGF与 MMP- 2同时阳性表达者为 2 7例。结论　 VEGF和 MMP- 2在HCC肿瘤组织中表达上调 ,且与 HCC临床病理特征有一定相关性。VEGF与 MMP- 2在 HCC肿瘤组织中的表达具有相关性。表明 VEGF与 MMP- 2在 HCC发生发展过程中起重要作用。     

HBx及Beclin1在肝癌中表达的关系研究

目的了解HBx和Bcclin1在原发性肝癌、癌旁组织的表达水平,及其在HCC的发病机制中作用及其相互关系。方法收集经病理确诊的HCC患者64例,患者术前术经任何抗肿瘤治疗,采用免疫组化、Western印迹及实时PCR方法检测HBx及Beclin 1在肝癌组织及其癌旁组织中的表达情况,并将实验结果与患者的临床资料结合进行统汁学分析。结果 53例患者的肝癌组织HBx蛋白表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05);肝癌组织与癌旁组织中HBx与GAPDH相对灰度比值分别为1.54±0.13、0.62±0.07,肝癌组织表达量明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)、肝癌组织与癌旁组织中HBx表达量分别为0.78±0.10、0.11±0.01,差异有统汁学意义(P0.05)。51例患者肝癌组织Beclin1蛋白表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。肝癌组织与癌旁组织中Bcclin1与GAPDH相对灰度比值分别为1.52±0.11、0.98±0.05,肝癌组织表达量叫显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。肝癌组织与癌旁组织中Beclin1表达量分别为0.83±0.15、0.1 8±0.03,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HBx和Beclin1在HCC中高表达,两者相互作用且共同参与HCC的发生、发展过程,联合检测HBx和Beclin1对判断HCC的发生和转移有重要价值,是有潜力的肝癌治疗的候选靶基因。     

极性蛋白AF-6mRNA在肝细胞肝癌中的表达及其对侵袭的影响

目的:检测肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)癌组织、癌旁组织(adjacent normal liver tissue,ANLT)及不同侵袭能力细胞系中极性蛋白AF-6 m RNA的表达情况,分析其在不同组织及不同细胞系中的表达差异及意义.方法:利用实时定量PCR检测(real-time quantitative,q RT-PCR)检测AF-6 m RNA在3 0对癌组织、A N LT和4种细胞系(L 0 2、Hep G2、MHCC97-H和HCCLM3)中的表达情况.结果:AF-6 m RNA在93.3%(28/30)的HCC中呈低表达;正常肝细胞株L02中AF-6 m RNA含量明显高于肝癌细胞株(P0.05);高侵袭转移能力的细胞系MHCC97-H及HCCLM3只有极低的AF-6 m RNA表达,且明显低于低侵袭转移能力的细胞系Hep G2(P0.05).结论:AF-6 m RNA在肝癌中的低表达可能与高侵袭能力相关,提示AF-6 m RNA在将来可能会成为治疗侵袭性HCC的潜在靶点.     

蛋白翻译起始因子C_2在原发性肝细胞肝癌中表达的意义

目的研究C_2mRNA及其蛋白在原发性肝细胞肝癌(HCC)中的表达及意义。方法用原位杂交检测C_2mRNA住21例HCC及其癌旁组织中的表达,ABC免疫组化法检测C_2蛋白在60例HCC及其42例癌旁组织中的表达,Western blot法检测C_2蛋白在HCC及其癌旁组织中的表达。结果 21例HCC及其癌旁组织中,C_2mRNA阳性率分别占23.8％(5/21)和85.7％(18/21),60例HCC及42例癌旁组织中,C_2蛋白阳性分别占27.3％(17/60)和83.3％(35/42),27例肝硬变中,C_2蛋白阳性率为77.8％(21/27)。χ~2检验:C_2mRNA及其蛋白在HCC癌旁组织中表达明显高于癌组织(P<0.001);C_2蛋白在肝硬变中的表达明显高于HCC癌组织(P<0.01);C_2的表达与患者年龄、HBsAg及AFP有明显关系(P<0.05);而与癌组织的分化程度、肿瘤大小、淋巴转移无关;Western blot与免疫组化结果一致。结论 C_2基因表达下调可能与HCC的发生、发展及早期诊断有关。     

Op18：一个潜在的肝癌诊断标志物

目的探讨人原癌基因蛋白18（Op18）在肝癌细胞和组织中的表达及临床意义。方法应用RT-PCR、Western blot和免疫组化染色法检测常见肝癌细胞和88对配对肝癌组织及癌旁组织中Op18的表达。结果 Hep3B、SMMC-7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3和HCCLM6等常见肝癌细胞株中均见Op18表达;配对肝癌及癌旁组织中,RT-PCR发现肝癌组织中Op18阳性率达68.75%（11/16）,Western blot发现Op18的阳性率为56.25%（9/16）,免疫组化检测发现肝癌组织中Op18的阳性率为65.28%（47/72）,P〈0.05;Op18的表达与肿瘤大小数目、临床分化、门脉侵犯和TMN分期相关（P〈0.05）。结论 Op18可能是一个潜在的肝癌诊断标志物。     

Pokemon基因在原发性肝癌组织中的表达及意义

采用免疫组化PV-9000二步法检测 Pokemon蛋白在原发性肝癌(HCC)癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达情况,分析其表达与HCC临床病理特征的关系.结果 Pokemon蛋白在癌组织中的阳性率(54%)明显高于癌旁组织(30%)、正常组织(10%),其表达与肿瘤大小有关(P＜0.05).提示Pokemon基因可促进HCC的发生、发展.     

AU结合因子1对肝细胞癌患者磷脂酰肌醇蛋白聚糖3水平的影响

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者中AU结合因子1(AUF1)对磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)表达的影响及其机制。方法LCI-HCC基因表达数据下载自GSE14520,最终纳入214例有随访信息的乙型肝炎相关HCC患者。35例HCC及配对癌旁样本选取自2009年—2013年在河南省肿瘤医院接受常规根治性手术的HCC患者。采用免疫组化检测GPC3和AUF1蛋白在HCC中的表达及相关性;在HCC细胞系中敲减或者过表达AUF1后,采用Western Blot和实时荧光定量PCR检测GPC3表达;利用RNA结合蛋白免疫沉淀实验和RNA稳定性检测研究AUF1调控GPC3表达的机制。计量资料两组间比较采用t检验,计数资料两组间比较采库中,肝癌组织GPC3的表达均显著高于癌旁组织(P值均0.05);TCGA数据库中,GPC3高表达与肝癌患者的不良预后有关(P0.05)。免疫组化结果显示,GPC3和AUF1蛋白均在肝癌组织中呈高表达,阳性表达率分别为77.1%(27/35)和74.3%(26/35)。体外实验结果表明,在肝癌细胞系HepG2和Huh-7中敲减AUF1明显降低了GPC3表达(P值均0.05),而过表达AUF1则上调GPC3表达(P0.05)。AUF1蛋白可与GPC3 mRNA结合,敲减AUF1导致GPC3 mRNA稳定性降低。结论 AUF1是调控GPC3基因转录后修饰的重要调节因子,AUF1和GPC3蛋白的异常高表达可能参与肝癌的发生和发展。     

原发性肝癌C-kit和SCF基因的表达及意义

探讨C -kit、SCF基因编码的蛋白在肝癌(HCC)组织中的表达及其临床病理意义。采用免疫组化SP法检测92例肝癌中C -kit、SCF蛋白表达,同时取对应的癌旁肝组织及30例良性肝病组织作对照。结果显示,HCC中有较强的C -kit和SCF蛋白表达,癌旁组织呈弱表达,良性肝病组织则呈阴性表达。C -kit、SCF阳性率肝癌组织与癌旁组织、良性肝病组织比较差异有非常显著意义(P均<0 . 0 1)。C -kit、SCF蛋白表达与AFP异常、肝癌分级、门脉癌栓有关。C -kit、SCF蛋白过表达可能在原发性肝癌的发生、发展中发挥作用。     

肝癌组织和血清中钙囊素的表达及其意义

目的 研究人肝癌组织及血清中钙囊素(S100A11)的表达及其临床意义.方法 免疫组织化学法检测46例肝癌及其癌旁组织中S100A11表达,比较肝癌与癌旁组织中S100A11的阳性率,分析肝癌组织中S100A11表达水平与各临床参数之间的关系;同时检测肝癌(62例)、肝硬化(32例)、慢性肝炎(30例)患者及健康体检者(28名)血清中S100A11浓度,比较S100A11浓度与甲胎蛋白(AFP)、γ-谷氨酰转肽酶同工酶Ⅱ(GGT-Ⅱ)诊断肝癌的灵敏性及特异性.结果 S100A11在肝癌组织中的表达阳性率(78.3%)显著高于癌旁组织(19.6%,P<0.01),其表达水平与分化程度相关,分化程度越低表达水平越高.根据ROC曲线,当确定诊断界值为7.3μg/L时,S100A11在肝癌患者血清中的阳性率为30.6%,明显高于肝硬化、慢性肝炎及健康人(P值均<0.05).肝癌患者血清中S100A11与AFP、GGT-Ⅱ均无相关性,联合检测三项指标对肝癌诊断有互补性,可使诊断敏感性提高至84.5%.结论 S100A11可能与肝癌的发生发展有关.联合检测S100A11与AFP和GGT-Ⅱ可提高对肝癌的诊断敏感度.

Abstract：

Objective To explore the expression of calcium binding protein (S100A11) and its clinical significances in human hepatocellular carcinoma (HCC) tissue and blood plasma. Methods The expressions of S100A11 in 46 cases of HCC tissues and their paracancerous tissues were detected by immunohistochemistry. The relationship between S100A11 expression level in HCC tissues and clinical parameters was analyzed. The S100A11 expression levels in blood plasma of HCC patients (62 cases), liver cirrhosis patients (32 cases), chronic hepatitis patients (30 cases) and healthy subjects (30 cases) were detected. The sensitivity and specificity of S100A11, alpha fetoprotein (AFP) and γ-glutamyl transpeptidase Ⅱ (GGT-Ⅱ ) in HCC diagnosis were compared. Results The positive rate of S100A11 in HCC tissue (78. 3%) was significantly higher than that in paracancerous tissues (19. 6%) (P<0. 05). The expression level was correlated with the degree of differentiation, the lower differentiation degree with the higher expression level. According to ROC curve, if the cutoff points for diagnosis was set at 7. 3 μg/L, the positive rate of S100A11 in HCC patients blood plasma was 30. 6% , which was significantly higher than that in the blood plasma of patients with liver cirrhosis, patients with chronic hepatitis and healthy persons (P<0. 05). There was no correlation between S100A11 and AFP or GGT-Ⅱ in the blood plasma of HCC patients. These three indicators were complementary in HCC diagnosis, and the diagnostic sensitivity increased to 84.5% with combined detection. Conclusions S100All may be related to HCC genesis and development. The HCC diagnostic sensitivity may be increased with combined detection of S100All ,AFP and GOT- Ⅱ.     

长链非编码RNA XLOC-007123在乙型肝炎相关肝细胞癌中的表达及临床意义

目的检测长链非编码RNA(lncRNA)XLOC-007123在乙型肝炎相关肝细胞癌(HCC)患者组织(癌、癌旁)及肝癌细胞系中的表达,并分析其表达水平与临床病理特征的关系。方法选取2013年12月-2015年12月于解放军三〇二医院肝胆外科行HCC切除术的52例乙型肝炎相关HCC患者的肝癌组织;同时取同一患者的癌旁组织作为对照。应用荧光实时定量PCR检测lncRNA XLOC-007123在乙型肝炎相关HCC患者癌组织、配对癌旁组织以及肝癌细胞系中的表达水平。其中研究所用细胞系L02、HuH7、HepG2、SMMC-7721均由解放军三○二医院临床管理中心提供。非参数Wilcoxon秩和检验比较lncRNA XLOC-007123在癌组织和配对癌旁组织的表达水平;独立样本t检验比较不同HCC细胞系与正常肝细胞系间lncRNA XLOC-007123表达水平。临床指标差异分析采用χ~2检验。结果与癌旁组织相比,lncRNA XLOC-007123在乙型肝炎相关HCC患者的癌组织中表达显著下调(P<0.01);与正常肝细胞株相比,IncRNA XLOC-007123在3种肝癌细胞系中均呈低表达(P值均<0.05)。lncRNA XLOC-007123表达水平与患者的血清AFP水平和肿瘤分期相关,差异有统计意义(χ2值分别为7.738、7.589,P值均<0.05)。结论 lncRNA XLOC-007123在乙型肝炎相关HCC组织中表达降低,且与临床患者血清AFP水平和病理分期有关联,推测lncRNA XLOC-007123在乙型肝炎相关HCC发生发展过程中发挥着调控作用,有望成为乙型肝炎相关HCC临床诊断的潜在标志物。     

骨形态发生蛋白-2调控MAPK信号通路在肝癌干细胞特征维持中的机制研究

目的:探究骨形态发生蛋白-2(BMP-2)在肝癌干细胞特征维持中的作用及其相关机制。方法:采用qRT-PCR检测肝癌患者癌组织及其癌旁组织BMP-2和CD133的表达水平。通过慢病毒将PLK-NC和PLK-BMP-2转染至HepG2细胞,设空白对照组(未转染)、PLK-NC组(转染PLK-NC)、PLK-BMP-2组(转染PLK-BMP-2)与PLK-BMP-2+PNU-120596组(转染PLK-BMP-2后给予5μmol/L PNU-120596孵育24 h)。采用qRT-PCR检测各组细胞BMP-2、EpCAM、CD133、CD24基因表达水平,Western blot检测BMP-2、p-MAPK蛋白表达水平。通过有限稀释法测定各组干细胞的成球频率差异。结果:与癌旁组织比较,癌组织BMP-2和CD133表达水平升高。与PLK-NC组比较,PLK-BMP-2组BMP-2、EpCAM、CD133、CD24基因表达水平升高,BMP-2、p-MAPK蛋白表达水平升高,细胞成球频率增加(均P<0.05)。与PLK-BMP-2组比较,PLK-BMP-2+PNU-120596组BMP-2...